Submitted by Claudia Rocha (claudia.rocha@udesc.br) on 2017-12-13T13:00:43Z No. of bitstreams: 1 PGEF17MA075.pdf: 2618024 bytes, checksum: d2a8781e299067e8fc5f0691bd03b8a5 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-12-13T13:00:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGEF17MA075.pdf: 2618024 bytes, checksum: d2a8781e299067e8fc5f0691bd03b8a5 (MD5) Previous issue date: 2017-02-17 / Capes / The objective of this study was to determine method to the rescue of vegetative material of adult plants of P. willdenovii and evaluate the spread of this material, via tissue culture. The work was conducted with 20 P. willdenovii matrices located in Urupema / SC (28°17'38 ''S, 49°55'54''W). In the vegetative rescue, the following techniques were tested: trunk annealing (100%), semianelation at 75% of the trunk circumference, semianelation at 50% trunk and the induction of shoots from pruned branches. The shoots were harvested at 90, 120, 150, 180, 210 and 240 days after application of the treatments. Sprouts were used in the in vitro culture technique. In the establishment of shoots, asepsis methods were tested: 15 and 20 minutes of contact with sodium hypochlorite (NaClO) (2% v v-1) and the presence / absence of the PPM® biocide (1,5mL L-1) In the culture medium. For in vitro multiplication, two culture media (MS and WPM) and BAP concentration (0, 2, 4 and 6 mg L-1) were tested. Also, the induction of calogenesis by foliar explant was tested in the treatments: position of contact of the foliar face with the culture medium (up and down) and the combination of the BAP and ANA phytoregulators in different concentrations (0 to 12 mg L-1). All vegetative material rescue techniques emitted new shoots, with emphasis on the pruned branches method, which presented the best results for sprouting percentage, number and length of shoots. In vitro culture, asepsis of explants with NaClO for 20 minutes and addition of PPM® in the medium resulted in lower rates of fungal (50%), bacterial (5%), oxidation (23%) and higher survival (76%) of the explants. In vitro multiplication, explants in MS medium had higher oxidation (48%) and lower survival (52%) when compared to WPM medium (26% and 74%, respectively). For the average number of shoots and leaves, the concentration of 3 mg L-1 BAP reached the highest technical efficiency (MET) (1.22 and 1.75 mg L-1, respectively). Foliar segments were not responsive in inducing calogenesis after 120 days of in vitro culture. In this way, it is indicated for the vegetative rescue of P. willdenovii the method of pruned branches. While for in vitro propagation, the use of NaClO (2% v v-1) for 20 minutes and the PPM® biocide (1.5 ml L-1) in the culture medium is recommended in the establishment phase and The use of WPM medium plus 3 mg L-1 of BAP in the multiplication phase. / O objetivo deste trabalho foi determinar método para o resgate de material vegetativo de plantas adultas de P. willdenovii e avaliar a propagação deste material, via cultura de tecidos. Foram utilizadas 20 árvores matrizes de P. willdenovii localizadas no município de Urupema/SC (28°17'38''S; 49°55'54''W). No resgate vegetativo, foram testadas as seguintes técnicas: anelamento do tronco, semianelamento em 75% da circunferência do tronco, semianelamento em 50% e galhos podados. As coletas das brotações foram realizadas aos 90, 120, 150, 180, 210 e 240 dias após a aplicação dos tratamentos. As brotações foram utilizadas na técnica de cultivo in vitro. No estabelecimento testaram-se métodos de assepsia: 15 e 20 minutos de contato com hipoclorito de sódio (NaClO) (2% v v-1) e a presença/ausência do biocida PPM® (1,5mL L-1) no meio de cultura. Para a multiplicação in vitro, foram testados meios de cultura (MS e WPM) e doses de BAP (0, 2, 4 e 6 mg L-1). Também, foi testada a indução de calogênese via explante foliar, nos tratamentos: posição de contato da face foliar com o meio de cultivo (abaxial e adaxial) e a combinação dos fitorreguladores BAP e ANA em diferentes concentrações (de 0 a 12 mg L-1). Todas as técnicas de resgate de material vegetativo emitiram novos brotos, com destaque para o método via galhos podados que apresentou os melhores resultados para porcentagem de brotação, número e comprimento de brotos. No