Resumo: As espécies reofílicas apresentam, de modo geral, suas gônadas desenvolvidas até estágios avançados de maturação, porém as etapas finais do processo reprodutivo, tais como, a maturação final dos ovócitos, a ovulação, a desova e a liberação de sêmen, somente são atingidas mediante tratamentos hormonais. No entanto, a reprodução induzida de Leporinus macrocephalus apresenta algumas particularidades. Mesmo com a aplicação de duas doses de hormônio, os machos de L. macrocephalus geralmente liberam uma quantidade muito reduzida de sêmen, que freqüentemente é insuficiente para os procedimentos de reprodução induzida. Assim, o objetivo principal deste trabalho foi avaliar a evolução do processo de espermiação em reprodutores machos de L. macrocephalus, submetidos a tratamento hormonal. Para tanto, foram realizados estudos histológicos da estrutura testicular e da via seminífera, com inclusão de tecidos em historesina e coloração com azul de Toluidina. Estudos ultraestruturais das células germinativas foram realizados com processamento do material para rotina de microscopia eletrônica de transmissão. Análise da via seminífera foi também realizada com a injeção de acetato de vinila nos ductos testiculares e posterior análise em microscopia eletrônica de varredura. Para análise do epitélio germinativo ao longo do processo de indução hormonal, as preparações histológicas foram destinadas para estudos morfométricos, com utilização de sistema de análise de imagens. Após o tratamento hormonal foram realizadas análises seminais para verificação do volume total de sêmen liberado, concentração espermática, tempo de ativação e sobrevivência dos espermatozóides. Os estudos morfológicos evidenciaram que a estrutura testicular de L. macrocephalus é do tipo tubular anastomosado, espermatogonial irrestrito com espermatogênese do tipo cística... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Rheophilic species present, in general, their gonads developed to advanced stages of maturation, but the final stages of the reproductive process, such as the final maturation of oocytes, ovulation, spawning, and release of semen, are only achieved with hormonal treatments. However, the induced breeding of Leporinus macrocephalus has some peculiarities. Even with the application of two doses of hormone, males of L. macrocephalus usually release reduced semen, which is often insufficient for procedures of induced spawning. Thus, the objective of this study was to evaluate the progress of spermiation in males broodstocks of L. macrocephalus, undergoing hormonal treatment. For this, were performed histological studies of testicular structure and the seminal pathway with tissue inclusion into historesin and staining with toluidine blue. Ultrastructural studies of the stems cells were performed with material processing for routine of transmission electron microscopy. Analyses of seminal pathway were performed with the injection of vinyl acetate in the testicular ducts and subsequent analysis of scanning electron microscopy. For analysis of the germinal epithelium throughout the hormonal induction process, the histological preparations were destined for morphometric studies using an image analysis system. After hormone treatment seminal analysis was performed to verify the volume total release of semen, sperm concentration, time activation and survival of spermatozoa. Morphological studies evidence that the testicular structure of L. macrocephalus is anastomosed tubular type, espermatogonial unrestricted with a spermatogenesis of cystic type. The seminal pathway of this species comprises the seminiferous tubules anastomosing, the main testicular duct and spermatic duct. The histologic and ultrastructural studies showed that the connection of the seminiferous tubules occurs in different segments... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Carlos Alberto Vicentini / Coorientador: Sérgio Ricardo Batlouni / Banca: Luciene Patrici Papa / Banca: João Paulo Mardegan Issa / Mestre

Hormonally induced artificial propagation of individually marked broodstock was performed identically at two sequential reproductive seasons. In both years, four separate groups of females were intraperitonealy injected by carp pituitary extrakt, Supergestran (containing GnRH analogue Lecirelin), Ovopel and Dagin (containing GnRH analogue and dopamine inhibitor) at 21 °C. In control group, no injection was carried out in broodstock. It observed the effect of treatment on the ovulation ratio, survival and growth of broodfisch, the ability of stripping in the next season and the effect on eggs.