Atualmente há um grande interesse em estudos voltados para sistema de tratamento de esgoto sanitário. Isso se deve principalmente pela presença de microrganismos e substâncias que podem interferir na saúde humana e ambiental. Dentre os microrganismos patogênicos responsáveis por transmissão de doenças estão os protozoários Giardia spp. e Cryptosporidium spp. No que se refere às substâncias nocivas à saúde humana e ambiental podem ser citados os desreguladores endócrinos que agem sobre o sistema endócrino de homens e animais causando efeitos adversos. Baseado na importância destes estudos, o presente trabalho teve por objetivo avaliar a eficiência de remoção de protozoários patogênicos - Giardia spp. e Cryptosporidium spp. e da atividade de estrogenicidade em processos de tratamento de esgoto sanitário constituídos por reator UASB, sistema de lodos ativados e filtro de areia. Também foram avaliados os padrões de qualidade dos efluentes do reator UASB e sistema de lodos ativados utilizando sulfato de alumínio e cloreto férrico. A combinação dos processos biológicos sequenciais apresentou robustez em termos de remoção de matéria orgânica, microrganismos indicadores e (oo)cistos. A desinfecção com cloro mostrou-se eficiente em inativar os microrganismos indicadores: coliformes totais e Escherichia coli. A atividade estrogênica, avaliada pelo teste YES, foi maior no efluente do lodo ativado e do filtro de areia devido à conjugação dos compostos estrogênicos no esgoto bruto. Detectou-se toxicidade à levedura utilizada no teste YES (Saccharomyces cerevisae), principalmente nas menores diluições, a qual interferiu na expressão da estrogenicidade impossibilitando o cálculo em termos de concentração equivalente de 17β-estradiol. / Currently there is great interest in studies related to the wastewater treatment system. This is mainly for the present of microorganisms and substances that can interfere with human and environmental health. Among the pathogens responsible for diDEse transmission are protozoa Giardia spp. and Cryptosporidium spp. With regard to substances harmful to human and environmental health can cite endocrine disrupters that act on the endocrine system of humans and animals causing adverse effects. Based on the importance of these studies, the present study aimed to evaluate the efficiency of removal of pathogenic protozoa - Giardia spp. and Cryptosporidium spp. - Activity and estrogenicity in processes of wastewater treatment consisting of UASB reactor, activated sludge system and sand filter. We also evaluated the quality standards of the effluent of the UASB reactor and activated sludge system using aluminum sulfate and ferric chloride. The combination of hardiness sequential biological processes presented in terms of removal of organic matter, microorganisms and indicators (oo) cysts. The chlorine disinfection proved effective in inactivating microorganisms indicators: total coliforms e Escherichia coli. The estrogenic activity, assessed by the YES assay, was higher in the effluent of the activated sludge and sand filter due to a combination of estrogenic compounds in raw sewage. Was detected toxicity to the yeast used in the YES assay (Saccharomyces cerevisiae), mainly in the lower dilutions, which interfered with the expression of estrogenicity it impossible to calculate in terms of an equivalent concentration of 17β-estradiol.

In mice infected with 10$ sp4$ Giardia muris cysts, a peak lymphocyte proliferation in the spleen and Peyer's patches in response to Giardia extract occurred during the elimination and latent phases, respectively. This shows that the Peyer's patch cells are more responsive than the spleen to Giardia infection. Th2-type cytokines produced by Peyer's patch cells may play a protective role during the latent and acute phases. Th1-type cytokines may contribute to this production during the elimination phase. Cytokine production in response to Giardia extract in vitro was observed in mice immunized with this extract, but not in control mice. Therefore, Giardia antigen can induce cytokine production in vitro in a specific manner.

