published_or_final_version / Botany / Doctoral / Doctor of Philosophy

Thesis (Ph. D.)--University of Hong Kong, 1998. / Includes bibliographical references (leaves 84-200).

Konstanz, Univ., Diss., 2006.

En esta tesis se estudió la biología y la ultraestructura del género Haematococcus pluvialis y se evaluó el contenido lipídico de las células para la obtención de biodiesel. La ultra-estructura general de las células vegetativas es común a muchas Chlorophyceae, sin embargo, la cubierta celular y la configuración absoluta del aparato flagelar presentaron características particulares del género. En este estudio, se propone una nueva interpretación de la cubierta celular, formada por un estrato externo delgado y fibrilar y un estrato interno constituido por vesículas muy próximas entre sí. Además se describe el proceso de formación, en el cual inter-viene el sistema de endomenbranas. Bajo condiciones de culti-vo adversas las células vegetativas formaron cistos. Durante el proceso de enquistamiento las células perdieron movilidad, aumentaron de tamaño, sintetizaron una pared gruesa y acumularon un pigmento llamado astaxantina. La pared celular estuvo compuesta por una capa externa trilaminar de algae-nano, un componente medio formado por material electrónica-mente denso y un componente más interno, formado por dis-tintos estratos de morfología variada. Se describe por primera vez el proceso de germinación de los cistos en H. pluvialis, con particular atención al comportamiento de los distintos componentes de la pared durante este proceso y la liberación de los zooides. Las capas trilaminar y media se rompieron con el incremento de tamaño del cisto, sin embargo, el componen-te interno acompañó la expansión del mismo durante la germi-nación. El diferente proceso de formación de cada uno de los componentes de la pared explicaría el comportamiento distinto de estos, durante el proceso de germinación. Se evaluó el contenido lipídico de H. pluvialis y su posible aplicación en la obtención de biodiesel. Se logaron optimizar las condiciones específicas de cultivo para un crecimiento óptimo y para la síntesis de lípidos bajo condiciones de estrés, duplicando el contenido lipídico en cultivos estresados (35 g de lípidos en 100 g de biomasa) con respecto a los cultivos control. Se evaluaron distintos métodos de extracción lipídica y se realizó la caracterización de los ácidos grasos, siendo la fracción neu-tra la mayoritaria en cultivos control y estresados. El perfil de los ácidos grasos en ambas condiciones de cultivo fue similar y los principales ácidos grasos fueron el palmítico, esteárico, oleico, linoleico, linolelaídico y linolénico. Se obtuvo biodiesel por los métodos convencional de transesterificación y de me-tanol supercrítico. El rendimiento de la reacción de transesteri-ficación por catálisis ácida fue del 70%. Este valor puede con-siderarse aceptable considerando que la materia prima utili-zada, no sólo contenía triglicéridos sino además otros lípidos y pigmentos. A través del método supercrítico fue factible la extracción lipídica utilizando metanol a alta temperatura y presión, como también se efectivizó la transesterificación de los triglicéridos. La calidad lipídica de H. pluvialis indica el potencial que posee esta microalga como materia prima para la obtención de biodiesel. Este estudio provee información de base útil para futuras investigaciones tendientes a buscar las condiciones más adecuadas para mejorar el rendimiento lipídico, la extracción de lípidos y el proceso de obtención de biodiesel. / In this thesis the biology and ultrastructure of the genus Haematococcus pluvialis were studied. The evaluation of lipid content for biodiesel production was also performed. The general ultrastructure of vegetative cells is common to many Chlorophyceae; however, the cell coat and the absolute configuration of the flagellar apparatus showed particular ge-neric characteristics. In this study a new interpretation of the cell coat was proposed. The cell coat consisted of a fibrillar-thin outer layer and an inner one composed of vesicles close together. In addition, its formation process that involved en-domembrane system was described. Under adverse growing conditions, vegetative cells formed cysts. During cyst forma-tion, the cells lost mobility, increased in size, synthesized a thick wall and accumulated a pigment called astaxanthin. The cell wall was composed of a trilaminar outer layer of algaenan, a middle component that was made of