Orientador: Jorge Humberto Nicola / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas. Instituto de Fisica Gleb W ataghin / Made available in DSpace on 2018-07-14T02:00:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Zezell_DeniseMaria_D.pdf: 4526430 bytes, checksum: ea58726a6a28c7dce0f9ec742ab7118b (MD5) Previous issue date: 1991 / Resumo: A Terapia Fotodinâmica de Câncer, como um processo complexo, permite o desenvolvimento de estudos direcionados à diferentes áreas do conhecimento. No presente trabalho apresentamos inicialmente as bases da terapia ressaltando a sua forte dependência com a espectroscopia óptica. Apresentamos toda a "ferramenta" básica que possibilitou o entendimento dos nossos resultados experimentais em fluorescência e Raman, os quais acrescentam contribuições originais, experimental e teórica, para esta linha de pesquisa. Nosso objetivo principal foi o de utilizar resultados acadêmicos, como os de fluorescência e absorção óptica, para elaborar experimentos fronteiriços com a prática médica. Neste sentido demonstramos a viabilidade de um método capaz de monitorar o processo da terapia "in vivo", bem como mostramos que a eficiência da Terapia Fotodinâmica de câncer pode ser melhorada em condições hiperbáricas de oxigênio adequadas / Abstract: Photodynamic Therapy for the treatment of Cancer is a very complex process which leaded us in the study of different areas of knowledge. In this work we discuss all the basic concepts of the Photodinamic Therapy in strong connection to optical spectroscopy. The scientific tools indispensable for understanding of our results in fluorescence and Raman spectra were presented added with original experimental and theoretical contributions. The aim of this thesis was the use of academic results which could be useful in medicine. Therefore we have demonstrated the feasibility of a new method for monitoring the Photodynamic Therapy "in vivo". Besides these results we were able to demonstrate that in Hyperbaric Oxygen atmosphere the PDT process would probably be accelerated. / Doutorado / Física / Doutor em Ciências

Orientador: Jorge Humberto Nicola / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Fisica Gleb Wataghin / Made available in DSpace on 2018-07-16T05:23:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Zezell_DeniseMaria_M.pdf: 8748447 bytes, checksum: e70a323386c229c01c18c17f06b10949 (MD5) Previous issue date: 1987 / Resumo: No presente trabalho desenvolvemos o estudo, sob o ponto de vista físico, da Terapia fotodinâmica do Câncer (PDT), bem como de substâncias usadas com tal processo. A PDT é uma técnica de uso clínico no tratamento de câncer já consagrada em outros países e ainda não implantada no nosso, que consiste na destruição do tecido maligno via excitação óptica de moléculas de um derivado da hematoporfirina (HpD), previamente injetado no paciente. Na primeira parte do nosso trabalho apresentamos, além de uma revisão bibliográfica, um estudo que situa as fases do processo, separando-as sob o ponto de vista da química, biologia e física, o que inclui a preparação do composto, a ação metabólica do mesmo, bem como o efeito físico propriamente dito da fotorradiação. A parte final do trabalho está dedicada ao estudo das propriedades ópticas da hematoporfirina e de seus derivados, que por sua complexibilidade estrutural apresentam espectros de absorção, fluorescência e Raman, de difícil interpretação, podendo levar até mesmo a erros, como os encontrados na literatura / Abstract: In this work we present a study of Photodynamic Therapy of Cancer (PDT) from the physical point, of view as well as the study of substances used in this process. PDT is a type of cancer treatment, therapy successfully used in other countries, but unknown in our own country. It consists of the destruction of malignous tissues by optical excitation of the molecules of an hematoporphyrin derivative (HpD) previouly injected in the patient. In the first