Copies of author's previously published articles inserted. / Includes bibliographies. / iii, 277, [81] leaves : ill. ; 30 cm. / Title page, contents and abstract only. The complete thesis in print form is available from the University Library. / The aim of this research is to investigate the phylogeny of isolates of the intestinal protozoan parasite Giardia intestinalis using molecular systematic techniques. Most of the isolates used in this study are propagated by the infection of suckling mice. Isolates are characterised allozymically and their genetic relationships are inferred using clustering methods. Seven lineages of isolates are identified, five comprising animal-derived G. intestinalis, and two comprising human-and animal-derived G. intestinalis. / Thesis (Ph.D.)--University of Adelaide, Dept. of Microbiology and Immunology, 1997?

Thesis (M.S.)--University of Texas at El Paso, 2008. / Title from title screen. Vita. CD-ROM. Includes bibliographical references. Also available online.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2012-07-20T21:00:56Z No. of bitstreams: 1 Karla Kraziela Santana dos Anjos. Efeitos do Dietilditiocarbamato em Trofo.pdf: 3361074 bytes, checksum: e19c34444cdf9505da3479b6a62ee82a (MD5) / Made available in DSpace on 2012-07-20T21:00:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Karla Kraziela Santana dos Anjos. Efeitos do Dietilditiocarbamato em Trofo.pdf: 3361074 bytes, checksum: e19c34444cdf9505da3479b6a62ee82a (MD5) Previous issue date: 2008 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, Bahia, Brasil / O protozoário microaerófilo Giardia lamblia coloniza o trato intestinal de hospedeiros vertebrados, onde é exposto a diferentes concentrações de oxigênio. Apesar do metabolismo fermentativo, trofozoítos de Giardia consomem oxigênio e mecanismos de detoxificação são requeridos. Desprovido de glutationa, Giardia expressa altas concentrações de proteínas ricas em cisteína (CRP, também conhecidas como proteínas variantes de superfície ou VSP), como defesa antioxidante. Este mecanismo envolve ciclagem redox para a manutenção de um ambiente intracelular reduzido e proteção contra o estresse oxidativo. Neste contexto, substâncias que interfiram na resposta antioxidante deste protozoário podem compreender uma poderosa estratégia quimioterápica contra a giardíase. Neste estudo, nós analisamos os efeitos do dietilditiocarbamato (DETC), um inibidor de superóxido dismutase (SOD), na proliferação do parasito, expressão de tióis totais, lipoperoxidação, produção de radicais livres e arquitetura celular. DETC inibiu a proliferação celular em níveis semelhantes ao metronidazol e induziu a peroxidação de membranas neste parasito, possivelmente pelo aumento de espécies reativas. Alterações ultraestruturais também foram observadas neste protozoário. Células tratadas com DETC apresentaram alto grau de extração citoplasmática, além de estruturas indicativas de autofagia. As vesículas periféricas também se encontravam maiores, sugerindo confluência. Estes efeitos são independentes de SOD, já que Giardia não apresenta esta enzima. Detecção de grupos tiol com a sonda fluorescente o-phthaldialdeído (OPA) foram significantemente moduladas negativamente pelo DETC. Estes dados nos indicam que DETC aumenta o estresse oxidativo em trofozoítos de Gardia lamblia pela reação com grupos tiol. / The microaerophilic protozoan Giardia lamblia inhabits the upper small intestine mucosa of vertebrate hosts, where it is exposed to different concentrations of oxygen. Despite the fermentative metabolism, Giardia trophozoites consume O2 and produce oxygen free radicals and therefore mechanism for detoxification are required. Devoid of glutathione, Giardia express high concentrations of cystein-rich proteins (CRP, also known as variable surface protein or VSP), as an antioxidant defense. This mechanism involves redox cycling for maintenance of a reduced intracellular environment and protection from oxidative stress. In this regard, substances that interfere in the antioxidant response of this protozoan could comprise a powerful chemotherapeutic strategy for Giardia lamblia infection. Here, we analyzed the effects of DETC, a superoxide dismutase (SOD) inhibitor, on parasite proliferation, thiol expression, lipid peroxidation, free radicals detection and cell architecture. DETC inhibited parasite proliferation at levels similar to metronidazole and induced peroxidation of membrane, possibly by the increase of reactive species.Ultrastructural alteration were also observed. Since this protozoan is devoid of SOD, here present data indicate SOD-independ DETC effects. Thiol groups detection with the fluorescent probe o-phthaldialdehyde (OPA). Cells treated with DETC displayed washed out cytoplasm and structures indicative of autophagy. The peripheral vesicles also had an increased volume, presumably caused by homophilic fusion. Taken together these data indicate that DETC enhance the oxidative stress in Giardia trophozoites by reacting with thiol groups.