electronically dense material and an innermost component, consisting of various layers of varied morphology. The cyst germination process in H. pluvialis was described for the first time. During germination the trilaminar layer broke down, carrying the adjacent secon-dary component, and the extensible tertiary component accompanied the cyst in its size increase and its shape change. Lipid content and its possible application for biodiesel production were evaluated. The optimization of specific culture conditions for optimum growth and lipid synthesis under stress conditions were achieved. The lipid content in stressed cultures doubled (35 g lipid in 100 g biomass) compared with control cultures. Different lipid extraction methods were evaluated and characterization of fatty acids was performed, being major the neutral fraction in both control and stressed cultures. The fatty acid profile in both culture conditions was similar and the main fatty acids were palmitic, stearic, oleic, linoleic, linolenic and linolelaidic acids. Biodiesel by conventional transesterification and supercritical methanol methods was obtained. The yield of the transes-terification reaction by acid catalysis was 70%. This value can be regarded as acceptable considering that the feedstock contained not only triglycerides but also other lipids and pigments. H. pluvialis lipid quality showed the potential of this microalga as a promising feedstock for biodiesel production. This study provides baseline information useful for future researches tending to find more suitable conditions in order to improve lipid yield, lipid extraction and the biodiesel production process.

Presented diploma thesis is focused on the optimisation of Haematococcus pluvialis cultivations in different photobioreactors and on biotechnological production of astaxanthin. Theoretical part summarized the knowledge about optimal growth and production conditions of secondary metabolites. Followed research was focused on actual cultivation systems and on the possibilities of metabolite and nutrient monitoring. In experimental part the growth characteristic of the strain from Březova nad Svitavou (HMP-CCALA 375) was analyzed under optimal cultivation conditions on white and red light. During culture growth the profile and the concentration of carotenoid pigments were determined. The best yield of biomass was achieved in the cultivation on white light (0,939 g/l),carotenoids lutein and -carotene were observed as dominant pigments. In the next experiments optimal growth medium, temperature and light intensity were determined for cultivations of four chosen HMP strains from Germany, America, Africa and Switzerland. The most suitable cultivation medium was found BBM, oppositely the worst results were obtained with BG11. In previous experiments cultivation temperature 22 °C was determined as optimal value for comparative strain HMP – CCALA 375. Selected four strains were cultivated at 22 °C, as well as at 25 °C. Higher temperature was more optimal mainly for Switzerland, German and Africa strains. By analyzing of light intensity influence, it was found that the best increase of biomass was induced by the adaptation of culture on lower illumination (50 µmol photones•m^-2•s^-1) followed by higher light intensity (100 - 150 µmol photones•m^-2•s^-1). HMP from Switzerland showed the best growth results during all cultivation experiments, so this strain could be perhaps useful for industrial production of astaxanthin. In the last part of work, the influence of stress conditions on astaxanthin production by strain from Březova nad Svitavou (HMP – CCALA 375) was studied. Followed stress factors were used: high intensity of light (1 000 µmol photones•m^-2•s^-1), low nitrogen concentration (32,96 mg/l), addition of sodium chloride (0,5%), influence of sodium acetate (2,2 mM) and combination of sodium chloride and sodium acetate (0,5% NaCl, 2mM NaAc). Due to strong illumination (1 000 µmol photones•m^-2•s^-1) the best yield of astaxanthin was obtained (more than 20 mg/g). According to literature [103, 105] significant amount was also observed by addition of sodium acetate (9,2 mg/g). Oppositely minimal astaxanthin production was showed in presence of salt stress (3,8 mg/g). In followed experiments should be studied the influence of stress combinations on HMP – CCALA 375 strain as well as on other suitable strains of H. pluvialis with the aim to achieve the maximal yield of astaxanthin significant for large scale cultivation.

