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Aplicabilidade do método 1623 e do método de filtração em membranas para detecção de cistos de Giardia spp. e oocistos de Cryptosporidium spp. em amostras hídricas considerando diferentes faixas de turbidez, e estudo da etapa de purificação por separação imunomagnética : Applicability of method 1623 and membrane filtration method for detection of Giardia spp. cysts and Cryptosporidium spp. oocysts in water samples considering different levels of turbidity, and study of immunomagnetic separation phase / Applicability of method 1623 and membrane filtration method for detection of Giardia spp. cysts and Cryptosporidium spp. oocysts in water samples considering different levels of turbidity, and study of immunomagnetic separation phase

Pinto, Diego de Oliveira, 1987- 28 September 2018 (has links)
Orientador: Romeu Cantusio Neto / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-09-28T14:16:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pinto_DiegodeOliveira_M.pdf: 2983083 bytes, checksum: 203eb1379711790b56fd1c53f7740c0c (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: Os protozoários patogênicos Giardia spp. e Cryptosporidium spp. estão entre os principais contaminantes associados à veiculação hídrica e seu monitoramento em águas de abastecimento público é determinado pela Portaria n. 2.914/2011, do Ministério da Saúde do Brasil. Este trabalho foi dividido em duas partes. Na primeira, foi realizado um estudo da aplicabilidade do Método 1623 utilizando Filta-Max® (FMx) e Método de Filtração em Membranas (FM). Cistos de Giardia spp. e oocistos de Cryptosporidium spp. foram inoculados artificialmente em amostras de água bruta superficial proveniente do rio Atibaia, coletadas na cidade de Campinas/SP, Brasil, e agrupadas de acordo com faixas de turbidez. Cistos de Giardia spp. naturalmente presentes nas amostras foram detectados em todas as faixas de turbidez por ambos os métodos. O método de FM atendeu aos critérios de controle de qualidade analítica da USEPA em todas as faixas de turbidez. Não houve diferença estatística significativa entre os métodos de FMx e FM. Na segunda parte deste trabalho, foi feito um estudo da etapa de purificação por Separação Imunomagnética (IMS) no qual foi avaliado o desempenho dos procedimentos de dissociação: ácida e térmica; bem como investigado possíveis causas de perdas dos organismos-alvo durante execução desta etapa. A dissociação ácida apresentou maior média de eficiência de recuperação e precisão do que a dissociação térmica para cistos de Giardia spp.. Para oocistos de Cryptosporidium spp. não houve diferença estatística significativa. Após o procedimento de dissociação, tanto ácida quanto térmica, haviam cistos e oocistos aderidos às beads (micro-esferas magnéticas) que seriam descartadas de acordo com o protocolo padrão da IMS / Abstract: The pathogenic protozoa Giardia spp. and Cryptosporidium spp. are some the major waterborne contaminants and their monitoring in water supply is determined in Decree no. 2.914/2011, the Brazil¿s Ministry of Health. This study was divided in two parts. In the first, a study was conducted to evaluate the applicability of two methods for concentration of pathogenic protozoa Giardia spp. and Cryptosporidium spp. in water samples: Method 1623 using Filta-Max® (FMX) and Membrane Filtration (MF) Method. Giardia spp cysts and Cryptosporidium spp oocysts were artificially inoculated in samples of raw surface water from the Atibaia River, collected in Campinas/SP, Brazil, and grouped according to ranges of turbidity. Giardia spp. cysts naturally present in the samples were detected in all ranges of turbidity by both methods. The method of FM met the criteria for analytical quality control of USEPA in all ranges of turbidity. There was no statistically significant difference between the methods of FM and FMX. In the second part of this work, a study was made of the purification step by immunomagnetic separation (IMS) in which was evaluate the performance of the dissociation procedures: acid and heat, as well as investigating possible causes loss of target organisms during execution of this step. The acid dissociation showed higher mean recovery efficiency and accuracy than heat dissociation for Giardia spp.. For Cryptosporidium spp. difference was not statistically significant. After the dissociation procedure, both acid and heat, cysts and oocysts were still adhered to the beads (magnetic microspheres) that would be discarded, according to the standard protocol of IMS / Mestrado / Relações Antrópicas, Meio Ambiente e Parasitologia / Mestre em Biologia Animal

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