Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-11-12T14:09:32Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Kellen Cristhina Inácio Sousa - 2012.pdf: 5012340 bytes, checksum: 5d359d0996e1d7af5f7a16ae553d8b85 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-11-12T14:26:47Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Kellen Cristhina Inácio Sousa - 2012.pdf: 5012340 bytes, checksum: 5d359d0996e1d7af5f7a16ae553d8b85 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-11-12T14:26:47Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Kellen Cristhina Inácio Sousa - 2012.pdf: 5012340 bytes, checksum: 5d359d0996e1d7af5f7a16ae553d8b85 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2012-06-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / In Brazil, 2500 to 3000 species of orchids have been reported to occur, of which 300 are found in the “cerrado” region. The orchids Cyrtopodium saintlegerianum (epiphyte) and Epidendrum nocturnum (rupicola) occur in areas anthropized of cerrado and cerrado rupestre, respectively. The orchids posses mycorrhizal association with rhizoctonia-like and endophytic fungi. The identification of these fungi can be done by microscopic and morphological characters. Root infecting fungi also are utilized for in vitro symbiotic germination of orchid seeds, aiming the conservation of plant species and fungi. The objective of the present investigation was isolation and morphological characterization of mycorrhizal and endophytic fungi originating from roots of C. saintlegerianum and E. nocturnum, as well as symbiotic in vitro seed germination. Three isolates of Epulorhiza sp. from each one of C. saintlegerianum, and E. nocturnum and two of Rhizoctonia sp. from E. nocturnum were obtained. Also, two isolates of Xylaria sp. were obtained from roots of C. saintlegerianum. There were, however, differences among isolates Epulorhiza sp. of C. saintlegerianum and of the E. nocturnum, in relation to morphological and enzymatic characters. The fungus was localized in root tissues of both species by optical and scanning electronic microscopes. The seed viability was tested by tetrazolium chloride and found 80.3 and 32.33% viable embryos of C. saintlegerianum and E. nocturnum, respectively. There was no in vitro symbiotic germination of E. nocturnum due to low seed viability. Two experiments of symbiotic germination of C. saintlegerianum seeds were conducted, both under photoperiods of 16/8 h (light/dark) at 26°C ± 2°C. The treatments were two isolates of Xylaria sp., three plant pathogens (Rhizoctonia solani of common beans and R. oryzae of rice ), and three mycorrhiza of C. saintlegerianum, two of Cyrtopodium vernum, and one ofE. nocturnum. Of three culture media tested, germination was obtained only in oat meal agar culture. The isolate En07 of Rhizoctonia sp. from E. nocturnum was found better for seed germination with 81.64 and 90.73% of germination of experiments 1 and 2, respectively. One non-specific isolate, two plant pathogenic isolates and one specific isolate were efficient for seed germination of C. saintlegerianum. On the other hand, for symbiotic in vitro seed germination of C. saintlegerianum, there was no specificity between this orchid and only one rhizoctonia-like fungus. These results showed that C. saintlegerianum can be propagated utilizing different root infecting fungi, which facilitates future programs of reintroduction and commercialization of species. / O Brasil possui entre 2500 e 3000 espécies de orquídeas, das quais cerca de 300 são encontradas em áreas de Cerrado. Cyrtopodium saintlegerianum (epífita) e Epidendrum nocturnum (rupícola) ocorrem em áreas antropizadas de Cerrado e Cerrado Rupestre, respectivamente. As orquídeas possuem associação micorrízica com fungos rizoctonioides, e fungos endofíticos também podem ser encontrados nessas plantas. Os fungos rizoctonioides são utilizados para a germinação simbiótica in vitro de sementes de orquídeas, tendo em vista a conservação das espécies vegetais e fúngicas. O presente trabalho objetivou o isolamento e a caracterização morfológica de fungos oriundos do sistema radicular de C. saintlegerianum e E. nocturnum, visando a germinação simbiótica