Orientador: Antonio Carlos Monteiro / Banca: Ernani Pinto Júnior / Banca: Eliana Gertrudes Macedo Lemos / Banca: Ana Teresa Lombardi / Banca: Jackson Antonio Marcondes de Souza / Resumo: A microalga Haematococcus pluvialis é conhecida como o microrganismo que apresenta maior rendimento final de astaxantina em sua biomassa, quando submetida a fatores de estresse celular eficientes. Contudo ainda apresenta uma característica de crescimento desfavorável quando comparada a outras espécies de microalgas cultivadas em escala comercial, visto que possui uma taxa de crescimento intrínseca, resultando em baixa densidade celular ao final dos cultivos. Assim, o rendimento final do pigmento é relativamente baixo. Neste sentido, este estudo teve por objetivo avaliar a resposta de Haematococcus pluvialis ao processo de indução à carotenogênese por meio de estresse luminoso e nutricional, e promover o aumento de biomassa vegetativa da microalga através da adição da rizobactéria promotora de crescimento em plantas, Azospirillum brasilense V6, estirpe produtora do fito hormônio AIA (ácido indol - acético), em cultivos estanques, visando obter maior rendimento final de astaxantina. O trabalho foi dividido em duas fases. Primeiramente, no cultivo referente ao controle (contendo apenas H. pluvialis) foram aplicadas duas combinações de fatores de estresse celular para indução a síntese de astaxantina pela microalga, visando a escolha do método de estresse a ser aplicado na fase seguinte. As células de H. pluvialis foram submetidas ao estresse por alta intensidade luminosa (350 μmol photons m-2 s-1) ou ao mesmo estresse luminoso aliado a suplementação com CO2 (4%) na aeração fornecida na fase exponencial de crescimento. Avaliou-se, entre outros fatores de resposta celular, a concentração final de astaxantina na biomassa após 10 dias de estresse. As concentrações do pigmento foram 4,15 e 17,66 mg g-1, respectivamente, para as culturas submetidas ao estresse luminoso e para... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The microalgae Haematococcus pluvialis is known as the microorganism that has a highest final yield of astaxanthin in its biomass, when induced by efficient stress factors. However, still presents a characteristic of unfavorable growth when compared to other species of microalgae grown on a commercial scale, once it has an intrinsic growth rate that provides low cell density in the culture. Thus, the final yield of the pigment is relatively low. Thus, this study aimed to evaluate the response of Haematococcus pluvialis submitted to carotenogenesis induction process through light and nutrient stress, and promotion of vegetative microalgae biomass increase through the addition of the growth promoter bacteria in plants, Azospirillum brasilense V6, a strain that produce the phyto hormone IAA (indole - acetic acid). The experiments were performed in "batch" systems, aiming to obtain higher final yield of astaxanthin. The work was divided into two phases. First, to the control (containing only H. pluvialis) it was applied two combinations of stress factors to induce cellular synthesis of astaxanthin by the microalgae, to define the method of stress to be applied in the next phase. The cells of H. pluvialis were submitted to stress by high light intensity (seven times the original) or the same light stress combined with CO2 supplementation (4%) in the aeration provided in the exponential growth phase. We evaluated, among other factors of cellular response, the final concentration of astaxanthin in the biomass after 10 days of stress. The pigment concentrations were 4.15 and 17.66 mg g-1, respectively, for cultures submitted to light stress and to those who received the same light stress add with the increase of C / N ratio in the culture medium. So, for the next experimental phase, the combination... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:54Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-10-27Bitstream added on 2014-06-13T20:24:21Z : No. of bitstreams: 1 nunes_m_dr_jabo.pdf: 789915 bytes, checksum: d33780e723c4af1036139660c9582f18 (MD5) Bitstreams deleted on 2016-10-27T11:27:29Z: 000681810.