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Obtenção e caracterização de linhagem de Escherichia coli adaptada ao glicerol bruto proveniente da síntese de biodiesel por engenharia evolutivaMiranda, Letícia Passos 31 March 2016 (has links)
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Previous issue date: 2016-03-31 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Biodiesel is a renewable fuel and its production generate raw glycerol (RG) as main byproduct.
The use of RG as carbon source in microorganism cultivations poses as an alternative to add
value and reduce the environmental impact of this residue. However, RG impurities (salts,
esters, alcohol and soap) can inhibit cell growth. Techniques that aims adapting microorganisms
to environments containing contaminants by adaptive evolution have been employed to
overcome inhibition problems. Adaptation strategies allows imposing a certain selective
pressure upon the population, favoring the appearance of mutants and selection of most
beneficial mutations, which will make the cell more suited to develop itself in a hostile
environment. This work employed Adaptive Evolution methodology to obtain an E. coli K12
strain adapted to RG concentrated by rotary evaporation (RGRota). Cultivations were carried
out in plates (E. coli – USP strain) incubated at 37 ºC, as well as shaken flasks (E. coli – UMinho
strain), kept at 37 ºC and 300 rpm, involving transfers to defined media gradually enriched with
RGRota. Obtained evolved strain as well as the wild-type strain E. coli – UMinho were
characterized in cultivations using 2 L, bench-scale bioreactor, equipped with monitoring and
control system. During shaken flask experiments, growth was followed by optical density (OD)
readings. In bioreactor cultures, samples were withdrawal to analyze cell concentration of the
suspension (OD and dry cell weight), concentrations of glycerol, ethanol and organic acids
(liquid chromatography), concentration of viable cells (colony forming units counting) and
morphology. Cultures characterization were carried out with E. coli – USP in shaken flasks, the
values of maximum specific growth rate (μmax) remained between 0.40 e 0.45 h-1 and they
showed little influence of strain or media composition. These results suggest that the selected
strain did not have differentiated characteristics from the wild-type strain. For E. coli – UMinho,
two adaptation strategies were evaluated: successive transfer during exponential growth phase
(OD = ~2.5) and during stationary growth phase (OD = ~10). In both cases cells evolved,
showing increased μmax values, with more homogeneous populations being observed for
adaptation conducted under the first strategy. After 26 days of adaptation, corresponding to 534
generations, an evolved strain, exhibiting μmax of 0.60 h-1 and capable of growing in medium
containing 29 g/L of glycerol from RGRota was selected by the methodology of successive
transfers in exponential phase. This growth rate was 27.6 % superior to that achieved by the
wild-type strain (0.47 h-1). Evolved and wild-type strains were cultivated in bioreactor,
containing defined medium prepared with GBRota to have 40 g/L of glycerol. The evolved one
maintained μmáx of 0.61 h-1. Acetate formation was observed, with yield of 0.19 g acetate/g
glycerol, which caused growth inhibition and limited biomass yield to 0.26 gbiomass/gglycerol.
When the wild-type strain was cultivated in bioreactor, exponential growth started after 24 h of
lag phase and it presented μmax of 0.28 h-1, biomass yield of 0,39 gbiomass/gglycerol and acetate
yield of 0.19 gacetate/gglycerol. The evolved strain obtained, capable of growing in the biodiesel
production residue, showed a μmax value similar to the best results reported in the literature for
E. coli adaptation in pure glycerol (0.7 h-1), what demonstrates the successful application of the
adaptive evolution methodology. Acetate accumulation can be reduced by Genetic Engineering
techniques to manipulate metabolic pathways and this will lead to development of an industrial
strain which can be employed as a platform of high value products using unrefined glycerol as
substrate. / O biodiesel é um combustível renovável cuja produção gera o glicerol bruto (GB) como
principal subproduto. O aproveitamento de GB como fonte de carbono em cultivos de
microrganismos se apresenta como uma alternativa para agregar valor e reduzir o impacto
ambiental deste resíduo. Contudo, as impurezas do GB (sais, ésteres, álcool e sabão) podem
inibir o crescimento das células. Técnicas que visam adaptar os microrganismos via evolução
adaptativa a ambientes contendo contaminantes vêm sendo empregadas para contornar
problemas de inibição. As estratégias de adaptação permitem impor uma certa pressão seletiva
sobre a população, favorecendo o aparecimento de mutantes e a seleção de mutações benéficas,
que tornam a célula mais apta a se desenvolver em um ambiente hostil. O trabalho empregou a
metodologia de Evolução Adaptativa para obter uma linhagem de E. coli K12 adaptada ao GB
concentrado por rotaevaporação (GBRota). Os cultivos foram realizados tanto em placas
(linhagem E. coli – USP) incubadas a 37ºC, como em frascos agitados (linhagem E. coli –
UMinho), mantidos a 37ºC e 300 rpm, envolvendo transferências para meios definidos
gradualmente enriquecidos com GBRota. A linhagem evoluída obtida assim como a linhagem
selvagem E. coli – UMinho foram caracterizadas em cultivos em biorreator de bancada de 2 L,
dotado de sistema de monitoramento e controle. Durante os experimentos em frascos agitados, o
crescimento foi acompanhado por leitura de densidade ótica (DO). Nos cultivos em biorreator,
amostras foram coletadas para análises de concentração celular da suspensão (DO e massa seca),
da concentração de glicerol, etanol e ácidos orgânicos (por cromatografia líquida), da concentração
de células viáveis (por contagem de unidades formadoras de colônia) e de morfologia. Para os
cultivos de caracterização da E. coli – USP realizados em frascos agitados, os valores da
velocidade máxima específica de crescimento (max) permaneceram entre 0,40 e 0,45 h-1, sendo
pouco influenciados pela linhagem ou pela composição dos meios, sugerindo que a metodologia
adotada para adaptação em placa não foi eficiente, já que a linhagem selecionada não possuía
características diferenciadas em relação à linhagem selvagem. Para a E. coli – UMinho foram
avaliadas duas estratégias de adaptação: transferências sucessivas na fase exponencial do
cultivo (DO = ~2,5) e na fase estacionária (DO = ~10). Em ambos os casos, as células
evoluíram, apresentando aumento nos valores de max., sendo que populações mais homogêneas
foram observadas na adaptação realizada pela primeira estratégia. Após 26 dias de adaptação,
correspondendo a 534 gerações, foi selecionada pela metodologia de transferências sucessivas
na fase exponencial, uma linhagem evoluída apresentando velocidade máxima específica de
0,60 h-1, resultado superior em 27,6% ao da linhagem selvagem (0,47h-1), capaz de crescer em
meio contendo ~30 g/L de glicerol proveniente do GBRota. As linhagens selvagem e evoluída
foram cultivadas em biorreator contendo meio preparado com GBRota na concentração de 40
g/L de glicerol. A linhagem evoluída manteve o μmáx de 0,61 h-1. Foi observada formação de
acetato, com rendimento de 0,19 gacetato/gglicerol, o que causou inibição do crescimento e limitou
o rendimento em biomassa a 0,26 gbiomassa/gglicerol. Enquanto que, para a linhagem selvagem o
cultivo em biorreator apresentou uma fase lag de 24 h, um max de 0,28 h-1, rendimento em
biomassa de 0,39 gacetato/gglicerol e rendimento em acetato 0,19 gacetato/gglicerol. A linhagem
evoluída obtida no presente trabalho, capaz de crescer no resíduo da produção de biodiesel,
apresenta max semelhante aos melhores resultados relatados na literatura para adaptação de E.