in vitro de suas sementes. Foram obtidos três isolados de Epulorhiza sp. para C. saintlegerianum, e para E. nocturnum obteve-se três de Epulorhiza sp. e dois de Rhizoctonia sp. Das raízes de C. saintlegerianum também foram obtidos dois isolados de Xylaria sp. Houve diferença entre os isolados de Epulorhiza sp. oriundos de C. saintlegerianum e os originários de E. nocturnum quanto as características morfológicas e enzimáticas. Os fungos micorrízicos foram histolocalizados, por microscopia óptica e eletrônica de varredura, em raízes de ambas as espécies. A viabilidade de sementes foi realizada pelo teste do cloreto de tetrazólio e verificou-se 80,3 e 32,33% de embriões viáveis para C. saintlegerianum e para E. nocturnum, respectivamente. Não houve germinação simbiótica in vitro de E. nocturnum devido a baixa viabilidade das sementes. Para as sementes de C. saintlegerianum foram realizados dois experimentos de germinação simbiótica, ambos em fotoperíodo de 16/8 h (Luz/Escuro) a 26°C ± 2°C. Os tratamentos foram dois isolados de Xylaria sp., três fitopatogênicos (Rhizoctonia solani de feijão e R. oryzae de arroz), e três micorrízicos de C. saintlegerianum, dois de Cyrtopodium vernum Rchb.f. & Warm., e um de E. nocturnum. Foram testados três meios de cultivo, mas somente o meio agar aveia padrão proporcionou a germinação. Verificou-se que o isolado En07 de Rhizoctonia sp. oriundo de E. nocturnum foi o melhor para germinar as sementes com 81,64 e 90,73% de germinação nos experimentos 1 e 2, respectivamente. Observou-se que um isolado não específico, dois isolados fitopatogênicos e um específico foram eficientes em germinar as sementes de C. saintlegerianum. Portanto, para a germinação simbiótica in vitro de C. saintlegerianum não houve especificidade entre esta orquídea e um único fungo rizoctonioide. Estes resultados indicam que C. saintlegerianum pode ser propagada utilizando fungos rizoctonioides, o que facilita futuros programas de reintrodução e comercialização da espécie.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:51:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 01 - capa_abstract.pdf: 60769 bytes, checksum: 7bb9d45d4373809fdd703200fc0ce609 (MD5) Previous issue date: 2006-10-03 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / In nature, species of Orchidaceae are always associated with mycorrhizal fungi. However, diversity of fungi associated to the orchids is little studied. Fungus-plant specificity has been observed and its comprehension is very important to establish programs for the simbiotic propagation of orchids. The objective of this work was to study the diversity and specificity of Rhizoctonia-like fungi associated to four populations of Epidendrum secundum, growing at three localities in the Totem Deitado Mountain, at State Park of Serra do Brigadeiro, in Minas Gerais. Segments of healthy roots were collected from two populations growing at campo garminóide , near rocky outcrop, and another one growing at campo garminóide by a escrube area, localized at 1700 m above the sea level, and the last was growing at campo graminóide on a rocky outcrop, localized at 1580 m of altitude. Twenty six isolates, all belonging to the Epulorhiza, were obtained by transferring cortical root fragments to the isolation medium. In general, the colony aspect of the isolates, the morphology, and width of monilioid cells were different among isolates from different localities, but similar in the population. The multivariate analyses of morphological characteristics using Tocher optimization, UPGMA, and graphic dispersion by canonic variables, separated the 26 isolates in, respectively, six, two, and three groups, showing similarities among most of all isolates from population I, II, and IV, and, also, among isolates from population III, and M61, from population II. Epulorhiza spp., isolated from E. secundum, supported seed germination of this plant species, but efficiency to promote protocorm development varied even among the isolates that presented morphological similarities. Results from this work show that there is high diversity of mycorrhizal fungi in Epulorhiza associated to E. secundum in this region and confirm the high specificity of this