Grado de magíster en ciencias médicas y ciencias biológicas / Más de 140 millones de personas residen en un ambiente hipóxico por sobre los 2500 m de altura, susceptibles a desarrollar alteraciones cardiovasculares. Este ambiente es más riesgoso cuando afecta la adecuada transición feto-neonato en la etapa perinatal, siendo capaz de generar hipertensión pulmonar del recién nacido. El estrés oxidativo, es uno de los mecanismos a través del cual la hipoxia genera daño vascular. Por otro lado, melatonina es una neurohormona con importantes propiedades antioxidantes. Como la hipertensión pulmonar neonatal actualmente carece de tratamiento definitivo, esta tesis propone utilizar melatonina, como tratamiento emergente para reducir el estrés oxidativo pulmonar generado por la hipoxia crónica en neonatos gestados y nacidos en altura. Como modelo experimental se utilizaron recién nacidos de oveja gestados y nacidos a 3.600 m, constituyendo 2 grupos, uno control (vehículo 0,5 ml.kg-1.d-1 v.o., CN, n=6) y un grupo tratado con melatonina (1 mg.kg-1.d-1 v.o., MN, n=6), recibiendo tratamiento por 8 días. Al final del tratamiento (12 días de edad) los neonatos se eutanizaron para obtener muestras de tejido pulmonar y realizar medición de actividad de enzimas antioxidantes, marcadores de estrés oxidativo y el factor de transcripción Nrf2. Los resultados muestran que melatonina logró aumentar el mRNA de las enzimas antioxidantes superóxido dismutasa 2 (SOD2), catalasa (CAT) y glutatión peroxidasa 3 (GPx3) e incrementó la actividad de CAT. Además, los animales tratados con melatonina mostraron menores niveles de productos de lipoperoxidación, con disminución de los de 8-isoprostanos y menor expresión de 4- HNE. Los resultados de esta tesis confirman la capacidad antioxidante de melatonina, atribuyéndole aún más un rol como emergente antioxidante y potencialmente útil coadyuvante en el tratamiento de la hipertensión pulmonar neonatal. / More than 140 million people inhabit in hypoxic environments over 2500 m of altitude, susceptible to develop cardiovascular disorders. This condition involves a higher risk when affecting the normal fetal – neonatal transition in the perinatal period, inducing pulmonary hypertension of the newborn. Oxidative stress is one of the hypoxic-induced mechanisms that cause vascular damage. Conversely, melatonin is a neurohormone with important antioxidant properties. As neonatal pulmonary hypertension currently has no definitive treatment, this thesis put forward the therapeutic use of melatonin as an emerging treatment for reducing pulmonary oxidative stress caused by chronic hypoxia in neonates gestated and born at high altitude. As experimental model we used newborn sheep gestated and born at 3,600 m. Two groups were constituted, one control (vehicle 0,5 ml.kg-1.d-1 orally, CN, n=6) another treated with melatonin (1 mg.kg-1.d-1 orally, MN, n=6), both treated for 8 days. At the end of treatment (12 days old), the neonates were euthanized obtaining lung tissue samples to perform antioxidant enzymes analysis, oxidative stress biomarkers and expression of the transcription factor Nrf2. The results show that melatonin increases the mRNA for the antioxidant enzymes superoxide dismutase 2 (SOD2), catalase (CAT) and glutathione peroxidase 3 (GPx3) and enhances CAT activity. Also, melatonin treated animals show decreased levels of lipoperoxidation products, with decreased 8-isoprostanes and 4-HNE. These thesis outcomes, support melatonin antioxidant capacity and establish melatonin as an emerging antioxidant potentially useful as coadyuvant in treating neonatal pulmonary hypertension.

