Made available in DSpace on 2013-08-07T19:05:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000380711-Texto+Completo-0.pdf: 3272506 bytes, checksum: fec29259ab112a4da7e58d3b56ab863f (MD5) Previous issue date: 2006 / Type 1 diabetes is an autoimmune disease mediated by T cells. Nonobese diabetic mice (NOD) are the most important experimental model of organ specific autoimmune disease. These animals develop beta cells damage associated to insulitis and autoantibodies, and diabetes similar to the human type 1 diabetes. The incidence of diabetes in NOD mice is not constant, depending on gender and environment. Recent publications demonstrated that in germ free environment (SPF), the incidence of diabetes in females ranges from 60 to 100%, and from 20 to 60% in males. However, there are no data describing the incidence of diabetes employing this model in conventional environment. The aim of this study was to verify the incidence of diabetes in NOD mice placed in conventional environment, as well as to verify the survival of these animals. Initially, three NOD couples were bred to produce offsprings for the research. During 32 weeks, 79 males and 58 females were followed. Every 15 days, weaning, non-fasting glucose blood levels and body weight were measured and the number of deaths were registered. Diabetes was considered in those animals presenting glucose blood levels above 250 mg/dl. After 32 weeks, 38% of these animals became diabetic. The incidence was significantly higher in females (51%) when compared to males (27%, P<0,05). Moreover, diabetes diagnosis was made around the 8th week in both genders. The total NOD mice survival in eight months was 60%.Survival was significantly higher in males (85%) than in females (60%, P<0,05). In conclusion, the incidence of diabetes in females NOD mice in conventional environment is significantly higher than in males, similarly to what is observed in germ free environment. Females Survival is lower in females than males, probably related to higher incidence of diabetes. Therefore, these data demonstrate that, even in conventional environment NOD mice breed grow and develop diabetes in an acceptable rate, which allows its experimental use. / O diabetes mellitus tipo 1 é uma doença auto-imune mediada por células T. Os camundongos NOD (nonobese diabetic) são o modelo experimental de doença autoimune órgão-específica mais utilizado em todo o mundo. Apresentam destruição das células beta associada com insulite e produção de auto-anticorpos. A incidência de diabetes nestes camundongos é variável, dependendo do ambiente em que estão alocados, assim como do sexo dos mesmos. Dados na literatura demonstram que em biotério SPF (Specific Patogen Free), a incidência de diabetes em fêmeas varia de 60 a 100% e em machos de 20 a 60%. No entanto, não são descritos valores de incidência de diabetes nestes camundongos em biotério convencional. Este trabalho tem o objetivo de avaliar a incidência de diabetes mellitus insulino-dependente de camundongos NOD em biotério convencional, além de verificar a sobrevida dos animais. Três casais de camundongos NOD foram endocruzados para a obtenção dos animais desta pesquisa. Setenta e nove machos e 58 fêmeas foram acompanhados durante 32 semanas de vida em biotério convencional. Peso e glicemia foram mensurados após o desmame, a cada 15 dias, e as mortes contabilizadas. Foram considerados diabéticos, os animais que apresentavam glicemia acima de 250mg/dl. Em 32 semanas de seguimento, 38% da amostra tornou-se diabética; as fêmeas (51%) tornaram-se significativamente (P<0,001) mais diabéticas do que os machos (27%). Além disso, verificou-se que o início do diabetes, em ambos os sexos, ocorreu por volta da oitava semana de vida.A sobrevida dos camundongos NOD em biotério convencional, em 32 semanas de vida, foi de 60%, as fêmeas tiveram sobrevida de aproximadamente 40% e os machos de 85%, sendo esta diferença significativa (P<0,02). Conclui-se que, em ambiente convencional, os camundongos NOD do sexo feminino desenvolvem mais diabetes que os machos, similarmente aos camundongos NOD criados em biotério SPF. As fêmeas possuem sobrevida menor que os machos, provavelmente devido a presença do diabetes. Desta forma, verifica-se que, mesmo em ambiente convencional, é possível que camundongos NOD, apresentem diabetes em proporções que possibilitem sua utilização experimental.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:05:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000428504-Texto+Completo-0.pdf: 9435155 bytes, checksum: b968cd0d1d061bafe5d115acc37423bf (MD5) Previous issue date: 2011 / This study investigated the effects of selective PI3K inhibitors in the pruriceptive, inflammatory and nociceptive responses induced by trypsin in mice. The animals were orally treated with the selective PI3Kg inhibitors AS605240 (1 to 30 mg/kg), AS041164 and AS252424 (both 1 mg/kg), 30 min beforehand. In separate groups, AS605240 was given by intrathecal (i. t. ) or intracerebroventricular (i. c. v. ) routes. The control groups received saline at the same schedules of administration. The effects of PI3K blocking were assessed in different experimental assays. The oral treatment with AS605240 produced a marked reduction of scratching behavior elicited by trypsin, whereas AS041164 and AS252424 administration failed to significantly affect this parameter. Moreover, AS605240 (1 mg/kg) was