O presente trabalho foi realizado com a finalidade de estudar alguns isolados de Pisolithus tinctorius quanto aos aspectos básicos de crescimento, características citológicas, padrão de esterases e obtenção de protoplastos e quanto ao potencial de infecção desses isolados em espécies de eucalyptus. A caracterização do crescimento em diferentes meios de cultura mostrou que os isolados AC 12, PI 314 e PI 203 apresentaram um bom crescimento em todos os meios testados e não apresentaram diferenças quanto a produção de biomassa nos diferentes meios. Na analise citológica, verificou-se que cada célula micelial possui dois núcleos e a presença de pontes de conexão entre as células. A mitose e similar a que ocorre em outros fungos com agregação dos cromossomos formando duas barras paralelas. Os isolados obtidos de pinus apresentaram um padrão eletroforético de esterases com quatro bandas. Quanto à obtenção de protoplastos, fez-se a avaliação de algumas condições para o isolamento dos mesmos. Quanto aos aspectos mais práticos, foram obtidos e selecionados novos isolados. O problema da falha de micorrização foi eliminado inoculando-se plântulas ao invés de sementes / The present research was carried out in order basic of growth, characteristics, aspects patterns of esterases and cytological protoplast isolation of some isolates of Pisolithus tinctorius as well as their potential of mycorrhizal infection in Eucapyptus. Growth characteristics in different media has shown that the isolates AC 12, PI 314 and PI 203 had good growth in alI of them, while the other ones showed changes in mycelium growth and didn't show a difference in the biomass production. Cytological analysis of these isolates indicated that the hyphae had different widths, each mycelial cell had two nuclei with a diameter of 2.439 μm and the presence of clamp connexion between the cells. The study of the nucIei during the division of somatic cells showed that the mitosis is similar to that which occurs in other fungi, with the chromossomes forming two paraIleI bars.The cromossome number could not be determinated. Pisolithus tinctorius isolated from Pinus showed an eletrophoretic pattern of esterase with four bands. For the Eucalyptus isolates, there were no satisfactory results. An evaluation of different conditions was made for the isolation of protoplasts. Optimal yield were obtained with four day old mycelia, Novozym 234 and the osmotic stabilizer, mannitol. For practical aspects, some strains were evaluated for their potential in mycorrhizal infection on Eucalyptus species in different concentrations of iron. The results were not satisfactory because of the failure to obtain infection of the plants. New strains were isolated and among them AT 501 and AT 502 were selected for Eucalyptus urophylla and E. paniculata and AT 502 and AT 508 for E. torelliana. The other strains did not infect more than 50% of the plants. In order to try to overcome problem the inoculation of a few plants instead inoculation of seeds, was made. With this alteration, problem of non infection was solved, probably because this of the fungi grown on particles of vermiculite were not able to survive during the period of root formation, when inoculated on seeds

A presente pesquisa foi instalada com o objetivo de verificar o efeito do uso de herbicidas residuais bem como os de pós-emergência sobre o número de esporos e índice de colonização de fungos micorrízicos vesículo-arbusculares num Latossolo Vermelho Amarelo, cultivado com citrus (Citrus sinensis L. Osbeck.). O delineamento experimental utilizado foi o de blocos ao acaso com 12 tratamentos e 3 repetições. Os tratamentos utilizados com as respectivas doses de i.a./ha foram: bromacil (3.2 kg), terbacil (3.2), simazine (4.0), ametryne (2.25) + secbumetone (2.25), dichlobenil (5.0); diuron (3.2) e bromacil (2.13) + diuron (1.07) aplicados em pré-emergência e paraquat (0.6), glyphosate (1.61) e MSMA (1.77) aplicados em pós-emergência e os tratamento controles. A amostragem do solo foi feita antes da aplicação dos herbicidas pós-emergentes e após a aplicação dos mesmos, aos 2 e 31 dias. Com relação aos herbicidas pré-emergentes, a amostragem do solo foi feita aos 37, 65 e 94 dias após a aplicação dos mesmos. Os esporos de fungos endomicorrízicos foram obtidos através de peneiramento por via úmida. As raízes das plantas foram separadas, coradas e observadas para avaliação de índice de colonização. Para as condições do presente trabalho, não se detectaram diferenças significativas entre o controle e os tratamentos com herbicidas para número de esporos por unidade de solo e índice de colonização de fungos. / This research was carried with the aim to verify the effect of the use of residual herbicides as well as the post-emergence ones over the spores number and colonization rate of V.A. mycorrhizal fungi in a Red Yellow Latosol cultivated with Citrus (Citrus sinesis L. Osbeck). The experimental design used was randomized blocks being 12 treatments and 3 replications. The treatment utilized and the respective doses of a.i./ha were: bromacil (3.2 kg), terbacil (3.2), simazine (4.0) ametryn (2.25) + secbumetone (2.25), dichlobenil (5.0), diuron (3.2) and bromacil (2.13) + diuron (1.07) applied in pre-emergence and paraquat (0.6), glyphosate (1.61) and MSMA (1.77) applied in post-emergence and the controls treatments, without herbicide. The soil sampling was done before the application of the post-emergence herbicide and 2 and 31 days after their application. In relation to the pre-emergence ones the soil sampling was done 37, 65 and 94 days after their application. The spores were collected from the soil samples by wet sieving. The citrus roots were separated, stained and observed for colonization rate evaluation. For the condition of this experiment there was no significative differences among the control and the herbicides treatments for spores number by soil unit and colonization rate.