part of this work we present a study with a bibliographical review that establishes the steps of the process, dividing them under the chemical, physical and biological point of view. This includes the compound preparation, its metabolic action and the physical effect of photoradiation. The last part of the work consists of the study of the optical properties of the hematoporphyrin and its derivatives which, due to their complex structures, show absorption, fluorescence and Raman spectra of difficult, interpretation, leading to errors found in other publications / Mestrado / Física / Mestre em Física

Orientadores: Jorge Humberto Nicola, Ester Maria Danielli Nicola / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-22T07:43:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Colussi_ValdirCarlos_D.pdf: 6054760 bytes, checksum: 4acce1be5c11dc543cb084ccd5b0b44f (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: A Terapia Fotodinâmica do Câncer (PDT) é baseada no envolvimento de três fatores, a saber: detenção pelo tecido canceroso de um fotossensibilizador específico; iluminação localizada da lesão e ocorrência de oxigênio inicialmente no estado fundamental triplete. Na literatura científica sobre o assunto, encontram-se vários trabalhos sobre a dosagem de fotossensibilizadores diversos e sobre a dosimetria da radiação visível capaz de provocar a terapia. O nível de oxigênio, por depender intrinsecamente do organismo tratado, tem sido tomado como um parâmetro constante na terapia e raramente estudado. No presente trabalho apresentamo pela primeira vez um desenvolvimento teórico que relaciona matematicamente o dano celular resultante do tratamento, com a variação do aporte de oxigênio nas células cancerosas. Para testar a teoria desenvolvida, levamos a cabo uma série de experimentos de PDT com o tumor de Walker 256 em ratos, em situações de hiperoxigenação hiperbárica (HBO), em câmara experimental especialmente projetada e construí da, comparadas com situações normobáricas. Os resultados foram conclusivos, mostrando que a previsão teórica está correta, sendo constatado um aumento na eficiência do tratamento em situação hiperbárica, relativo ao convencional, da ordem de 4: 1 em densidade de células cancerosas eliminada / Abstract: Photodynamic therapy is based on simultaneous involvement of three factors, namely: tumor tissue retention of an specific photosensitizer; local illumination of the lesion and occurrence of oxygen in the triplet state. Theoretically, changes in any one of these factors may be compensated by a change in the other factors, leading to the same therapeutic resulto Practically this is not true, but we expect to find an ideal combination of these three factors which may give the best clinical results. We present experimental results of PDT under Hyperbaric hyperoxia (HBO) in tumor masses at the dorsal subcutaneous tissue of rats. These tumors were created by previous inoculation of "Walker 256" neoplastic cells. Haematoporphyrin Esther (HpE) was administered as the photosensitizer. The rats were' pressurized up to 3 atm, with 100% oxygen continuous ventilation condition in an specially designed hyperbaric chamber. In animaIs treated with PDT/HBO the histology revealed a very important reduction in the number of the tumor cells as compared with PDT controls in normal atmospheric condition, showing numerous apoptotic as well as necrotic cells at the border of the irradiated area. The observed enhancement in the PDT for this situation is, of course, related to extra oxygen in the circulatory system / Doutorado / Doutor em Neurociencias