Magíster en fisiología / La Hipertensión Pulmonar (HP) es una patología vascular compleja que conduce a falla cardíaca, menor expectativa de vida y tiene un impacto significativo en la sociedad, ya que produce la muerte de pacientes en edad productiva e implica altos costos de financiamiento en su tratamiento. Existe evidencia sobre la contribución de venas intrapulmonares a la Resistencia Vascular Pulmonar (RVP). La Hipertensión Venosa Pulmonar (HVP) puede producir un incremento en la RVP y aumentar la Presión Arterial Pulmonar (PAP), debido a transmisión pasiva de la presión venosa al territorio arterial. La familia de receptores purinérgicos se encuentra ampliamente expresada en diversos vasos sanguíneos y se ha descrito respuesta contráctil de arterias intrapulmonares a nucleótidos, en particular a Uridín Trifosfato (UTP). La investigación del rol de la señalización purinérgica en la circulación pulmonar venosa podría aportar información relevante para abordar otra vía involucrada en la fisiopatología de la HAP. Se realizaron rebanadas de pulmón de ratas Sprague Dawley controles y con HAP inducida por Monocrotalina (HAP-MCT), en un vibrátomo a 150 μm de espesor. La respuesta contráctil de Venas Intrapulmonares Pequeñas (VIP) inducida por UTP se registró mediante videomicroscopía de contraste de fases (VMCF), demostrando actividad del nucleótido como agente vasoconstrictor en VIP, con mayor respuesta en la VIP provenientes de ratas con HAP-MCT (EC50= 8,8±1,4 μM) que en las control (EC50= 16 μM) (p<0,05). Las imágenes de inmunofluorescencia muestran expresión de los receptores P2Y2 y P2Y4 en la capa media de VIP de ratas control y con HAP-MCT. Estos resultados sugieren un nuevo mecanismo involucrado en la HAP, orientando el estudio de nuevas terapias para combatir el curso de la enfermedad, mejorar la sobrevida y la calidad de vida de pacientes que padecen HAP. / Pulmonary Hypertension (HP) is a complex vascular condition that leads to heart failure, lower life expectancy and has a significant impact on society, because it involves the death of patients of working age and involves high costs of financing treatment. Pulmonary Venous Hypertension (HVP) may cause an increase in Pulmonary Vascular Resistance (RVP), Pulmonary Artery Pressure (PAP) is increased by the HVP, due to passive transmission of venous pressure to arterial territory. There is also evidence on the contribution of intrapulmonary veins to the RVP. Purinergic receptor family is widely expressed in various blood vessels and described intrapulmonary artery contractile responses to nucleotides, especially Uridine Triphosphate (UTP). The investigation of the role of purinergic signaling in the pulmonary venous circulation could provide relevant information to address another pathway involved in the pathophysiology of Pulmonary Arterial Hypertension (HAP). Lung slices from Sprague Dawley rats controls and rats with Pulmonary Hypertension monocrotaline induced (HAP-MCT), were made from vibratome to 150 μm thick . The contractile response of small intrapulmonary veins (VIP) was recorded by videomicroscopy phase contrast (VMCF), showing nucleotide activity as a vasoconstrictor agent in VIP, with greater response in the VIP from rats HAP-MCT (EC50 = 8.8 ± 1,4 μM) than in control (EC50 = 16 ± 1,1 μM (p<0,05). Immunofluorescence images show expression of P2Y2 and P2Y4 receptors in the middle layer of VIP of control and HAP-MCT rats. These findings suggest a new mechanism involved in PAH, directing the study of new therapies to combat disease course, improve survival and life quality of these patients.

Determina la eficacia de un programa de hipertensión arterial ofrecido por Rímac EPS una aseguradora a sus afiliados con hipertensión arterial es más efectivo que tratarse libremente en consultas ambulatorias en la misma clínica de Lima, durante todo el 2011.Estudio retrospectivo que compara dos cohortes de hipertensos, una tratada en el programa CUIDATE (n=1857) y la otra tratada libremente en atenciones ambulatorias en la misma Clínica Internacional (n=2082). De estos marcos muestrales se extrajeron muestras aleatorias CUIDATE (n=87) y Ambulatoria (n=65). Se comparan las variables cualitativas de las muestras usando las pruebas de Ji cuadrado o Prueba exacta de Fisher según fuere necesario y para las cuantitativas la prueba de t student. Se realizó el análisis de regresión múltiple para analizar el efecto de la edad, sexo, daño órgano blanco, diabetes, dislipidemia. Se comparó el porcentaje de los pacientes de los marcos muestrales que recibieron atenciones en emergencias o se hospitalizaron por hipertensión arterial durante el período de observación. En todos los análisis se considerará el 95% de nivel de confianza y el 90% para la potencia de la prueba. El análisis de las dos muestras no mostró diferencias en edad, sexo, tiempo de enfermedad, índice de masa corporal, porcentaje de dislipidemia y estadio de la enfermedad. Más atenciones recibieron en CUIDATE (10.9±2 vs 6.2±3.7; p<0.001) y también hubo más diabéticos (26.4% vs 12.7%; p<0.04). Más hipertensos controlados hubo en CUIDATE (93.1% vs 56.9%; p<0.001), con menores promedios de presión arterial sistólica y diastólica. En el análisis de regresión el modelo nos indica que pertenecer a