Submitted by Alessandra Portugal (alessandradf@ioc.fiocruz.br) on 2013-09-17T11:35:25Z No. of bitstreams: 1 Tese Danielle Versao Final.pdf: 5521521 bytes, checksum: bcd4e1200342929a6452f7261e7193ee (MD5) / Made available in DSpace on 2013-09-17T11:35:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese Danielle Versao Final.pdf: 5521521 bytes, checksum: bcd4e1200342929a6452f7261e7193ee (MD5) Previous issue date: 2011-08-31 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Estudos anteriores demonstraram que macrófagos de pacientes lepromatosos possuem um fenótipo regulador que contribui para a imunossupressão observada na hanseníase. IDO, CD86 e HLA-DR são moléculas altamente expressas por macrófagos de pacientes lepromatosos, como também o receptor “scavenger” CD163, regulado pela IL-10. Este trabalho foi realizado com o intuito de analisar a expressão de CD163 nas lesões cutâneas de pacientes polares da hanseníase e em monócitos infectados pelo Mycobacterium leprae (ML). Observamos um aumento de macrófagos CD163+IDO+ nas lesões e nas células isoladas do infiltrado inflamatório de pacientes LL. Ademais, durante o período de cultura de 6 dias dos macrófagos isolados das lesões lepromatosas, houve uma gradativa redução da expressão gênica de CD163, IDO e IL-10, assim como dos receptores de superfície CD163, CD209, HLA-DR, CD86 e CD14 observada por citometria de fluxo, fato que ocorreu concomitantemente com a saída de ML destas células. A expressão de células CD163+IDO+CD209+ aumentou em monócitos de indivíduos saudáveis, estimulados com ML irradiado obtido de extratos de lesão. Adição de citocalasina B na cultura de monócitos reduziu a expressão de CD163 nessas células, e, na presença de anti- CD163, a entrada de bactérias nos monócitos também foi reduzida. A adição da anti- IL-10 em cultura de monócitos de indivíduos sadios reduziu a expressão de CD163 até mesmo na presença do ML. Além disso, os níveis séricos de sCD163, IL-10 e heme estavam aumentados nos pacientes lepromatosos, em comparação com pacientes tuberculóides e indivíduos sadios, assim como os depósitos intracelulares de ferro. Estes resultados sugerem que o perfil de expressão de CD163 é importante na endocitose e sobrevivência do ML no polo lepromatoso da hanseníase. / According to prior studies, macrophages from lepromatous patients present a regulatory phenotype that contributes to the immunosuppression observed in the disease. IDO, CD86, and HLA-DR molecules are highly expressed by macrophages from lepromatous patients, as well the scavenger receptor CD163, regulated by IL- 10. The purpose of this study was to analyze CD163 expression on polar leprosy skin lesions and monocytes infected by Mycobacterium leprae. We observed an increased number of CD163+IDO+ in the lesions and cells isolated from the inflammatory infiltrate of LL patients. Moreover, during the 6-day culture of macrophages isolated from lepromatous lesions, the gene expression of CD163, IDO and IL-10 and the surface receptors CD163, CD209, HLA-DR, CD86, CD14 presented a gradual decrease, as shown by flow cytometry, simultaneously with the output of ML from these cells. The expression of IDO+CD163+CD209+ cells was augmented in monocytes from healthy individuals, stimulated with irradiated ML, obtained from extracts of lesion. The addition of cytochalasin B to monocyte culture reduced the expression of CD163 in these cells, and, in presence of anti-CD163, the bacterial input into monocytes was also reduced. The addition of anti-IL-10 in monocyte culture from healthy individuals led to a decrease at the expression of CD163, even in presence of ML. Besides, serum levels of sCD163, IL-10 and heme were increased in lepromatous patients, when compared to tuberculoid patients and healthy controls, while intracellular iron deposits were also augmented. These results suggest the relevance of CD163 expression profile for endocytosis and also for the survival of ML itself in lepromatous patients.