able to produce a partial, but significant inhibition of the scratching bouts elicited by CP 48/80. Interestingly, the i. c. v. and i. t. injection of AS605240 also reduced trypsin-induced itching. The oral administration of AS605240 was found effective in producing a significant and dose-dependent reduction of trypsin-induced paw edema, TNFa production, as well as the neutrophil recruitment, according to MPO activity assessment. Likewise, oral AS605240 (1 mg/kg) promoted a significant reduction of spontaneous nociception induced by trypsin in the mouse paw. In contrast, the same dose of AS605240 did not significantly modify capsaicin-evoked nociception. Noteworthy, AS605240 (1 mg/kg) was effective in preventing c-Fos and phospho-Akt immunopositivity at the spinal cord of trypsin-injected mice, either into the dorsum or the paws. Our data suggests that PI3K inhibitors might represent a valuable alternative for treating inflammatory and painful conditions, as well as pruritus. / Este estudo investigou os efeitos de inibidores seletivos para PI3K nas respostas pruriceptivas, inflamatórias e nociceptivas induzidas por tripsina em camundongos. Os animais foram tratados por via oral com os inibidores seletivos de PI3K AS605240 (1 a 30 mg/kg), AS041164 e AS252424 (ambos 1 mg/kg), 30 min antes dos experimentos. Em grupos separados, o AS605240 foi administrado por via intratecal (i. t. ) ou intracerebroventricular (i. c. v. ). Os grupos controles receberam solução salina nos mesmo esquemas de administração. Os efeitos da inibição da PI3K foram avaliados em diferentes modelos experimentais. O tratamento oral com AS605240 reduziu marcantemente o comportamento de coçar causado pela tripsina, enquanto o AS041164 e AS252424 não afetaram de forma significativa esse parâmetro. Além disso, o AS605240 (1 mg/kg) produziu uma inibição parcial, mas significativa do comportamento de coçar evocado pelo CP 48/80. De maneira interessante, a injeção i. t. e i. c. v. de AS605240 também reduziu o prurido causado pela tripsina. A administração oral de AS605240 foi efetiva em promover uma redução significativa e dosedependente do edema de pata, produção de TNF, bem como o recrutamento de neutrófilos induzido por tripsina. Do mesmo modo, o AS605240 (1 mg/kg) reduziu significativamente a nocicepção espontânea causada pela injeção de tripsina na pata dos animais. Por outro lado, a mesma dose de AS605240 não modificou a nocicepção induzida por capsaicina. Notavelmente, o AS605240 (1 mg/kg) previniu a imunopositividade para c-Fos e fosfo-Akt na medula espinhal dos camundongos injetados com tripsina tanto no dorso como na pata. Nossos dados sugerem que a inibição de PI3K pode representar uma valiosa alternativa para o tratamento de condições inflamatórias e dolorosas, bem como o prurido.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:05:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000439242-Texto+Completo-0.pdf: 1575567 bytes, checksum: 619d0569503f83efdbc96d24f37eb2fb (MD5) Previous issue date: 2012 / Memories are not stored in its final form immediately after the acquisition. They undergo a long stabilization process known as consolidation. Consolidated memories can become labile again after the retrieval and susceptible to the action of amnesic agents. Thus, to persist must go through the re-stabilization process called reconsolidation. Several evidences indicate that the hippocampus plays an important role in both consolidation and reconsolidation process of different memories. In this way, we decided investigate the participation of NMDA and GABA receptors of dorsal hippocampus CA1 region on the retrieval and reconsolidation of spatial memory. We used the Morris water maze task (MWM) to demonstrate that infusion of AP5 (5 μg/μl), the selective antagonist of the NMDA receptor, into the dorsal hippocampus CA1 region of rats is able to block temporarily the retrieval of spatial memory. However, when we administered different doses and different times after the reactivation session in the absence of reinforcement is not observed any effect on spatial memory reconsolidation. While agonists of the glycine site of NMDA receptors, D-SER (10 μg/μl), improves the consolidation and the reconsolidation of spatial memory. Furthermore, we found that infusion of the agonist of GABA, muscimol (0. 1 μg/μl), temporarily prevents the memory retrieval of MWM. However, when the animals received infusion of muscimol before the reactivation session and the protein synthesis inhibitor, anisomycin (160 μg/μl), immediately after this session, spatial memory remains inhibited. Thus, we have demonstrated that inhibition of NMDA receptors prevents the retrieval but not the reconsolidation of the spatial memory and the NMDA agonist is capable of improving consolidation and reconsolidation of memory, while the GABA activation temporarily prevents retrieval and the impairment of memory is maintained through inhibition of protein synthesis. / As memórias não são armazenadas em sua forma definitiva. Logo após a aquisição, elas passam por um longo processo de estabilização conhecido como consolidação. Memórias já consolidadas podem se tornar novamente lábeis logo após a evocação e suscetíveis a ação de agentes amnésicos. Dessa forma, para persistirem devem passar pelo processo de reestabilização denominado, reconsolidação. Inúmeras evidências indicam que o hipocampo tem um papel importante