CUIDATE se comporta como un factor de protección. El OR ajustado indica que los pacientes de CUIDATE presentan 91.6% menos riesgo de no controlar la presión arterial, independientemente de las variables incluidas en el modelo. Al comparar las poblaciones de los marcos muestrales se observó que recibieron menos atenciones en emergencia en el grupo de CUIDATE (2% vs 5.2%; p<0.001) y menos pacientes fueron hospitalizados (0.38% vs 1.49%) por hipertensión arterial o enfermedades asociadas. Se concluye que los pacientes hipertensos tratados en el Programa CUIDATE se controlan mejor que los hipertensos que se tratan ambulatoriamente. Dado el crecimiento de la hipertensión arterial, es necesario evaluar el costo eficiencia del Programa CUIDATE para que pueda ser adaptado a cualquier ámbito público o privado. / Trabajo de investigación

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario. / La hipertensión pulmonar en los recién nacidos es una patología causada por múltiples factores. Uno de ellos es la hipoxia aguda y/o crónica que altera los mecanismos que ocurren normalmente en la transición cardiovascular y respiratoria de feto a recién nacido, fenómeno que ocurre en gestaciones a grandes alturas o en gestaciones en tierras bajas que cursan con insuficiencia placentaria. Esta genera una importante vasoconstricción e hipertensión arterial en la circulación pulmonar, remodelamiento de los vasos pulmonares, reducción del lumen vascular y aumento de la resistencia vascular pulmonar, lo que puede llevar a hipertrofia ventricular derecha, eventualmente falla cardiaca y muerte. Además, la eficacia y disponibilidad de los tratamientos actuales es limitada. El péptido natriurétuco auricular (ANP) es un vasodilatador dependiente de cGMP, por lo que el objetivo de este estudio fue plantear una terapia basada en este péptido para reducir la presión pulmonar arterial pulmonar (mPAP) y la resistencia vascular pulmonar (RVP). Para ello, se cateterizaron 14 corderos gestados y nacidos en tierras altas (3.600 m) de 3 o 4 días de edad, bajo anestesia, que presentan la mPAP elevada a causa de la altura. 2 corderos fueron utilizados para prueba de dosis. A 6 se les administró NaCl 0,9% (controles) y a otros 6 se les administró ANP durante 7 días, período en el cual se evaluaron las variables cardiopulmonares diariamente. Al final de este período, los neonatos se sometieron a un episodio de hipoxia aguda sobreimpuesta evaluando la respuesta del fármaco a una crisis hipóxica. Los animales tratados diariamente con ANP presentaron una disminución aguda de la mPAP que se mantuvo luego de la administración durante los 2 primeros días de tratamiento. Desde el tercer día en adelante esta disminución solo fue significativa durante la infusión del péptido. Además, el tratamiento crónico con el fármaco produjo una ausencia de la vasoconstricción pulmonar durante el episodio de hipoxia aguda sobreimpuesta. Se concluye que el ANP podría ser considerado como un fármaco para ser utilizado en las crisis hipertensivas pulmonares que ocurren en la patología estudiada. Sin embargo, se debe buscar una opción de tratamiento que perdure con el pasar de los días. / Pulmonary hypertension in newborns is a pathology caused by multiple factors. One of which is acute and / or chronic hypoxia that alters the mechanisms that normally occur in the cardiovascular and respiratory transition from fetus to newborn, phenomenon that occurs in gestations at great geographical altitudes or in lowland gestations with placental insufficiency. This generates an important vasoconstriction and arterial hypertension in the pulmonary circulation, remodeling of the pulmonary vessels, reduction of the vascular lumen and increasing the pulmonary vascular resistance, which can lead to right ventricular hypertrophy, and eventually heart failure and death. In addition, the efficacy and availability of current treatments is markedly limited. Atrial natriuretic peptide (ANP) is a cGMP-dependent vasodilator, so the aim of this study was to propose a therapy based on this peptide to reduce pulmonary arterial pulmonary pressure (mPAP) and pulmonary vascular resistance (PVR). For that, 14 lambs gestated and born in the highlands (3,600 m) of 3 or 4 days of age were catheterized under anesthesia, presenting high mPAP due to height. 2 lambs were used for dose testing. 6 patients were given 0.9% NaCl (controls) and another 6 were given ANP for 7 days, during which time the cardiopulmonary variables were evaluated daily. At the end of this period, the neonates underwent an episode of overhyped acute hypoxia assessing the drug's response to a hypoxic crisis. Animals treated daily with ANP showed an acute decrease in mPAP that remained after the infusion during the first 2 days of treatment. From the third day onwards the decrease was only significant during infusion period. In addition, chronic treatment with the drug produced an absence of pulmonary vasoconstriction during the episode of superimposed acute hypoxia. It is concluded that the ANP could be considered as a drug to be used in pulmonary hypertensive crises that occur in the pathology studied. However, a treatment option that will last as days go by should be looked for. / Financiamiento: Proyecto Fondecyt No. 1 1140647.