coli em glicerol puro (0,7 h-1), demonstrando o sucesso da aplicação da metodologia de
evolução adaptativa. O acúmulo de acetato pode ser amenizado utilizando técnicas de
Engenharia Genética para manipulação das vias metabólicas e permitindo o desenvolvimento
de uma linhagem industrial que poderá ser empregada como plataforma para obtenção de
produtos de alto valor agregado usando o glicerol não refinado como substrato.
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Produção biotecnológica de hidrogênio a partir do glicerol, bioproduto da produção do biodiesel / Biotechnological production of hydrogen from glycerol, bioproduct of biodiesel productionRodrigues, Caroline Varella [UNESP] 23 August 2016 (has links)
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Previous issue date: 2016-08-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A produção de biodiesel levou ao aumento do coproduto gerado desse processo, o glicerol bruto, que devido ao seu excesso, tem ganhado interesse nas transformações biotecnológicas visando à formação de produtos com valor agregado, sendo H2 de maior interesse. Este estudo avaliou o potencial da bioconversão do glicerol bruto, proveniente da produção de biodiesel a partir de óleo de cozinha usado, a hidrogênio por meio de consórcios de bactérias anaeróbias fermentativas. O glicerol bruto foi submetido ao pré-tratamento ácido (pH 3,0, HCl 1,0M) para converter sabões solúveis, considerados inibitórios ao crescimento microbiano, à ácidos graxos insolúveis. Consórcios bacterianos provenientes de estação de tratamento de água residual industrial (I) e sanitária (II e III), além da cultura pura Enterobacter sp. (inóculo IV) foram utilizados como inóculos e reativados em meio de cultivo, pH 7,0, a 37°C por 7 dias, sob condições anaeróbias. Para a obtenção de consórcios bacterianos produtores de H2, o pré-tratamento nos inóculos I, II e III foi realizado por meio do choque térmico (100°C por 15 minutos) com posterior enriquecimento por diluições seriais em meio PYG modificado e pH 5,5. Bacilos Gram positivos e formadores de endósporos foram predominantes. Os consórcios enriquecidos que apresentaram melhores desempenhos quanto à geração de H2, (I) e (II), foram utilizados para as realizações de ensaios, em batelada, em proporções crescentes de glicerol bruto pré-tratado. Nos ensaios de geração de H2, 20% do meio reacional era composto pelos inóculos (I) e (II), separadamente, em meio PYG modificado, mantidos a 37°C, pH inicial 5,5, headspace de N2 (100%) sob as seguintes condições: (a) 10 g DQO L-1 de glicerol bruto pré-tratado e 10 g DQO L-1 de glicerina; (b) 4 g DQO L-1 de glicerina e 16 g DQO L-1 de glicerol bruto pré-tratado e (c) 20 g DQO L-1 de glicerol bruto pré-tratado. Os rendimentos de H2 foram de 2,21, 1,63, 0,83, 1,05, 0,57 e 0,31 mol H2 mol-1 glicerol, respectivamente para Ensaio (I)-a (envolvendo o inóculo (I) sob a condição a), Ensaio (I)-b, Ensaio (I)-c, Ensaio (II)-a (envolvendo o inóculo (II) sob a condição a), Ensaio (II)-b e Ensaio (II)-c, com o consumo de glicerol de 26,9%, 45,8%, 56,2%, 31,7%, 59,0% e 91,0% para os respectivos ensaios citados. Foi detectado principalmente etanol em maior concentração em todos os ensaios envolvendo o inóculo (I), bem como para o inóculo (II) envolvendo os ensaios (II)-a e b, e ácido butírico em maior concentração no ensaio (II)-c. Por meio da análise de biologia molecular, a abundância relativa da ordem Clostridiales para o inóculo (I) e (II) foi, respectivamente, 91,81% e 94,70%, bem como de representantes da família Peptostreptococcaceae com alta abundância relativa para ambos os inóculos, de 85,29% e 70,26% para inóculo (I) e (II) respectivamente. Foi realizado um ensaio comparativo com cultura pura Enterobacter sp. com 20 g DQO L-1 de glicerol bruto pré-tratado e o rendimento obtido foi de 0,13 mol H2 mol-1 glicerol. Além disso, a cultura pura mostrou-se ser mais sensível nos ensaios de geração de hidrogênio devido à presença de contaminantes no glicerol bruto. Os resultados de geração de H2 envolvendo consórcios foram eficientes do ponto de vista em que foram atingidos rendimentos equivalentes, ou até mesmo superiores, aos reportados por outros trabalhos, mostrando que é possível obter hidrogênio por meio do glicerol bruto proveniente de transesterificação do óleo de cozinha usado. / The biodiesel production has led to increase co-product generated in this process, the crude glycerol, which due to its excess, has gained interest in the biotechnological transformations for aimed at formation of value-added products, considering H2 the most interest bioproduct. This study evaluated the potential of bioconversion of crude glycerol from the biodiesel production from used cooking oil, to generate hydrogen through consortia of fermentative anaerobic bacteria. The crude glycerol has been subjected to the acid pretreatment (pH 3.0, 1.0M HCl) to convert soluble soaps, considered inhibitory to microbial growth, to insoluble fatty acids. Consortia from sewage treatment of industrial waste (I) and sanitary waste (II and III), and the pure culture Enterobacter sp. (inoculum IV) were used as inocula and reactivated in growth medium, pH 7.0, at 37°C for 7 days, under anaerobic conditions. To obtain H2-producing bacterial consortia, pretreatment in inocula I, II and III was carried through the thermal shock (100°C for 15 minutes) with subsequent enrichment by serial dilutions in modified PYG and pH 5.5. Gram positive bacillis and spores-forming were predominant. The enriched consortia that showed better performances for the H2 generation, (I) and (II), were used for the assays, in batch mode, varying concentrations in increasing proportions of the crude glycerol pretreated. In the H2 generation assays, 20% of the reaction medium was composed of inoculum (I) and (II) separately in modified PYG medium, kept at 37 ° C, initial pH 5.5, headspace N2 (100%) under the following conditions: (a) 10 g COD L-1 crude glycerol pretreated and 10 g COD L-1 glycerine; (b) 4 g COD L-1 of glycerin and 16 g COD L-1 crude glycerol pretreated and (c) 20 g COD L-1 crude glycerol pretreated. H2 yields were 2.21, 1.63, 0.83, 1.05, 0.57 and 0.31 mol H2 mol-1 glycerol, respectively, for the Assay (I)-a (involving the inoculum (I) under the condition a), Assay (I) -b, Assay (I)-c, Assay (II)-a (involving the inoculum (II) under the condition a), Assay (II) -b Assay (II)-c with glycerol consumption of 26.9%, 45.8%, 56.2%, 31.7%, 59.0% and 91.0% for the respective assays cited. Ethanol was mainly detected in a higher concentration in all assays involving the inoculum (I), as well as for the inoculum (II) involving the assays (II)-a and b, and butyric acid in higher concentrations in the assay (II)-c. Through molecular biology, the relative abundance of the Clostridiales order for the inoculum (I) and (II) were, respectively, 91.81% and 94.70% as well as the Peptostreptococcaceae family showed high relative abundance for both inocula of 85.29% and 70.26% for inoculum (I) and (II) respectively. A comparative assay with a pure culture Enterobacter sp., with 20 g COD L-1 crude glycerol pretreated and the yield obtained was 0.13 mol H2 mol-1 glycerol was performed. In addition, the pure culture was shown to be more sensitive to hydrogen generation assays due to the presence of contaminants in the crude glycerol. The results of generation of H2 evolving consortia were efficient from the point of view that equivalent yields have been achieved, or even superior, to those reported by other studies showing that it is possible to obtain hydrogen by crude glycerol from cooking oil transesterification used.