tanto na consolidação quanto na reconsolidação de diferentes memórias. Assim, decidimos investigar a participação dos receptores NMDA e GABA da região CA1 do hipocampo dorsal na evocação e reconsolidação da memória espacial. Utilizando a tarefa de labirinto aquático de Morris (LAM) em ratos, demonstramos que a infusão na região CA1 do hipocampo do antagonista seletivo do receptor NMDA, AP5 (5 μg/μl) é capaz de bloquear temporariamente a evocação da memória espacial. Porém quando administrado diferentes doses e diferentes tempos, após a sessão de reativação na ausência de reforço não se observa efeito algum sobre a reconsolidação da memória espacial. Enquanto que o agonista do sítio da glicina no receptor NMDA, D-SER (10 μg/μl), melhora não só a consolidação, mas também a reconsolidação da memória espacial. Além disso, a infusão do agonista do receptor GABA, muscimol (0,1 μg/μl), impede temporariamente a evocação da memória do LAM. Porém, quando os animais recebem a infusão de muscimol antes da sessão de reativação e do inibidor da síntese de proteínas, anisomicina (160 μg/μl), imediatamente após esta sessão, a memória espacial permanece inibida. Assim, demonstramos que a inibição dos receptores NMDA impede a evocação mas não a reconsolidação da memória espacial e seu agonista é capaz de melhorar a consolidação e a reconsolidação dessa memória, enquanto a ativação do receptor GABA impede temporariamente a evocação e o prejuízo na memória é mantido com a inibição da síntese de proteínas.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:05:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000431166-Texto+Completo-0.pdf: 3777595 bytes, checksum: c7d18cac0fd705a5be8b122432c8abd1 (MD5) Previous issue date: 2011 / Extracellular nucleotides are important signaling molecules that mediate many biological effects, through the purinergic receptor activation. ATP is released in response to cellular damage, and P2X7 receptors have an essential role in the onset and maintenance of pathological changes. Haemorrhagic cystitis (HC) is a well known adverse effect of therapy with cyclophosphamide (CYP) used in patients under the treatment of many solid tumours and autoimmune conditions. This study aimed to determine the role of P2X7 receptors in the mouse model of HC induced by CYP. The effects of pharmacological antagonism or genic absence of P2X7 receptor in CYP-induced HC was assessed in a series of nociceptive and inflammatory parameters. In addition the immunopositivity for P2X7 receptors was investigated by means of immunohistochemistry. The pre-treatment with the selective P2X7 receptor antagonist A438079 or genic ablation of P2X7 receptors inhibited the nociceptive behaviour score induced by CYP. The same strategies produced a significant reduction of both oedema and haemorrhage indexes, as indicated by either macroscopic or histological evaluation. A438079 treatment also significantly decreased the positive staining for c-Fos in the lumbar spinal cord and brain cortical areas. Noteworthy, the administration of A438079 markedly prevented the increase of urinary bladder MPO activity and macrophage migration induced by CYP, and widely reduced the tissue levels of IL-1b and TNFa. Finally, P2X7 receptor was found strikingly up-regulated in the bladders of CYP-treated mice. The present study revealed the importance of P2X7 receptors in HC induced by CYP. The pharmacological inhibition of these receptors might represent a new therapeutic alternative for this pathological condition. / Nucleotídeos extracelulares são moléculas sinalizadoras importantes que medeiam diversos efeitos biológicos, através da ativação de receptores purinérgicos. O ATP é liberado em resposta ao dano celular e os receptores P2X7 têm um papel essencial no início e na manutenção das várias alterações patológicas. A cistite hemorrágica (CH) é um efeito adverso bem conhecido da terapia com ciclofosfamida (CYP), observada em pacientes sob tratamento de muitos tumores sólidos e doenças auto-imunes. Este trabalho teve como objetivo determinar o papel dos receptores P2X7 no modelo de CH induzida por CYP em camundongos. Os efeitos do antagonismo farmacológico ou ausência gênica do receptor P2X7 na CH induzida pela CYP foram avaliados em uma série de parâmetros nociceptivos e inflamatórios. Além disso, a imunopositividade para o receptor P2X7 foi investigada através de análise imunoistoquímica. O pré-tratamento com o antagonista seletivo do receptor P2X7 (A438079) ou a deleção gênica do receptor P2X7 reduziu os escores indicativos de comportamento nociceptivo. As mesmas estratégias produziram uma redução significante dos índices de edema e hemorragia, como indicado pela avaliação macroscópica e histológica. O tratamento com o A438079 também diminuiu significativamente a marcação positiva para c-Fos na medula espinhal e em áreas corticais do cérebro. Notavelmente, a administração do A438079 preveniu o aumento da atividade de MPO, da migração de macrófagos e dos níveis de IL-1b e TNFa no tecido vesical de animais que receberam CYP. Por fim, foi detectado um aumento significativo do receptor P2X7 na bexiga de animais tratados com CYP. O presente estudo revelou a importância do receptor P2X7 na CH induzida pela CYP.A inibição farmacológica deste receptor poderia representar uma nova alternativa terapêutica para esta condição patológica ou, ainda, em outros tipos de cistite sem origem definida.