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-10-27T11:28:04Z : No. of bitstreams: 1 000681810.pdf: 562297 bytes, checksum: 2a5bb2ece78e1bfaa1bd6aca60814546 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A microalga Haematococcus pluvialis é conhecida como o microrganismo que apresenta maior rendimento final de astaxantina em sua biomassa, quando submetida a fatores de estresse celular eficientes. Contudo ainda apresenta uma característica de crescimento desfavorável quando comparada a outras espécies de microalgas cultivadas em escala comercial, visto que possui uma taxa de crescimento intrínseca, resultando em baixa densidade celular ao final dos cultivos. Assim, o rendimento final do pigmento é relativamente baixo. Neste sentido, este estudo teve por objetivo avaliar a resposta de Haematococcus pluvialis ao processo de indução à carotenogênese por meio de estresse luminoso e nutricional, e promover o aumento de biomassa vegetativa da microalga através da adição da rizobactéria promotora de crescimento em plantas, Azospirillum brasilense V6, estirpe produtora do fito hormônio AIA (ácido indol – acético), em cultivos estanques, visando obter maior rendimento final de astaxantina. O trabalho foi dividido em duas fases. Primeiramente, no cultivo referente ao controle (contendo apenas H. pluvialis) foram aplicadas duas combinações de fatores de estresse celular para indução a síntese de astaxantina pela microalga, visando a escolha do método de estresse a ser aplicado na fase seguinte. As células de H. pluvialis foram submetidas ao estresse por alta intensidade luminosa (350 μmol photons m-2 s-1) ou ao mesmo estresse luminoso aliado a suplementação com CO2 (4%) na aeração fornecida na fase exponencial de crescimento. Avaliou-se, entre outros fatores de resposta celular, a concentração final de astaxantina na biomassa após 10 dias de estresse. As concentrações do pigmento foram 4,15 e 17,66 mg g-1, respectivamente, para as culturas submetidas ao estresse luminoso e para... / The microalgae Haematococcus pluvialis is known as the microorganism that has a highest final yield of astaxanthin in its biomass, when induced by efficient stress factors. However, still presents a characteristic of unfavorable growth when compared to other species of microalgae grown on a commercial scale, once it has an intrinsic growth rate that provides low cell density in the culture. Thus, the final yield of the pigment is relatively low. Thus, this study aimed to evaluate the response of Haematococcus pluvialis submitted to carotenogenesis induction process through light and nutrient stress, and promotion of vegetative microalgae biomass increase through the addition of the growth promoter bacteria in plants, Azospirillum brasilense V6, a strain that produce the phyto hormone IAA (indole - acetic acid). The experiments were performed in “batch” systems, aiming to obtain higher final yield of astaxanthin. The work was divided into two phases. First, to the control (containing only H. pluvialis) it was applied two combinations of stress factors to induce cellular synthesis of astaxanthin by the microalgae, to define the method of stress to be applied in the next phase. The cells of H. pluvialis were submitted to stress by high light intensity (seven times the original) or the same light stress combined with CO2 supplementation (4%) in the aeration provided in the exponential growth phase. We evaluated, among other factors of cellular response, the final concentration of astaxanthin in the biomass after 10 days of stress. The pigment concentrations were 4.15 and 17.66 mg g-1, respectively, for cultures submitted to light stress and to those who received the same light stress add with the increase of C / N ratio in the culture medium. So, for the next experimental phase, the combination... (Complete abstract click electronic access below)

Submitted by Programa de Pós-graduação em Biotecnologia (mebiotec.ufba@gmail.com) on 2017-04-04T12:10:12Z No. of bitstreams: 1 Dissertação final - Cintia.pdf: 2438772 bytes, checksum: 38cb68fae42cf11ebe768c50e9cb479b (MD5) / Approved for entry into archive by Delba Rosa (delba@ufba.br) on 2017-07-03T15:46:44Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação final - Cintia.pdf: 2438772 bytes, checksum: 38cb68fae42cf11ebe768c50e9cb479b (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-03T15:46:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação final - Cintia.pdf: 2438772 bytes, checksum: 38cb68fae42cf11ebe768c50e9cb479b (MD5) / As microalgas representam um grupo extremamente diversificado capaz de sobreviver e proliferar em um amplo espectro ambiental. Isto é refletido em sua diversidade e capacidade de modificar o seu metabolismo de forma eficiente em resposta a mudanças ambientais. Além disso, podem ser consideradas verdadeiras fábricas fotossintéticas, sendo fontes potenciais de uma vasta gama de bioprodutos. Dentre os produtos de alto valor agregado e de interesse biotecnológico estão os pigmentos carotenóides que são matérias-primas para indústria farmacêutica, de suplementos alimentares e de cosméticos. Dunaliella salina e Haematococcus pluvialis são exemplos de microalgas com