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Síntese de nanopartículas de ouro com forma e tamanho controlados utilizando glicerol como um agente de redução e estabilização ecológico e de baixo custo / Synthesis of Shape and Size controlled gold nanoparticles using glycerol as a low-cost and environmental friendly reducing and stabilizing agentParveen, Rashida 26 June 2017 (has links)
As nanopartículas de ouro (AuNPs), com formatos e distribuição de tamanhos definidos, têm atraído grande atenção devido às suas propriedades óticas e e catalíticas únicas, que dependem de da forma e tamanho de AuNPs e que são importantes para diversos aplicações. O desenvolvimento de métodos simples e ecológicamente seguros para a síntese de AuNPs de tamanho e forma controlados, empregando reagentes de baixo custo e de fácil manuseamento é, portanto, de grande importância. Considerando isto, realizou-se um estudo sistemático para preparar nanoparticlus de ouro (AuNPs) e prata (AgNPs) com um controle de forma e tamanho, empregando exclusivamente glicerol como um agente redutor flexivel, eco-friendly e de baixo custo. Em primeiro lugar, descrevemos um novo one-pot método para a preparação de nanorods ou nanobastões de ouro (AuNRs) monocristalinos com quase 100% de rendimento empragando o glicerol em meio alcalino como agente redutor e Brometo de hexadeciltrimetilamónio (CTAB) como agente controlador da forma de particulas. Podemos conseguir um controle da razões de aspecto (Aspect ratio do inglês, AR = 2 a 6), rendimento de AuNRs (27-99%) bem como da posicao de banda de absorção óticas de AuNRs (de 620 a 1200 nm) simplesmente variando as condições experimentais, principalmente o pH de meio reaccional (variou-se entre 12-13,5) e a concentração do AgNO3. Descobrimos que a formação de AuNRs é mais rápida a pH mais alto (> 11) e a maior temperatura (> 30 ° C), mas o rendimento de AuNRs é menor (< 70%). A análise de HRTEM mostrou que os AuNRs crescem na direcção [001] e têm uma estrutura do tipo fcc monocristalina, isenta de falhas estruturais ou deslocamentos. Em segundo lugar, realizamos com sucesso, pela primeira vez, a formação de nanoparticlulas esféricas de ouro (AuNPs), quase monodispersas de cerca de 8 nm, utilizando o glicerol bruto conhecido localmente como Glicerina Loíra (crude glycerol (CG) do inglê), tal como recebido, da planta de biodiesel pela. Não foi realizado nehum tratamento químico ou físico específico do CG, exceto filtração simples. Utilizaram-se duas amostras diferentes de CG com diferentes teores de glicerol (65% e 73%) e diferentes níveis de impurezas (baixo e alto) e tipos (orgânicos e inorgânicos) para preparar AuNPs, a fim de estudar o efeito de possíveis impurezas na formato e distribuição de tamanho de AuNPs. Para comparação, foram também preparadas AuNPs utilizando glicerol comercial puro (99,5%) em condições experimentais idênticas. Foram obtidos AuNPs com tamanho e formato semelhantes em ambos os casos (glicerol puro comercial e CG) indicando que o glicerol comercial pode ser substituído por CG na síntese de AuNPs e as impurezas orgânicas e inorgânicas não afectam significativamente a distribuição de tamanho de AuNPs preparadas . Este estudo abre novas possibilidades para um eco-friendly preparação de nanopartículas metálicas utilizando o CG com um agente redutor barato, não tóxico e biodegradável como. Em terceiro lugar, desenvolvemos um método de síntese de AuNPs do tipo Ligand-free (sem uso de agente establizante) empregando o glicerol tanto como agente redutor quanto com agente estabilizador. A ideia era evitar o uso de um agente estabilizante externo que muitas vezes diminui a actividade catalítica ou afeta adversamente a biocompatibilidade dos sistemas surfactante/AuNPs. Obtiveram-se AuNPs coloidais estáveis com uma distribuição de tamanho razoavelmente estreita (8 ± 3 nm) por este método e verificou-se que a estabilidade e distribuição de tamanho das partículas dependiam da razão água/glicerol, temperatura e pH dos meios reaccionais. Tais ligand-free AuNPs preparados utilizando glicerol podem ser utilizadas nas aplicações catáliticas e biomédicas. / Gold nanoparticles (AuNPs) especially with a control of size and shape have attracted great attention due to their shape-dependent optical properties that are important for many applications. The development of simpler and greener methods for the synthesis of size- and shape-controlled AuNPs employing low-cost and easily handled reagents is thus of great importance. Thus we have carried out a systematic study to prepare shape- and size-controlled AuNPs and AgNPs employing exclusively glycerol as an eco-friendly, low cost and pH-tunable reducing agent. Firstly, we report a new one-pot seedless method for the preparation of single-crystalline AuNRs in almost 100% yield based on the use of glycerol in alkaline medium as the reducing agent and hexadecyltrimethylammonium bromide (CTAB) as the shape-controlling agent. We could achieve a control of the aspect ratio (AR= 2 to 6), AuNRs yield (27-99%) as well the LSPR band of the AuNRs (620 to 1200 nm) by simply varying the experimental conditions, principally the pH of the reaction media (varied between 12-13.5 ) and the concentration of the AgNO3. We found that the formation of AuNRs is faster at higher pH (>11) and higher temperature (>30°C) but the AuNRs yield is smaller (< 70%). HRTEM analysis showed that the AuNRs grow in [001] direction and have a perfect single crystalline fcc structure, free from structural faults or dislocations. Secondly, we successfully carried out the formation of nearly monodisperse spherical AuNPs of around 8 nm using the as-received crude glycerol (CG) from the biodiesel plant for the first time. No special chemical or physical treatment of CG except simple filtration was carried out. Two different crude glycerol samples with different glycerol contents (65% and 73%) and different impurity levels (low and high) and types (organic and inorganic) were employed to prepare AuNPs so as to study the effect of possible impurities on the shape and size distribution of AuNPs. For