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:22Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-02-16Bitstream added on 2014-06-13T20:28:39Z : No. of bitstreams: 1 munozgutierrez_me_me_jabo.pdf: 8691171 bytes, checksum: a98f3132095e7d380f9ddb444d3e1300 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / As espécies reofílicas apresentam, de modo geral, suas gônadas desenvolvidas até estágios avançados de maturação, porém as etapas finais do processo reprodutivo, tais como, a maturação final dos ovócitos, a ovulação, a desova e a liberação de sêmen, somente são atingidas mediante tratamentos hormonais. No entanto, a reprodução induzida de Leporinus macrocephalus apresenta algumas particularidades. Mesmo com a aplicação de duas doses de hormônio, os machos de L. macrocephalus geralmente liberam uma quantidade muito reduzida de sêmen, que freqüentemente é insuficiente para os procedimentos de reprodução induzida. Assim, o objetivo principal deste trabalho foi avaliar a evolução do processo de espermiação em reprodutores machos de L. macrocephalus, submetidos a tratamento hormonal. Para tanto, foram realizados estudos histológicos da estrutura testicular e da via seminífera, com inclusão de tecidos em historesina e coloração com azul de Toluidina. Estudos ultraestruturais das células germinativas foram realizados com processamento do material para rotina de microscopia eletrônica de transmissão. Análise da via seminífera foi também realizada com a injeção de acetato de vinila nos ductos testiculares e posterior análise em microscopia eletrônica de varredura. Para análise do epitélio germinativo ao longo do processo de indução hormonal, as preparações histológicas foram destinadas para estudos morfométricos, com utilização de sistema de análise de imagens. Após o tratamento hormonal foram realizadas análises seminais para verificação do volume total de sêmen liberado, concentração espermática, tempo de ativação e sobrevivência dos espermatozóides. Os estudos morfológicos evidenciaram que a estrutura testicular de L. macrocephalus é do tipo tubular anastomosado, espermatogonial irrestrito com espermatogênese do tipo cística... / Rheophilic species present, in general, their gonads developed to advanced stages of maturation, but the final stages of the reproductive process, such as the final maturation of oocytes, ovulation, spawning, and release of semen, are only achieved with hormonal treatments. However, the induced breeding of Leporinus macrocephalus has some peculiarities. Even with the application of two doses of hormone, males of L. macrocephalus usually release reduced semen, which is often insufficient for procedures of induced spawning. Thus, the objective of this study was to evaluate the progress of spermiation in males broodstocks of L. macrocephalus, undergoing hormonal treatment. For this, were performed histological studies of testicular structure and the seminal pathway with tissue inclusion into historesin and staining with toluidine blue. Ultrastructural studies of the stems cells were performed with material processing for routine of transmission electron microscopy. Analyses of seminal pathway were performed with the injection of vinyl acetate in the testicular ducts and subsequent analysis of scanning electron microscopy. For analysis of the germinal epithelium throughout the hormonal induction process, the histological preparations were destined for morphometric studies using an image analysis system. After hormone treatment seminal analysis was performed to verify the volume total release of semen, sperm concentration, time activation and survival of spermatozoa. Morphological studies evidence that the testicular structure of L. macrocephalus is anastomosed tubular type, espermatogonial unrestricted with a spermatogenesis of cystic type. The seminal pathway of this species comprises the seminiferous tubules anastomosing, the main testicular duct and spermatic duct. The histologic and ultrastructural studies showed that the connection of the seminiferous tubules occurs in different segments... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2016-08-15T20:31:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 FernandaAS_DISSERT.pdf: 1414995 bytes, checksum: e7e006bb87888d5b4777f2f259d7afd8 (MD5) Previous issue date: 2015-09-29 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Ovarian xenografting is an auxiliary reproductive technique that allows the conservation of germplasm of high value livestock or endangered species. The use of exogenous gonadotropins assists in developing these xenografted tissues and obtaining viable follicles for in vitro embryo production (IVEP), however this use has not been reported in xenograftings of cats ovaries with C57BL/6 SCID female mice as recipients. Thus, the aim of this study was to evaluate the response of xenografting of domestic cat ovaries to equine chorionic gonadotropin (eCG) when grafted into C57BL/6 SCID female mice. Therefore, domestic cats ovarian cortex fragments were grafted under the kidney capsule of fifteen C57BL/6 SCID mice after bilateral ovariectomy. At the end of 45 days, the female mice were divided into two groups and those who did not receive hormone induction (eCG ) were euthanized at the time of induction. Females who received hormonal induction (eCG +) were euthanized after 48 hours. All collected tissues were taken for histologic processing. The proportions between the different ovarian follicles were compared by the chi-square test. The