grande potencial de síntese de carotenóides como β-caroteno e astaxantina, respectivamente e, quando submetidas a condições estresse acumulam grandes quantidades no interior das células. Neste trabalho duas espécies de microalgas foram submetidas às condições de estresse por deficiência de nitrogênio e estresse luminoso, com intuito de avaliar a produção dos pigmentos carotenóides em cada condição. Além disso, nosso objetivo também foi conhecer o perfil protéico dessas microalgas em cada condição de estresse a partir de análises por SDS-PAGE. A partir dos resultados, concluiu-se que a privação do nitrogênio no meio de cultura limitou o crescimento das duas microalgas. A microalga D. salina atingiu elevadas concentrações celulares quando cultivada em elevada intensidade luminosa. No entanto, o mesmo não foi observado para microalga H. pluvialis, onde a exposição continua a alta luminosidade atuou de forma negativa ao aumento do número de células. Em relação ao conteúdo de beta-caroteno e astaxantina, a luz contribuiu de forma significativa para o aumento da produção dos pigmentos nas microalgas. No entanto, com privação do nitrogênio no meio, resultou em um menor número de células, consequetemente, a produção de pigmentos pode ter sido influenciada por este fator. Porém, foi observado microscopicamente e visualmente, que a ausência desse elemento possibilitou a produção mais rápida do pigmento nas células, resultando na mudança precoce da cor do cultivo. Avaliando a expressão das proteínas nas microalgas submetidas as condições de estresse, foi observado uma variação de bandas nas diferentes culturas. A expressão de certas proteínas HSPs com diferentes pesos moleculares foi apontada como possível resposta da D. salina e H. puvialis às condições ambientais analisadas. / Microalgae represent an extremely diverse group that can survive and proliferate in a broad spectrum environment. This is reflected in its diversity and ability to modify the metabolism effectively in response to environmental changes. Furthermore, they can be considered true photosynthetic plants, and potential sources of a wide range of byproducts. Among the products of high assembled value and biotechnological interest are the carotenoid pigments that are raw materials for pharmaceuticals, food supplements and cosmetics. Dunaliella salina and Haematococcus pluvialis microalgae are species with potential for the synthesis of carotenoids such as β-carotene and astaxanthin, respectively, and when subjected to stress conditions accumulate large quantities inside the cells. In the present study two species of microalgae were submitted to stress conditions of nitrogen deficiency and light stress, in order to assess the production of carotenoid pigments in each condition. In addition to that, we aimed to know the protein profile of these microalgae in each stress condition from analyzes by SDS-PAGE. From the results it was concluded that the absence of nitrogen in the culture medium limited the growth of both microalgae. The microalgae D. salina reached high cell concentrations when growing in high light intensity. However, this was not observed for microalgae H. pluvialis, since continuous exposure to high brightness limited cell growth. Regarding the content of beta-carotene and astaxanthin, the light has significantly contributed to the increased production of microalgae pigment. However, the deprivation of nitrogen in the medium resulted in a smaller number of cells, consequently, production of pigments may have been influenced by this factor. Although, it was observed visually and microscopically, that the absence of this element enabled faster production of the pigment in cells, resulting in premature color change of the crop. Assessing the protein expression of microalgae subjected to stress conditions, it was revealed a variation in bands in different cultures. The expression of certain HSPs proteins with different molecular weight was highlighted as possible response of D. salina and H. puvialis to the analyzed environmental conditions.