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2015-04-10T17:17:19Z No. of bitstreams: 1 Tayane Gonçalves Fernandes Efeito....pdf: 3094368 bytes, checksum: 87dc6aa455511d7e1892b6398cc286a4 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2015-04-10T17:17:27Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tayane Gonçalves Fernandes Efeito....pdf: 3094368 bytes, checksum: 87dc6aa455511d7e1892b6398cc286a4 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-10T17:17:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tayane Gonçalves Fernandes Efeito....pdf: 3094368 bytes, checksum: 87dc6aa455511d7e1892b6398cc286a4 (MD5) Previous issue date: 2014 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / A giardíase é uma doença causada pelo protozoário flagelado Giardia lamblia, e sua sintomatologia é caracterizada pela eliminação de fezes esteatorréicas, dores abdominais e náuseas. Segundo o CDC estima-se que há cerca 1,2 milhões de casos por ano de giardíase, acometendo principalmente crianças em idade escolar. Atualmente, o tratamento da giardíase é realizado principalmente pelo uso do fármaco da família dos 5-nitromidazóis, metronidazol (Flagyl®), secnidazol e tinidazol em particular. Estes são confrontados em casos de resistência clínica causada pelo frequente uso inadequado do medicamento e/ou abandono do tratamento. Além disso, o metronidazol pode apresentar efeito carcinogênico em longo prazo em humanos. Desta forma, novos estudos com análogos e/ou inibidores de poliaminas podem levar à elucidação dos mecanismos de ação envolvidos, favorecendo o estabelecimento de novos regimes terapêuticos mais seguros e eficazes. Em nosso trabalho, foram testadas as substâncias ciclohexilamina (CHA) e o metronidazol que são produtos sintéticos, com o objetivo de avaliar os seus efeitos na proliferação celular, caracterização dos moduladores do metabolismo de poliaminas, avaliação nas mudanças no potencial redox e elucidação de seus possíveis mecanismos de ação nos trofozoítos de Giardia lamblia. Foi realizada uma avaliação da proliferação celular na presença de CHA para trofozoítos de Giardia lamblia, onde observamos que a substância demonstrou ter ação siginficativa apresentando um efeito dosedependente. Observamos que os trofozoítos de G. lamblia apresentam uma inibição significativa do crescimento em presença de concentrações milimolares do CHA, cujo IC50 em 72 horas foi de 1,646 mM. Ao avaliar a produção de lipoperóxidos nos trofozoítos foi observado o possível papel do CHA como promotor de estresse oxidativo neste parasito. Ao realizar microscopia eletrônica de varredura (MEV) os trofozoítos apresentaram morfologias completamente irregulares em diferentes concentrações da CHA, com internalização do disco adesivo, sendo corroborado com os resultados da microscopia eletrônica de transmissão (MET) que mostram o processo de encistamento seguido de necrose celular. Esses resultados indicam que a CHA é possível candidata para o uso terapêutico contra a giardíase. / Giardiasis is a disease caused by the flagellate protozoan Giardia lamblia, and its symptomatology is characterized by steatorrhea, abdominal pain and nausea. According to the CDC, an estimate number of 1.2 million cases of giardiasis happen every year, affecting especially schoolchildren.Nowadays, giardiasis treatment is based on drugs from the 5-nitroimidazole family, particularly metronidazole (Flagyl), secnidazole and tinidazole. Those drugs are indiscriminately used by the population, and it's not uncommon to find them causing clinical resistance due to inappropriate utilization and/or tratment abandon. Besides that, metronidazole can present longterm carcinogenic effect in humans. Thus, new studies with analogs and/or polyamines inhibitors can lead to the clarification of the drugs action mechanis, favouring the establishment of new, safer and more efficient therapeutic regimens.Our work tested cyclohexylamine (CHA) and metronidazole, wich are synthetic products, in order to evaluate their effects on cell proliferation and on changes in redox potential, characterize polyamines metabolism modulator and describe their possible action mechanisms on Giardia lamblia trophozoites. We evaluated Giardia lamblia trophozoites cell proliferation in the presence of CHA; it was observe that the substance shows significant action, presenting dose-dependent effect. We also observed that G. lamblia trophozoites presented significant growth inhibition when exposed to millimolar concentrations of CHA - its IC50 in 72 hours was 1,646mM. When assessed the lipoperoxides production in trophozoites, we observed a possible role of CHA as an oxidative stress promoter in the parasite.Under Scanning Electron Microscopy, trophozoites showed completely irregular morphologies in different CHA concentrations, with internalization of the adhesive disc; this results are corroborated by the Transmission Electron Microscopy results, wich showed the process of encystment followed by cell necrosis. This makes CHA a possible candidate for therapeutic use against giardiasis.