comparison, AuNPs were also prepared using pure commercial (99.5 %) glycerol under identical experimental conditions. AuNPs with similar size and shape were obtained in both cases (commercial pure glycerol as well as CG) indicating that commercial glycerol can be replaced with CG in the AuNPs synthesis and the organic and inorganic impurities do not significantly affect the particle size distribution of prepared AuNPs. This study opens up new possibilities for the environment-friendly preparation of metallic nanoparticles using the low-cost, non-toxic and biodegradable CG as a reducing agent. Thirdly, we developed a ligand-free one-pot synthesis method of AuNPs employing the eco-friendly glycerol both as reducing agent and stabilizing agent. The idea was to avoid the use of an external stabilizing agent which often hinder the catalytic activity and adversely affect the biocompatibility of the surfactant/AuNP systems. Stable AuNPs with reasonably good size distribution (8 ± 3 nm) were obtained by this method and the stability and size distribution of the particles was found to be dependent on the water/glycerol ratio, temperature and pH of the reaction media. Such surfactant-free biocompatible AuNPs prepared using the eco-friendly glycerol may find useful applications in catalysis and biomedical applications.
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Processamento do glicerol bruto em reatores anaeróbios de leito fluidificado, acidogênico e metanogênico, em temperatura mesofílica / Processing of crude glycerol in anaerobic fluidized bed reactors, acidogenic and methanogenic, at mesophilic temperatureSimões, Andreza Nataline 24 March 2017 (has links)
A utilização de combustíveis renováveis tem se destacado nos últimos anos, principalmente devido aos impactos ambientais gerados pelo uso de combustíveis fósseis e escassez dos mesmos. Dentre os combustíveis renováveis destaca-se o biodiesel, cujo processo produtivo apresenta como principal subproduto o glicerol bruto, que tem instigado nos últimos anos intensas discussões sobre a problemática de sua destinação e disposição final. Apesar de ser utilizado na indústria química, o seu teor de impurezas limita o seu processamento industrial. Buscando agregar valor a esse resíduo bruto e contribuir para a produção de bioenergia, este trabalho teve por intuito avaliar a produção dos biocombustíveis hidrogênio e metano, assim como de intermediários químicos a partir de glicerol bruto como substrato em reatores anaeróbios de leito fluidificado (RALF), mesofílicos (30°C), utilizando inóculo de cultura mista. O RALF-H2, com o objetivo de produzir hidrogênio e metabólitos solúveis, foi submetido à concentração de 10 g.L-1 de glicerol e variação do tempo de detenção hidráulica (TDH) de 8, 6, 4, 2, 1 e 0,5 h. Já o RALF-CH4, com intuito de produzir metano, operou sob TDH fixo de 24 h, submetido à variação da concentração de glicerol de 1, 2, 3, 4, 5 e 7 g.L-1, e portanto, da taxa de carregamento orgânico (TCO) de 1, 2, 3, 4, 5 e 7 kgDQO.m-3.d-1, respectivamente. No RALF-H2, os valores máximos de conteúdo de hidrogênio no biogás (69,2 %), produtividade volumétrica de hidrogênio (1,90 L.h-1.L-1) e rendimento de hidrogênio (0,28 molH2.mol-1glicerolconsumido) foram verificados no TDH de 0,5 h. O 1,3-propanodiol se destacou entre os metabólitos produzidos, com rendimento máximo de 0,57 mol1,3-PDO.mol-1glicerolconsumido, alcançado no TDH de 8 h. No RALF-CH4, o máximo conteúdo de metano no biogás (83,0%) foi verificado na TCO de 1 kgDQO.m-3.d-1, a maior produtividade volumétrica de metano (2,26 L.d-1.L-1) na TCO de 5 kgDQO.m-3.d-1 e o máximo rendimento (0,19 m3H4.kg-1DQOaplicada ou 0,77 molCH4.mol-1glicerolconsumido) na TCO de 4 kgDQO.m-3.d-1. Portanto, os resultados evidenciaram a possibilidade de produção de biocombustíveis e metabólitos de valor agregado utilizando glicerol bruto como substrato no processo da digestão anaeróbia. / The use of renewable fuels has been highlighted in recent years, mainly due to the environmental impacts generated by the use of fossil fuels and their scarcity. Among the renewable fuels highlights the biodiesel, whose production process displays as the main byproduct crude glycerol, which has instigated in recent years, intense debates about a problem of its destination and final disposal. Although it is used in the chemical industry, its impurities content limits its industrial processing. In order to add value to this crude residue and to contribute to the production of bioenergy, this work aimed to evaluate the production of biofuels hydrogen and methane, as well as chemical intermediates from crude glycerol as substrate in anaerobic fluidized bed reactors (AFBR), mesophilic (30°C), using mixed culture inoculum. The AFBR-H2, with the objective of producing hydrogen and soluble metabolites, was submitted to a concentration of 10 g.L-1 of glycerol and a variation of the hydraulic retention time (HRT) of 8, 6, 4, 2, 1 and 0.5 h. The AFBR-CH4, with the intention of producing methane, operated under fixed HRT of 24 h, subjected to the variation of the glycerol concentration of 1, 2, 3, 4, 5 and 7 g.L-1 and, therefore, of the organic loading rate (OLR) of 1, 2, 3, 4, 5 and 7 kgCOD.m-3d-1, respectively. In the AFBR-H2, the maximum values of hydrogen content in the biogas (69.2%), hydrogen volumetric productivity (1.90 L.h-1.L-1) and hydrogen yield (0.28 molH2.mol-1glycerolconsumed) were verified in the HRT of 0.5 h. The 1,3-propanediol was highlighted among the metabolites produced, with a maximum yield of 0.57 mol1,3-PDO.mol-1glycerolconsumed, reached in the TDH of 8 h. In the AFBR-CH4, the higher methane content in the biogas (83.0%) was detected in the OLR of 1 kgCOD.m-3.d-1, a higher volumetric productivity of methane (2.26 L.d-1.L-1) in the OLR of 5 kgCOD.m-3.d-1 and the maximum yield (0.19 m3CH4.kg-1CODapplied or 0.77 molCH4.mol-1glycerolconsumed) in the OLR of 4 kgCOD.m-3d-1. Therefore, the results evidenced the possibility of producing biofuels and value-added metabolites using crude glycerol as a substrate at the anaerobic digestion process.