A presente pesquisa foi instalada com o objetivo de verificar o efeito do uso de herbicidas residuais bem como os de pós-emergência sobre o número de esporos e índice de colonização de fungos micorrízicos vesículo-arbusculares num Latossolo Vermelho Amarelo, cultivado com citrus (Citrus sinensis L. Osbeck.). O delineamento experimental utilizado foi o de blocos ao acaso com 12 tratamentos e 3 repetições. Os tratamentos utilizados com as respectivas doses de i.a./ha foram: bromacil (3.2 kg), terbacil (3.2), simazine (4.0), ametryne (2.25) + secbumetone (2.25), dichlobenil (5.0); diuron (3.2) e bromacil (2.13) + diuron (1.07) aplicados em pré-emergência e paraquat (0.6), glyphosate (1.61) e MSMA (1.77) aplicados em pós-emergência e os tratamento controles. A amostragem do solo foi feita antes da aplicação dos herbicidas pós-emergentes e após a aplicação dos mesmos, aos 2 e 31 dias. Com relação aos herbicidas pré-emergentes, a amostragem do solo foi feita aos 37, 65 e 94 dias após a aplicação dos mesmos. Os esporos de fungos endomicorrízicos foram obtidos através de peneiramento por via úmida. As raízes das plantas foram separadas, coradas e observadas para avaliação de índice de colonização. Para as condições do presente trabalho, não se detectaram diferenças significativas entre o controle e os tratamentos com herbicidas para número de esporos por unidade de solo e índice de colonização de fungos. / This research was carried with the aim to verify the effect of the use of residual herbicides as well as the post-emergence ones over the spores number and colonization rate of V.A. mycorrhizal fungi in a Red Yellow Latosol cultivated with Citrus (Citrus sinesis L. Osbeck). The experimental design used was randomized blocks being 12 treatments and 3 replications. The treatment utilized and the respective doses of a.i./ha were: bromacil (3.2 kg), terbacil (3.2), simazine (4.0) ametryn (2.25) + secbumetone (2.25), dichlobenil (5.0), diuron (3.2) and bromacil (2.13) + diuron (1.07) applied in pre-emergence and paraquat (0.6), glyphosate (1.61) and MSMA (1.77) applied in post-emergence and the controls treatments, without herbicide. The soil sampling was done before the application of the post-emergence herbicide and 2 and 31 days after their application. In relation to the pre-emergence ones the soil sampling was done 37, 65 and 94 days after their application. The spores were collected from the soil samples by wet sieving. The citrus roots were separated, stained and observed for colonization rate evaluation. For the condition of this experiment there was no significative differences among the control and the herbicides treatments for spores number by soil unit and colonization rate.

Orientador: Sidney Luiz Stürmer. / Dissertação (Mestrado em Engenharia Ambiental) - Programa de Pós-Graduação em Engenharia Ambiental, Centro de Ciências Tecnológicas.

Orientadores: Rosete Pescador, Sidney Luiz Stürmer. / Dissertação (mestrado) - Universidade Regional de Blumenau, Centro de Ciências Tecnológicas, Programa de Pós-Graduação em Engenharia Ambiental.