Orientador : Ester Maria Danielli Nicola / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-18T04:54:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gusmao_ReinaldoJordao_M.pdf: 2293049 bytes, checksum: b30e559c0bd2d2d6a2609f0694169457 (MD5) Previous issue date: 1992 / Resumo: Neste trabalho, apresentamos os resultados experimentais de detecção de tumores malignos através da terapia fotodinâmica - PDT (do inglês, Photodynamic therapy) com o uso do derivado de hematoporfirina - HpD (do inglês Hematoporphyrin derivative), ativado por fonte de luz com comprimento de onda em torno de 365nm. Os resultados obtidos comprovam que o fotossensibilizador utilizado apresenta maior retenção nos tecidos malignos em relação ao tecido normal, servindo como delineador (Iocalizador) através de fluorescência avermelhada. Os estudos foram realizados em modelo experimental, especialmente montado para esse fim, utilizando tumores malignos do tipo sarcomatoso implantados em ratas, lâmpada ultravioleta e HpD preparado em nosso meio. São descritas a montagem e a metodologia empregadas neste modelo, que permitiram o presente estudo e que certamente servirão de embasamento em futuras pesquisas e/ou aplicações clínicas. Foi discutido, também, o modelo fotográfico empregado para efeito de documentação. A revisão bibliográfica da PDT é apresentada com seus aspectos históricos, físico-químicos, biológicos e aplicações clínicas, chamando a atenção para essa modalidade de diagnóstico e tratamento do câncer, desconhecida em nosso meio. / Abstract: In this study, we present experimental results on the detection of malignant tumors using photodynamic therapy with the use of a hematoporphyrin derivative activated by a light source with a wavelength of approximately 365nm. The results showed that the photosensitizer used presented greater retention on the malignant tissues when compared with normal tissue, serving as a localizer by means of red fluorescence. An experimental model was created specially for this study utilizing sarcomatose malignant tumors implanted in female rats, an ultraviolet light and the hematoporphyrin derivative prepared in our laboratory. The methodology and the preparation of the model is described, which undoubtedly will serve as a basis for future studies and/or clinical applications. We also discuss the photographic model used for documentation. The bibliographic revision of photodynamic therapy is presented with historical, physical-chemical and biological aspects as well as clinical applications, paying special attention to the diagnostic and treatment of cancer, which is unknown in our milieu. / Mestrado / Mestre em Ciências Médicas

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2018-08-08T12:56:31Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1495332 bytes, checksum: 8c8726b4f0b0407e2a15a87f6871ba21 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-08T12:56:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1495332 bytes, checksum: 8c8726b4f0b0407e2a15a87f6871ba21 (MD5) Previous issue date: 2017-06-30 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A Urochloa decumbens (sinonímia: Brachiaria decumbens) é uma gramínea que pode ser tóxica aos animais em pastejo, principalmente aos ovinos. A intoxicação é associada com a ingestão de um metabólito secundário das plantas, uma saponina esteroidal, a protodioscina. Uma vez metabolizadas no trato digestivo, as saponinas se associam com íons cálcio, formando sais insolúveis, que podem obstruir as vias biliares interferindo no metabolismo dos hepatócitos. Essas alterações hepáticas interferem na eliminação de um composto fotoativo derivado da clorofila, a filoeritrina, que acumula na corrente sanguínea e posteriormente nos tecidos da pele, e por meio da ação dos raios solares, gera intensa inflamação, caracterizando a fotossensibilização. Assim, o trabalho consistiu na avaliação da fotossensibilização em ovinos submetidos ao pastejo em Urochloa decumbens cv. Basilisk em sistema silvipastoril (capim-braquiária e eucalipto) ou em monocultivo do capim-braquiária (a pleno sol), durante 60 dias. Nossas hipóteses foram que a sombra proporcionada pelas árvores no sistema silvipastoril previne ou ameniza os sintomas clássicos de fotossensibilização em ovinos em pastejo e afeta a concentração da