BEZERRA FILHO, João Evangelista. Dosagem, in vitro, de metabólitos sanguíneos e tissulares de ratos submetidos à isquemia renal e à reperfusão durante a oferta de L-alanil-glutamina. 2004. 117 f. Dissertação (Mestrado em Cirurgia) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2004. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-02-27T15:27:16Z No. of bitstreams: 1 2004_dis_jebezerrafilho.pdf: 2031058 bytes, checksum: 087b24a3d1f775d526e500a7e2608d24 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-02-27T15:28:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2004_dis_jebezerrafilho.pdf: 2031058 bytes, checksum: 087b24a3d1f775d526e500a7e2608d24 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-02-27T15:28:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2004_dis_jebezerrafilho.pdf: 2031058 bytes, checksum: 087b24a3d1f775d526e500a7e2608d24 (MD5) Previous issue date: 2004 / Renal tranplantation and other operations give rise to kidney ischemia/ reperfusion injuries that may interfere with the final outcome. The purpose of this study is to examine the effects of l-alanil-glutamine pre-treatment in rats subjected to renal ischemia/reperfusion. Twenty -four rats were distributed in 4 subgroups of 6 animals. Half an hour following administation of l-alanil-glutamine (0,75 g/Kg) animals were subjected to kidney ischemia during 30 minutes. Kidney arterial blood samples were collected at the end of the ischemia and 5,15 and 30 minutes later. Glucose pyruvate lactate and cetonic bodies in vivo concentrations were determined in all samples. A second group of 24 animals received i.v.saline solution pre-treatment half an hour prior to the experiment. Laboratory analysis revealed a significant increase in blood concentration of lactate in l-alanil –glutamine group and during reperfusion. The offer of l-alanil-glutamine cause no significant change on concentration of glucose and pyruvate. On the other hand it did induce to significant reduction of cetonemia in the animal group treated with l-alanil-glutamine as compared to that observed in animals from control group. It is concluded that l-alanil –glutamine pre – treatment may enhance glycolysis during ischemia-reperfusion. Activation of malate-aspartate shuttle in glucose oxidative pathway due to increase availabitity of glutamate can explain these changes. / Durante a realização de transplantes renais e outras operações sobre os rins ocorrem os fenômenos de isquemia/reperfusão cujos efeitos nocivos colocam em risco o sucesso dessas intervenções. Pesquisas têm sido feitas no sentido de controlar, ou ao menos diminuir, os efeitos indesejáveis da isquemia/reperfusão. O objetivo desse estudo é avaliar o possível efeito da l-alanil-glutamina sobre a isquemia/reperfusão renal mediante a determinação, in vivo, das concentrações de glicose, piruvato, lactato e corpos cetônicos no sangue e no tecido renal submetido a isquemia/reperfusão. Isquemia de 30 min. foi induzida em dois grupos de animais de experimentação (ratos Wistar). Em seguida, foram determinadas as alterações ocorridas no tempo pós-reperfusão (0 min., 5mi., 15 min., 30 min.) nas concentrações sangüíneas e renais de glicose, piruvato, lactato e corpos cetônicos. Um grupo de 24 animais (6 para cada tempo) foi previamente tratado com l-alanil-glutamina administrada por via venosa e na dose de 0,75g /kg de peso. Em grupo controle com igual número de animais administrou-se, também por via venosa, o mesmo volume de solução salina. Os resultados apontam para aumento significante na concentração sangüínea de lactato nos animais que receberam l-alanil-glutamina, logo após a isquemia (tempo 0 min.) e em todos os tempos após a reperfusão. Não foram constatadas alterações significantes nas concentrações de piruvato e de glicose. No entanto, foi observada redução significante na concentração de corpos cetônicos. Os resultados obtidos sugerem aumento da atividade glicolítica durante o período de reperfusão decorrente da oferta exógena de l-alanil-glutamina. Tal fato deve-se, provavelmente, à ativação do sistema carreador malato-aspartato, em razão da oferta de glutamato, através de seu precursor l-glutamina.

