Orientador: Stephen Hyslop / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-16T17:40:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Renno_AndreLisboa_M.pdf: 4228712 bytes, checksum: 0936c01dc377e3a0ea8aef8156dde24c (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: O envenenamento por serpentes do gênero Bothrops pode resultar em manifestações sitemicas que incluem coagulopatias, hemorragias internas, choque cardiovascular e insuficiência renal aguda, sendo esta última a mais importante causa de morte após a picada. Neste trabalho, analisamos os aspectos morfofuncionais renais, além da expressão e/ou atividades da heme-oxigenase (HO), ciclo-oxigenase (COX) e superóxido dismutase (Cu/Zn-SOD) em ratos. Foi administrada uma dose única da peçonha Bothrops alternatus em ratos Wistar, e após diversos intervalos (1, 3, 6, 24, 48, 72 h e 7 e 15 dias pós-peçonha), foram coletados amostras de urina e os animais eutanasiados, com a coleta do tecido renal para os ensaios enzimáticos, análises de expressão gênica por PCR-real time e imunohistoquímica. A peçonha de B. alternatus causou oligúria, proteinúria, acidificação urinária, aumento da densidade e diminuição da depuração de creatinina; estas alterações foram proeminentes nas primeiras 24 horas pós-peçonha. Análises histológicas reveleram alterações morfológicas, como descamação tubular epitelial e microaneurismas glomerulares. Houve um aumento significativo da expressão gênica da COX-2 em 3 horas pós-peçonha, o que causou no aumento dos níveis de proteínas COX-2 observados no western blot e na imunohistoquímica; não houve mudanças significativas na expressão gênica da COX-1. A HO teve aumento em sua atividade no córtex e medula renal, sendo atribuída este aumento ao aumento da expressão da forma induzível HO-1, com pequenas mudanças da isoforma constitutiva HO-2. A Cu/Zn-SOD demonstrou um aumento da atividade no córtex renal. Estes resultados revelam que a peçonha B. alternatus afeta a função renal com mudanças na expressão/atividade de enzimas renais específicas. O aumento da expressão da HO-1 e da Cu/Zn-SOD pode estar associado a mecanismos de citoproteção no tecido renal, enquanto que o aumento da expressão da COX-2 pode estar ligado a respostas inflamatórias. Entretanto, não se pode descartar a possibilidade de que os produtos da COX-2 poderiam ajudar também na manutenção do fluxo sanguíneo renal. / Abstract: Envenoming by Bothrops snakes can result in systemic manifestations that include coagulopathy, internal hemorrhage, cardiovascular shock and acute renal failure, with the latter being the most important cause of death after such bites. In this work, we examined the changes in renal function and histology and the expression and/or activity of heme-oxygenase (HO), cyclooxygenase (COX) and superoxide dismutase (Cu/Zn-SOD) in rats. Male Wistar rats were injected with a single dose (0.8 mg/kg, i.v.) of Bothrops alternatus venom and at various intervals thereafter (1, 3, 6, 24, 48, and 72 h and 7 and 15 days post-venom) urine samples were collected and the rats then killed to provide renal tissue for enzymatic assays, analysis of gene expression by real time-PCR and immunohistochemistry. Bothrops alternatus venom caused oliguria, proteinuria, urine acidification, an increase in urine specific gravity and a decrease in creatinine clearance; these alterations were most pronounced in the first 24 h post-venom. Histological analysis revealed morphological alterations that included tubule desquamation and glomerular microaneurysms. There was a significant increase in the gene expression of COX-2 at 3 h post-venom that subsequently reflected in enhanced COX-2 protein levels seen in western blots and immunohistochemistry; there were no significant changes in COX-1 gene expression. HO showed high levels of activity in renal cortex and medulla that was attributable to enhanced expression of the inducible isoform HO-1, with little change in the constitutive isoform HO-2. There was a significant increase in Cu/Zn-SOD activity and expression in the renal cortex. These results show that B. alternatus venom adversely affects renal function in rats and alters the expression and/or activity of selected renal enzymes. The enhanced expression and activity of HO-1 and Cu/Zn-SOD may reflect their involvement in a cytoprotective action in renal tissue, whereas increased COX-2 expression may be related to venom-mediated inflammatory responses, although a role for cyclooxygenase products in the regulation of renal blood flow cannot be excluded. / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Farmacologia