Atualmente há um grande interesse em estudos voltados para sistema de tratamento de esgoto sanitário. Isso se deve principalmente pela presença de microrganismos e substâncias que podem interferir na saúde humana e ambiental. Dentre os microrganismos patogênicos responsáveis por transmissão de doenças estão os protozoários Giardia spp. e Cryptosporidium spp. No que se refere às substâncias nocivas à saúde humana e ambiental podem ser citados os desreguladores endócrinos que agem sobre o sistema endócrino de homens e animais causando efeitos adversos. Baseado na importância destes estudos, o presente trabalho teve por objetivo avaliar a eficiência de remoção de protozoários patogênicos - Giardia spp. e Cryptosporidium spp. e da atividade de estrogenicidade em processos de tratamento de esgoto sanitário constituídos por reator UASB, sistema de lodos ativados e filtro de areia. Também foram avaliados os padrões de qualidade dos efluentes do reator UASB e sistema de lodos ativados utilizando sulfato de alumínio e cloreto férrico. A combinação dos processos biológicos sequenciais apresentou robustez em termos de remoção de matéria orgânica, microrganismos indicadores e (oo)cistos. A desinfecção com cloro mostrou-se eficiente em inativar os microrganismos indicadores: coliformes totais e Escherichia coli. A atividade estrogênica, avaliada pelo teste YES, foi maior no efluente do lodo ativado e do filtro de areia devido à conjugação dos compostos estrogênicos no esgoto bruto. Detectou-se toxicidade à levedura utilizada no teste YES (Saccharomyces cerevisae), principalmente nas menores diluições, a qual interferiu na expressão da estrogenicidade impossibilitando o cálculo em termos de concentração equivalente de 17β-estradiol. / Currently there is great interest in studies related to the wastewater treatment system. This is mainly for the present of microorganisms and substances that can interfere with human and environmental health. Among the pathogens responsible for diDEse transmission are protozoa Giardia spp. and Cryptosporidium spp. With regard to substances harmful to human and environmental health can cite endocrine disrupters that act on the endocrine system of humans and animals causing adverse effects. Based on the importance of these studies, the present study aimed to evaluate the efficiency of removal of pathogenic protozoa - Giardia spp. and Cryptosporidium spp. - Activity and estrogenicity in processes of wastewater treatment consisting of UASB reactor, activated sludge system and sand filter. We also evaluated the quality standards of the effluent of the UASB reactor and activated sludge system using aluminum sulfate and ferric chloride. The combination of hardiness sequential biological processes presented in terms of removal of organic matter, microorganisms and indicators (oo) cysts. The chlorine disinfection proved effective in inactivating microorganisms indicators: total coliforms e Escherichia coli. The estrogenic activity, assessed by the YES assay, was higher in the effluent of the activated sludge and sand filter due to a combination of estrogenic compounds in raw sewage. Was detected toxicity to the yeast used in the YES assay (Saccharomyces cerevisiae), mainly in the lower dilutions, which interfered with the expression of estrogenicity it impossible to calculate in terms of an equivalent concentration of 17β-estradiol.