Orientador: Sidney Luiz Stürmer. / Dissertação (mestrado) - Universidade Regional de Blumenau, Centro de Ciências Tecnológicas, Programa de Pós-Graduação em Engenharia Ambiental.

Orientador: Sidney Luiz Stürmer. / Dissertação (mestrado) - Universidade Regional de Blumenau, Centro de Ciências Tecnológicas, Programa de Pós-Graduação em Engenharia Ambiental.

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No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Ieda Ribeiro Coelho.pdf: 382504 bytes, checksum: 79cc4bf87d75e83442feb42baa5e2cec (MD5) Previous issue date: 2012-03-08 / CAPES / O sistema de produção de inóculo de fungos micorrízicos arbusculares (FMA) usando areia e vermiculita irrigados com solução nutritiva é promissor. Porém, fontes orgânicas adicionadas ao substrato de cultivo podem estimular a esporulação dos FMA e substituir a solução nutritiva. O objetivo deste estudo foi selecionar substratos orgânicos que, adicionados ao sistema areia:vermiculita, maximizem a produção de inóculo micorrízico. Foram conduzidos três experimentos: o primeiro para selecionar o substrato orgânico para produção de inóculo; o segundo para determinar a infectividade dos inóculos que produziram mais esporos; o terceiro para avaliar a eficiência dos inóculos produzidos. No primeiro experimento testaram-se quatro substratos usando areia e vermiculita adicionados de: (a) solução nutritiva = controle; (b) 10 % de vermicomposto; (c) 10 % de pó de coco; (d) 10 % de Tropstrato® e quatro isolados de FMA: Acaulospora longula, Claroideoglomus etunicatum, Dentiscutata heterogama e Gigaspora albida. Como hospedeiro, utilizou-se painço (Panicum miliaceum). Após 60 dias de manutenção dos potes em telado quantificaram-se os esporos. No segundo experimento, utilizaram-se amostras dos inóculos produzidos com 10 % de vermicomposto. Amostras do inóculo, constituído por esporos, hifas e raízes colonizadas, foram diluídas nas proporções 1:10; 1:100: 1:1000 (v/v) com areia autoclavada utilizando-se milho como planta hospedeira. Após 30 dias em telado, foi avaliada a presença de estruturas micorrízicas nas raízes para determinar o número mais provável de propágulos infectivos. Raízes cultivadas no substrato 1:10 também foram usadas para avaliação da infectividade dos inóculos pelo método da percentagem média de infecção. No terceiro experimento, os isolados produzidos com vermicomposto (10%) foram testados quanto à eficiência em plantas de milho, em solo coletado em área de Caatinga nativa. Após 70 dias da inoculação avaliou-se a biomassa das mudas. A produção de esporos variou em função da fonte orgânica adicionada. O vermicomposto adicionado à areia e vermiculita proporcionou maior esporulação para o isolado de A. longula, em relação aos demais substratos. O inóculo de A. longula produzido também apresentou elevado número de propágulos infectivos e eficiência em promover acúmulo de biomassa em plantas de milho. Conclui-se que o sistema de produção de inóculo utilizando areia e vermiculita + 10 % vermicomposto favorece a produção de inóculo infectivo de A. longula, com o fungo beneficiando o crescimento do hospedeiro. / The system of production of inoculum of arbuscular mycorrhizal fungi (AMF) using sand and vermiculite irrigated with nutrient solution is promising. However, organic amendments added to the substrate can stimulate sporulation of AMF and replace the nutrient solution. The aim of this study was to select organic substrates which, added to the system sand: vermiculite, maximize the production of mycorrhizal inoculum. Three experiments were conducted: the first to select the organic substrate for the production of inoculum; the second to determine the infectivity of inoculum that produced more spores; the third to evaluate the efficiency of the inoculum produced. In the first experiment, the treatments consisted of four substrates [sand and vermiculite added of: (a) nutrient solution = control; (b) 10 % of vermicompost; (c) 10 % of coconut powder; (d) 10 % Tropstrato®] and four AMF: Acaulospora longula, Claroideoglomus etunicatum, Dentiscutata heterogama and Gigaspora albida. Panicum miliaceum (millet) was used as host. After 60 days of maintenance of the pots in a greenhouse the spores were quantified. In the second experiment, inoculum produced with 10% vermicompost was used. Samples of inoculum consisting of spores, hyphae and colonized roots were diluted [1:10, 1:100, 1:1000 (v / v)] with autoclaved sand using Zea mays (maize) as host plant. After 30 days in the greenhouse the presence of mycorrhizal structures was assessed in the roots to determine the most probable number of infective propagules. Roots grown in the substrate 1:10 were also used to evaluate the infectivity of the inoculum by the average percentage of infection. In the third experiment, the efficiency of the inoculum produced in vermicompost (10 %) was tested in maize plants, in soil collected in an area of native Caatinga. After 70 days of inoculation, biomass of the seedlings was evaluated. The production of spores varied according to the organic source added. The vermicompost added to sand and vermiculite provided the highest number of spores of A. longula, compared to other substrates. The inoculum of A. longula also showed a high number of infective propagules and promoted biomass accumulation in maize plants. In conclusion, the inoculum production system using sand and vermiculite + 10 % vermicompost favors the production of infective inoculum of A. longula with the fungus benefiting the host growth.