Magíster en fisiología / La hipertensión arterial pulmonar (HAP) es una enfermedad crónica, progresiva y fatal. A pesar del desarrollo de nuevas drogas, continúa siendo incurable. Las tres vías de tratamiento farmacológico actual apuntan a la regulación del tono vascular pulmonar, sin embargo, no se ha considerado la posible participación del sistema de regulación purinérgica del tono, el cual ya es conocido por su contribución a la regulación de la vaso-actividad a nivel sistémico. La escasa bibliografía disponible que ha permitido iniciar la caracterización del sistema purinérgico a nivel pulmonar se refiere solo al nivel arterial, sin embargo, los vasos venosos intrapulmonares pequeños dan cuenta de cerca de un 20% de la resistencia vascular pulmonar, lo que hace de este un componente importante en HAP. Es por esto que nuestro objetivo fue evaluar la contracción de venas intrapulmonares pequeñas inducida por UDP y buscar el receptor sensible a UDP involucrado (P2Y6 o P2Y14 ). Registramos la contracción de venas intrapulmonares pequeñas (VIP) inducida por dosis crecientes de UDP en rebanadas de pulmón de ratas con HAP y ratas sanas; luego desarrollamos ensayos funcionales con agonistas y antagonistas específicos para los receptores P2Y6 y P2Y14 y finalmente evaluamos la expresión de dichos receptores a través de Inmunofluorescencia Indirecta (IFI). Nuestros resultados muestran por primera vez que el UDP es un agonista capaz de inducir contracción dependiente de concentración en VIP tanto en ratas sanas como HAP, en este último grupo se observa una contracción mediada por UDP de una magnitud mayor a la lograda en ratas sanas. Los estudios funcionales con agonistas específicos para cada receptor muestran contracción mediada por el receptor P2Y6 y en muy menor medida por el receptor P2Y14 en ratas sanas e interesantemente demostramos una hipercontractilidad mediada por UDP-Glucosa a través de su único receptor P2Y14 en ratas HAP. La IFI ratifica la presencia del receptor P2Y6 en músculo liso de ratas controles e hipertensas y consecuentemente con los estudios funcionales se demostró una mayor presencia del receptor P2Y14 en músculo liso de VIP de ratas con HAP en comparación a ratas sanas. Nosotros concluimos que es el receptor P2Y14 el que presenta una destacada participación en la fisiopatología de la HAP; esto debido a que su activación específica induce una respuesta hipercontráctil de las VIP en ratas enfermas, lo cual se ve respaldado por su mayor colocalización a nivel del músculo liso en la pared de VIP de ratas HAP. Esto nos permite pensar en el receptor P2Y14 como un nuevo target de acción farmacológica para el tratamiento de la enfermedad.

El Body Mind Centering es una metodología aplicada en diversas áreas del conocimiento, entre estas se encuentra el de las artes escénicas. Permite a quien la practique, trazar una relación consciente y genuina con la respiración, su cuerpo y movimiento, generando muchos beneficios entorno a la salud física, emocional y psicológica. De esta manera, el BMC propone la construcción de una relación distinta con el entorno y con uno mismo. La presente investigación busca analizar cómo surgen los mecanismos de cuidado dentro de un espacio sostenido por el BMC para que así responda a cuestionamientos éticos de la práctica escénica y de esta manera se construya un espacio de creación seguro, sensible y significativo. El desarrollo de esta investigación se realizará a través de la observación y análisis de las sesiones del laboratorio titulado, De adentro hacia afuera. / Body Mind Centering is a methodology applied in various areas of knowledge, among these is that of the performing arts. It allows those who practice it, to draw a conscious and genuine relationship with the breath, the movement and their body, generating many benefits around physical, emotional and psychological health. In this way, the BMC proposes the construction of a different relationship with the environment and with oneself. The present research seeks to analyze how care mechanisms arise within a space supported by the BMC so that it responds to ethical questions of the performing practice and in this way a safe, sensitive and meaningful creation space is built. The development of this research will be carried out through the observation and analysis of the laboratory sessions, From the inside out.