Orientador: Regina Maura Bueno Franco / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-08T19:15:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Santos_LucianaUrbanodos_D.pdf: 2872201 bytes, checksum: 3d486b0bfc4357c133c090e92209db49 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: Entre muitas doenças de veiculação hídrica, a criptosporidiose e a giardiose são de particular interesse para a Saúde Pública, porque oocistos de Cryptosporidium spp e cistos de Giardia spp. podem persistir por longos períodos no ambiente, sendo que estes dois protozoários patogênicos têm sido implicados como a causa de muitos surtos epidêmicos de gastroenterites nos últimos 25 anos.Em muitos desses surtos, o esgoto doméstico foi incriminado como a fonte de contaminação do manancial; os variados métodos de tratamento de esgoto não removem totalmente agentes patogênicos, evidenciando a necessidade de desinfecçãodo esgoto tratado antes do seu lançamento no corpo hídrico. Uma forma de tratamento de esgoto amplamente utilizada é o processo por Iodos ativados, onde a degradação da matéria orgânica é realizada por bactérias aeróbicas.Em função da resistência de Cryptosporidium spp e Giardia spp. Ao processode desinfecção por cloração, a radiação por luz ultravioleta (UV) têm sidoavaliada como um processo alternativo. Para avaliar a eficiência de remoção de oocistose cistos pelo processo de Iodo ativado e de um reator de luz UV em inativaroocistos e cistos em uma Estação de Tratamento de Esgoto (ETE) da cidadede Campinas, 3 tipos de amostras foram selecionados para o estudo: I) afluente (n=53), iii) efluente desinfetado por luz UV (n=38) e, iii) efluente sem desinfecção por luz UV (n=53). As amostras de afluente foram concentradas por centrífugo-concentraçãoe as amostras de efluente (desinfetadas ou não por luz UV) foram processadas por filtração em membrana de éster de celulose) e, a visualizaçãodos protozoários, feita pela reação de imunofluorescência direta, com anticorposmonoclonais. A avaliação do processo de desinfecção por luz UV foi realizada com experimento de infectividade animal, inoculando-se 14/ cistos camundongos da linhagem BALB!c nude. Cistos de Giardia spp foram mais freqüentes e em maior densidade nos três tipos de amostras. Oocistos de Cryptosporidiumspp. foram observados somente em 2 amostras de afluente e em apenas uma amostra de efluente desinfetado por luz UV. O tratamento de esgoto pelo processo de Iodo ativado reduziu 98,9 % dos cistos e 99,7 % dos oocistos. A administração intragástrica de cistos de Giardia spp. desinfetados ou não por luz UV em camundongos, resultou na liberação de cistos de Giardia spp., nas fezes e trofozoítos foram observados nas lâminas confeccionadas por aposição do intestino. Estes resultados indicam que a desinfecção por luz UV não foi completamente eficiente na inativação dos cistos de Giardia spp, no caso da ETE estudada / Abstract: Among many water-borne diseases the cryptosporidiosis and giardiosis are of particular public health interest, because Cryptosporidium spp. oocysts and Giardia spp. cysts can persist for long periods in the environment, and both pathogenic protozoa have been implicated as the cause of many outbreaks of gastroenteritisin the last 25 years. In many of those outbreaks, the domestic sewer was incriminated as to source of contamination of the spring; they varied treatment sewage approaches do not remove entirely agent's pathogens, showing up the need of disinfection of the treated effluent before of their launching in the water body.A form of address of sewer broadly utilized is the trial by activated sludge whichway the degradation of the organic matter is carried out by aerobic bacteria and, in function of the resistance of Cryptosporidium spp and Giardia spp. to the chlorinedisinfection, the ultraviolet light (UV) has been evaluated like an alternative trial of disinfection. In order to evaluate the efficiency of cysts and oocysts removal by the activated sludge process, and by a UV reactor in inactivating cysts and oocystsin one Wastewater Treatment Plant (Wl/VTP)in Campinas, three sampling points