Brazil is a great producer and consumer of fruits in the world. The soursop (Annona muricata L.) is a fruit with special flavor and aroma and with growing demand for fresh or processed consumption, such as juices, jams, fruit jellies and ice cream. However, the culture of soursop is subjected to the action of different pests and diseases and the application of pesticides has been one of the main ways of control. The present work aims at developing a rapid and low-cost methodology based on matrix solid phase dispersion and high-performance liquid chromatography with diode-array detection (HPLC UV-Vis/DAD) for the determination of pesticide residues of Bifenthrin, Lufenuron, Teflubenzuron, Thiacloprid, Thiophanate-methyl and Thiamethoxam, in the exotic fruit soursop. Some tests conducted with the standards of pesticides allowed the adjustment of the chromatographic conditions for simultaneous analysis of analytes. The best extraction conditions were obtained using 1.0 g of Florisil to 0.5 g of fresh soursop and Elution with 5 mL of Acetonitrile. The miniaturization of the extraction procedure was shown to be efficient in the extraction of pesticides. Analytical validation was performed from the parameters: linearity and sensitivity, with coefficients of determination over 0.9995 and sensitive concentration range of 0.01 -10 g mL-1; selectivity, from the matrix effect studies; accuracy and precision, with recovery values between -118 79% and RSD in the range of 1- 15% for concentration levels 0.1, 0.25 and 0.5 g g-1 (n = 5); and limits of detection and quantification in the intervals of 0.01-0.25 g g-1 and 0.1-0.5 g g- 1, respectively. Metal Organic Frameworks (MOF) [(Nd0, 9Eu0.1)2(DPA)3(H2O)3] was tested as sorbent for the MSPD extraction process and presented satisfactory recovery results (78-87%) compared to those achieved with Florisil. / O Brasil é um importante produtor e consumidor de frutas no mundo. A graviola (Annona muricata L.) é uma fruta de sabor e aroma característicos e com crescente demanda, seja para o consumo in natura ou na forma processada, como sucos, doces, geleias e sorvetes. Todavia, a cultura da graviola está sujeita a ação de diferentes pragas e doenças e a aplicação de agrotóxicos tem sido uma das principais formas de controle. O presente trabalho tem como objetivo o desenvolvimento de uma metodologia rápida e de baixo custo baseada nas técnicas de dispersão da matriz em fase sólida (MSPD) e cromatografia líquida de alta eficiência com detector espectrofotométrico na região do ultravioleta e visível com arranjo de diodos (HPLC UV-Vis/DAD) para a determinação de resíduos dos agrotóxicos bifentrina, lufenuron, teflubenzuron, tiacloprido, tiofanato metílico e tiametoxam, na fruta exótica graviola. Testes realizados com os padrões dos agrotóxicos permitiram o ajuste das condições cromatográficas para análise simultânea dos analitos. As melhores condições de extração foram obtidas utilizando 1,0 g de Florisil para 0,5 g de graviola in natura e eluição com 5 mL de acetonitrila. A miniaturização do procedimento de extração mostrou-se eficiente à extração dos agrotóxicos. A validação analítica foi realizada a partir dos parâmetros: linearidade e sensibilidade, mostrando-se linear com coeficientes de determinação superiores a 0,9995 e sensível no intervalo de concentração de 0,01-10 g mL-1; seletividade, a partir dos estudos de efeito matriz; exatidão e precisão, com valores de recuperação entre 79 -118% e coeficientes de variação na faixa de 1-15 % para os níveis de concentração 0,1; 0,25 e 0,5 g g-1 (n=5); e limites de detecção e quantificação nos intervalos de 0,01 - 0,25 g g-1 e 0,1 - 0,5 g g-1 , respectivamente. O material metal-orgânico (MOF) [(Nd0,9Eu0,1)2(DPA)3(H2O)3] foi testado como adsorvente para o processo de extração por MSPD e apresentou resultados satisfatórios de recuperação (78-87%), comparados àqueles obtidos com o Florisil.

