Submitted by Cristiane Chim (cristiane.chim@ucpel.edu.br) on 2017-02-15T13:44:21Z No. of bitstreams: 1 Tese Henrique Ribeiro Issacsson.pdf: 26423531 bytes, checksum: 842afd4c9c66fc82555f2eb9af20dd15 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-15T13:44:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese Henrique Ribeiro Issacsson.pdf: 26423531 bytes, checksum: 842afd4c9c66fc82555f2eb9af20dd15 (MD5) Previous issue date: 2014-12-10 / We describe the case of a newborn with MEND, which presents in addition to the membrane collodium, polydactyly, Syndactyly, microphthalmia, corpus callosum agenesis, agenesis of vérmix Cerebellar, cerebellar hypoplasia, and Dandy Walker cyst. It was still Analysis by scanning electron microscopy Collagen membrane and genetic sequencing of the EBP gene. Is responsible for the encoding of the enopamil binding enzyme. In the electron microscopy findings, there was an intense Desquamation of corneocytes on the outer face of the collodic membrane, Nucleated corneocytes on the inner face, and several layers of Forming a thick membrane. The DNA test found New mutation in the EBP gene in exon 4 c.439C> T, p.R147C.New Cases need to be sought, and should be reported for the best Knowledge of this disease. / Descrevemos o caso de um recém-nascido portador da Síndrome de MEND, que apresenta além da membrana colódio, polidactilia, sindactilia, microftalmia, agenesia de corpo caloso, agenesia de vérmix cerebelar, hipoplasia cerebelar e cisto de Dandy Walker. Foi ainda realizada análise através de microscopia eletrônica de varredura da membrana colódio e sequenciamento genético do gene EBP, sendo este responsável pela codificação da enzima ligação do emopamil. Nos achados de microscopia eletrônica evidenciou-se intensa descamação de corneócitos na face externa da membrana colódio, além de corneócitos nucleados na face interna, e várias camadas de células formando uma membrana espessa. O exame do DNA localizou nova mutação no gene EBP no exon 4 c.439C>T,p.R147C.Novos casos necessitam ser buscados, e devem ser relatados para o melhor conhecimento desta doença.

Orientador: Maria Beatriz Puzzi / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-07T22:49:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Souto_MariamPatriciaAuada_D.pdf: 7783740 bytes, checksum: ba776e2125f132647d619bed067b9da5 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: A síndrome de Sjögren-Larsson (SSL) é uma ictiose congênita com alterações neurológicas decorrentes da deficiência enzimática da enzima aldeído graxo desidrogenase (FALDH). Mutações no gene ALDH3A2 são responsáveis pela doença. A proposta foi estudar os aspectos clínicos, histológicos, estruturais e moleculares de dez pacientes com SSL. Métodos: Foram selecionados dez pacientes com SSL de quatro famílias distintas. Foi realizada ressonância magnética cerebral (RM) em oito pacientes e, em sete destes, também espectroscopia de prótons; os resultados foram comparados com a espectroscopia de sete voluntários sadios. Foram coletadas biópsias de pele de cada paciente e pele sã de 17 voluntários. Os espécimes foram corados com hematoxilina-eosina e imagens digitais foram adquiridas a partir do exame histológico de rotina; a luminância em escala de cinza foi analisada utilizando método quantitativo de análise de textura de imagem digital: transformada rápida de Fourier, calculada a partir dos valores do momento de inércia (função harmônica) das frequências espaciais nas direções vertical e horizontal da camada espinhosa da epiderme. Amostras de pele de nove pacientes com SSL também foram obtidas para cultura de fibroblastos utilizando método padrão para dosagem da enzima FALDH. Para a extração de DNA genômico foi coletado sangue total periférico de nove pacientes. Os fragmentos foram amplificados por PCR. Os resultados obtidos foram analisados e comparados com a seqüência normal de DNA. Resultados: A mutação encontrada foi a 1108-1G?C no intron 7/exon 8. Os pacientes exibiram diferenças na presença e intensidade dos sinais e sintomas da doença (prurido, retardo mental, espasticidade, fotofobia e alterações da retina). No exame de RM dos pacientes com SSL foi observada desmielinização da substância branca profunda; na espectroscopia, presença de pico anormal de lípídios. O estudo da textura da camada espinhosa da epiderme, sob a Transformada de Fourier, mostrou amplitudes de função harmônica mais largas no grupo com SSL na direção vertical e não na direção horizontal, correspondendo a núcleos e nucléolos maiores e ao espessamento focal da carioteca dos ceratinócitos. Conclusões: As manifestações clínicas e histológicas da SLS não são exclusivamente decorrentes da mutação c.1108-1G>C, mas também expressão de outras modificações genéticas e influências ambientais. A mutação descrita pode ser classificada como uma causa comum da doença no Brasil. Os achados de textura podem ser explicados pela maior síntese de DNA na epiderme na SSL, tendo sido descrita, também, uma produção mais rápida da camada córnea e uma renovação celular 3,5 vezes o normal / Abstract: Background: Sjögren-Larsson syndrome (SLS) is an autosomal recessive disorder characterized by ichthyosis, mental retardation, and spasticity. Various mutations in the ALDH3A2 gene that codes for fatty aldehyde dehydrogenase (FALDH) are responsible for the disease but the genotype-phenotype relationships are undefined. Objectives: The purpose of this study was to describe ten individuals with Sjögren-Larsson syndrome from four families representing the first cohort of Brazilian patients defined at the molecular level and investigate whether image analysis of routine H&E skin sections using fast Fourier transformation (FFT) could detect structural alterations in SLS. Patients and methods: A 5-mm punch biopsy for histologic analysis was obtained under local anesthesia from each patient. Similar biopsies were obtained from age- and anatomical site-matched from 17 controls. The samples were stained with haematoxylin and eosin and observed under a light microscope. Digital images of routine histologic sections were taken and their gray scale luminance was analyzed by FFT. The inertia values were determined for different ranges of the spatial frequencies in the vertical and horizontal directions. Skin biopsies were also obtained from nine patients with SLS for establishing fibroblast cultures using standard methods to determine FALDH enzyme activity. MR imaging was performed in eight patients. Singel-voxel proton MR spectra were acquired from cerebral white matter in seven patients with SLS and in seven controls. Total genomic DNA was extracted from peripheral blood of nine patients using standard methods. ALDH3A2 exons and their flanking sequences were amplified by PCR and sequenced. Results: All patients were homozygous for a unique c.1108-1G>C splice-site mutation and displayed a profound reduction in fatty aldehyde dehydrogenase enzyme activity. The patients exhibited a moderate-to-severe form of Sjögren-Larsson syndrome with respect to mental retardation, spastic diplegia and ichthyosis. Within this phenotypic context, patients varied, even within a family, in the presence of pruritus, thickness of the epidermal granular layer, retinal glistening white dots and photophobia. Brain MR imaging revealed retardation of myelination. Proton MR spectroscopy of white matter revealed abnormal high-lipid peak. The study of epidermal spinous layer texture by Fast Fourier Transform showed higher amplitudes in the vertical direction in SLS patients, corresponding to greater nuclei and nucleoli, higher number of nucleoli and focal thickening of keratinocytes¿ carioteca. Conclusion: We concluded that the latter clinical features are not strictly determined by the c.1108-1G>C mutation, but are subject to modification by other genetic/environmental factors. The c.1108-1G>C mutation may be classified as a common cause of Sjögren-Larsson syndrome in Brazil. The textural findings are in keeping with higher DNA synthesis and a 3.5x turn over that were demonstrated in SLS epidermis / Doutorado / Clinica Medica / Doutor em Clínica Médica