were selected for study: i) influent (n=53),iii) treated effluent with UV disinfection (n=38) and iii) treated effluent without UV disinfection (n=53). The influent samples were concentrated by centrifugation and effluent samples (disinfectedwith UV light or not) were processed by cellulose esters membrane filtration, and protozoan visualization was analyzed by fluorescent monoclonal antibodytests. The investigation of disinfection potential by UV light was made with infectivityassay. Each mice of linage BALB/c nude were intragastrically inoculated a mean dosage 14 cysts. Giardia spp cysts prevailed with higher density in the three different sample types. Cryptosporidium spp. oocysts were observed in only 2 samples of influent and in just one sample of treated sewage with UV disinfection.The treatment by the activated sludge process promoted a reduction of 98.9% of cysts and 99.7 % of oocysts. Gastric intubation of Giardia spp. Cysts disinfected ar not by UV light to mice resulted in cysts released in feces and trophozoiteswere also observed toa in intestinal scrapings. The findings of this study indicate that disinfection by UV light was not completely efficient regarding the inactivationof Giardia spp cysts in the case of the / Doutorado / Doutor em Parasitologia

Orientador: Regina Maura Bueno Franco / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-09T07:00:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Franca_RitaBorges_M.pdf: 4952448 bytes, checksum: 49473f55f00ae94646a96bb8c6672aac (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: O efluente hospitalar apresenta, dentre seus componentes, organismos como vírus, bactérias, protozoários e helmintos, que ocasionam muitas doenças com implicações em saúde pública. Cryptosporidium spp. e Giardia spp. são protozoários parasitos com grande importância por sua veiculação hídrica e cujas formas infectantes são resistentes aos processos rotineiramente usados no tratamento de água e esgoto. A transmissão destes pode ocorrer com a ingestão dos oocistos e cistos eventualmente presentes na água e nos alimentos contaminados, por contato direto (pessoa a pessoa), por contato indireto (objetos contaminados), pelo contato sexual ou pode ser zoonótica. Os métodos mais utilizados para desinfecção em estações de tratamento são a aeração, cloração e irradiação por UV, mas a cloração, não é suficiente para eliminar oocistos de Cryptosporidium spp e cistos de Giardia spp. A tecnologia eletroquímica oferece um meio de tratamento eficiente para a oxidação. da carga orgânica e microbiológica degradando-as ou mineralizando-as. O presente trabalho teve por objetivos: (1) verificar a ocorrência natural de Cryptosporidium spp. e Giardia spp. em amostras de esgoto do Hospital de Clínicas de Campinas, utilizando o método, de centrífugo-concentração seguido de clarificação com éter e visualização por, imunofluorescência direta, durante o período de um ano; (2) verificar a presença de ovos e larvas de helmintos no esgoto hospitalar empregando a técnica da NOM (Norma Oficial Mexicana) e (3) avaliar a taxa de destruição e o dano estrutural causado em cistos e oocistos após o tratamento fotoeletroquímico. No esgoto hospitalar bruto 4,1 % e 58,3 % das amostras foram positivas para Cryptosporidium spp. e Giardia spp., respectivamente, sendo observada a concentração média de 2,7 x 103 oocistos/L e 3,8 x 105 cistos/L. Foi possível verificar a elevada presença de helmintos, com 90 % das amostras apresentando positividade e concentração de 5,8 x 104 ovos/L e 4,0 x 105 larvas/L. Os protozoários e helmintos presentes em altas concentrações no esgoto hospitalar representam uma séria ameaça à saúde humana. Para os ensaios com o tratamento fotoeletroquímico, amostras de 1 L de esgoto hospitalar foram artificialmente contaminadas com cistos e oocistos e, posteriormente, submetidas a esse tratamento em um reator de bancada, com tempos de exposição de 0,30, 60 e 90 minutos. Por meio das técnicas de imunofluorescência direta, microscopia de contraste de fase e microscopia eletrônica de varredura verificou-se o dano estrutural causado pela ação