JESUS, Luciano Augusto Oliveira de. Produção de IFN-Y em pacientes com hanseníase e em seus contactantes numa amostra populacional do município de Sobral-Ceará. 2007. 96 f. Dissertação (Mestrado em Microbiologia Médica) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2007. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-01-05T13:09:34Z No. of bitstreams: 1 2007_dis_laojesus.pdf: 935043 bytes, checksum: 479087f2722a2585b7c5e90f41bdaeb4 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-02-02T16:26:31Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2007_dis_laojesus.pdf: 935043 bytes, checksum: 479087f2722a2585b7c5e90f41bdaeb4 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-02-02T16:26:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2007_dis_laojesus.pdf: 935043 bytes, checksum: 479087f2722a2585b7c5e90f41bdaeb4 (MD5) Previous issue date: 2007 / Leprosy, which is caused by Mycobacterium leprae, is an illness of ample clinical and immunopathological spectrum. Its clinical manifestations are correlated with distinct immunologic form, varying from a vigorous immune response mediated by cells to M. leprae, with type 1 standard in the tuberculóide polar region, to an absence of specific cellular response to antigens of M. leprae in the lepromatous polar region, with predominance of type 2 response and exacerbations of humoral response. The capacity of whole M. leprae antigen to stimulate peripheral blood mononuclear cell (PBMC) in the IFN-y production was measured in leprosy patients and their household’s contacts, in the city of Sobral, state of Ceará. A total of 30 leprosy patients were used for the study, before start chemotherapy. The paucibacilary leprosy patient group consisted of eight polar indeterminate, ten polar tuberculóide, two borderline tuberculóide, and the multibacilary leprosy patient group consisted of ten lepromatous leprosy and two borderline lepromatous leprosy. The household contacts group consisted of sixty healthy individuals, consanguineous and non consanguineous. The whole M. leprae antigen stimulated IFN-y production in the PBMC of seven borderline tuberculóide/tuberculóide (DT/TT), three indeterminate form, two borderline lepromatous/lepromatous (DV/VV the DT/TT group produced IFN-y levels significantly higher than DV/VV group (Fisher Test, p=0,027). The IFN-y production in the household contacts was observed in 34, 21 consanguineous and 13 non consanguineous. It wasn’t observed significant difference between paucibacilary household’s contacts (DT/TT, indeterminate form) and multibacilary household’s contacts groups in the IFN-y production to whole M. leprae antigen. However, it was observed significant difference in the production of these cytokine between household contacts and DV/VV patients. This study suggests that there wasn’t significative difference in the production IFN-y between non consanguineous and consanguineous subjects of the paucibacilary and multibacilary cases. Moreover, at correlacionated the production in these cytokine in the subjects with the presence of scar, we didn’t observed significative difference too. / A hanseníase, cujo agente etiológico é o Mycobacterium leprae, é doença de amplo espectro clínico e imunopatológico. Suas apresentações clínicas estão correlacionadas com padrões imunológicos distintos, variando de uma vigorosa resposta imune mediada por células ao M. leprae, com padrão tipo 1 no polo tuberculóide, a uma ausência de resposta celular específica aos antígenos do M. leprae no pólo lepromatoso, com predomínio de resposta tipo 2 e exacerbação da resposta humoral. A capacidade do antígeno bruto de M. leprae em estimular células mononucleares do sangue periférico (PBMC) na produção de IFN-y foi avaliada em pacientes com hanseníase e em seus contactantes, do município de Sobral-CE. Um total de 30 casos foi estudado, antes de receberem tratamento poliquimiterápico. O grupo de casos paucibacilares foi constituído por oito com a forma indeterminada, dez com a forma tuberculóide, dois com a forma dimorfo tuberculóide; e o grupo multibacilar foi constituído por dez com a forma virchoviana e dois com a forma dimorfa virchoviana. O grupo de contactantes foi constituído por sessenta indivíduos, sendo 1 consangüíneo e 1 não consangüíneo para cada caso índice. O antígeno bruto de M. leprae estimulou a produção de IFN-y nas PBMC de sete casos dimorfo tuberculóide/tuberculóide (DT/TT), três com a forma indeterminada e dois com a forma dimorfa virchoviana/virchoviana (DV/VV). O grupo DT/TT produziu níveis de IFN-y significantemente maiores que o grupo DV/VV (Teste de Fisher, p=0,027). A produção de IFN-y nos contactantes foi observada em 34 indivíduos, 21 consangüíneos e 13 não consangüíneos. Não foi observada diferença significativa entre os contactantes do grupo paucibacilar (forma indeterminada, DT/TT) e multibacilares (DV/VV). Porém, foi observada diferença significativa na produção desta citocina entre contactantes e casos DV/VV. O estudo sugere que não há diferença significativa na produção de IFN-y entre indivíduos contactantes consangüíneos e não consangüíneos, dos casos paucibacilares e multibacilares. Além disso, ao correlacionarmos a produção desta citocina nos indivíduos com a presença de cicatriz, também não observamos diferença significativa.