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:15:21Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo9046_1.pdf: 688167 bytes, checksum: 9e852eb8e43d4826e028b767d621ae8f (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2004 / Os fungos micorrízicos arbusculares (FMA) são componentes importantes dos ecossistemas, pois eles associam-se a plantas e incrementam a absorção de fósforo, sendo importante estudar os efeitos da conversão de áreas nativas em pastagem ou cultivo sobre os FMA em áreas de Caatinga e de Mata Atlântica de Altitude, e avaliar a capacidade de plantas micorrizadas em absorver P de solos com crescente capacidade de fixação de P ou em situação de competição com biota heterotrófica pelo P do solo. No estudo realizado em áreas nativas de caatinga convertidas em pastagem ou cultivo, com declínio na fertilidade do solo e sinais de erosão, o objetivo foi investigar o efeito da mudança no uso destas áreas sobre a qualidade e a quantidade de propágulos de FMA. Amostras de solo tinham sido retiradas de 10 locais contendo áreas de caatinga adjacentes a áreas sob cultivo ou pastagem, nas profundidades 0-7,5 e 7,5-15 cm, ao longo de transeções com quatro pontos de amostragem (10 locais × 2 situações de uso × 2 profundidades × 4 pontos amostrais). A intensidade de uso e da erosão do solo foram usadas para agrupar as áreas nas categorias: Caatinga preservada (CaatP), Caatinga raleada (CaatR), Cultivada preservada (CultP) e Cultivada degradada (CultD). O solo foi analisado quanto à disponibilidade de P e a quantidade de esporos de FMA viáveis, usando cloreto de iodonitrotetrazólio (INT), e dos não viáveis. As raízes finas foram catadas, coloridas com azul de tripan e analisadas a colonização por FMA. O número de esporos viáveis e não viáveis nas áreas de estudo foi maior na profundidade 0-7,5 cm que na 7,5-15 cm. A densidade de esporos viáveis nas amostras variou de 1,4 a 6,8 esporos/50 g de solo e a de esporos não viáveis de 91 a 226 esporos/50 g de solo. A mudança intensidade do uso do solo teve pouco efeito sobre o número de esporos viáveis, enquanto o aumento da profundidade promoveu diminuição no número de esporos. A colonização dar raízes por FMA nas áreas cultivadas com concentrações de P-resina < 1 mg Kg-1 foram menores que em áreas com teores >1 mg Kg-1, na profundidade 0-7,5 cm, o que talvez indique uma concentração crítica de P no solo para viabilizar a simbiose. Para estudar o efeito da conversão de uma área de Mata Atlântica de Altitude em pastagem (Brachiaria decumbens Stapf) e em reflorestamento com sabiá (Mimosa caesalpiniifolia Benth) sobre a diversidade de espécies e os propágulos de FMA foram retiradas sete amostras de solo (pseudorepetições), da camada de 0-15 cm de profundidade, totalizando 21 amostras (3 locais com diferentes usos x 7 pontos amostrais). Foi coletado o folhedo que estava sobre a área onde seriam retiradas as amostras de solo. As raízes do solo e folhedo foram preparadas para verificação de colonização por FMA. Esporos de FMA foram extraídos do solo e contados os viáveis (corados por INT), os não viáveis e os mumificados. Nas três áreas foram encontradas 28 espécies de FMA, distribuídas nos gêneros Archaeospora (1), Acaulospora (8), Entrophospora (1), Glomus (14), Gigaspora (1) e Scutellospora (3). A área de pastagem teve 2 maior riqueza de espécies (22 espécies), seguida pela área de sabiá (14) e pela de mata (11). Archaeospora leptoticha, Glomus sp1, G. etunicatum, G. macrocarpum e G. microaggregatum ocorreram em todas as áreas. Nas áreas com mata e com sabiá as espécies Glomus invermaium e G. macrocarpum tiveram maior freqüência, enquanto na pastagem as espécies mais freqüentes foram Entrophospora colombiana, Glomus diaphanum e G. macrocarpum. Na área de