dos radicais hidroxila nesses protozoários patogênicos e a destruição dos mesmos. O tratamento fotoeletroquímico mostrou uma redução na concentração dos protozoários nos tempos de 30 e 60 minutos e após 90 minutos, nenhum cisto ou oocisto foi detectado. A presença do cloreto no efluente bruto (média de 45 mg/l) desencadeou uma potencializaçáo da ação de mecanismo do reator, gerando efeito associado com a eletrólise, dos radicais hidroxila com a formação de hipoclorito / Abstract: Hospital effluent presents organisms as virus, bacteria, protozoan and helminthes, that cause many iIInesses with implications in public health. Cryptosporidium spp. and Giardia spp. are parasites with waterborne importance and its cysts and oocysts are resistant to the routinely processes used in water treatment. Their transmission can occur by oocysts and cysts ingestion in the water and contaminated foods, by direct contact (person the person), by indirect contact (contaminated objects), by sexual contact or zoonotic. The methods used for disinfection and treatment of sewage are aeration, chlorination and irradiation of ultraviolet light, but the treatment by chlorination is not enough to inactivate Cryptosporidium spp. oocyst and Giardia spp. cysts. The electrochemical technology offers an efficient treatment for the oxidation of organic and microbiological load, degrading and mineralizing them. The present work had as objectives: (1) to verify the natural occurrence of Cryptosporidium spp. and Giardia spp. in samples of Clinical Hospital sewage from Unicamp using centrifugal concentration followed by clarification with ether method and visualization by immunoflourescence assay, during one year, (2) to verify the presence of eggs and larvae of helminthes in the hospital sewage by NOM (Mexican Official Norm) technique and (3) to evaluate the destruction rate and the structural damage caused in cysts and oocysts by photoelectrochemical treatment. In raw hospital sewage 4.1 % and 58.3% of the samples were positive for Cryptosporidium spp. and Giardia spp., respectively, with concentrations of 2.7 x 103 oocysts/L and 3.8 x 105 cysts/L. The high presence of helminthes, 90% positive, with 5.8 x 104 eggs/L and 4.0 x 105 larvae/L and protozoan in hospital sewage represent a serious threat to human being health. For the assays with the photoelectrochemical treatment, samples of 1 L of hospital sewage artificially contaminated with cysts and oocysts ! were submitted to this treatment in a bench reactor, with times of exposition of 0, 30, 60 and 90 minutes. By the techniques of immunofluorescence assays, microscopy of phase contrast and scanning electronic microscopy, the structural damage and destruction were observed, caused by hydroxyl radicals in these pathogenic protozoans. The photoelectrochemical treatment showed a concentration reduction of the protozoan in 30 and 60 minutes, and after 90 minutes no cyst or oocysts were detected. The chloride present in raw effluent (average of 45 rng/L) unchained a potential action of the reactor mechanism, generating an effect associated with electrolysis of the hydroxyl radicals with production of hypochlorite / Mestrado / Parasitologia / Mestre em Parasitologia

Orientadores: José Euclides Stipp Paterniani, Cristiano de Mello Gallep / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Agrícola / Made available in DSpace on 2018-08-25T21:52:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Santos_SamuelRicardodos_D.pdf: 51294263 bytes, checksum: 55a8bb93513a62aa29e85fe9467412c6 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Giardia spp. e Cryptosporidium spp. são organismos desafiadores em monitoramento ambiental, podendo afetar os seres humanos e os animais com grandes impactos na saúde pública. Métodos para detectar esses organismos são descritos na literatura ¿ p.ex.: o método EPA 1623.1. No entanto, muitos não são capazes de detectar a viabilidade destes parasitos. Este trabalho avaliou o uso de marcadores fluorescentes combinados com a técnica de detecção de fluorescência retardada na detecção de viabilidade de Giardia intestinalis e