saponina protodioscina no capim-braquiária. Foram utilizados 20 ovinos mestiços (Dorper x Santa Inês) não adaptados ao pastejo de capim-braquiária, com idade média de quatro meses, distribuídos em um delineamento em blocos casualizados, com dois blocos e cinco animais por bloco, totalizando 10 repetições por tratamento. Foram avaliados a concentração de saponina protodioscina no capim-braquiária, o consumo de saponina, indicadores séricos bioquímicos, histopatologia hepática, bem como os sintomas clínicos apresentados pelos animais. A concentração média de saponina protodioscina encontrada no capim-braquiária foi de 1,37% e 0,98% na pastagem em monocultivo e em sistema silvipastoril respectivamente. Tanto os animais mantidos em sistema silvipastoril quanto os animais que permaneceram no monocultivo do capim-braquiária apresentaram sintomas clínicos, alterações no fígado, elevações das enzimas gama-glutamiltransferase (GGT) e da aspartato aminotransferase (AST) e aumento dos níveis séricos de bilirrubinas ao longo do período experimental. Embora o teor de saponina protodioscina na U. decumbens em sistema silvipastoril tenha sido menor do que no monocultivo, foi suficiente para causar fotossensibilização secundária nos animais. O sombreamento natural proporcionado pelo sistema silvipastoril não previne ou ameniza os sintomas de fotossensibilização em ovinos jovens não adaptados ao pastejo em Urochloa decumbens. / The Urochloa decumbens (synonym: Brachiaria decumbens) is a grass that can be toxic to grazing animals, especially to sheep. The intoxication is associated with the ingestion of a plant secondary metabolite, a steroidal saponin, protodioscin. Once metabolized in the digestive tract, the saponins associate with calcium ions, forming insoluble salts, which can obstruct the bile ducts interfering in the metabolism of hepatocytes. These hepatic alterations interfere in the elimination of a photoactive compound derived from chlorophyll, phylloerythrin, which accumulates in the bloodstream and subsequently in the skin tissues, and through the action of the sun's rays generates intense inflammation, characterizing photosensitization. Thus, the work consisted of the evaluation of photosensitization in sheep submitted to grazing in Urochloa decumbens cv. Basilisk in a silvopastoral system (signal grass and eucalyptus) or monoculture of the signal grass (full sun) for 60 days. We hypothesized that the shade provided by trees in the silvopastoral system prevents or alleviates the classic symptoms of photosensitization in grazing sheep and affects the concentration of the saponin protodioscin in signal grass. Twenty crossbred sheep (Dorper x Santa Ines) not adapted to grazing of signal grass were used, with a mean age of four months, distributed in a randomized block design, with two blocks and five animals per block, totaling 10 replicates per treatment. The concentration of protodioscin saponin in signal grass, protodioscin intake, serum biochemical indicators, liver histopathology, as well as the clinical symptoms presented by the animals were evaluated. The average concentration of protodioscin saponin found in signal grass was 1.37% and 0.98% full sun and silvopastoral systems, respectively. Both the animals kept in the silvopastoral system and the animals that remained in the monoculture of the signal grass presented clinical symptoms, alterations in the liver, elevations of the gamma-glutamyltransferase (GGT) and aspartate aminotransferase (AST) enzymes and increased serum bilirubin levels throughout the experimental period. Although the concentration of protodioscin saponin in U. decumbens in the silvopastoral system was lower than in full sun treatment, it was sufficient to cause secondary photosensitization in the animals. The natural shading provided by the silvopastoral system does not prevent or attenuates the symptoms of photosensitization in young sheep not adapted to grazing on Urochloa decumbens.