Submitted by Ricardo Cedraz Duque Moliterno (ricardo.moliterno@uefs.br) on 2016-09-15T21:49:15Z No. of bitstreams: 1 Rodrigo Tese Final PDF.pdf: 7598532 bytes, checksum: 876426158d6c8f445be96952d8f7c27b (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-15T21:49:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rodrigo Tese Final PDF.pdf: 7598532 bytes, checksum: 876426158d6c8f445be96952d8f7c27b (MD5) Previous issue date: 2016-03-28 / The use of vegetables with medicinal purposes contributes significantly to the care of the primary needs of assistance to health due to difficult access of the population to medical and pharmaceutical assistance, the high cost of manufactured medications and a tendency for people to use natural origin products. However, technical and scientific information about most of them, particularly with respect to the genotoxic potential, are still insufficient so that the use can be considered safe. In this context, the aim of this study was to evaluate the genotoxic effects of boldo extracts (Plectranthus ornatus) and soursop (Annona muricata), through the comet assay and micronucleus test in human lymphocytes with cytokinesis blocking (MNCtB). The tests were performed on human lymphocyte cultures exposed to the extracts in three concentrations: 1.000?g/ml, 500?g/ml and 250?g/ml. Hydrogen peroxide (1mM) was used as a positive control in the comet assay and vincristine sulfate (1mM) in MNCtB. As a negative control, 40% ethanol was used in both tests. The processing of the material for the comet assay and MNCtB was done according respectively to the protocols Tice et al. (2000) and Fenech (1993). The comet assay was performed in five repetitions being computed, in each of them, 100 comets in a total of two blades. For MNCtB three repetitions were performed and 1.000 binucleate lymphocytes were computed per slide. The occurrence of DNA damage (comet assay) did not differ between the cell of the cultures exposed to different concentrations of boldo extracts from each other nor compared to the negative control. Higher occurrence of micronuclei (MNCtB) was observed in the cell of the cultures treated with the extract at concentrations of 1.000?g/ml and 500?g/ml when compared to the negative control (p<0.05) and cultures treated with the extract concentration of 250?g/ml. The soursop extracts at concentrations of 1.000?g/ml to 500?g/ml induced damage occurrence to the DNA significantly higher than that observed in the negative control and cultures treated with extract at a concentration of 250?g/ml (p<0.001). The conditions in which this study was performed, the obtained results allow concluding that: 1) boldo extracts are not effective in inducing DNA damage, but depending on the concentration, they present clastogenic and/or aneugenic effects; 2) soursop extracts induce DNA damage under certain concentrations. The results of this study strongly raise the achievement of other addressing the issue, so that the actual genotoxic potential of vegetables analyzed here can be established. / O uso de vegetais com fins medicinais contribui de forma significativa para o cuidado das necessidades prim?rias de assist?ncia ? sa?de devido ao dif?cil acesso da popula??o ? assist?ncia m?dica e farmac?utica, aos altos custos dos medicamentos industrializados e ? uma tend?ncia das pessoas a utilizarem produtos de origem natural. No entanto, informa??es t?cnico-cient?ficas acerca da maioria deles, particularmente no que tange ao potencial genot?xico, s?o ainda insuficientes para que o uso possa ser considerado seguro. Neste contexto, o objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos genot?xicos de extratos do boldo (Plectranthus ornatus) e da graviola (Annona muricata), atrav?s do ensaio cometa e do teste de micron?cleo em linf?citos humanos com bloqueio da citocinese (MNCtB). Os testes foram feitos em culturas de linf?citos humanos expostas aos extratos em tr?s concentra??es: 1.000?g/ml, 500?g/ml e 250?g/ml. Per?xido de hidrog?nio (1mM) foi utilizado como controle positivo no ensaio cometa e sulfato de vincristina (1mM) no MNCtB. Como controle negativo foi usado o etanol 40% em ambos os testes. O processamento do material para o ensaio cometa e MNCtB foi feito de acordo, respectivamente, com os protocolos de Tice et al. (2000) e Fenech (1993). O ensaio cometa foi realizado em cinco repeti??es, sendo computados, em cada uma delas, 100 cometas em um total de duas l?minas. Para o MNCtB foram realizadas tr?s repeti??es e computados 1.000 linf?citos binucleados por l?mina. A ocorr?ncia de danos ao DNA (ensaio cometa) n?o diferiu entre as c?lulas das culturas expostas ?s diferentes concentra??es dos extratos do boldo entre si e nem quando comparadas ao controle negativo. Maior ocorr?ncia de micron?cleos (MNCtB) foi observada nas c?lulas das culturas tratadas com os extratos nas concentra??es de 1.000?g/ml e de 500?g/ml quando comparadas ao controle negativo (p<0,05) e ?s culturas tratadas com o extrato na concentra??o de 250?g/ml. Os extratos da graviola nas concentra??es de 1.000?g/ml e 500?g/ml induziram ocorr?ncia de danos ao DNA significativamente maior do que o observado no controle negativo e nas culturas tratadas com extrato na concentra??o de 250?g/ml (p<0,001). Nas condi??es em que este estudo foi realizado, os resultados obtidos permitem concluir que: 1) extratos do boldo n?o s?o efetivos em induzir danos ao DNA, mas na depend?ncia da concentra??o apresentam efeitos clastog?nicos e/ou aneug?nicos; 2) extratos da graviola induzem danos ao DNA sob determinadas concentra??es. Os resultados deste estudo suscitam fortemente a realiza??o de outros abordando o tema, para que o real potencial genot?xico dos vegetais aqui analisados possa ser estabelecido.