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Síntese de nanopartículas de ouro com forma e tamanho controlados utilizando glicerol como um agente de redução e estabilização ecológico e de baixo custo / Synthesis of Shape and Size controlled gold nanoparticles using glycerol as a low-cost and environmental friendly reducing and stabilizing agentRashida Parveen 26 June 2017 (has links)
As nanopartículas de ouro (AuNPs), com formatos e distribuição de tamanhos definidos, têm atraído grande atenção devido às suas propriedades óticas e e catalíticas únicas, que dependem de da forma e tamanho de AuNPs e que são importantes para diversos aplicações. O desenvolvimento de métodos simples e ecológicamente seguros para a síntese de AuNPs de tamanho e forma controlados, empregando reagentes de baixo custo e de fácil manuseamento é, portanto, de grande importância. Considerando isto, realizou-se um estudo sistemático para preparar nanoparticlus de ouro (AuNPs) e prata (AgNPs) com um controle de forma e tamanho, empregando exclusivamente glicerol como um agente redutor flexivel, eco-friendly e de baixo custo. Em primeiro lugar, descrevemos um novo one-pot método para a preparação de nanorods ou nanobastões de ouro (AuNRs) monocristalinos com quase 100% de rendimento empragando o glicerol em meio alcalino como agente redutor e Brometo de hexadeciltrimetilamónio (CTAB) como agente controlador da forma de particulas. Podemos conseguir um controle da razões de aspecto (Aspect ratio do inglês, AR = 2 a 6), rendimento de AuNRs (27-99%) bem como da posicao de banda de absorção óticas de AuNRs (de 620 a 1200 nm) simplesmente variando as condições experimentais, principalmente o pH de meio reaccional (variou-se entre 12-13,5) e a concentração do AgNO3. Descobrimos que a formação de AuNRs é mais rápida a pH mais alto (> 11) e a maior temperatura (> 30 ° C), mas o rendimento de AuNRs é menor (< 70%). A análise de HRTEM mostrou que os AuNRs crescem na direcção [001] e têm uma estrutura do tipo fcc monocristalina, isenta de falhas estruturais ou deslocamentos. Em segundo lugar, realizamos com sucesso, pela primeira vez, a formação de nanoparticlulas esféricas de ouro (AuNPs), quase monodispersas de cerca de 8 nm, utilizando o glicerol bruto conhecido localmente como Glicerina Loíra (crude glycerol (CG) do inglê), tal como recebido, da planta de biodiesel pela. Não foi realizado nehum tratamento químico ou físico específico do CG, exceto filtração simples. Utilizaram-se duas amostras diferentes de CG com diferentes teores de glicerol (65% e 73%) e diferentes níveis de impurezas (baixo e alto) e tipos (orgânicos e inorgânicos) para preparar AuNPs, a fim de estudar o efeito de possíveis impurezas na formato e distribuição de tamanho de AuNPs. Para comparação, foram também preparadas AuNPs utilizando glicerol comercial puro (99,5%) em condições experimentais idênticas. Foram obtidos AuNPs com tamanho e formato semelhantes em ambos os casos (glicerol puro comercial e CG) indicando que o glicerol comercial pode ser substituído por CG na síntese de AuNPs e as impurezas orgânicas e inorgânicas não afectam significativamente a distribuição de tamanho de AuNPs preparadas . Este estudo abre novas possibilidades para um eco-friendly preparação de nanopartículas metálicas utilizando o CG com um agente redutor barato, não tóxico e biodegradável como. Em terceiro lugar, desenvolvemos um método de síntese de AuNPs do tipo Ligand-free (sem uso de agente establizante) empregando o glicerol tanto como agente redutor quanto com agente estabilizador. A ideia era evitar o uso de um agente estabilizante externo que muitas vezes diminui a actividade catalítica ou afeta adversamente a biocompatibilidade dos sistemas surfactante/AuNPs. Obtiveram-se AuNPs coloidais estáveis com uma distribuição de tamanho razoavelmente estreita (8 ± 3 nm) por este método e verificou-se que a estabilidade e distribuição de tamanho das partículas dependiam da razão água/glicerol, temperatura e pH dos meios reaccionais. Tais ligand-free AuNPs preparados utilizando glicerol podem ser utilizadas nas aplicações catáliticas e biomédicas. / Gold nanoparticles (AuNPs) especially with a control of size and shape have attracted great attention due to their shape-dependent optical properties that are important for many applications. The development of simpler and greener methods for the synthesis of size- and shape-controlled AuNPs employing low-cost and easily handled reagents is thus of great importance. Thus we have carried out a systematic study to prepare shape- and size-controlled AuNPs and AgNPs employing exclusively glycerol as an eco-friendly, low cost and pH-tunable reducing agent. Firstly, we report a new one-pot seedless method for the preparation of single-crystalline AuNRs in almost 100% yield based on the use of glycerol in alkaline medium as the reducing agent and hexadecyltrimethylammonium bromide (CTAB) as the shape-controlling agent. We could achieve a control of the aspect ratio (AR= 2 to 6), AuNRs yield (27-99%) as well the LSPR band of the AuNRs (620 to 1200 nm) by simply varying the experimental conditions, principally the pH of the reaction media (varied between 12-13.5 ) and the concentration of the AgNO3. We found that the formation of AuNRs is faster at higher pH (>11) and higher temperature (>30°C) but the AuNRs yield is smaller (< 70%). HRTEM analysis showed that the AuNRs grow in [001] direction and have a perfect single crystalline fcc structure, free from structural faults or dislocations. Secondly, we successfully carried out the formation of nearly monodisperse spherical AuNPs of around 8 nm using the as-received crude glycerol (CG) from the biodiesel plant for the first time. No special chemical or physical treatment of CG except simple filtration was carried out. Two different crude glycerol samples with different glycerol contents (65% and 73%) and different impurity levels (low and high) and types (organic and inorganic) were employed to prepare AuNPs so as to study the effect of possible impurities on the shape and size distribution of AuNPs. For comparison, AuNPs were also prepared using pure commercial (99.5 %) glycerol under identical experimental conditions. AuNPs with similar size and shape were obtained in both cases (commercial pure glycerol as well as CG) indicating that commercial glycerol can be replaced with CG in the AuNPs synthesis and the organic and inorganic impurities do not significantly affect the particle size distribution of prepared AuNPs. This study opens up new possibilities for the environment-friendly preparation of metallic nanoparticles using the low-cost, non-toxic and biodegradable CG as a reducing agent. Thirdly, we developed a ligand-free one-pot synthesis method of AuNPs employing the eco-friendly glycerol both as reducing agent and stabilizing agent. The idea was to avoid the use of an external stabilizing agent which often hinder the catalytic activity and adversely affect the biocompatibility of the surfactant/AuNP systems. Stable AuNPs with reasonably good size distribution (8 ± 3 nm) were obtained by this method and the stability and size distribution of the particles was found to be dependent on the water/glycerol ratio, temperature and pH of the reaction media. Such surfactant-free biocompatible AuNPs prepared using the eco-friendly glycerol may find useful applications in catalysis and biomedical applications.