O objetivo do estudo foi avaliar o efeito de repetidas aplicações da Terapia Fotodinâmica antimicrobiana (TFDa) adjuvante ao tratamento periodontal não cirúrgico em pacientes fumantes. Foram selecionados 20 indivíduos fumantes com diagnóstico clínico de periodontite crônica. O estudo foi do tipo boca dividida, sendo um lado utilizado a TFDa associada à raspagem e alisamento radicular (RAR) e no outro apenas RAR. Foi utilizado laser com 660nm de comprimento de onda associada ao fotosensibilizador fenotiazida e as aplicações foram realizadas em 4 episódios (dias 0, 2, 7 e 14). Todos os pacientes foram acompanhados por 90 dias. As avaliações clínicas de índice de placa (IP), profundidade de sondagem (PS), nível clínico de inserção (NCI), sangramento à sondagem (SS) e sangramento marginal (SM) foram realizadas no baseline, 0, 30 e 90 dias após a execução do tratamento. Foi realizada análise microbiológica para contagem de 40 espécies bacterianas da amostra subgengival da placa bacteriana (Checkerboard DNA-DNA hybridization). Níveis das citocinas do fluido crevicular gengival foram avaliados (Interleucina-1β, Interleucina-10 e Fator de Necrose Tumoral Alpha). Os dados obtidos foram analisados estatisticamente. Em geral não foram observadas diferenças estatisticamente significantes entre os grupos (p &lt0,05) nos parâmetros clínicos, microbiológicos e imunológicos 90 dias após o tratamento. O tratamento periodontal com RAR + TFDa em múltiplos episódios não promoveu benefícios adicionais à RAR no tratamento não cirúrgico da periodontite crônica em fumantes sem o uso de antibióticos sistêmicos / The aim of this study was to investigate the additional influence of multiple applications of antimicrobial Photodynamic Therapy (aPDT) in smokers without use of systemic antibiotics. Twenty smokers with chronic periodontitis were treated in a split-mouth design study with aPDT adjunct to Scaling and Root Planing (SRP) or SRP only. aPDT was performed by using a laser light source with 660 nm wavelength associated with a photosensitizer. The applications were performed in four episodes (at days 0, 2, 7 and 14). All patients were monitored for 90 days. Plaque index, probing depth, clinical attachment level, bleeding on probing and marginal bleeding were performed at baseline, 0, 30 and 90 days after the SRP. Counts of 40 subgingival species in plaque samples were monitored (Checkerboard DNA-DNA hybridization). Gingival crevicular fluid and subgingival plaque samples were collected (Interleukin 1β, Interleukin 10 e Tumor necrosis factor. Data obtained were statistically analyzed. aPDT as an adjunct to SRP did not demonstrate statistically significant advantages on clinical parameters when compared with SRP alone. In general no statistic significant differences between groups were observed (p &lt0.05). Levels of anti-inflammatory cytokines and bacterial species were comparable in both groups at day 90 after treatment. Periodontal treatment with SRP + aPDT in multiples episodes was not able to improve results in the non-surgical treatment of chronic periodontitis in smokers when compared SRP alone, without the use of systemic antibiotics

Para melhor entender o envolvimento do NER em lesões oxidativas averiguou-se os efeitos da foto-excitação do azul de metileno (MB) in vitro e in vivo. Verificou-se que MB e luz induzem muitos sítios sensíveis a enzima FPG em DNA plasmidial. Mostrou-se que MB é incorporado por fibroblastos humanos proficientes ou deficientes em NER (XP-A e XP-C) e gerou oxigênio singlete (1O2) intracelularmente. A foto-excitação do MB formou também 8-oxoG em núcleos de fibroblastos. Células mutantes XP-A e XP-C foram mais sensíveis ao tratamento e apresentaram mais danos oxidativos em seu DNA genômico do que células selvagens. Contudo, todas as células mostraram a mesma cinética de reparo das lesões formadas. Além disso, houve mais marcação de g-H2AX nas células mutantes após a foto-excitação do MB. Assim, os resultados sugerem que a excitação do MB gera danos oxidativos e quebras na molécula de DNA, tanto in vitro quanto in vivo e que as proteínas XPA e XPC podem ter algum papel na proteção desse estresse, além da sua sabida participação em reparo de lesões induzidas por luz UV. / In order to study the participation of NER mechanisms in the removal of oxidative DNA lesions, we examined the effects of photoactivated methylene blue (MB) in vitro and in vivo. Plasmid DNA presents more FPG sensitive sites when MB was photoactivated than non-photoactivated. MB can be incorporated by NER-proficient or deficient cells and is able to generate singlet oxygen (1O2) inside cells. We detected also the presence of 8-oxoG in genomic DNA after treatment. XP-A and XP-C deficient cells are more sensitive to MB treatment and were found to have more oxidative DNA lesions than proficient cells. Also, there are more g-H2AX foci in mutant cells after treatment. However, there is a clear similarity in lesions repair kinetic between proficient and deficient cells. Therefore, these results suggest that photoactivated MB generates oxidative damage and DNA strand breaks both vitro and in vivo assays and that XPA and XPC proteins may also have a role in the protection of cellular oxidative stress, in addition to its participation in repair of UV-induced DNA damage.