cultivo in vitro, a assepsia dos explantes com NaClO por 20 minutos e a adição do PPM® no meio resultou em menores índices de contaminação fúngica (50%), bacteriana (5%), oxidação (23%) e maior sobrevivência (76%) dos explantes. Na multiplicação in vitro, os explantes em meio MS tiveram maior oxidação (48%) e menor sobrevivência (52%) quando comparado ao meio WPM (26% e 74%, respectivamente). Para o número médio de brotos e de folhas, a concentração de 3 mg L-1 BAP atingiu a máxima eficiência técnica (MET) (1,22 e 1,75 mg L-1, respectivamente). Os segmentos foliares não foram responsivos na indução de calogênese após 120 dias de cultivo in vitro. Desta forma, indica-se para o resgate vegetativo de P. willdenovii o método de galhos podados. Enquanto que, para a propagação in vitro, recomenda-se o uso de NaClO (2% v v-1) durante 20 minutos e do biocida PPM® (1,5 ml L-1) no meio de cultura na fase de estabelecimento e a utilização do meio WPM acrescido de 3 mg L-1 de BAP na fase de multiplicação

Submitted by Deyse Queiroz (deysequeirozz@hotmail.com) on 2018-06-13T12:15:00Z No. of bitstreams: 1 MARIA DO SOCORRO ROCHA - DISSERTAÇÃO PPGEA 2004..pdf: 12014866 bytes, checksum: e5b21eb998760e2ed7cd6bdeddf94a3e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-13T12:15:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MARIA DO SOCORRO ROCHA - DISSERTAÇÃO PPGEA 2004..pdf: 12014866 bytes, checksum: e5b21eb998760e2ed7cd6bdeddf94a3e (MD5) Previous issue date: 2004-11 / A conservação e manipulação dos recursos genéticos vegetais de espécies de valor económico são de fundamental importância para a conservação em banco de germoplasma. Este trabalho teve como objetivo; a) avaliar a crioconservação de sementes de algodão das cultivares BRS-Verde, BRS-200, BRS-187-8H e 6MMocó e b) estudar a indução ao superbrotamento dos nós cotiledonares de plântulas do algodoeiro cultivados in vitro, para as mesmas cultivares supracitadas. Neste trabalho propôs-se inicialmente determinar do teor de água limite para crioconservação (TALC). Para esta determinação as sementes foram imersas ao nitrogénio líquido (-196°C) por cinco dias e após esse período elas forma descongelados e submetidas ao teste de germinação e vigor. Utilizou as armazenagem das sementes a 23°C por 5 dias como testemunha. O delineamento estatístico empregado foi o inteiramente casualizado com arranjo fatorial representado por (quatro cultivares x duas temperaturas x seis teor de água). Na crioconservação utilizou-se um lote de sementes com teor de água limite previamente determinado para as diferentes cultivares, a partir do qual se procedeu ao seu armazenamento em nitrogénio líquido (-196°C) e no vapor do nitrogénio (-170°C), durante 5, 30, 60 e 90 dias. O delineamento experimental utilizado nesta etapa foi o inteiramente casualizado em parcela sub-dividida no tempo, sendo a parcela representas pela interação (quatro cultivares x duas temperaturas de armazenamento) e a sub-parcela pelos quatro períodos de armazenamento. Em cada período de armazenamento, as sementes foram submetidas a testes de germinação e vigor. De acordo com os resultados obtidos póde-se concluir que: a) estudar a determinação do teor de água limite para crioconservação-TALC, durante 5 dias, o teor de água limite para a crioconservação das cultivares BRS-Verde, BRS-200, 6M-Mocó e BRS-187-8H considerando-se a germinação dessas cultivares está entre 6 e 8% (b.u.) e considerando-se o vigor das sementes o TALC é de 6% (b.u.); b) sementes de algodoeiro, das diferentes cultivares podem ser crioconservados em banco de germoplasma nas duas temperaturas, ou seja no vapor a -170°C ou imersa ao nitrogénio líquido a -196°C; c) a crioconservação aumenta o percentual de germinação e vigor das sementes de algodão, devido a essa temperatura a promover uma quebra de dormência pela ação do frio. No Capítulo II propôs-se a indução de superbrotamento, empregando como explante dos nós cotiledonares, plântulas cultivadas in vitro durante 25 dias. Os explantes foram cultivados em tubos de ensaio contendo o meio básico MS, suplementado com citocininas BAP, KIN e TDZ, isolados ou associados em diferentes concentrações. Os tubos de ensaio contendo os explantes foram mantidos em sala de crescimento regulada à temperatura de 