Made available in DSpace on 2015-05-22T12:39:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000467931-Texto+Completo-0.pdf: 1649223 bytes, checksum: 97061538af6c3abdd1bf13692fc0be12 (MD5) Previous issue date: 2015 / Depression is a serious and recurrent disease characterized by anhedonia, loss of interest in daily activities, appetite, and sleep disturbances, reduced concentration and psychomotor agitation. Antidepressant drugs currently used have a very slow onset of action, with that comes the need for fast-acting treatments. Therefore, there is a growing interest in NMDA antagonists as a target for the development of new antidepressant drugs. Considering that the purinergic and dopaminergic systems are involved in anxiety, depression, and sleep, we characterize the role of these signaling pathways on antidepressant effects induced by MK-801 in zebrafish. The animals treated with MK-801 at 5, 10, 15, and 20 µM during 15, 30, and 60 minutes showed higher permanence in the top area of the tank, in comparison with the control group, indicating an antidepressant effect induced by this drug. The animals treated with MK-801 remained within 2 hours in the top of the tank when treated with 5 µM MK-801 and 4 hours when treated with 20 µM MK-801, returning to basal levels 24 hours after exposure.The repeated treatment did not induce cumulative effects, since animals treated daily for seven days showed the same pattern of behavioral response observed from the first day until the 7th day. In order to investigate the action of agonists and antagonists of A1 and A2A receptors and the influence of modulation on adenosine levels in antidepressant effects induced by MK-801, animals were pretreated with Caffeine, DPCPX, CPA, ZM 241385, CGS 21680, AMPCP, EHNA, dipyridamole, and NBTI before the exposure to MK-801 for 30 minutes. The nonselective adenosine receptor antagonist Caffeine (50 mg/kg) and the selective A1 adenosine receptor antagonist DPCPX (15 mg/kg) blocked the behavioral changes induced by MK-801. Dipyridamole (10 mg/kg), a selective inhibitor of nucleoside transport (NT), exacerbates the behavioral changes induced by MK-801. Dopamine receptor antagonists (sulpiride and SCH23390) did not induce changes on the behavioral alterations induced by MK-801. Our results have shown that the antidepressant effects induced by MK-801 in zebrafish are mediated by the activation by A1 adenosine receptor. / A depressão é uma doença grave, recorrente, caracterizada por anedonia, perda de interesse em atividades diárias, distúrbios do apetite e do sono, concentração reduzida e agitação psicomotora. Os fármacos antidepressivos utilizados atualmente têm um início de ação muito lento, com isso, surge a necessidade de tratamentos de ação rápida. Portanto, há um interesse crescente em antagonistas de receptores NMDA como um alvo para o desenvolvimento de novos fármacos antidepressivos. Considerando-se que os sistemas purinérgicos e dopaminérgicos estão envolvidos na ansiedade, sono e depressão, caracterizamos o papel destas vias de sinalização sobre os efeitos antidepressivos induzidos por MK-801, um antagonista NMDA, em peixe-zebra. Os animais tratados com MK-801 em doses de 5, 10, 15 e 20 µM durante 15, 30 e 60 minutos apresentaram maior permanência na área superior do aquário, em comparação com o grupo controle, indicando um efeito antidepressivo induzido por este composto.Os animais tratados com MK-801 permaneceram até 2 horas na parte superior do aquário quando tratados com 5 µM de MK-801 e 4 horas quando tratados com 20 µM MK-801, retornando aos parâmetros basais após 24 horas de exposição. O tratamento repetido não induziu efeitos cumulativos, uma vez que os animais tratados diariamente durante sete dias apresentaram o mesmo padrão de resposta comportamental observada desde o primeiro até o dia 7º dia. Com o objetivo de investigar a ação dos agonistas e antagonistas dos receptores A1 e A2A e a influência da modulação dos níveis de adenosina nos efeitos antidepressivos induzidos por MK-801, os animais foram pré-tradados com cafeína, DPCPX, CPA, ZM 241385, CGS 21680, AMPCP, EHNA, Dipiridamol e NBTI por 30 minutos antes da exposição ao MK-801. O antagonista não seletivo de receptores de adenosina cafeína (50 mg/kg) e o antagonista seletivo do receptor A1 DPCPX (15 mg/kg) bloquearam as alterações comportamentais induzido pelo MK-801.O Dipiridamol (10 mg/kg), um inibidor não seletivo do transportador de nucleosídeo (NT), exacerbou as alterações comportamentais induzidos pelo MK-801. Os antagonistas dos receptores de dopamina (sulpirida e SCH23390) não apresentaram modificações nas alterações comportamentais induzidas por MK-801. Os nossos resultados sugerem que o efeito antidepressivo induzido por MK-801 em peixe-zebra é mediado principalmente pela ativação do receptor de adenosina A1.