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Extração e caracterização química de polissacarídeos de basidiomicetos comestíveis de ocorrência na AmazôniaPessoa, Felipe Barbosa 08 August 2016 (has links)
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Previous issue date: 2016-08-08 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Besides being useful for human consumption, fungi are versatile organisms that degrade
organic matter, producing value added substance. Among the bioactive substances present in
these fungi, polysaccharides are the main products, which have a high value for chemical,
pharmaceutical and medical industries. Knowing that the Amazon presents the greatest
biodiversity of the planet and that in this forest there is still little information about the
species of native basidiomycetes, the objective of the study was the cultivation of edible
mushrooms Lentinus strigosus and Pleurotus ostreatus in regional wood residues as a
substrates, aiming the extraction and Chemical characterization of polysaccharides isolated
from the fruiting body of these mushrooms. For the cultivation, regional wood residues were
used, according to the following substrate formulation: 68% sawdust of Simaboura amara
(marupá) or Anacardium giganteum (cajuí), cereal meal mixture (30%) and calcium
carbonate (2 %), homogenized and humidified to 75%. The substrates were autoclaved,
inoculated and kept in a climatic chamber until complete colonization, and then transferred
to the production chamber. After the fruiting, the mushrooms were harvested, dehydrated
and analyzed for yield. They were grounded and successively subjected to cold and hot
water extractions for subsequent purification and characterization of polysaccharides. The
fractions obtained containing polysaccharides were purified by the process of freezing and
thawing, Fehling solution and dialysis membranes with 12-14 kDa exclusion limit. The
chemical structure of the polysaccharide was determined by an analysis of the
monosaccharide composition, NMR and methylation. Regarding to the production, the
results showed that the formulation containing cajuí allowed better results of biological
efficiency (EB 221,17 and 104,88%); Yield (220.23 g kg-1 and 72.5 g kg-1) for P. ostreatus
and L. strigosus, respectively. The organic matter loss (OML) was not significantly different
for the two types of substrates used. Three β-D-glucans were isolated from the hot extraction (IHW-fraction A, B and C), which contains the main chain composed of β-D-Glcp units
connection (1→ 3), and may be replaced by O-6 for β-Glcp terminals. Besides, these were
isolated homopolysaccharide (methylated galactan) of cold extraction. Thus, it is possible to
use regional waste timbers for the cultivation of native edible fungi in the Amazon region.
The glucans described in this study are similar to those that have biological effects reported
in scientific literature, as it is likely that they have a therapeutic potential. / Os fungos são organismos versáteis que degradam matéria orgânica, produzem substância de
valor agregado, além de serem úteis para a alimentação humana. Dentre as substâncias
bioativas presentes nos fungos, os polissacarídeos são os principais produtos que apresentam
elevado valor para a indústria química, farmacêutica e medicinal. Sabendo que a Amazônia
apresenta a maior biodiversidade do planeta e que nesta floresta existem poucas informações
sobre espécies nativas de basidiomicetos, são necessárias pesquisas sobre o petencial destes
fungos. Desta forma, o presente estudo teve como objetivo o cultivo dos cogumelos
comestíveis Lentinus strigosus e Pleurotus ostreatus em resíduos madeireiros regionais
como substratos, visando à extração e caracterização química dos polissacarídeos isolados
do corpo de frutificação destes cogumelos. Para o cultivo, foram utilizados resíduos
maderireiros regionais, conforme a seguinte formulação de substrato: 68% de serragem de
de Simaboura amara (marupá) ou Anacardium giganteum (cajuí), mistura de farelo de
cereais (30%) e carbonato de cálcio (2%), sendo os mesmos homogeneizados e umidificados
a 75%. Os substratos foram autoclavados, inoculados e mantidos em câmara climática até a
completa colonização, sendo em seguida, transferidos para câmara de produção. Após o
período de frutificação, os basidiomas foram colhidos, desidratados e analisados quanto à
produtividade. Posteriormente foram moídos e submetidos às extrações aquosas à frio e à
quente sucessivamente para purificação e caracterização dos polissacarídeos. As frações
obtidas contendo os polissacarídeos foram purificadas pelo processamento de
congelamento/degelo, solução de Fehling e diálises em membranas com limite de exclusão
de 12-14 kDa. A estrutura química dos polissacarídeos foi determinada através das análises
de composição monossacarídica, metilação e RMN. Em relação ao cultivo, os resultados
mostraram que a formulação contendo cajuí permitiu melhores resultados quanto à eficiência biológica (EB 221,17 e 104,88 %); rendimento (220,23 g kg-1 e 72,5g kg-1) para P.
ostreatus e L. strigosus, respectivamente. A perda de matéria orgânica (PMO) não diferiu
estatisticamente para os dois tipos de substratos utilizados. Três β-D-glucanas foram
isoladas das extrações à quente (fração IHW-A, B e C). Sua estrutura contém cadeia
principal formada por unidades β-D-Glcp com ligação (1→3), podendo ser substituída em
O-6 por terminais de β-Glcp. Além destas, foram isolados homopolissacarídeos (galactana
metilada) das extrações a frio. Sendo assim, foi possível utilizar resíduos de marupá e cajuí
para o cultivo de fungos comestíveis nativos da Amazôia. As moléculas descritas neste
estudo são semelhantes as que apresentam efeitos biológicos relatadas na literatura, sendo
provável que as mesmas tenham um potencial terapêutico.
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