orchid to this fungal genus. / Na natureza, as espécies da família Orchidaceae estão associadas a fungos micorrízicos, entretanto, a diversidade de fungos associados às orquídeas é ainda pouco conhecida. Especificidade nessa associação fungoplanta vem sendo observada, sendo sua compreensão fundamental para o desenvolvimento de programas para propagação simbiótica das orquídeas. O objetivo deste trabalho foi estudar a diversidade e a especificidade de fungos micorrízicos rizoctonióides associados a quatro populações de Epidendrum secundum crescendo em três locais de um campo de altitude localizado na sub-serra Totem Deitado, no Parque Estadual da Serra do Brigadeiro, em Minas Gerais. Raízes saudáveis foram coletadas de duas populações crescendo sobre campo graminóide próximo a afloramento rochoso e uma sobre campo graminóide próximo a escrube, em altitude aproximada de 1700 m, e a última em uma pequena mancha de campo graminóide sobre afloramento rochoso, em altitude aproximada de 1580 m. Vinte e seis isolados fúngicos, todos pertencentes ao gênero Epulorhiza, foram obtidos a partir da transferência asséptica de fragmentos do tecido cortical de raiz colonizada para o meio de isolamento. De modo geral, os aspectos da colônia dos isolados, a morfologia e a largura das células monilióides evidenciaram diferenças entre os fungos isolados de diferentes locais, mas semelhanças foram observadas entre aqueles isolados de um mesmo local. A análise de agrupamento utilizando as características morfométricas, pelas técnicas de otimização de Tocher, UPGMA e de dispersão gráfica pelas variáveis canônicas separaram os 26 isolados em, respectivamente, seis, dois e três grupos, evidenciando as semelhanças entre a maioria dos isolados da população I, II e IV, e também entre os isolados da população III e o isolado M61 da população II. Os fungos Epulorhiza spp., isolados de E. secundum, induzem a germinação das sementes desta planta, mas apresentam diferenças na eficiência em promover o desenvolvimento dos protocórmios, mesmo entre os fungos que apresentam grandes semelhanças morfológicas. Os resultados deste trabalho mostram existir uma grande diversidade de fungos micorrízicos do gênero Epulorhiza associados a E. secundum nesta região e confirmam a existência da especificidade entre esta espécie de orquídea e este gênero de fungo.

Submitted by Michele Mologni (mologni@unoeste.br) on 2018-07-27T17:21:00Z No. of bitstreams: 1 Joice Yuri Minamiguchi.pdf: 1305334 bytes, checksum: ce408a4b1cb0c85010e11bc39b0761d9 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-27T17:21:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Joice Yuri Minamiguchi.pdf: 1305334 bytes, checksum: ce408a4b1cb0c85010e11bc39b0761d9 (MD5) Previous issue date: 2017-12-19 / Orchid seeds do not have practically reserve of energy and are not able to absorb what exists, necessitating a symbiosis with mycorrhizal fungi for germination to occur. During the aclorophyll stage of embryo development, these are the dependent on the mycorrhizal association, because fungi provide simple sugars to the plant from digested pelotons. The objective of this work was to isolate mycorrhizal fungi of orchid in cultivated and wild plants, that could promote the germination and development of seedlings of different species. Roots of nine species of orchids were collected for the isolation by peloton, four of natural environment, three from in vitro culture that developed and grew in greenhouse orchid and two who were born spontaneously in the greenhouse orchid. This methodology promoted the isolation of nine anamorphic rhizoctonioid from two species from a natural environment, Prescotia sp and Oeceoclades maculata and of a spontaneous species in greenhouse orchid, Arundina bambusifolia. In pots of three species of orchids, Vanda sp., Cattleya tigrina and Cattleya walkeriana, were placed baiting containing seeds of the same. This methodology obtainedthe isolation of eight anamorphic rhizoctonioid fung from Cattleya tigrina and Cattleya walkeriana. Were made the quantitative and qualitative morphological characterizations of the 17 isolates obtained by the two methodologies, and these characteristics were used for the formation