Made available in DSpace on 2016-04-07T13:23:13Z (GMT). No. of bitstreams: 2 andre_dias_ioc_dout_2015.pdf: 3243109 bytes, checksum: d7bd8cfe053e4a7e858a6c96fc09cceb (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2015 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Mycobacterium leprae, agente etiológico da hanseníase, expressa em abundância uma proteína catiônica semelhante às histonas, denominada Hlp, presente tanto no envelope como no nucleóide bacteriano. O reconhecimento do DNA bacteriano, rico em motivos CpG não metilados, pelo receptor TLR-9 representa uma importante via para a ativação da resposta imune inata, a qual pode levar à eliminação do agente infeccioso ou mediar manifestações patológicas. Foi mostrado ainda que complexos DNA-histona são mais potentes agonistas de TLR-9 que DNA sozinho. Assim, o presente trabalho teve como objetivo investigar o envolvimento do receptor TLR-9 na ativação da resposta imune do hospedeiro durante o curso da infecção pelo M. leprae. Inicialmente foi analisada a participação do TLR-9 na ativação da resposta imune inata em células epiteliais alveolares da linhagem A549 após estímulo com M. leprae. M. leprae foi capaz de induzir aumento das quimiocinas IL-8 e MCP-1 e a transcrição gênica do peptídeo antimicrobiano H\F062D-2 nas células epiteliais. O aumento da expressão de CD80 na superfície celular também foi observada após estímulo com o bacilo. O complexo CpG-Hlp micobacteriano solúvel também induziu aumento na produção de IL-8 nas células A549. Foi observado que o aumento de IL-8 induzido pelo M. leprae ocorre de forma dependente da translocação nuclear do NF-\F06BB e que o antagonista sintético de TLR-9 afetou a secreção de IL-8 induzida pelo M. leprae. A adição de CpG ao M. smegmatis selvagem, mas não mutante para o gene hlp, aumentou a produção de IL-8 pelas células epiteliais Em conjunto, esses dados sugerem que as células epiteliais respiratórias podem reconhecer M. leprae via TLR-9 e, assim, participar da resposta imune inata no sítio inicial da infecção. Uma vez que o aparecimento do eritema nodoso hansênico (ENH) está associado a liberação massiva de antígenos micobacterianos, foi investigado o envolvimento do TLR-9 na patogênese do ENH. Neste sentido, foi verificado o aumento da expressão de TLR-9, tanto em lesões de pele como em células mononucleares periféricas de pacientes reacionais, quando comparados com pacientes não reacionais. Posteriormente foram quantificados os níveis de ligantes de TLR-9 na circulação dos pacientes. Além de DNA de M. leprae, altos níveis de Hlp foram detectados no soro de pacientes reacionais. Como o TLR-9 também reconhece DNA endógeno, os níveis circulantes do complexo DNA-histona humano foram quantificados e observou-se um aumento destes complexos no soro de pacientes reacionais. Demonstramos que PBMCs de pacientes reacionais secretam níveis aumentados das citocinas TNF-\F061, IL-6 e IL-1\F062 em resposta ao complexo CpG-Hlp em comparação a pacientes não reacionais e indivíduos sadios. Finalmente, o antagonista sintético de TLR-9 inibiu a secreção das citocinas pelas PBMCs em resposta ao lisado de M. leprae. Em conjunto, esses resultados sugerem um importante envolvimento do receptor TLR-9 no processo inflamatório desencadeado no ENH abrindo perspectivas para novas abordagens imunoprofiláticas e terapêuticas / Mycobacterium leprae , etiological agent of leprosy, expresses in abundance a cationic protein similar to histones, called histone - like protein ( Hlp ) , present in the envelope as well as in bacterial nucleoid. The r ecognitio n of bacterial DNA rich in unmethylated CpG motifs by TLR - 9 is an important pathway for activation of the innate immune response, which can lead to the elimination of the infectious agent or mediate pathological manifestations. Moreover, studies showed tha t DNA - histone complexes are mor e potent agonists of TLR - 9 than DNA alone . This study aimed to investigate th e involvement of TLR - 9 in the activation of the host immune response d urin g the course of M. leprae infection. Initially, we analyzed the participat ion of TLR - 9 activation on the innate immune response in A549 alveolar epithelial cells after stimulation with M. leprae . It was shown that M. leprae was able to induce the