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Obtenção e caracterização de linhagem de Escherichia coli adaptada ao glicerol bruto proveniente da síntese de biodiesel por engenharia evolutivaMiranda, Letícia Passos 31 March 2016 (has links)
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Previous issue date: 2016-03-31 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Biodiesel is a renewable fuel and its production generate raw glycerol (RG) as main byproduct.
The use of RG as carbon source in microorganism cultivations poses as an alternative to add
value and reduce the environmental impact of this residue. However, RG impurities (salts,
esters, alcohol and soap) can inhibit cell growth. Techniques that aims adapting microorganisms
to environments containing contaminants by adaptive evolution have been employed to
overcome inhibition problems. Adaptation strategies allows imposing a certain selective
pressure upon the population, favoring the appearance of mutants and selection of most
beneficial mutations, which will make the cell more suited to develop itself in a hostile
environment. This work employed Adaptive Evolution methodology to obtain an E. coli K12
strain adapted to RG concentrated by rotary evaporation (RGRota). Cultivations were carried
out in plates (E. coli – USP strain) incubated at 37 ºC, as well as shaken flasks (E. coli – UMinho
strain), kept at 37 ºC and 300 rpm, involving transfers to defined media gradually enriched with
RGRota. Obtained evolved strain as well as the wild-type strain E. coli – UMinho were
characterized in cultivations using 2 L, bench-scale bioreactor, equipped with monitoring and
control system. During shaken flask experiments, growth was followed by optical density (OD)
readings. In bioreactor cultures, samples were withdrawal to analyze cell concentration of the
suspension (OD and dry cell weight), concentrations of glycerol, ethanol and organic acids
(liquid chromatography), concentration of viable cells (colony forming units counting) and
morphology. Cultures characterization were carried out with E. coli – USP in shaken flasks, the
values of maximum specific growth rate (μmax) remained between 0.40 e 0.45 h-1 and they
showed little influence of strain or media composition. These results suggest that the selected
strain did not have differentiated characteristics from the wild-type strain. For E. coli – UMinho,
two adaptation strategies were evaluated: successive transfer during exponential growth phase
(OD = ~2.5) and during stationary growth phase (OD = ~10). In both cases cells evolved,
showing increased μmax values, with more homogeneous populations being observed for
adaptation conducted under the first strategy. After 26 days of adaptation, corresponding to 534
generations, an evolved strain, exhibiting μmax of 0.60 h-1 and capable of growing in medium
containing 29 g/L of glycerol from RGRota was selected by the methodology of successive
transfers in exponential phase. This growth rate was 27.6 % superior to that achieved by the
wild-type strain (0.47 h-1). Evolved and wild-type strains were cultivated in bioreactor,
containing defined medium prepared with GBRota to have 40 g/L of glycerol. The evolved one
maintained μmáx of 0.61 h-1. Acetate formation was observed, with yield of 0.19 g acetate/g
glycerol, which caused growth inhibition and limited biomass yield to 0.26 gbiomass/gglycerol.
When the wild-type strain was cultivated in bioreactor, exponential growth started after 24 h of
lag phase and it presented μmax of 0.28 h-1, biomass yield of 0,39 gbiomass/gglycerol and acetate
yield of 0.19 gacetate/gglycerol. The evolved strain obtained, capable of growing in the biodiesel
production residue, showed a μmax value similar to the best results reported in the literature for
E. coli adaptation in pure glycerol (0.7 h-1), what demonstrates the successful application of the
adaptive evolution methodology. Acetate accumulation can be reduced by Genetic Engineering
techniques to manipulate metabolic pathways and this will lead to development of an industrial
strain which can be employed as a platform of high value products using unrefined glycerol as
substrate. / O biodiesel é um combustível renovável cuja produção gera o glicerol bruto (GB) como
principal subproduto. O aproveitamento de GB como fonte de carbono em cultivos de
microrganismos se apresenta como uma alternativa para agregar valor e reduzir o impacto
ambiental deste resíduo. Contudo, as impurezas do GB (sais, ésteres, álcool e sabão) podem
inibir o crescimento das células. Técnicas que visam adaptar os microrganismos via evolução
adaptativa a ambientes contendo contaminantes vêm sendo empregadas para contornar
problemas de inibição. As estratégias de adaptação permitem impor uma certa pressão seletiva
sobre a população, favorecendo o aparecimento de mutantes e a seleção de mutações benéficas,
que tornam a célula mais apta a se desenvolver em um ambiente hostil. O trabalho empregou a
metodologia de Evolução Adaptativa para obter uma linhagem de E. coli K12 adaptada ao GB
concentrado por rotaevaporação (GBRota). Os cultivos foram realizados tanto em placas
(linhagem E. coli – USP) incubadas a 37ºC, como em frascos agitados (linhagem E. coli –
UMinho), mantidos a 37ºC e 300 rpm, envolvendo transferências para meios definidos
gradualmente enriquecidos com GBRota. A linhagem evoluída obtida assim como a linhagem
selvagem E. coli – UMinho foram caracterizadas em cultivos em biorreator de bancada de 2 L,
dotado de sistema de monitoramento e controle. Durante os experimentos em frascos agitados, o
crescimento foi acompanhado por leitura de densidade ótica (DO). Nos cultivos em biorreator,
amostras foram coletadas para análises de concentração celular da suspensão (DO e massa seca),
da concentração de glicerol, etanol e ácidos orgânicos (por cromatografia líquida), da concentração
de células viáveis (por contagem de unidades formadoras de colônia) e de morfologia. Para os
cultivos de caracterização da E. coli – USP realizados em frascos agitados, os valores da
velocidade máxima específica de crescimento (max) permaneceram entre 0,40 e 0,45 h-1, sendo
pouco influenciados pela linhagem ou pela composição dos meios, sugerindo que a metodologia
adotada para adaptação em placa não foi eficiente, já que a linhagem selecionada não possuía
características diferenciadas em relação à linhagem selvagem. Para a E. coli – UMinho foram
avaliadas duas estratégias de adaptação: transferências sucessivas na fase exponencial do
cultivo (DO = ~2,5) e na fase estacionária (DO = ~10). Em ambos os casos, as células
evoluíram, apresentando aumento nos valores de max., sendo que populações mais homogêneas
foram observadas na adaptação realizada pela primeira estratégia. Após 26 dias de adaptação,
correspondendo a 534 gerações, foi selecionada pela metodologia de transferências sucessivas
na fase exponencial, uma linhagem evoluída apresentando velocidade máxima específica de
0,60 h-1, resultado superior em 27,6% ao da linhagem selvagem (0,47h-1), capaz de crescer em
meio contendo ~30 g/L de glicerol proveniente do GBRota. As linhagens selvagem e evoluída
foram cultivadas em biorreator contendo meio preparado com GBRota na concentração de 40
g/L de glicerol. A linhagem evoluída manteve o μmáx de 0,61 h-1. Foi observada formação de
acetato, com rendimento de 0,19 gacetato/gglicerol, o que causou inibição do crescimento e limitou
o rendimento em biomassa a 0,26 gbiomassa/gglicerol. Enquanto que, para a linhagem selvagem o
cultivo em biorreator apresentou uma fase lag de 24 h, um max de 0,28 h-1, rendimento em
biomassa de 0,39 gacetato/gglicerol e rendimento em acetato 0,19 gacetato/gglicerol. A linhagem
evoluída obtida no presente trabalho, capaz de crescer no resíduo da produção de biodiesel,
apresenta max semelhante aos melhores resultados relatados na literatura para adaptação de E.