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2017-10-20T14:19:41Z No. of bitstreams: 1 Ana Paula Felipe dos Santos.pdf: 781799 bytes, checksum: c9b604f7dd3deeeb5abbf59688ec9a86 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-20T14:19:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ana Paula Felipe dos Santos.pdf: 781799 bytes, checksum: c9b604f7dd3deeeb5abbf59688ec9a86 (MD5) Previous issue date: 2016-06-07 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The Haematococcus pluvialis microalgae species is able to accumulate pigments (chlorophylls a and b, carotenoids –astaxanthin, β-carotene and lutein) with high value and commercial use when subjected to stress conditions, such as types of culture medium. The work aimed to study the growth of H. pluvialis and identify chlorophylls and carotenoids present in the cells, from the use of different culture medium. Six treatments were performed and different means were evaluated: Provasoli, Provasoli I modified, Provasoli II modified, KM1, MM2 and Guillard, all with three replications. The experimental units were conditioned in flasks with a volume of 2 liters, treated fresh water and enriched their culture medium. The microalgae were inoculated with an initial concentration of 1 x 105 cél.mL-1 and the treatments maintained at a temperature of 24 ± 1 ° C, photoperiod and light intensity integral 4000 lux. The assessment of growth, crop samples were taken and held daily counts by light microscopy. Growth curves were prepared for each treatment and the obtained values of the maximum cell density, culture time and the growth rate. For quantification of the pigments, samples of 2 ml were collected daily treatments, treated with 80% acetone in order to then be performed by reading the absorbance spectrophotometer. From the results of absorbances were calculated concentrations of chlorophyll a, chlorophyll b, total chlorophyll and total carotenoids. For data analysis was used Cochran, Shapiro-Wilk, ANOVA and Tukey test (P <0,05). The statistical results showed that there was significant difference (P <0,05) between treatments for maximum cell density, which was higher (21,42 ± 7,84 x 105 cél.mL-1) when using the medium Provasoli I modified, followed by Provasoli and Provasoli II modified means. Regarding pigments, significant differences (P <0,05) were observed for the concentration of chlorophyll b, total chlorophyll and total carotenoids, which were higher in the treatments used the Provasoli I modified, means Provasoli II modified and Provasoli. However, no significant differences were observed (P> 0,05) for chlorophyll a. For these experimental conditions suggest the use of the medium Provasoli I modified, so as to obtain a higher cell density and concentration of pigments of microalgae H. pluvialis. / A espécie Haematococcus pluvialis é uma microalga capaz de acumular pigmentos (clorofilas a e b, carotenoides –astaxantina, β-caroteno e luteína) com alto valor e uso comercial, quando submetida a condições de estresse, tal como, tipos de meios de cultura. O trabalho teve como objetivo estudar o crescimento de H. pluvialis e identificar clorofilas e carotenoides presentes nas células, a partir da utilização de diferentes meios de cultura. Seis tratamentos foram realizados e os diferentes meios foram avaliados: Provasoli, Provasoli modificado I, Provasoli modificado II, KM1, MM2 e Guillard, todos com três repetições. As unidades experimentais foram condicionadas em erlenmeyers com volume útil de 2 litros, água doce tratada e enriquecida com os respectivos meios de cultura. A microalga foi inoculada com a concentração inicial de 1 x 105 cél.mL-1 e os tratamentos mantidos a temperatura de 24 ± 1°C, fotoperíodo integral e intensidade luminosa de 4000 lux. Para avaliação do crescimento, foram retiradas amostras das culturas e realizadas contagens diárias em microscópio óptico. Foram elaboradas curvas de crescimento para cada tratamento e obtidos os valores da densidade celular máxima, tempo de cultivo e a velocidade de crescimento. Para quantificação dos pigmentos, amostras de 2mL foram coletadas dos tratamentos diariamente, tratadas com acetona a 80%, para em seguida ser realizada a leitura das absorvâncias através de espectrofotômetro. A partir dos resultados das absorvâncias foram calculadas as concentrações de clorofila a, clorofila b e carotenoides totais. Para análise dos dados utilizou-se Cochran, Shapiro-Wilk, ANOVA e teste de Tukey (P<0,05). Os resultados estatísticos mostraram que houve diferença significativa (P<0,05) entre os tratamentos para a densidade celular máxima, que foi mais alta (21,42 ± 7,84 x 105 cél.mL-1) quando utilizado o meio Provasoli modificado I, seguido dos meios Provasoli e Provasoli modificado II. Com relação aos pigmentos, diferenças significativas (P<0,05) foram observadas para a concentração de clorofilas b e total, carotenoides totais, que foram maiores nos tratamentos utilizado os meios Provasoli modificado I, Provasoli modificado II e Provasoli. Contudo, não foram observadas diferenças significativas (P>0,05) para concentração de clorofila a. Para estas condições experimentais sugere-se o uso do meio Provasoli modificado I, para assim obter uma maior densidade celular e concentração de pigmentos da microalga H. pluvialis.