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:05:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000436229-Texto+Completo-0.pdf: 1123384 bytes, checksum: 85ba9f774662974dca27a3df7d39708d (MD5) Previous issue date: 2011 / Resveratrol (RSV) is a polyphenol with well-characterized anti-inflammatory and antioxidant actions, with some evidence for antinociceptive effects. Herein, we have evaluated the effects of RSV in two acute mouse models of spontaneous nociception, induced by capsaicin and glutamate, with some attempts to define the possible mechanisms of action of this compound. The oral administration of RSV (100 mg/kg) significantly reduced the licking behavior elicited by the intraplantar injection of capsaicin (1. 6 μg/paw) or glutamate (10 μmol/paw). The co-administration of RSV, into the mouse paw (25 μg/site), markedly prevented glutamate-induced licking, without affecting capsaicin-elicited responses. Otherwise, the i. t. injection of RSV (300 and 600 μg/site) widely reduced the licking behavior caused by capsaicin, but not by glutamate. Lastly, the i. c. v. injection of RSV (300 μg/site) caused only a mild inhibition of capsaicin-induced nociception, whereas glutamate responses remained unaffected. Unexpectedly, the co-administration of RSV (300 μg/site) was able to inhibit the biting behavior induced by i. t. injection of glutamate (30 μg/site), leaving capsaicin (6. 4 μg/site)-induced biting unaltered. Of note, the oral treatment with RSV (100 mg/kg) resulted in a significant inhibition of capsaicin-induced increase of both c-Fos and COX-2 immunolabeling in the lumbar spinal cord, as well as the COX-2 expression in cortex. In glutamate model, the oral administration of RSV failed to affect either c-Fos or COX-2 activation in spinal or brain tissues. Data provides new evidence showing that analgesic effects of RSV are mediated by different mechanisms of action and anatomical sites, depending on the algogenic stimulus. / O resveratrol (RSV) é um polifenol natural com efeitos anti-inflamatórios e antioxidantes bem descritos. Efeitos significantes sobre a hiperalgesia inflamatória induzida por carragenina em ratos já foram demonstrados. Neste estudo, foram avaliados os efeitos da administração de RSV em dois modelos de nocicepção espontânea, induzida por capsaicina e glutamato em camundongos, com abordagens para definição dos possíveis mecanismos de ação deste composto. A administração oral de RSV (100 mg/kg) reduziu significativamente o efeito comportamental provocado pela injeção intraplantar de capsaicina (1,6 μg/pata) ou glutamato (10 μmol/pata). A co-administração de RSV intraplantar (25 μg/sítio) preveniu a nocicepção aguda induzida por glutamato, sem afetar o comportamento induzido pela capsaicina. Em contraste, a injeção intratecal de RSV (300 e 600 μg/sítio) reduziu a nocicepção causada pela capsaicina, mas não pelo glutamato.A administração intracerebroventricular de RSV (300 μg/sítio) inibiu parcialmente a nocicepção induzida pela capsaicina, enquanto que a resposta induzida pelo glutamato permaneceu inalterada. A co-administração de RSV (300 μg/sítio) foi capaz de inibir a nocicepção induzida pela injeção intratecal de glutamato (30 μg/site), não alterando o comportamento induzido pela capsaicina (6,4 μg/sítio). O tratamento oral com RSV (100 mg/kg) resultou em uma inibição significativa da imunopositividade de c-Fos e de COX-2 na medula espinhal, causada pela capsaicina, bem como, a expressão da COX-2 no córtex. Em relação ao modelo de glutamato, a administração oral de RSV não afetou a expressão c-Fos ou COX-2 na medula espinhal ou córtex. Nossos dados fornecem novas evidências demostrando que os efeitos analgésicos do RSV são provavelmente mediados por diferentes mecanismos de ação e sítios anatômicos, dependendo do estímulo algogênico.