coli em glicerol puro (0,7 h-1), demonstrando o sucesso da aplicação da metodologia de
evolução adaptativa. O acúmulo de acetato pode ser amenizado utilizando técnicas de
Engenharia Genética para manipulação das vias metabólicas e permitindo o desenvolvimento
de uma linhagem industrial que poderá ser empregada como plataforma para obtenção de
produtos de alto valor agregado usando o glicerol não refinado como substrato.
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Processamento do glicerol bruto em reatores anaeróbios de leito fluidificado, acidogênico e metanogênico, em temperatura mesofílica / Processing of crude glycerol in anaerobic fluidized bed reactors, acidogenic and methanogenic, at mesophilic temperatureAndreza Nataline Simões 24 March 2017 (has links)
A utilização de combustíveis renováveis tem se destacado nos últimos anos, principalmente devido aos impactos ambientais gerados pelo uso de combustíveis fósseis e escassez dos mesmos. Dentre os combustíveis renováveis destaca-se o biodiesel, cujo processo produtivo apresenta como principal subproduto o glicerol bruto, que tem instigado nos últimos anos intensas discussões sobre a problemática de sua destinação e disposição final. Apesar de ser utilizado na indústria química, o seu teor de impurezas limita o seu processamento industrial. Buscando agregar valor a esse resíduo bruto e contribuir para a produção de bioenergia, este trabalho teve por intuito avaliar a produção dos biocombustíveis hidrogênio e metano, assim como de intermediários químicos a partir de glicerol bruto como substrato em reatores anaeróbios de leito fluidificado (RALF), mesofílicos (30°C), utilizando inóculo de cultura mista. O RALF-H2, com o objetivo de produzir hidrogênio e metabólitos solúveis, foi submetido à concentração de 10 g.L-1 de glicerol e variação do tempo de detenção hidráulica (TDH) de 8, 6, 4, 2, 1 e 0,5 h. Já o RALF-CH4, com intuito de produzir metano, operou sob TDH fixo de 24 h, submetido à variação da concentração de glicerol de 1, 2, 3, 4, 5 e 7 g.L-1, e portanto, da taxa de carregamento orgânico (TCO) de 1, 2, 3, 4, 5 e 7 kgDQO.m-3.d-1, respectivamente. No RALF-H2, os valores máximos de conteúdo de hidrogênio no biogás (69,2 %), produtividade volumétrica de hidrogênio (1,90 L.h-1.L-1) e rendimento de hidrogênio (0,28 molH2.mol-1glicerolconsumido) foram verificados no TDH de 0,5 h. O 1,3-propanodiol se destacou entre os metabólitos produzidos, com rendimento máximo de 0,57 mol1,3-PDO.mol-1glicerolconsumido, alcançado no TDH de 8 h. No RALF-CH4, o máximo conteúdo de metano no biogás (83,0%) foi verificado na TCO de 1 kgDQO.m-3.d-1, a maior produtividade volumétrica de metano (2,26 L.d-1.L-1) na TCO de 5 kgDQO.m-3.d-1 e o máximo rendimento (0,19 m3H4.kg-1DQOaplicada ou 0,77 molCH4.mol-1glicerolconsumido) na TCO de 4 kgDQO.m-3.d-1. Portanto, os resultados evidenciaram a possibilidade de produção de biocombustíveis e metabólitos de valor agregado utilizando glicerol bruto como substrato no processo da digestão anaeróbia. / The use of renewable fuels has been highlighted in recent years, mainly due to the environmental impacts generated by the use of fossil fuels and their scarcity. Among the renewable fuels highlights the biodiesel, whose production process displays as the main byproduct crude glycerol, which has instigated in recent years, intense debates about a problem of its destination and final disposal. Although it is used in the chemical industry, its impurities content limits its industrial processing. In order to add value to this crude residue and to contribute to the production of bioenergy, this work aimed to evaluate the production of biofuels hydrogen and methane, as well as chemical intermediates from crude glycerol as substrate in anaerobic fluidized bed reactors (AFBR), mesophilic (30°C), using mixed culture inoculum. The AFBR-H2, with the objective of producing hydrogen and soluble metabolites, was submitted to a concentration of 10 g.L-1 of glycerol and a variation of the hydraulic retention time (HRT) of 8, 6, 4, 2, 1 and 0.5 h. The AFBR-CH4, with the intention of producing methane, operated under fixed HRT of 24 h, subjected to the variation of the glycerol concentration of 1, 2, 3, 4, 5 and 7 g.L-1 and, therefore, of the organic loading rate (OLR) of 1, 2, 3, 4, 5 and 7 kgCOD.m-3d-1, respectively. In the AFBR-H2, the maximum values of hydrogen content in the biogas (69.2%), hydrogen volumetric productivity (1.90 L.h-1.L-1) and hydrogen yield (0.28 molH2.mol-1glycerolconsumed) were verified in the HRT of 0.5 h. The 1,3-propanediol was highlighted among the metabolites produced, with a maximum yield of 0.57 mol1,3-PDO.mol-1glycerolconsumed, reached in the TDH of 8 h. In the AFBR-CH4, the higher methane content in the biogas (83.0%) was detected in the OLR of 1 kgCOD.m-3.d-1, a higher volumetric productivity of methane (2.26 L.d-1.L-1) in the OLR of 5 kgCOD.m-3.d-1 and the maximum yield (0.19 m3CH4.kg-1CODapplied or 0.77 molCH4.mol-1glycerolconsumed) in the OLR of 4 kgCOD.m-3d-1. Therefore, the results evidenced the possibility of producing biofuels and value-added metabolites using crude glycerol as a substrate at the anaerobic digestion process.
