Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:22Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-02-27Bitstream added on 2014-06-13T19:35:23Z : No. of bitstreams: 1 bergamasco_vb_me_jabo.pdf: 403453 bytes, checksum: 6a88a5515cdd11dfe0eb79e82bebc66d (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O controle de pragas da cultura algodoeira pode ser feito utilizando proteínas Cry de Bacillus thuringiensis e para tal, o presente trabalho testou a atividade inseticida de novos isolados de B. thuringiensis frente a larvas neonatas de Spodoptera frugiperda e Anthonomus grandis, resultando em diversos níveis de mortalidade que foram associados a oito diferentes combinações de genes cryl identificados por PCR. O gene crylla (lepidóptero e coleóptero específico) esteve presente na maioria dos isolados, assim como nas linhagens padrões e principalmente nos isolados de maior efetividade para as duas pragas. A partir deste fato, a atividade inseticida de uma nova proteína Cry1 la foi avaliada frente a larvas neonatas de S. frugipercla e A. grandis. O gene crylla completo, previamente obtido por PCR com oligonucleotídeos iniciadores desenhados a partir do gene seqüenciado, foi clonado no vetor pET28a(+), introduzido em Escherichia cor, BL21(DE3) e expresso por indução com IPTG, confirmando a expressão da proteína Cry1la, com peso molecular de aproximadamente 81 kDa. Os resultados demonstraram a eficiência do sistema bacteriano na expressão da proteína Cry1 la de B. thuringiensis, a qual foi, posteriormente, utilizada nos bioensaios quantitativos contra larvas de S. frugiperda e A. grandis, resultando em uma proteína altamente tóxica às duas espécies, característica importante para obtenção de plantas transgênicas de algodão resistentes a estas pragas / The control af cotton pests may be done by using Bacillus thuringiensis Cry proteins. For this purpose, the present work tested the insecticidal activity of new B. thutingiensis isolates, in neonate larvae of Spodoptera frugiperda and Anthonomus grandis, resulting in different mortality leveis that were associated to eight different combinations of cry 1 genes identified by PCR. The cry1la gene (specific Lepidoptera and Coleoptera) was present in most of the isolates, as well as in the standard strains and mainly in the isolates with higher affectivity for both pests. Considering this, the insecticidal activity of a new Cryl la protein was evaluated against neonate larvae of S. frugiperda and A. grandis. The complete cry1la gene, previously obtained by PCR with oligonucleotide primers that were drawn based on the sequenced gene, was cloned in the vector pET28a(+), introduced in Eschetichia coli BL21(0E3) and expressed by induction with IPTG, confirming the expression of the Cry1la protein, with molecular weight of approximately 81 kDa. The results demonstrated the bacterial system efficiency on the expression of B. thuringiensis Cry1la protein, which was posteriorly, used on the quantitative bioassays against S. frugipercla and A. grandis larvae, resulting in an extremely toxic protein for both species. This characteristic is exceptionally important for obtaining transgenic cotton plants resistant to these pests

Orientador: Manoel Victor Franco Lemos / Coorientador: Janete Apparecida Disidério Sena / Banca: Marcelo Luiz de Laia / Banca: Cristina Lacerda Soares Petrarolha Silva / Resumo: O controle de pragas da cultura algodoeira pode ser feito utilizando proteínas Cry de Bacillus thuringiensis e para tal, o presente trabalho testou a atividade inseticida de novos isolados de B. thuringiensis frente a larvas neonatas de Spodoptera frugiperda e Anthonomus grandis, resultando em diversos níveis de mortalidade que foram associados a oito diferentes combinações de genes cryl identificados por PCR. O gene crylla (lepidóptero e coleóptero específico) esteve presente na maioria dos isolados, assim como nas linhagens padrões e principalmente nos isolados de maior efetividade para as duas pragas. A partir deste fato, a atividade inseticida de uma nova proteína Cry1 la foi avaliada frente a larvas neonatas de S. frugipercla e A. grandis. O gene crylla completo, previamente obtido por PCR com oligonucleotídeos iniciadores desenhados a partir do gene seqüenciado, foi clonado no vetor pET28a(+), introduzido em Escherichia cor, BL21(DE3) e expresso por indução com IPTG, confirmando a expressão da proteína Cry1la, com peso molecular de aproximadamente 81 kDa. Os resultados demonstraram a eficiência do sistema bacteriano na expressão da proteína Cry1 