of groups by the grouping method UPGMA. This method together with the morphological characteristics made it possible to classify four genera of mycorrhiza, Epulorhiza, Ceratorhiza, Moniliopsis and Rhizoctonia-like. The isolates were separated into 7 different groups, and one isolate from each group was used for the symbiotic germination of six species of orchids, Cattleya brevicaulis, Cattleya tigrina, Cattleya walkeriana, Cattleya labiata, Dendrobium signatum and Encyclia cordigera. Posteriorly confirmation of the mycorrhizal association was made, of protocorm resulting from symbiotic germination. Ninety days after seeding, seedlings of the six species that germinated were transferred to flasks, and 180 days after seeding were evaluated growth and dry mass variables. The methodology of isolation by peloton promoted the isolation of mycorrhiza from plants of natural environment and from a spontaneous in greenhouse orchid, the baiting methodology was able to promote the isolation of mycorrhiza from plants that were born and developed in a controlled environment. Of the seven inoculum, six were efficient to promote the germination of the six species tested, but only five inoculum presented growth of seedlings. One inoculum is no specific, presenting better results, improving seedling growth in five of the evaluated species. / Sementes de orquídea praticamente não possuem reserva de energia e não são capazes de absorver as que possuem, necessitando de uma simbiose com fungos micorrízicos para que ocorra a germinação. Durante a fase aclorofilada do desenvolvimento do embrião, estes são dependentes da associação micorrízica, pois os fungos fornecem açúcares simples oriundos de pelotons digeridos pela planta. O objetivo deste trabalho foi isolar fungos micorrízicos de orquídeas cultivadas e silvestres, que pudessem promover a germinação e o desenvolvimento de plântulas de diferentes espécies. Raízes de nove espécies de orquídeas foram coletadas para o isolamento por peloton, quatro de ambiente natural, três oriundas de cultivo in vitro aclimatizadas e crescidas em um orquidário e de duas que nasceram espontaneamente no orquidário. Esta metodologia obteve o isolamento de nove fungos rizoctonióides anamorfos de duas espécies oriundas de ambiente natural, Prescotia sp e Oeceoclades maculata e de uma espécie espontânea no orquidário, Arundina bambusifolia. Nos vasos de três espécies Vanda sp., Cattleya tigrina e Cattleya walkeriana, foram colocados pacotes de isca contendo sementes das mesmas. Esta metodologia obteve o isolamento de oito fungos rizoctonióides anamorfos de Cattleya tigrina e Cattleya walkeriana. Foram feitas as caracterizações morfológicas quantitativas e qualitativas dos 17 isolados obtidos pelas duas metodologias, e essas características foram usadas para a formação de grupos pelo método de agrupamento UPGMA. Esse método juntamente com as características morfológicas possibilitou a classificação de quatro gêneros de micorrizas, Epulorhiza, Ceratorhiza, Moniliopsis e Rhizoctonia-like. Os isolados foram separados em sete grupos diferentes, e um isolado de cada grupo foi utilizado para a germinação simbiótica de seis espécies de orquídeas, Cattleya brevicaulis, Cattleya tigrina, Cattleya walkeriana, Cattleya labiata, Dendrobium signatum e Encyclia cordigera. Posteriormente foi feita a confirmação da associação micorrízica, dos protocórmios resultantes da germinação simbiótica. Noventa dias após a semeadura, plântulas das seis espécies que germinaram foram transferidas para frascos, e 180 dias após a semeadura foram avaliadas variáveis de crescimento e de massa seca. A metodologia de isolamento por peloton promoveu o isolamento de micorrizas de plantas de ambiente natural e de uma espontânea em orquidário. A metodologia por isca foi capaz de promover o isolamento de micorrizas de plantas que nasceram e se desenvolveram em ambiente controlado. Dos sete inóculos, seis foram eficientes para promover a germinação de sementes das seis espécies testadas, mas somente cinco inóculos exibiram crescimento de plântulas. Um inóculo demonstrou ser não específico, apresentando melhor resultado melhorando o crescimento de plântulas em cinco das espécies avaliadas.