morphometric analysis of the follicles were compared between the experimental groups by the Tukey test (primordial follicles, primary and secondary) and Kruskal-Wallis (antral follicles). Macroscopically, it was possible to observe a low number (16%) of antral follicles with more than 1mm in transplants treated with eCG. In the microscopic analysis, follicles from all categories were observed in transplants and all had normal morphology and morphometry for the studied species (Felis catus), being however observed larger primordial and primary follicles in those eCG + transplants. There was a decrease in primordial follicles percentages and an increase in subsequent categories, mainly in antral follicles of eCG + group, and this condition is proposed here characterized as Follicular Right Shift (FRS). Luteinized follicles were also observed in transplants treated with eCG. Thus, it is concluded that the treatment with eCG is effective when it comes to follicular development, but it did not show a good superovulatory response / Xenotransplante ovariano é uma técnica reprodutiva auxiliar que permite a conservação do germoplasma de espécies de alto valor zootécnico ou em perigo de extinção. O uso de gonadotrofinas exógenas auxilia no desenvolvimento desses tecidos xenotransplantados e na obtenção de folículos viáveis para produção in vitro de embriões (PIVE), entretanto esse uso não foi relatado em xenotransplante de ovários de gatas com fêmeas C57BL/6 SCID como receptora. Dessa forma, o objetivo desse trabalho foi avaliar a resposta do xenotransplante ovariano de gata doméstica à gonadotrofina coriônica equina (eCG) quando transplantados em fêmeas C57BL/6 SCID. Para tanto, fragmentos de córtex ovariano de gatas domésticas foram transplantados sob a cápsula renal de quinze camundongas C57BL/6 SCID após ovariectomia bilateral. Ao final de 45 dias, as fêmeas foram divididas em dois grupos e aquelas que não receberam indução hormonal (eCG ) foram eutanasiadas no momento da indução. As fêmeas que receberam indução hormonal (eCG +) foram eutanasiadas 48h após. Todos os tecidos colhidos foram levados para processamento histológico. As proporções entre os diferentes folículos ovarianos foram comparadas pelo teste de qui-quadrado. A análise morfométrica dos folículos foi comparada entre os grupos experimentais pelo teste de Tukey (folículos primordial, primário e secundário) e Kruskal-Wallis (folículo antral). Macroscopicamente foi possível observar um baixo número (16%) de folículos antrais com mais de 1mm nos transplantes tratados com eCG. Na análise microscópica, folículos de todas as categorias foram observados nos transplantes e todos apresentaram morfologia e morfometria normais para a espécie estudada (Felis catus), sendo, porém observado folículos primordiais e primários maiores naqueles transplantes eCG +. Houve uma redução nas porcentagens de folículos primordiais e aumento nas categorias subsequentes, principalmente nas de folículos antrais do grupo eCG +, sendo essa condição caracterizada como Follicular Right Shift (FRS). Folículos luteinizados também foram observados nos transplantes tratados com eCG. Dessa maneira, conclui-se que o tratamento com eCG foi eficaz em se tratando de desenvolvimento folicular, mas não apresentou boa resposta superovulatória

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The objective of the present study was to determine the action of gestagens and estradiol benzoate (EB) on the mechanism of premature regression of the first corpus luteum (CL) after parturition, and to develop an efficient artificial insemination system for suckling beef cows. The effect of pre-exposure to gestagens and EB on the expression of the alpha (ERα) and beta (ERß) estrogen receptors and progesterone receptor (PR) in the endometrium and CL was evaluated after the first postpartum ovulation. Thirty days after calving, ten anestrous cows were divided into a control group (AN) and a treatment group (AN+MAP). On day 0, animals of the treatment group received 250 mg medroxyprogesterone (MAP) in a vaginal device for 7 days and 5 mg EB. In both groups, the follicular wave was monitored and ovulation was induced for the formation of a CL. Luteal and endometrial tissues were collected after 7 days. The samples were submitted to the analysis of gene expression by RT-PCR and endometrial and luteal histological evaluation. Preexposure to gestagen during the first postpartum estrous cycle resulted in a higher endometrial expression of the PR (AN+MAP group; P<0.05) and inhibition of ERß expression in endometrial tissue (P<0.05). The height of the endometrial glandular epithelium and the total number of large luteal cells were higher in the AN+MAP group than in the AN group. In order to promote follicular growth compatible with the ovulatory response in postpartum cows, we analyzed the follicular dynamics to determine the best time for the application of eCG and EB in combination with MAP. The cows received MAP for 7 days and EB on day 0 or 1, followed by eCG on day 6 (B0E6 or B1E6) or 7 (B0E7 or