la de B. thuringiensis, a qual foi, posteriormente, utilizada nos bioensaios quantitativos contra larvas de S. frugiperda e A. grandis, resultando em uma proteína altamente tóxica às duas espécies, característica importante para obtenção de plantas transgênicas de algodão resistentes a estas pragas / Abstract: The control af cotton pests may be done by using Bacillus thuringiensis Cry proteins. For this purpose, the present work tested the insecticidal activity of new B. thutingiensis isolates, in neonate larvae of Spodoptera frugiperda and Anthonomus grandis, resulting in different mortality leveis that were associated to eight different combinations of cry 1 genes identified by PCR. The cry1la gene (specific Lepidoptera and Coleoptera) was present in most of the isolates, as well as in the standard strains and mainly in the isolates with higher affectivity for both pests. Considering this, the insecticidal activity of a new Cryl la protein was evaluated against neonate larvae of S. frugiperda and A. grandis. The complete cry1la gene, previously obtained by PCR with oligonucleotide primers that were drawn based on the sequenced gene, was cloned in the vector pET28a(+), introduced in Eschetichia coli BL21(0E3) and expressed by induction with IPTG, confirming the expression of the Cry1la protein, with molecular weight of approximately 81 kDa. The results demonstrated the bacterial system efficiency on the expression of B. thuringiensis Cry1la protein, which was posteriorly, used on the quantitative bioassays against S. frugipercla and A. grandis larvae, resulting in an extremely toxic protein for both species. This characteristic is exceptionally important for obtaining transgenic cotton plants resistant to these pests / Mestre

Orientadores: Jurandir F. R. Fernandes. João F.C. Azevedo Meyer / Tese (Doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Eletrica / Made available in DSpace on 2018-07-19T23:59:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pessoa_MariaConceicaoPeresYoung_D.pdf: 14502262 bytes, checksum: 2daa1dea882104cd33b5ee91e0d40105 (MD5) Previous issue date: 1994 / Resumo: O objetivo desta tese foi criar um simulador com o intuito de analisar a dinâmica populacional do bicudo do algodoeiro, Anthonomus grandis, interagindo técnicas de simulação de sistemas e de inteligência artificial. Desenvolveu-se um programa de computador, capaz de elucidar e fazer boas interpretações de dados de monitoramento coletados em campos de algodão, sujeito aos Programas de Manejo Integrado de Pragas (MIP). Desse modo, é possível determinar momentos ou períodos críticos, onde a praga pode alcançar o Limiar Econômico e o Nível Econômico de Dano. O programa também indica que tipo de ação pode ser feita para reduzir a população da praga, tais como o uso de inseticida químico seletivo ou a liberação do parasitóide Bracon. O simulador desenvolvido para este trabalho, está apoiado no sistema inseto-planta-meio ambiente encontrados no Brasil (representados pelo Sistema Principal) acoplado a um Sistema Especialista responsável pela decisão de entrada do inseticida seletivo, orientada pelo Programa de Manejo Integrado de Pragas da região. Os fatores bióticos estão apresentados no Sistema Principal através de três modelos matemáticos dinâmicos compartimentais, contendo informações sobre os componentes biológicos (a planta hospedeira, a praga e o parasito), bem como seus respectivos ciclos de vida. O efeito das condições climáticas no ambiente (fatores abióticos físicos) da praga e da planta foi analisado utilizando-se, como parâmetros, as temperaturas máxima e mínima, diárias, aplicadas ao conceito de Constante Térmica. Precipitações pluviométricas diárias, geradas aleatoriamente, foram utilizadas para calcular o efeito dos níveis de chuva. O Sistema Especialista está acoplado ao Sistema Principal e está preparado para iniciar sua operação quando o Limiar Econômico for atingido. A máquina de inferência do Sistema Especialista está baseada no Método do Encadeamento Direto e decisão de tomada de ação é diretamente dependente de diferentes informações ambientais (bióticas e abióticas). O Sistema Principal e o Sistema Especialista são conectados um ao outro, seguindo o conceito de "quadronegro". As questões formuladas pelo Sistema Especialista são respondidas pelo Sistema Principal. A decisão tomada pelo Sistema Especialista é transmitida simultaneamente ao Sistema Principal, dando continuidade à simulação. O simulador foi elaborado em linguagem C da estação de trabalho SUN-OS (ambiente UNIX) / Abstract: The object of the present thesis was to create a simulator in order to analyse the population dynamics of the cotton boll weevil, Anthonomus grandis, interacting simulation systems and artificial intelligence techniques. A computer program capable of elucidating and make good interpretation to monitoring data collected in cotton fields subjected to Insect Pest Management (IPM) Programs was developed also. In this way it would be possible to detennine the critical moments or periods in which the pest can reach the Economic Threshold and Economic Injury Levels. Such a program could also indicate what type of action can be undertaken to reduce the population of this pest insect, such as the usage of selective chemical insecticides or the liberation of Braconid parasites. The simulator developed in this study has two systems: The Brazilian insect-plant-environrnent system (represented by main system) coupled to the expert system, that is responsable to start selective pesticides uses, oriented by the Insect Pest Management Programo The environmental biotic factors are presented in the main system by means of three dynamic mathematical models (cohort type), containing detailed informations about the biological components (the host plant, the pest insect and the parasite), as well as the life cycle of each. The effects of climatic conditions on pest and plant behavior were analysed utilizing, as a parameter, the maximum and minimum daily temperatures applied to the Thermal Constant concept. Daily precipitations generated randomily were utilized to evaluate the effect of rainfalllevels. The expert system is coupled to the main one and is prepared to start operations when the Economic Threshold is reached. The inference machine of the expert system is based on the forward chaining method and the decision is direcdy dependent on the several environrnental informations (biotic and non-biotic). The main and expert systems are connected one to another by means of a "blackboard". The questions asked by the expert system are answered by the main system. The type of decision taken by the first is simultaneously transmitted to the second, and the simulations goes on. This simulator was programmes in C-language in a SUN-OS workstation (UNIX environrnent) / Doutorado / Doutor em Engenharia Elétrica

Orientador: Mohamed E.M. Habib / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-15T07:56:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PierozziJunior_Ivo_M.pdf: 19255101 bytes, checksum: 99efbec8b31e627c7afd941ec4e25b90 (MD5) Previous issue date: 1985 / Resumo: O presente trabalho tem como objetivo revelar aspectos da ecologia de Anthonomus grandis grandis, na região de Campinas, SP, incluindo flutuação populacional durante o ciclo do algodão e na entressafra e ocorrência e eficiência de inimigos naturais. São ainda avaliadas medidas de supressão de populações do inseto pertencentes a programas de Manejo Integrado de Pragas (MIP), bem como a economia de tais medidas. A flutuação populacional do inseto foi estudada durante o ciclo do algodão 1983?84, em duas áreas experimentais, submetidas a programas de MIP que incluíram o uso de plantas iscas, armadilhas de feromônio, aplicação de inseticidas de ação seletiva, além de avaliações semanais de monitoramento. O nível populacional da praga foi avaliado através de três parâmetros: 1. Sintomas de ataque (alimentação e reprodução) do inseto em botões florais, flores e maçãs de algodão; 2. Presença de adultos em plantas; 3. Captura de adultos em armadilhas de feromônio. Tais armadilhas foram também utilizadas nos estudos durante a entressafra. As populações de A. g. grandis, nos campos estudados, apresentaram um padrão de flutuação, durante o ciclo, que acompanhava a disponibilidade dos recursos alimentares e de reprodução, sem no entanto, alcaçar índices no período anterior às colheitas... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: The present study was undertaken in order to reveal some ecological aspects of the cotton boll weevil, Anthonomus grandis Boheman (Coleoptera, Curculionidae), under field conditions in Campinas, State of São Paulo. Population densities of this insect pest, during and between cotton seasons, were estimated. Survey of some natural enemies was realized and their efficiencies were evaluated. Suppressive action was exerted on populations of the boll weevil utilizing Plant Traps and selective insecticides, within an IPM program. Effectiveness and advantages of these two methods were analysed. The research was realized in two separate Experimental Areas. A. g. grandis populations were evaluated through three indicators: 1) feeding and oviposition symptoms in squares, Flowers and bolls, 2) presence of adults on cotton plants, and 3) adults captured in specific pheromone traps. During the cotton season, the populations of this insect pest began to appear at least 6 weeks after cotton plant germination and did not reach any level of economic significance. However, after harvesting, high population densities were detected due to new formation of squares. Destruction of cotton stalks immediately after harvesting is recommended, as a mechanical control method. The weekly applications of Thiodan in the Plant Trap strips, protected the cotton field during approximately two months... Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Ecologia / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Mohamed E. M. Habib / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-19T01:36:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fernandes_WedsonDesiderio_D.pdf: 4849401 bytes, checksum: ec2d16b6c741b574965ba1fca51276fd (MD5) Previous issue date: 1994 / Resumo: Uma extensa lista de trabalhos científicos internacionais pode ser encontrada, enfocando os mais variados aspectos da ecologia de Anthonomus grandis Boheman, 1843. No Brasil, entretanto, muitos estudos ainda necessitam serem realizados para melhor conhecer esta praga, principalmente por ser este um inseto ainda recente no nosso convívio. O presente trabalho foi realizado a partir de três frentes básicas de estudo. Na primeira, foram analisados aspectos da preferência alimentar e de oviposição de A. grandis em relação às estruturas reprodutivas da planta bem como de sua distribuição espacial, em campos sujeitos a Programas de Manejo Integrado e em campos tardios sem qualquer medida de controle para ervas daninhas e artropofauna. As investigações foram realizadas durante o período de 1989 a 1991 e os resultados indicam uma tendência dos bicudos adultos para a alimentação nos botões florais dos terços superior e médio das plantas. As partes inferior e média destas, foram as preferidas para o processo de oviposição. Estes resultados foram obtidos em todos os campos experimentais, com e sem tratamento químico e em cultura isca. Os índices de ataque às estruturas da planta foram mantidos abaixo do nível econômico de dano até o final de janeiro na cultura comercial devido ao tratamento químico. Em campos sem medidas de controle, a população de A. grandis aumentou rapidamente, consumindo intensamente todas as estruturas reprodutivas da planta. Na fase final do desenvolvimento do algodão, quando ocorre uma diminuição dos índices de estruturas por planta, os bicudos adultos tendem a utilizar estas estruturas como sítios de alimentação e oviposição ao mesmo tempo. A presença da cultura isca na bordadura da área comercial foi importante para retardar a entrada dos bicudos adultos, bem como controlar sua população antes do período crítico no algodão comercial. Na segunda parte deste trabalho, foram realizados estudos populacionais de A. grandis em período de entressafra, durante os anos de 1990 e 1991. Os resultados mostraram que os bicudos adultos deixam o campo de acordo com a escassez das estruturas reprodutivas do algodão. Mesmo existindo rebrotas de algodão no campo durante o período de entressafra, somente dois bicudos adultos foram encontrados nas 180 parcelas avaliadas nos dois campos experimentais em 1990 e 1991. A pequena quantidade de rebrotas de algodão no campo não foi suficiente para manter a população de A. grandis no campo. Após a distribuição de capilares de feromônio, pode-se observar um aumento relativamente grande do número de bicudos adultos na área estudada. O maior índice foi observado na avaliação 24 horas após a distribuição de capilares. Com a redução da efetividade do feromônio após 14 dias, e o intenso consumo dos escassos recursos alimentares existentes no campo, os adultos de A. grandis retomaram para as áreas adjacentes. Na terceira parte deste trabalho foi avaliado o impacto de duas medidas de supressão para populações de A. grandis. O potencial biótico de formigas como agentes de controle natural foi avaliado durante a entressafra de 1991 e os resultados da presente pesquisa revelou que 20% dos bicudos adultos oferecidos foram atacados removidos para os ninhos de formiga pertencentes a cinco gêneros: Pheidole, Conomyrma, Tapinoma, Mycocepurus e Solenopsis. Dentre todas as observadas, uma espécie nova de Pheidole foi a responsável