Desarrollo de una estrategia de negocio para la producción de Astaxantina (que es un pigmento de alto valor comercial) a partir del cultivo de la microalga Haematococcus Pluviales (la cual tiene un costo de producción bajo), para su uso en la industria del Salmón. Dado que la tecnología usada es nueva, no existen estudios acabados del mercado por lo cual el estudio se delimitará a la factibilidad de producción y comercialización de Astaxantina a partir de Haematococcus pluviales. Los objetivos planteados para el estudio son: 1. Identificar las tecnologías de producción de Astaxantina, con el objeto de cuantificar la inversión necesaria y los costos de producción. 2. Desarrollar un estudio de mercado, que nos permita conocer la oferta y demanda actual de este pigmento, tanto nacional como extranjera. 3. Evaluar la factibilidad de producir Astaxantina a partir de Haematococcus pluvialis. La metodología a usar consistirá en desarrollar un análisis FODA., analizando el entorno, las fuerzas competitivas, organización Industrial, sistema del valor, ciclo de vida y medio ambiente. Los resultados esperados serían: determinar el proceso de producción, cuantificar la inversión y ver la factibilidad económica del cultivo, para definir un proyecto rentable, que sea atractivo a posibles inversionistas, lo cual le permita obtener el financiamiento. Hoy en día la industria de los Alimentos y Cosmética está usando en forma más intensiva pigmentos, ya sean artificiales o naturales. El pigmento más usado para pigmentar cosméticos y más importantes para la coloración de salmónidos es la Astaxantina, la cual, en Chile, es un 95% es de origen importado y un 75% de esta es sintética. El estudio se enfocará en la industria del Salmón, dado que el mercado Nutraséutico y de Cosmética exige otro tipo de calidades, tecnologías, certificaciones y su estudio tomaría un tiempo no disponible. Haematococcus Pluvialis es una microalga de agua dulce y de la cual podemos obtener el pigmento rojizo denominado Astaxantina. Se estima que el mercado global para la Astaxantina (natural y sintética), asociada a la salmonicultura, asciende a US$ 370 millones y en términos de volumen, la oferta de productos ricos en Astaxantina a escala mundial está situada en el orden de las 4.645 toneladas por año. En Chile las importaciones de Astaxantina fueron de US$ 101 millones el año 2006, lo que equivale a 1.268 toneladas al año de productos con concentraciones entre 3% a 8% de Astaxantina. El precio de la Astaxantina importada pura puede estar entre US$ 1.428 y US$ 1.748 (FOB) por Kilogramo, con un precio de venta estimado de 2.000 a 2.500 dólares el Kg. Podemos concluir que la rentabilidad del proyecto a 10 años debería interesar a los inversionistas, ya que presenta una TIR bastante alta de 36,7%, y un VAN interesante de US$ 3,0 millones (con un costo de capital de 15%), considerando una inversión de US$ 1,2 millones y captando sólo el 5% del mercado. Los aspectos financieros nos dicen que es un negocio rentable, por lo cual se deben asegurar los aspectos técnicos, para poder obtener la producción descrita. Se deben realizar visitas a los fabricantes de alimentos y centros de cultivos de salmones, para conocer en detalle los estudios necesarios y las restricciones que pondrían cada uno de ellos al uso de nuestro producto. Actualmente existen al menos uno o dos centros que lo han logrado, por lo cual es fundamental crear sinergias con los actuales actores nacionales para lograr desplazar los productos importados.