mata teve uma espécie de FMA com ocorrência exclusiva, na de sabiá foram duas espécies e na de pastagem foram 11 espécies. As áreas de mata nativa e de reflorestamento com sabiá apresentaram infectividade micorrízica semelhantes, e a grande proporção de raízes colonizadas pareceu ser a fonte principal de propágulos nestes locais. Na área com pastagem a grande quantidade de esporos viáveis pode ser o fator mais importante para a manutenção da infectividade micorrízica. Foi estudado o efeito dos FMA no favorecimento da absorção de fósforo (P) por plantas em solos com capacidade crescente de fixação de P, e também na competição pelo P do solo entre plantas e a biota heterotrófica, ativada pela adição de fontes de carbono. Foram montados dois experimentos, com delineamento ao acaso, em vasos com dois compartimentos concêntricos, o compartimento interno contendo areia lavada e o externo solo marcado com o isótopo radioativo 32P. O compartimento interno dos vasos continha aberturas laterais, nas quais foram coladas telas de nylon: ou com malha 40 &#956;m, que permite a passagem de hifas e não a de raízes, ou malha com 1 mm, pela qual passam hifas e raízes. O arranjo fatorial do primeiro experimento foi de 3 solos (alta, média e baixa fixação de P) × 2 telas (40 &#956;m e 1 mm) × 4 repetições. No segundo experimento o arranjo foi de 2 solos (alta e baixa fixação de P) × 2 fontes de C (celulose e palha) × 2 telas (40 &#956;m e 1 mm) × 3 repetições. No compartimento interno foram colocados esporos de FMA e plântulas de braquiária. Os experimentos tiveram duração de cinco semanas. Avaliou-se a massa seca, o conteúdo de P e a atividade específica do P nas plantas. A massa seca e o conteúdo de P e a atividade específica diminuíram com o aumento da capacidade de fixação de P pelo solo. A variação na atividade específica sugere diferentes níveis de diluição isotópica em cada solo. A contribuição dos FMA para massa seca e conteúdo de P foi maior com o aumento da fixação de P pelo solo. A adição de fontes de carbono ao solo com baixa fixação de P produziu diminuição na massa seca e no conteúdo de P nas plantas. A celulose teve efeito mais depressivo que a palha. A variação na atividade específica indicou que o P disponível para as plantas foi de distintas origens no tratamento com palha e celulose. No solo de alta fixação, a adição de celulose produziu diminuição de massa seca, conteúdo de P e atividade específica, independentemente da malha. Os maiores valores de atividade específica encontrados nas plantas com acesso livre ao solo (malha 1 mm) podem se dever à exploração mais imediata do solo que as plantas com acesso restrito (40 &#956;m)

Com o objetivo de desenvolver a quantificação das hifas externas e da sua atividade aos 30, 60 e 90 dias após o plantio (DAP), foram conduzidos dois experimentos em casa de vegetação utilizando-se Zea Mays inoculado e não inoculado com Glomus etunicatume doses crescentes de fosforo (0, 25, 50 e 75 mg de P/kg de solo). O micélio extramatrical foi extraído do solo através da técnica da membrana de filtração e quantificado pela técnica da grade de filtração. A proporção de hifas ativas foi determinada pelo método de coloração enzimática por Iodonitrotetrazólio (INT). Tanto a técnica de extração quanto o método de coloração por INT não apresentaram resultados promissores quando utilizados em solos argilosos. As limitações da quantificação da atividade e do método de extração de hifas externas de fungos micorrízicos vesículo-arbusculares através da técnica da membrana de filtração e do método de coloração enzimático por INT são discutidas. Observou-se que aos 30 e 60 DAP houve um aumento do micélio externo total e uma atividade com a elevação das doses de P aplicadas ao solo / not available