chemokines I L - 8 and MCP - 1 , and gene transcription of antimicrobial peptide H  D - 2 in epithelial cells. T he increase of CD80 expression on the cell surface was also observed after stimulation with bacillus. Soluble mycobacterial CpG - Hlp complex also induced an increase in IL - 8 in A549 cells. It was observed that the increase of IL - 8 , induc ed by M. leprae , occurs dependently nuclear translocation of NF -  B and synthetic TLR - 9 antagonist affected IL - 8 secretion induced by M. leprae . T he addition of CpG to wild type M. smegmatis , but not to the mutant gene hlp , increased IL - 8 production by epit helial cells. A s a whole , t he se results suggest that respiratory epithelial cells can recognize M. leprae via TLR - 9 and thus participate in the innate immune response in the initial infection site. Since the appearance of erythema nodosum leprosum (ENL) is associated with the massive release of mycobacterial antigens , it was investigated the involvement of TLR - 9 in the pathogenesis of ENL. In this sense, we observed an increase in expression of TLR - 9, both in skin lesions and peripher al mononuclear cells of ENL patients, when compa red with non reactional patients. Subsequently, we measured the levels of TLR - 9 ligands in the circulation of patients. In addition to M. leprae DNA , high levels of Hlp were detected i n the seru m of ENL patients . As TLR - 9 also recog nize s endogenous DNA, circulating levels of the human DNA - histone complex were quantified , and we also observed an increase of these complexes in the serum of ENL patients. Furthermor e, PBMCs from ENL pa tients secreted elevated levels of TNF -  , IL - 6 and IL - 1  cytokines in response to CpG - Hlp complex , when compared to nonreactional patients and healthy individuals. F inally, synthetic antagonist of TLR - 9 inhibited the secretion of cytokines by P BMCs in respo nse to M. leprae lysates . The results described in t he second part of the study suggest a major involvement of TLR - 9 receptor in the inflammatory process triggered in ENL , opening up prospects for new immunoprophylactic and therapeutic approaches.

Made available in DSpace on 2016-05-16T12:57:59Z (GMT). No. of bitstreams: 2 pedro_silva_ioc_mest_2016.pdf: 1919123 bytes, checksum: 819b6d80dd4622a4af7c53113c7ccc3d (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2016 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / O Erythema Nodosum Leprosum (ENL) é um quadro de inflamação aguda súbita que afeta predominantemente pacientes do polo lepromatoso (LL) da hanseníase, podendo ocorrer antes, durante ou após a poliquimioterapia, sendo responsável por grande parte das incapacidades físicas associadas à doença. Não está totalmente esclarecido quais fatores são responsáveis desencadeamento do ENL. Alguns dados mostram que no ENL ocorre aumento da mobilização de neutrófilos para as lesões de pele, ativação de macrófagos e linfócitos T, juntamente com o aumento na secreção dos níveis séricos de TNF e IL-1\F062. Com o intuito de aprofundar os conhecimentos em torno da participação dos linfócitos T na patogênese na hanseníase lepromatosa e do ENL, no presente trabalho realizamos a caracterização ex vivo e in vitro em resposta ao estímulo com M. leprae de subpopulações de linfócitos T obtidas do sangue periférico de pacientes LL com ou sem ENL, bem como a avaliação da ação funcional destas subpopulações mediante a análise da frequência destas células produtoras das citocinas IFN-\F067, TNF e IL-10, por citometria de fluxo multiparamétrica. Ademais, fizemos análise da expressão de genes que codificam os fatores de transcrição críticos para a diferenciação de linfócitos T por meio da reação em cadeia da polimerase quantitativa em tempo real (qRT-PCR). Voluntários sadios de área endêmica para a hanseníase foram incluídos em nosso estudo. Dentre os resultados obtidos, destacamos o aumento significativo na frequência de linfócitos T CD8+ de memória efetora produtores de TNF no grupo de pacientes que apresentou ENL Esse mesmo grupo também apresentou aumento significativo de linfócitos T CD4+ e CD8+ produtores de IL-10, especialmente em resposta ao antígeno. Contudo, esse fato ocorreu apenas nas subpopulações naïve e de memória central. Além disso, o grupo ENL apresentou