por aproximadamente 95% do total de bicudos removidos. A maioria dos bicudos adultos oferecidos nas parcelas de avaliação foram atacados e removidos para o ninho nos primeiros quatro minutos de observação. O efeito deterrente alimentar de extratos vegetais sobre adultos de A. grandis foi analisado no laboratório de entomologia do CNPDA/EMBRAPA no primeiro semestre de 1992. Os resultados obtidos indicaram que três extratos apresentaram altos índices de inibição alimentar. Os maiores índices foram observados para os extratos de Piper nigrum. Os extratos de Melia azedarach e Crocus sativus apresentaram altos índices de deterrência alimentar para os adultos de A. grandis. Uma média de 27.8% + 8,4 dos bicudos avaliados no extrato de pimenta do reino morreram após 48 horas. O extrato de Açafrão também apresentou efeito inseticida, provocando 13.3% + 3.35 de mortalidade / Abstract: Several intemational scientific papers can be found reporting a great variety of ecologica1 aspects of the boll weevil, Anthonomus grandis Boheman, 1843 (Coleoptera, Curculionidae). In Brazil, however, many studies must be still developed in order to permit a better knowledge about this recent1y introduced pest. The present work was undertaken through three basic fronts studies. In the first one, feeding and oviposition preference of A. grandis in plant reproductive structures as well as spatial distribution were analyzed in fields without any control methods . Observations were undertaken ftom 1989 to 1991 and results revealed a tendency of boll weevils adults to feed on squares in the upper and middle regions of the cotton plants The lower and middle part, on the other hand were preferred for oviposition process. These results were observed in all experimental fields with or without chemical treatment and in trapping culture. The infestation rate was maintained below economic injury level until the end of January in commercial monoculture. In fields without control methods, A. grandis population increased rapidly, attack.ing all types of reproductive structures. In the end of cotton season, when reproductive structures decrease, the boll weevil adults utilize these parts as feeding and oviposition sites as well. The trapping plants in the border of commercial fields were considered as very important strategy to delay the boll weevil infestations in the commercial area, as well as for an economic control of its population. In the second study, population of A. grandis in between-season period during 1990-1991 was studied. The results sbowed a populational dispersion of the boll weevil adults, due to the unavailability of reproductive structures. Even when cotton buds where available in fields during this between season, only two adults were found, when 180 samples in two experimental fields during 1990 and 1991 were examined. The small amount of cotton buds wasn't sufficient to maintain A. grandis population in the field. After pheromone lures application, a relative increase of boll weevil number was observed in the area. The highest levei of boll weevil adults was observed in 24 hours evaluation after pheromone distribution. Due to the reduction of pheromonal activity after 14 days, and to the intense consumption of scarce feeding resources, A. grandis adults retumed to their natural refuge. In the third part of this research the efficiency of two control methods was evaluated. The biotic potentiality of ants as natural control agents was determined in 1991 between-season period, and the results revealed that 20% of boll weevil adults offered was attacked and removed to nests of ants pertaining to five genera: Pheidole, Conomyrma, Tapinoma, Mycocepurus and Solenopsis. One new species of Pheidole was responsible for approximately 95% of the total removed boll weevil adults. The majority of adults offered in studied plots was attacked and removed to ant nests in the first four minutes of observation. The feeding deterrent effect of vegetable extracts against A. grandis adults were valuated in the Laboratory of entomology of CNPDA/EMBRAPA, Jaguariuna, SP in 1992. Three extracts showed high feeding deterrent effect. The highest level was observed to Piper nigrum treatment The Melia azedarach and Crocus sativus extracts also showed higb feeding deterrent levei againstA. grandis adults. An average of27,8% + 8,4 of adults subjected to black pepper treatment were died after 48 hours. The crocus extract also showed to be toxic causing 13,3% + 3,35 mortality among A. grandis adults / Doutorado / Doutor em Ciências Biológicas