Orientadora: Rosangela Itri / Tese (doutorado) - Universidade Federal do ABC. Programa de Pós-Graduação em Nanociências e Materiais Avançados, 2013

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-07-25T13:33:21Z No. of bitstreams: 1 Paulo Emilio Carneiro de Souza.pdf: 899959 bytes, checksum: 4cc43f14abd78191c314e85ccd4df87d (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-25T13:33:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Paulo Emilio Carneiro de Souza.pdf: 899959 bytes, checksum: 4cc43f14abd78191c314e85ccd4df87d (MD5) Previous issue date: 2013-02-22 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Poisonings by plants are important cause of death of cattle, sheep and goats and direct and indirect losses of flock in Brazil and worldwide. Among the toxic plants that cause economic damage to livestock, there are the photosensitization plants as Froelichia humboldtiana (Roem. & Schult.). This Amaranthacea, popularly known in the semiarid region of Pernambuco and Paraíba as "ervanço", is widely distributed in the areas of scrub from the State of Minas Gerais to Ceará, and can also be found in savannah areas in the State of Goiás. F. humboldtiana is a weed of pastures quite palatable to ruminants and horses and has been often found in degraded areas of the northeastern semiarid. This paper describes three outbreaks of primary photosensitization by F. humboldtiana and experimental reproduction of the disease in a cattle. The epidemiological and clinical data were obtained from the owners and veterinarians responsible for the livestock. After these procedures was recommended the the removal of cattle from invaded pastures. The animals were clinically examined after 30 and 90 days. From these animals samples of blood were collected on the first day of the experiment and on 20th day for determination of serum activities of aspartate aminotransferase, gamma-glutamyltransferase, total, indirect and conjugated bilirubin. Two animals with areas of white fur, crossbred, aged between 8 and 12 months were used as controls.An outbreak of primary photosensitization by F. humboldtiana occurred in Custodia, semiarid region of Pernambuco and another two outbreaks occurred in Agreste of Paraíba. The disease occurred from March to June 2011, affecting 27 bovines out of a total of 70. The main lesions consisted of dermatitis of the white skin, with edema and necrosis. All the bovines recovered after removal from the areas invaded by F. humboldtiana. To produce the disease experimentally, one bovine with white skin was placed for 14 days into an area with F. humboldtiana as the sole forage. This bovine presented photodermatitis on the 3rd day of consumption. The serum concentrations of total, indirect, and conjugated bilirubin and the serum activities of gamma-glutamyl transferase and aspartate-aminotransferase in the spontaneously affected cattle and in the experimental cattle remained within normal ranges. It is concluded that F. humboldtiana causes primary photosensitization in cattle in northeastern Brazil. / Intoxicações por plantas são importante causa de morte de bovinos, ovinos e caprinos e de perdas diretas e indiretas no rebanho brasileiro e mundial. Dentre as plantas tóxicas que provocam prejuízos econômicos à pecuária nacional, destacam-se as que provocam fotossensibilização, tal como Froelichia humboldtiana(Roem.