redução na frequência de linfócitos T CD4+ e CD8+ produtores de IFN-\F067, assim como uma significativa redução na expressão dos fatores de transcrição STAT4 e TBX21. Por fim, observamos uma forte correlação positiva e altamente significativa entre o índice bacilar (IB) dos pacientes com ENL e a frequência de linfócitos T CD4+/TNF+. No mesmo grupo de pacientes, também observamos uma significativa correlação negativa entre o IB e a frequência de células CD4+ produtoras de IL-10. Nossos resultados corroboram outros achados sobre o desequilíbrio da resposta imune na gênese do ENL, e demonstram associação entre o IB e a frequência de células produtoras das citocinas pró-inflamatórias IFN-\F067 e TNF. Em suma, os dados obtidos e discutidos neste trabalho sugerem a contribuição precípua dos linfócitos T de memória, especificamente os CD8+ de memória efetora para a alteração transitória da resposta imune ao M. leprae, característica marcante no ENL / Erythema nodosum leprosum (ENL), a sudden episode of acute inflammation predominantly affecting lepromatous leprosy patients (LL), can occur before, during or after multidrug therapy, accounting for much of the physical disabilities associated with the disease. It is not clear which are the triggering factors for ENL. Some data from ENL patients show an increased migration of neutrophils into skin lesions, activation of macrophages and T lymphocytes, together with an increased secretion of TNF and IL-1\F062 serum levels. For a better understanding on the involvement of T lymphocytes in the pathogenesis in lepromatous leprosy and ENL, this study performed ex vivo and in vitro characterization of T cell subpopulations from blood in response to M. leprae from LL patients with or without ENL, as well as the evaluation of functional activity of these subpopulations, by analyzing the frequency of these cells producing IFN-\F067, TNF and IL-10 by multiparametric flow cytometry. Furthermore, we analyzed the expression of genes encoding transcription factors, which are critical for the differentiation of T lymphocytes by quantitative real time polymerase chain reaction (qRT-PCR). Healthy volunteers from endemic area for leprosy were included in our study. Among the results, we highlighted the significantly increased frequency of CD8+/TNF+ T effector memory cells among ENL patients This group also showed a significantly increased frequency of CD4+ and CD8+ IL-10+ producing T lymphocytes, particularly in response to antigen. However, this finding was only observed in naïve and central memory T cell subpopulations. Moreover, ENL group showed a reduced frequency of CD4+ and CD8+ IFN-\F067 producing cells, and a significantly reduced expression of STAT4 and TBX21 transcription factors. Finally, we observed positive and significant strong correlation between bacillary index (BI) of ENL patients and CD4+/TNF+ cells frequency. The same group also presented a significant negative correlation between IB and the frequency of CD4+/IL-10+ T cells. Our results corroborate other findings about the imbalanced immune response in ENL genesis, and show an association between IB and the frequency of T cells producing pro-inflammatory cytokines IFN-\F067 and TNF. Briefly, the data obtained and discussed in this work suggest the major contribution of memory T cells, specifically CD8+ effector memory cells, to transient alteration in the immune response to M. leprae, a hallmark of ENL

Made available in DSpace on 2016-05-16T12:58:00Z (GMT). No. of bitstreams: 2 mayara_mendes_ioc_mest_2015.pdf: 18720258 bytes, checksum: 851f7c777695319f02f2ed49fd8e85b8 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2015 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / O Eritema Nodoso Hansênico (ENH) consiste no estado de emergência mais importante da hanseníase e representa a principal causa de internações, acometendo a pele e muitos outros órgãos. A presença de infiltrados contendo células polimorfonucleares é frequentemente comum para este tipo de reação e está relacionada com o aumento da inflamação. Uma das características com o ENH é a resposta clínica ao tratamento com Talidomida (Tal), acompanhada por uma significativa redução no número de neutrófilos nas lesões e redução de citocinas pró-inflamatórias. Objetivo: Identificar o perfil de expressão gênica das lesões ENH, antes e após o tratamento com a Talidomida, em busca de um melhor entendimento dos mecanismos imunopatogênicos e quais alvos moleculares são modulados pela Talidomida. Materiais e Métodos: Biópsias da lesão de pele foram obtidas de quatro pacientes no momento do diagnóstico do ENH e 7 dias após tratamento com Tal e submetidas a análise de microarranjo. A partir desses resultados, os alvos moleculares foram selecionados para a validação, em novas biópsias de lesão de pele obtidas de dez novos pacientes, por RT-PCR em tempo real, western blotting (WB) e imunohistoquímica (IH) Resultados: Dentre os processos biológicos identificados na análise do microarranjo, os de maior significância estatística foram o de resposta imune e ferimentos. Para validação por RT-PCR em tempo real foram selecionados genes correlacionados a imunopatologia do ENH. A análise da expressão gênica mostrou um redução dos níveis de RNAm de TNC; VCAM1; THBS1; ADAM12; MMP1; Cyr61; CASP1; CD16 nas lesões ENH tratadas com Talidomida em comparação com o grupo ENH. As análises por WB e IH das lesões ENH revelaram que a expressão proteica da TNC, PTX3 e CD16a foram globalmente reduzidas nas lesões após o tratamento com Tal. Conclusão: Em resumo, nossos dados sugerem relevância clínica dos alvos moleculares (TNC, PTX3 e CD16a) na patogênese da injúria tecidual da hanseníase estudados no contexto da Talidomida, uma droga eficaz para o tratamento do ENH e responsável pela redução significativa do infiltrado neutrofílico. Dessa forma, nossos estudos indicam que a Talidomida pode modular negativamente a injúria através da diminuição da expressão de TNC que é altamente expressa durante os processos de cicatrização de feridas e inflamação; PTX3, um importante marcador de inflamação vascular; e CD16a expresso em neutrófilos e que reconhecem imunocomplexos / Erythema nodosum leprosum (ENL) is the most important critical state of leprosy and is the leading cause of hospitalization, affecting the skin and many other organs. The presence of infiltrates containing polymorphonuclear cells is frequently common for this type of reaction and is related to increased inflammation. One of ENL\2019s characteristics is the clinical response to treatment with Thalidomide (Thal), accompanied by a significant reduction in the number of neutrophils in lesions and pro-inflammatory cytokines. Objective: To identify the gene expression profile of ENL lesions before and after treatment with Thalidomide in search of a better understanding of immunopathogenic mechanisms and molecular targets which are modulated by Thalidomide. Materials and Methods: Biopsies of skin lesion were obtained of four patients at the time of being diagnosed with ENL and 7 days after treatment with Thalidomide, and subjected to microarray. From these results, the molecular targets were selected for validation in new biopsies of skin lesion obtained from ten new patients, by real time RT-PCR, western blotting (WB) and immunohistochemistry (IH) Results: Among the biological processes identified in the analysis of microarray, those with the highest statistical significance were the immune response and injury response. Genes correlated with immunopathology of ENL were selected for validation by real time RT-PCR. The analysis of gene expression showed reduction in levels of mRNA of TNC; VCAM1; THBS1; ADAM12; MMP1; Cyr61; CASP1; CD16 in ENL lesions treated with Thalidomide in comparison with the ENL group. The IH and WB analysis of ENL lesions revealed that the protein expressions of TNC, PTX3 and CD16a were globally reduced in tissue lesions after treatment with Thal. Conclusion: In summary, our data suggests clinical relevance of molecular targets (TNC PTX3 and CD16a) in the pathogenesis of tissue injury of leprosy studied in the context of Thalidomide, an effective drug for the treatment of ENL and responsible for a significant reduction in the neutrophil infiltration. Thus, our studies indicate that Thalidomide can modulate negatively to injury by decreasing the TNC expression that is highly expressed during the healing of wounds and inflammation; PTX3, an important marker of vascular inflammation; and CD16a expressed in neutrophils and recognizing immunocomplexes