28°C, fotoperíodo de 16/8h (claro/escuro) e intensidade luminosa de 50umol.m2.s1 , durante 40 dias os quais foram avaliados por meio do delineamento inteiramente casualizado, com arranjo fatorial de 4x17 (quatro cultivares x dezessete meios), sendo então avaliadas quanto ao número de brotos emitidos e altura de brotos. De acordo com os resultados obtidos póde-se concluir que: O meio MS suplementados com BAP (2,0 mg.L"1) isolado ou associado com KIN (1,0mg.L"1), promoveu uma maior capacidade de regeneração e altura de brotos; b) o meio MS suplementados com BAP (2,5 mg.L"1) estimulou maior altura de brotos;c)o meio MS suplementados com TDZ (1,0 mg.L"1 , 0,50 mg.L"1e 0,25 mg.L"1) afetou a capacidade de regeneração de brotos, obteve formação de calos. / A conservação e manipulação dos recursos genéticos vegetais de espécies de valor económico, são de fundamental importância para a conservação em banco de germoplasma. Este trabalho teve como objetivo: a) avaliar a crioconservação de sementes de algodão das cultivares BRS-Verde, BRS-200- Marrom, BRS-187-8H-Branco e 6 M-Mocó-Branco e b) estudar a indução ao superbrotamento dos nós cotiledonares de plântulas do algodoeiro cultivados in vitro, para as mesmas cultivares supracitadas. Inicialmente, determina-se do teor de água limite para crioconservação (TALC). Para esta determinação, as sementes foram imersas no nitrogénio líquido (-196°C) durante cinco dias e após este período elas foram descongelados e submetidas ao teste de germinação e vigor. Utilizou-se a armazenagem das sementes a 23°C por 5 dias, como testemunha. O delineamento estatístico empregado foi o inteiramente casualizado com arranjo fatorial representado por (quatro cultivares x duas temperaturas x seis teores de água). Na crioconservação utilizou-se um lote de sementes com teor de água limite previamente determinado para as diferentes cultivares, a partir do qual se procedeu ao seu armazenamento em nitrogénio líquido (-196°C) e no vapor do nitrogénio (-170°C), durante 5, 30, 60 e 90 dias. O delineamento experimental usado nesta etapa foi o inteiramente casualizado, em parcela subdividida no tempo, sendo a parcela representada pela interação (quatro cultivares x duas temperaturas de armazenamento) e a subparcela pelos quatro períodos de armazenamento. Em cada período de armazenamento as sementes foram submetidas a testes de germinação e vigor. De acordo com os resultados obtidos concluiu-se que: a) O teor de água limite para crioconservação-TALC, durante 5 dias, para a crioconservação das cultivares BRS-Verde, BRS-200-Marrom, 6MMocó- Branco e BRS-187-8H-Branco, considerando-se a germinação dessas cultivares está entre 6 e 8% (b.u.) e, quanto os vigor das sementes, o TALC foi de 6% (b.u.); b) sementes de algodoeiro das diferentes cultivares podem ser crioconservadas em banco de germoplasma, nas duas temperaturas, ou seja, no vapor a -170°C ou imersa ao nitrogénio líquido a -196°C; c) a crioconservação aumenta o percentual de germinação e vigor das sementes de algodão, em virtude dessa temperatura promover quebra de dormência, pela ação do frio. No Capítulo II propôs-se a indução de superbrotamento, empregando-se como explante nós cotiledonares de plântulas cultivadas in vitro durante 25 dias. Os explantes foram inoculados em tubos de ensaio contendo o meio básico MS, suplementado com citocininas BAP, KIN e TDZ, isolados ou associados a diferentes concentrações. Os tubos de ensaio contendo os explantes foram mantidos em sala de crescimento regulada à temperatura de 28°C, fotoperíodo de 16/8h (claro/escuro) e intensidade luminosa de 50umol.m2.s1 , durante 40 dias, os quais foram avaliados por meio do delineamento inteiramente casualizado, com arranjo fatorial de 4x17 (quatro cultivares x dezessete meios), sendo então avaliadas quanto ao número de brotos emitidos e altura do comprimento de brotos. De acordo com os resultados obtidos pôde-se concluir que: a) o meio MS suplementado com BAP (2,0mg.L~1) isolado ou associado a KIN (1,0mg.L~1), promoveu maior capacidade de regeneração e altura de brotos; b) o meio MS suplementado com BAP(2,5mg.L"1 ) estimulou altura superior de brotos; c) o meio MS suplementado com TDZ (1,0mg.L~1, 0,50mg.L"1 e 0,25mg.L"1) afetou a capacidade de regeneração de brotos e a formação de calos.