&Schult.)Seub. Essa Amaranthacea, conhecida popularmente no semiárido de Pernambuco e da Paraíba como “ervanço”, encontra-se amplamente distribuída nas áreas de caatinga desde o Estado de Minas Gerais até o Ceará, podendo também ser encontrada em áreas de cerrado no Estado de Goiás. F. humboldtiana é uma planta invasora de pastagens, palatável para ruminantes e equídeos, e tem sido encontrada com frequência em áreas degradadas do semiárido nordestino. Neste trabalho, descrevem-se três surtos de fotossensibilização primária por F. humboldtiana, e a reprodução experimental da doença em um bovino. Os dados epidemiológicos e clínicos foram obtidos junto aos proprietários e veterinários responsáveis pelos rebanhos. Após esses procedimentos recomendou-se a retirada dos bovinos das pastagens invadidas por F. humboldtiana. Os animais foram reavaliados clinicamente após 30 e 90 dias. Desses animais coletou-se sangue no primeiro dia de experimento e no 20º dia, para determinação das atividades séricas de gama glutamil transferase(GGT), aspartato-aminotransferase(AST), bilirrubina total, indireta e conjugada . Dois bovinos com áreas de pelagem branca, mestiços e com idade entre 8 e 12 meses foram utilizados como controle. Um surto de fotossensibilização primária por F. humboldtiana ocorreu no Município de Custódia, região semiárida de Pernambuco e outros dois surtos ocorreram em Salgado de São Félix, no Agreste da Paraíba. A doença ocorreu entre os meses de março a junho de 2011; de um total de 70 bovinos, 27 apresentaram dermatite nas áreas despigmentadas da pele. Para a reprodução experimental da doença foi utilizado um bovino com áreas de pelagem branca que ingeriu F. humboldtiana por 14 dias. Esse bovino apresentou fotodermatite no 3º dia de experimento. De todos os bovinos naturalmente intoxicados e do bovino experimental coletou-se sangue para análise dos níveis séricos de GGT, AST e níveis de bilirrubina total, indireta e conjugada. Os níveis de GGT, AST e bilirrubinas ficaram dentro dos valores de referência para a espécie. Todos os bovinos se recuperaram após sua retirada das áreas invadidas pela planta. Conclui-se que Froelichia humboldtiana é a causa de fotossensibilização primária em bovinos nos Municípios de Custódia-PE e Salgado de São Félix-PB.

Para melhor entender o envolvimento do NER em lesões oxidativas averiguou-se os efeitos da foto-excitação do azul de metileno (MB) in vitro e in vivo. Verificou-se que MB e luz induzem muitos sítios sensíveis a enzima FPG em DNA plasmidial. Mostrou-se que MB é incorporado por fibroblastos humanos proficientes ou deficientes em NER (XP-A e XP-C) e gerou oxigênio singlete (1O2) intracelularmente. A foto-excitação do MB formou também 8-oxoG em núcleos de fibroblastos. Células mutantes XP-A e XP-C foram mais sensíveis ao tratamento e apresentaram mais danos oxidativos em seu DNA genômico do que células selvagens. Contudo, todas as células mostraram a mesma cinética de reparo das lesões formadas. Além disso, houve mais marcação de g-H2AX nas células mutantes após a foto-excitação do MB. Assim, os resultados sugerem que a excitação do MB gera danos oxidativos e quebras na molécula de DNA, tanto in vitro quanto in vivo e que as proteínas XPA e XPC podem ter algum papel na proteção desse estresse, além da sua sabida participação em reparo de lesões induzidas por luz UV. / In order to study the participation of NER mechanisms in the removal of oxidative DNA lesions, we examined the effects of photoactivated methylene blue (MB) in vitro and in vivo. Plasmid DNA presents more FPG sensitive sites when MB was photoactivated than non-photoactivated. MB can be incorporated by NER-proficient or deficient cells and is able to generate singlet oxygen (1O2) inside cells. We detected also the presence of 8-oxoG in genomic DNA after treatment. XP-A and XP-C deficient cells are more sensitive to MB treatment and were found to have more oxidative DNA lesions than proficient cells. Also, there are more g-H2AX foci in mutant cells after treatment. However, there is a clear similarity in lesions repair kinetic between proficient and deficient cells. Therefore, these results suggest that photoactivated MB generates oxidative damage and DNA strand breaks both vitro and in vivo assays and that XPA and XPC proteins may also have a role in the protection of cellular oxidative stress, in addition to its participation in repair of UV-induced DNA damage.