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Produção microbiológica de ácido propiônico, 1,3-propanodiol e hidrogênio a partir de glicerol bruto em reator anaeróbio de leito fluidizadoNazareth, Talita Corrêa 24 April 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-04-24 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas (FAPEAM) / This study aimed to produce propionic acid, 1,3-propanediol and hydrogen in anaerobic
fluidized bed reactor with grounded tire as support material for immobilization of
biomass. The experiment took place during 278 days in six distinct phases distributed
according to the hydraulic retention time (HRT), which ranged between 8 and 0.5 h.
The reactor was maintained at mesophilic conditions (30 ° C) with controlled pH
between 4.5 and 5.5 and crude glycerol as carbon source at a concentration of 5 g L-1.
The inoculum used in the experiment was derived from the processing of poultry
slaughterhouse wastewater station. The results show that the consumption of substrate
conversion reached the highest value (89.8 %) in HRT of 6 hours. The biogas produced
was composed of H2 and CO2 and the greatest recorded content of H2 has been reached
(81.2%) in HRT of 4 hours. The principal soluble metabolite produced were propionic
acid and 1,3-propanediol, with maximum yields of 1,77 and 0,82 mol.molglicerol
-1, respectively. Both maximum yields were achieved in HRT of 8 h. At all stages of this
work occurred predominantly propionic acid, with maximum molar percentage (96,9 %)
achieved in HRT of 0,5 h. The second predominant metabolite obtained was 1,3-
propanediol, achieving greater molar percentage (29.4%) in HRT of 6 hours. / O presente trabalho teve por objetivo produzir ácido propiônico, 1,3-propanodiol e
hidrogênio em reator anaeróbio de leito fluidizado com pneu triturado como material
suporte para adesão da biomassa. O experimento ocorreu durante 278 dias, em seis fases
distintas distribuídas em função do tempo de detenção hidráulica (TDH), que variou
entre 8 e 0,5 h. O reator foi mantido em condições mesofílicas (30 °C), com pH
controlado entre 4,5 e 5,5 e possuía glicerol bruto como fonte de carbono na
concentração de 5 g L-1. O inóculo utilizado no experimento foi proveniente de estação
de tratamento de efluente de abatedouro de aves. Os resultados obtidos mostram que o
consumo de substrato atingiu o maior valor de conversão (89,8 %) no TDH de 6 h. O
biogás produzido foi composto de H2 e CO2, tendo o maior conteúdo de H2 registado
(81,2 %) no TDH de 4 h. Os principais metabólitos solúveis obtidos foram ácido
propiônico e 1,3-propanodiol com rendimentos máximos de 1,77 e 0,82 mol.molglicerol
-1, respectivamente. Ambos os rendimentos máximos foram atingidos no TDH de 8 h. Em
todas as fases apresentadas, ocorreu a predominância de ácido propiônico, sendo a
maior porcentagem molar (96,9 %) atingida no TDH de 0,5 h. O segundo metabólito
mais produzido foi o 1,3-propanodiol, alcançando maior porcentagem molar (29,4 %)
no TDH de 6 h.
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Obtenção de consórcio de bactérias fotoheterotróficas geradoras de H2 visando sua produção em reator anaeróbio em batelada /Ríos Alcaraz, Francisco Abraham. January 2016 (has links)
Orientador: Sandra Imaculada Maintinguer / Resumo: A bioconversão de diferentes materiais orgânicos em hidrogênio é uma tecnologia sustentável. Inóculos de climas tropicais, como o Brasil, com temperaturas médias de 25°C podem favorecer o crescimento bacteriano. A geração de hidrogênio com consórcios bacterianos têm vantagens sobre culturas puras quanto aplicado no tratamento de águas residuárias. O hidrogênio pode ser gerado em duas fases durante os processos anaeróbios. Em primeiro lugar, hidrogênio e ácidos orgânicos podem ser produzidos por processos fermentativos. Esses ácidos gerados podem ser usados por bactérias fotoheterotróficas na segunda fase, durante a operação dos reatores anaeróbios na presença de luz. O objetivo deste estudo foi avaliar o potencial de produção hidrogênio a partir de resíduos orgânicos por consórcios de bactérias fotoheterotróficas. Foram feitos 12 ensaios (I-XII) separadamente, em triplicatas de reatores anaeróbios em batelada, em meio de cultivo Rhodospirillaceae, headspace N2 (100%), pH 7.0+1, a 37ºC. Foram comprovados os efeitos com duas potências de intensidade de luz (8,8±1 e 18,5±1 W/m2) e diferentes concentrações de ácidos butírico, acético, além de efluentes de processos fermentativos procedentes de glicerol bruto e águas residuárias citrícolas. As condições ótimas para a produção de hidrogênio foram de 18.5±1 W/m2 de intensidade de luz e 1.7 g/L para o ácido acético (II), 1.0 g/L para o ácido butírico (V), 1.0 g de COD/L de glicerol efluente (IX), e 0.5 g de DQO/L para o efluente de á... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The bioconversion of different organic materials to hydrogen is a sustainable technology. Inocula from tropical climates such as Brazil which average temperatures around 25°C may favour the bacterial growth. Hydrogen generation with bacterial consortia have advantages over pure cultures regarding application to wastewater treatment. The hydrogen can be generates in two stages during the anaerobic processes. Firstly, hydrogen and organic acids can be produced by dark fermentation. The acids generated during the first stage of the fermentation process can be used by phototrophic bacteria in the second stage during the operation of anaerobic batch reactors on the light presence. The aim of this study was evaluate the hydrogen producing potential from organic wastes by phototrophic bacterial consortia. Assays (I - XII) were made separately in triplicates of anaerobic batch reactors, Rhodospirillaceae medium (Chi Mei Lee, 2005), headspace with N2 (100%), pH 7.0+1, at 37oC. Effects with two potencies of light intensity (8.8±1 and 18.5±1 W/m2 ) and different concentrations of butyric acid, acetic acid and dark fermentation effluents from crude glycerol and citrus wastewaters were optimized. The optimal conditions for hydrogen production from phototrophic consortia were 18.5±1 W/m2 of light intensity and 1.7 g/L for acetic acid (II), 1.0 g/L for butyric acid (V), 1.0 g COD/L for Glycerol effluent (IX), and 0.5 g COD/L for citrus wastewater effluent (XII). Under the optimum conditions... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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