Made available in DSpace on 2014-03-29T02:01:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000455930-Texto+Completo-0.pdf: 2412584 bytes, checksum: f510a7887fb6fa3e2f006d9db557d511 (MD5) Previous issue date: 2014 / Spinal voltage-gated calcium channels (VGCC) are pivotal regulators of painful and inflammatory alterations, representing attractive therapeutic targets. We examined the effects of epidural administration of the selective P/Q- and N-type VGCC blockers Tx3-3 and Phα1β, respectively, isolated from the spider P. nigriventer, on symptomatic, inflammatory and functional changes allied to cyclophosphamide (CPA)-induced hemorrhagic cystitis (HC) in mice. The effects of P. nigriventer-derived toxins were compared to those displayed by MVIIC and MVIIA, extracted from the cone snail C. magus. HC was induced by a single intraperitoneal injection of CPA (300 mg/kg). The spinal blockage of P/Q-type VGCC by Tx3-3 and MVIIC, or N-type VGCC by Phα1β attenuated nociceptive and inflammatory events associated with HC, including bladder oxidative stress and cytokine production. Moreover, CPA produced an evident increase of bladder TRPV1 and TRPA1 mRNA expression, which was virtually reversed by all the tested toxins. Noteworthy, Phα1β strongly prevented bladder neutrophil migration, besides HC-related functional alterations. Finally, the spinal co-administration of the selective NK1 receptor antagonist CP-96345 heightened Phα1β antinociceptive effects. Our results shed new lights on the role of spinal P/Q and N-type VGCC in bladder dysfunctions, pointing out Phα1β as a promising alternative for treating complications associated to CPA-induced HC. / Os canais de cálcio voltagem-dependentes (CCVDs), ao nível medular, são um dos principais reguladores das alterações inflamatórias e dolorosas, representando um interessante alvo terapêutico. Com isso, avaliamos os efeitos da administração intratecal dos bloqueadores seletivos dos CCVD do subtipo P/Q e N, Tx3-3 e Phα1β, respectivamente, isolados do veneno da aranha P. nigriventer, nas mudanças sintomáticas, inflamatórias e funcionais, relacionadas com a cistite hemorrágica (CH), induzido pelo quimioterápico ciclofosfamida (CPA) em camundongos. Os efeitos dos peptídeos provenientes da aranha P. nigriventer foram comparados com os exibidos pelas toxinas MVIIC e MVIIA, obtidas do caramujo C. magus. A CH foi induzida por uma única administração intraperitoneal de CPA (300 mg/kg). O bloqueio medular dos CCVD do subtipo P/Q através da Tx3-3 e MVIIC ou, o bloqueio dos CCVD do subtipo N pela toxina Phα1β atenuou as respostas nociceptivas e inflamatórias associadas à CH, incluindo estresse oxidativo e produção de citocinas na bexiga. Além disso, a CPA produziu um aumento evidente na expressão do RNAm de TRPV1 e TRPA1 na bexiga, o qual foi virtualmente revertido por todas as toxinas. Notavelmente, a isoforma Phα1β reduziu a migração de neutrófilos para a bexiga, além de reverter as disfunções da bexiga relacionadas à CH. Finalmente, a co-administração medular do antagonista seletivo dos receptores NK1, CP-96345, com o peptídeo Phα1β, intensificou o efeito antinociceptivo do mesmo. Nossos resultados trazem novas evidências da função dos CCVD do subtipo P/Q e N ao nível medular na disfunção da bexiga, apontando a Phα1β como uma possível alternativa de tratamento para complicações associadas à CH, induzida por CPA.

Made available in DSpace on 2014-03-29T02:01:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000455924-Texto+Completo-0.pdf: 866376 bytes, checksum: 11973f76ada2aeeeb6a5dcd6c7c51f89 (MD5) Previous issue date: 2014 / Paraquat (PQ) is an agrochemical agent commonly used worldwide, which is allied to potential risks of intoxication. This herbicide induces the formation of reactive oxygen species (ROS) that ends up compromising various organs, particularly the lungs (by the polyamine uptake system), and the brain (by dopaminergic neuronal cell loss). This study evaluated the deleterious effects of paraquat on the central nervous system (CNS) (changes in physiologic parameters, nociceptive responses, locomotor activity and motor coordination, and expression profile of some inflammatory markers), or peripherally (inflammatory cells in the blood and lungs), with special attempts to assess the putative protective effects of the selective CXCR2 receptor antagonist SB225002 on these parameters. PQ-toxicity was induced in male Wistar rats, in a total dose of 50 mg/kg, given by the intraperitoneal (i. p. ) route (10 mg/kg each three days). Control animals received saline solution (10 ml/kg) at the same schedule of administration. Separate groups of animals were treated with the selective CXCR2 antagonist SB225002 (1 or 3 mg/kg, i. p. ), administered 30 min before each paraquat injection. The major changes found in paraquat-treated animals were: decreased body weight and hypothermia, nociception behavior, impairment of locomotor and gait capabilities, enhanced TNF-α and IL-1β expression in the striatum, and cell migration to the lungs and blood. Some of these parameters were reversed when the antagonist SB225002 was administered, including recovery of physiological parameters, decreased nociception, improvement of gait abnormalities, modulation of striatal TNF-α and IL-1β expression, and decrease of neutrophil migration to the lungs and blood. Taken together, our results demonstrate that damage to the central and peripheral systems elicited by paraquat can be prevented by the pharmacological inhibition of CXCR2 chemokine receptors. The experimental evidence