Cryptosporidium parvum. Testes de incubação com 6-carboxifluorceina-succinimidil-diacetato-éster (CFDA-SE), C12-resazurina e SYTOX Green foram desenvolvidos com cistos de G. intestinalis e oocistos de C. parvum. Medidas de fluorescência retardada em câmara escura projetada e em dispositivo comercial foram aplicados em amostras purificadas e concentradas de G. intestinalis após incubação com CFDA-SE. Grupos contendo cistos vivos e infecciosos, mortos a 100° C, estressados com luz UV-C e envelhecidos foram analisados via fluorescência retardada e microscopia de epifluorescência em oito séries experimentais. Os resultados demonstram que (oo)cistos vivos e infecciosos não são marcados com os marcadores fluorescentes. Dupla marcação em (oo)cistos mortos é observada após 30 minutos de incubação com C12-resazurina 5,0 ?M e SYTOX Green 100 nM. (Oo)cistos mortos apresentam marcação verde após incubação de CFDA-SE 5,0 ?M. O envelhecimento da amostra foi acompanhado pelo aumento da taxa de marcação celular com cistos apresentando ~50% de marcação aos 30 dias de idade e ~100% aos 50 dias de idade. Testes com fluorescência retardada demonstram que cistos vivos e com idade inferior a 20 dias apresentam intensidades superiores aos cistos mortos e estressados após excitação com 365 nm. A excitação com 365 nm apresentou correlação R2 > 95% após análise de cinética de decaimento com modelo exponencial de segunda ordem. Os dados indicam que o decaimento da fluorescência retardada é acompanhado por duas componentes k1 e k2 onde k2 = 5?k1, estando estas conectadas com as condições fisiológicas da Giardia. O procedimento pode ser efetuado em 10 passos laboratoriais em aproximadamente 60 minutos de análise. A fluorescência retardada apresenta futuro promissor na análise de viabilidade de parasitos em amostras purificadas / Abstract: Giardia spp. and Cryptosporidium spp. are challenging and important organisms in modern environmental monitoring. These protozoa can affect humans and animals seriously, as reflection of sanitation problems in water quality control, with huge impact over economics and public health. Methods to detect such organisms are well described in literature - i.e. the EPA Method 1623.1 and AWWA 2012. But those ones are not able to detect infectivity. For that, the usual procedures include infection of animal model leading to at least one week for confirming infectivity. Some research with dye probes are being developed in order to provide useful, reliable and low cost procedures for detection of protozoa viability, i.e. enabling to distinguish dead samples cells from living ones. This work describes the screening tests for viability detection of protozoa samples - Giardia intestinalis and Cryptosporidium parvum - using carboxifluorcein-succinimidyl-diacetate-ester (CFDA-SE), C12-resazurin and SYTOX Green. Living, heat-killed and UV-C stressed (oo)cysts were analyzed using these chemical probes. G. intestinalis in concentrated samples and stained with CFDA-SE were analysed by fluorescence imaging as well as by delayed fluorescence (DF) after UV-A and white-light excitation. The weak DF profiles were detected in photon-counting setups, in 8 series of tests for intact, for heat-killed and for UV-C-stressed samples are shown. Results show that fresh, i.e. living and viable (oo)cysts cannot be stained by the mentioned neither with CFDA-SE nor C12-resazurin and SYTOX Green dyes. Double-marked (oo)cysts are observed when C12-resazurin and SYTOX Green are applied to old cysts as well to dead ones. Aged samples show increasing number of stained organisms: 30-day-old with ~50% while samples older than 50 days with almost 100% marked. Intact samples present stronger fluorescence and DF than the stressed ones, with good replication after UV-A excitation. After excitation @365nm samples present DF better fitted by double exponential decay kinetics, with the decay constant k2 five times higher than the k1 constant. The procedure can be easily reproduced in 10 steps, taking around 1h of laboratorial work with purified samples / Doutorado / Agua e Solo / Doutor em Engenharia Agrícola