B1E7). In two groups, the animals were not injected with eCG but received EB on day 0 (B0) or 1 (B1). All cows received a GnRH agonist 45 h after removal of the vaginal device. Animals of the B0E6 group maintained a mean follicular diameter of 8 mm until eCG application and reached a mean diameter of 13 mm at the time of GnRH agonist injection (45 h after MAP removal), showing an ovulation rate of 80%. Covariance analysis showed a difference in this curve (P=0.0001) compared to the other groups, which reached a mean final follicular diameter of 7 to 12 mm and ovulation rate of 40%. Based on these results, we investigated an ovulation and estrus reinduction for a mixed system of estrus detection and fixed-time artificial insemination (ETAI) in postpartum suckling cows. A total of 553 animals was divided into the following groups: hormonal induction (HI; day 0 = EB and MAP for 7 days, day 6 = eCG, PGF2α and temporary weaning), early weaning at 60 days, and natural breeding. No difference in pregnancy rates (85%) was observed among groups. However, at 7 months of age, calves of the HI group had reached a 38 kg higher mean weight than those weaned at 60 days. In order to adjust the eCG dose to the HI system, doses of 300, 400 or 500 IU eCG were tested. No difference in the pregnancy rates (78.7%) was observed. In conclusion, MAP and EB regulate steroid receptors in the endometrium and CL, indicating an important role for these hormones in the mechanism of premature postpartum luteolysis. In addition, steroids participate in the postpartum restructuring of the endometrium and CL and, when applied 60 days after calving together with eCG administered one day before removal of the vaginal implant, increase the reproductive efficacy of beef cows. / O objetivo do presente estudo foi de elucidar a ação dos gestágenos e benzoato de estradiol (BE) no mecanismo de regressão prematura do primeiro corpo lúteo (CL) pós-parto, e desenvolver um sistema eficaz de inseminação artificial para vacas de corte amamentando. O efeito da pré-exposição a gestágenos e BE na expressão de receptor de estrógeno alfa (REα), beta (REβ) e receptor de progesterona (RP) no endométrio e CL foi avaliado após a primeira ovulação pós-parto. Dez vacas em anestro, 30 dias após o parto, foram divididas em grupo controle (AN) e tratamento (AN+MAP). No dia 0, os animais do grupo tratamento receberam 250 mg de medroxiprogesterona (MAP) em pessário vaginal por 7 dias e 5 mg de BE. Em ambos os grupos, a onda folicular foi acompanhada e a ovulação induzida para formação de um CL. Após 7 dias, foram obtidos tecidos luteal e endometrial. As amostras foram destinadas a expressão gênica (RT-PCR) e avaliação histológica endometrial e luteínica. A pré-exposição ao gestágeno no primeiro ciclo estral pós-parto resultou em uma maior expressão endometrial do RP (grupo AN+MAP; P<0,05) e um bloqueio da expressão dos REβ no tecido endometrial (P<0,05). No grupo AN+MAP, a altura do epitélio glandular endometrial e número total de células luteais grandes foram maiores do que no grupo AN. Visando promover o crescimento folicular compatível com resposta ovulatória, em vacas pós-parto, foi avaliada a dinâmica folicular, para determinar o melhor momento de aplicação do eCG e BE em associação ao MAP. As vacas receberam MAP por 7 dias e BE no Dia 0 ou 1, seguido de eCG no Dia 6 (B0E6 ou B1E6) ou 7 (B0E7 ou B1E7). Em dois grupos, os animais não foram injetados com eCG, mas com BE no Dia 0 (B0) ou no Dia 1 (B1). Todas as fêmeas receberam agonista de GnRH 45 h após remoção do implante vaginal. Os animais do grupo B0E6 mantiveram um diâmetro folicular médio de 8 mm até a aplicação do eCG e atingiram a média de 13 mm no momento do GnRH, com taxa de ovulação de 80%. Por análise de covariança, essa curva diferiu (P=0.0001) das demais, as quais atingiram média folicular final entre 8 e 12 mm e taxa de ovulação de 40%. A partir desses resultados, foi investigado um sistema de reindução de ovulação e estro e inseminação artificial em um processo misto de observação de estro e tempo fixo (IAETF) para vacas amamentando no período pós-parto. Um total de 553 animais foi dividido em indução hormonal (IH; Dia 0= BE e MAP por 7 dias, Dia 6= eCG, PGF2α e desmame temporário), desmame precoce aos 60 dias e monta natural. Não foi observada diferença nos índices de prenhez (85,0%) entre os grupos. No entanto, os terneiros do grupo IH, aos sete meses de idade, atingiram a média de 38 kg a mais do que os desmamados aos 60 dias. Com o objetivo de adequar a dose da gonadotrofina no sistema de IH, foram utilizadas 300, 400 ou 500 UI de eCG, não havendo diferença nos índices de prenhez (78,7%). Em conclusão, o MAP e BE regulam os receptores esteróides no endométrio e CL, evidenciando uma importante participação no mecanismo de luteólise prematura pós-parto. Além disso, esses esteróides participam da reestruturação pós-parto do endométrio e CL e, aplicados aos 60 dias pós-parto, associados ao eCG um dia antes da retirada do implante vaginal, resultam em maior eficácia reprodutiva em vacas de corte.