presented herein extends the comprehension on the toxicodynamic aspects of paraquat, and opens new avenues to treat intoxication induced by this herbicide. / O paraquat (PQ) é um composto químico bastante utilizado no mundo, o qual é aliado a potenciais riscos de intoxicação. Este herbicida induz a formação de espécies reativas de oxigênio (ROS) que podem comprometer vários órgãos, especialmente os pulmões (através da recaptação de poliaminas), e o cérebro (pela perda de neurônios dopaminérgicos). Este trabalho avaliou os efeitos deletérios do paraquat frente ao Sistema Nervoso Central (SNC) (como mudanças nos parâmetros fisiológicos, respostas nociceptivas, atividade locomotora e coordenação motora, e o perfil de expressão de alguns marcadores moleculares de inflamação), e periférico (como células inflamatórias no sangue e pulmões), com o objetivo de avaliar o possível papel protetor do antagonista de receptores de quimiocinas CXCR2, o SB225002, nestes parâmetros. A toxicidade ao paraquat foi induzida em ratos machos Wistar, em uma dose total de 50 mg/kg, administrada intraperitonealmente (i. p. ) (10 mg/kg a cada três dias). Animais do grupo controle receberam solução salina (10 ml/kg) no mesmo protocolo de administração. Diferentes grupos de animais foram tratados com o antagonista SB225002 (1 ou 3 mg/kg, i. p. ), administrado 30 minutos antes de cada aplicação do paraquat. As prinicpais mudanças encontradas nos animais tratados com paraquat foram: diminuição do peso corporal e hipotermia, aumento da resposta nociceptiva, diminuição da capacidade de marcha e locomoção, aumento da expressão de TNF-α e IL-1β no estriado, e a migração de células inflamatórias no sangue e pulmões. Alguns destes parâmetros foram revertidos quando administrado o antagonista SB225002, como recuperação dos parâmetros fisiológicos, diminuição da nocicepção, melhora na atividade de marcha, modulação da expressão estriatal de TNF-α e IL-1β, e diminuição da migração neutrofílica para o sangue e pulmões. Em conjunto, nossos resultados demonstram que os danos causados pelo paraquat ao sistema central e periférico podem ser prevenidos através da inibição farmacológica dos receptores de quimiocinas CXCR2. A evidência experimental aqui apresentada extende a compreensão dos efeitos toxicodinâmicos do paraquat, e proporciona novas possibilidades para tratar a intoxicação causada por este herbicida.

Made available in DSpace on 2014-06-17T02:02:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000458701-Texto+Completo-0.pdf: 1213511 bytes, checksum: 5c4a01085ee74091dcd6f5af755a1eca (MD5) Previous issue date: 2014 / Studies on dental caries demonstrate inflammation on dental pulp tissues following infection. Cytokines are able to activate those cells linked to inflammatory and immune response thus neutralizing potentially aggressive agents and allowing tissue repair. Some of those cytokines, denominated chemokines, could contribute to the establishment of an immunotherapy able to control those cytokines involved with the triggering of dental pulp inflammation. Research on chronic inflammation has provided some relevant insights. However, the role of certain chemokines on acute inflammation is yet not conclusive. This study attempts to unveil the role of the chemokines CCL5/RANTES, CCR5 and RANKL on initial and acute pulpal inflammation. Methods: 18 Wistar rats were subjected to anesthesia. Access was performed on their first lower molars until pulp exposure. They were divided into three experimental groups considering the solution administered: Saline, lipopolysaccharide (LPS) and lipoteichoic acid (LTA) (n=6 each group). Higid second lower molars were used as controls. The cavities were sealed with amalgam and euthanasia occurred after 48 h and the jaws were dissected for histologic evaluation. CCL5/RANTES is expressed in all groups, unlike CCR5, that was not expressed. RANKL appears only in inflammatory cells, including control group. Only RANKL could be expressed during initial pulpal inflammation, being able to detect inflammatory cell activity. / Estudos de cárie demonstraram aspectos inflamatórios nos tecidos pulpares decorrentes de infecção estabelecida. Citocinas seriam capazes de ativar células ligadas à resposta inflamatória e imune no sentido de neutralizar potenciais agentes invasores e permitir o reparo dos tecidos pulpares. Algumas destas, denominadas quimiocinas, poderiam contribuir no estabelecimento de uma imunoterapia capaz de bloquear aquelas citocinas responsáveis pelo processo inflamatório. Na inflamação crônica estas pesquisas já possuem resultados satisfatórios. Na inflamação aguda, os estudos ainda estão inconclusivos. Este estudo teve como objetivo testar as quimiocinas CCL5/RANTES, CCR5 e RANKL na inflamação pulpar aguda. Métodos: 18 Ratos Wistar foram anestesiados. Foram feitas cavidades até a exposição pulpar nos primeiros molares inferiores. Eles foram divididos em três grupos onde se administrou solução salina estéril, lipopolissacarídeo (LPS) e ácido lipoteicóico (LTA) (n= 6 por grupo). Os segundos molares inferiores hígidos foram utilizados como controle. As cavidades foram seladas com amálgama e a eutanásia foi realizada após 48h. As mandíbulas foram dissecadas para exame histológico e da imunoexpressão das quimiocinas em estudo. Obteve-se como resultados: CCL5/RANTES é expressa em todos os grupos, ao contrário do CCR5, que não foi expressa. RANKL aparece apenas em células inflamatórias. Somente a expressão de RANKL foi capaz de demonstrar atividade celular na inflamação pulpar inicial.