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Participação do CD163 na via anti-inflamatória do polo lepromatoso da hanseníaseMoura, Danielle Fonseca de January 2011 (has links)
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Previous issue date: 2011-08-31 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Estudos anteriores demonstraram que macrófagos de pacientes lepromatosos
possuem um fenótipo regulador que contribui para a imunossupressão observada na
hanseníase. IDO, CD86 e HLA-DR são moléculas altamente expressas por
macrófagos de pacientes lepromatosos, como também o receptor “scavenger”
CD163, regulado pela IL-10. Este trabalho foi realizado com o intuito de analisar a
expressão de CD163 nas lesões cutâneas de pacientes polares da hanseníase e em
monócitos infectados pelo Mycobacterium leprae (ML). Observamos um aumento de
macrófagos CD163+IDO+ nas lesões e nas células isoladas do infiltrado inflamatório
de pacientes LL. Ademais, durante o período de cultura de 6 dias dos macrófagos
isolados das lesões lepromatosas, houve uma gradativa redução da expressão
gênica de CD163, IDO e IL-10, assim como dos receptores de superfície CD163,
CD209, HLA-DR, CD86 e CD14 observada por citometria de fluxo, fato que ocorreu
concomitantemente com a saída de ML destas células. A expressão de células
CD163+IDO+CD209+ aumentou em monócitos de indivíduos saudáveis, estimulados
com ML irradiado obtido de extratos de lesão. Adição de citocalasina B na cultura de
monócitos reduziu a expressão de CD163 nessas células, e, na presença de anti-
CD163, a entrada de bactérias nos monócitos também foi reduzida. A adição da anti-
IL-10 em cultura de monócitos de indivíduos sadios reduziu a expressão de CD163
até mesmo na presença do ML. Além disso, os níveis séricos de sCD163, IL-10 e
heme estavam aumentados nos pacientes lepromatosos, em comparação com
pacientes tuberculóides e indivíduos sadios, assim como os depósitos intracelulares
de ferro. Estes resultados sugerem que o perfil de expressão de CD163 é importante
na endocitose e sobrevivência do ML no polo lepromatoso da hanseníase. / According to prior studies, macrophages from lepromatous patients present a
regulatory phenotype that contributes to the immunosuppression observed in the
disease. IDO, CD86, and HLA-DR molecules are highly expressed by macrophages
from lepromatous patients, as well the scavenger receptor CD163, regulated by IL-
10. The purpose of this study was to analyze CD163 expression on polar leprosy
skin lesions and monocytes infected by Mycobacterium leprae. We observed an
increased number of CD163+IDO+ in the lesions and cells isolated from
the inflammatory infiltrate of LL patients. Moreover, during the 6-day culture of
macrophages isolated from lepromatous lesions, the gene expression
of CD163, IDO and IL-10 and the surface receptors CD163, CD209, HLA-DR, CD86,
CD14 presented a gradual decrease, as shown by flow cytometry,
simultaneously with the output of ML from these cells. The expression of
IDO+CD163+CD209+ cells was augmented in monocytes from healthy individuals,
stimulated with irradiated ML, obtained from extracts of lesion. The addition
of cytochalasin B to monocyte culture reduced the expression of CD163 in these
cells, and, in presence of anti-CD163, the bacterial input into monocytes was also
reduced. The addition of anti-IL-10 in monocyte culture from healthy individuals led to
a decrease at the expression of CD163, even in presence of ML. Besides, serum
levels of sCD163, IL-10 and heme were increased in lepromatous patients, when
compared to tuberculoid patients and healthy controls, while
intracellular iron deposits were also augmented. These results suggest the relevance
of CD163 expression profile for endocytosis and also for the survival of ML itself in
lepromatous patients.
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Indução à triploidia em Crassostrea gigasMelo, Emílio Mateus Costa January 2011 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Aquicultura, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-26T03:07:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1
297103.pdf: 207947 bytes, checksum: eaca0841bbea8b409ef58133cad20397 (MD5) / Três métodos de indução à triploidia (3N) foram testados em ostras diplóides (Crassostrea gigas), sendo dois químicos, Citocalasina-B (CB) e 6-dimetilaminopurina (6-DMAP) e um físico de temperatura. O objetivo foi avaliar uma tecnologia de indução à triploidia apropriada às características peculiares do Laboratório de Moluscos Marinhos da UFSC. Três experimentos foram realizados separadamente, a 25º C, e em todos foram obtidas larvas triplóides viáveis. No experimento-I avaliou a eficiência de indução à triploidia com a CB [0,5 mg L-1] e 6-DMAP [390 µmols L-1], sendo o tratamento com CB (57% 3N) estatisticamente mais eficiente que a 6-DMAP (22,32% 3N). No experimento-II, testou a eficiência de indução à triploidia com a CB [0,5 mg L-1] e 6-DMAP [450 µmols L-1], não havendo diferença entre os tratamentos (CB - 55% 3N e 6-DMAP - 56% 3N). No experimento-III a eficiência de indução à triploidia com CB [0,5 mg L-1] e com choque de temperatura (25º-36º C), sendo que os tratamentos não tiveram diferença significativa (CB - 57,31% 3N e Temperatura - 45,29% 3N). Em ambos os experimentos foi observada uma alta mortalidade nos tratamentos com os químicos, em especial a CB. A partir desses resultados, a substituição da CB por outros métodos de indução demonstrados é necessária, tendo em vista seu alto custo de aquisição, e ainda a alta toxicidade da substância, tanto ao meio ambiente quanto ao operador.
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