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Dosagem da IgA sérica por ELISA de captura para o diagnóstico de dengueMorais, Viviane Martha Santos de 28 February 2013 (has links)
Submitted by Ramon Santana (ramon.souza@ufpe.br) on 2015-03-10T14:49:55Z
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Previous issue date: 2013-02-28 / Introdução: O diagnóstico rápido, simples e preciso para confirmar a infecção pelo vírus dengue (DENV) é uma necessidade real, uma vez que a doença pode se manifestar com um amplo espectro de sinais e sintomas, similares a outros quadros febris agudos. Durante a infecção por dengue se verifica também a produção da imunoglobulina A (IgA) específica, que aumenta ao mesmo tempo que a imunoglobulina M (IgM), permanece positiva por um período de tempo mais curto e se apresenta em níveis mais elevados na infecção secundária. Objetivo: O presente estudo teve como objetivo investigar a presença de IgA no soro durante a infecção primária e secundária (sequencial) pelo DENV. Metodologia: Foram avaliadas amostras de soro por meio do teste imunoenzimático de captura da IgA (AAC-ELISA) in house. Resultados: Avaliou-se um total de 445 amostras de soro, sendo 171 caracterizados como infecção primária e 194 secundária; 40 amostras de indivíduos saudáveis negativos para dengue e 40 de vacinados contra febre amarela. As amostras foram distribuídas em 13 grupos. A positividade da IgA foi de 42,2% (154/365), sendo 27,5% (47/171) na infecção primária e 55,2% (107/194) na secundária. Na infecção secundária, a IgA foi detectada do 2º ao 4º dias de sintomas (grupo 1), antes mesmo da IgM, assim como no grupo 11 no qual a IgM não havia sido detectada (infecção secundária). Na infecção primária o maior valor da sensibilidade foi de 60,0 (36,4 - 80,0) no grupo com 30-35 dias de sintomas e na secundária foi de 87,5% (60,4 – 97,8), grupo com 8 dias de sintomas. A especificidade foi de 100% nas duas infecções (94,3 – 100). Ao aplicar o teste em paralelo para ambas técnicas observou-se um aumento global de 6,6% na sensibilidade do diagnóstico; sendo 2,7% para a infecção primária e de 15,2% para a secundária. A IgA não foi detectada nas amostras dos indivíduos saudáveis, nem nas amostras dos indivíduos recentemente vacinados contra febre amarela. Conclusões: A detecção da IgA demonstrou ser útil como forma de diagnóstico sorológico e em conjunto com a detecção da IgM poderá auxiliar na confirmação de casos agudos de dengue e na interpretação dos resultados de casos inconclusivos, permitindo a adoção de medidas preventivas para evitar a ocorrência de epidemias e ocorrência de casos graves e óbitos.
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Aspectos clínicos e moleculares da dengue na epidemia de 2012/ 2013 em Goiânia – GO, Brasil.Rocha, Benigno Alberto Moraes da 03 December 2015 (has links)
Submitted by JÚLIO HEBER SILVA (julioheber@yahoo.com.br) on 2016-12-14T17:53:04Z
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Previous issue date: 2015-12-03 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Outro / Background: Dengue is the fastest growing arbovirosis in the world, infecting almost
390 million people. The dengue virus is the etiological agent of the disease, which has
four serotypes (DENV1-4). All serotypes can cause dengue, varying from asymptomatic
to severe forms and may lead to death. In Brazil, in 2010, there was the re-emergence of
serotype DENV-4 after 28 years. In 2013, it was registered the largest epidemic in
history with more than 1.4 million cases and circulation of the four serotypes. In the
state of Goiás, Central Region of Brazil, after serotype DENV-4 entry in 2011, for the
first time in the region, in 2013, there was a major epidemic which registered more than
10% of the cases in Brazil, more often DENV -4 followed by DENV-1. In this scenario,
a study was conducted with the objective to characterize the clinical and molecular
profile of patients with dengue; establish if there were associations between clinical and
laboratory markers of severity with the infectious virus serotypes; and genetic
characterization of the more frequent virus serotype during the 2012/2013 dengue
epidemic in Goiânia, Goiás.
Methods: A prospective clinical study with suspected dengue patients from eight
reference health units (five public, two hospitals and three of secondary level; and three
private hospitals) from January 2012 to July 2013 was conducted. The patients were
evaluated in three different moments by clinicians who collected clinical and
sociodemographic information. Blood sampling for laboratory testing (Hg, AST, and
ALT) and confirmatory tests for dengue infection (IgM, IgG, NS1, and RT-PCR) were
performed. The gene sequencing of dengue virus type 4 envelope was also carried out.
Patients with confirmation of dengue infection were classified according to clinical
signs according to the World Health Organization.
Principal findings: Six hundred and fifty patients were recruited; 18 were excluded,
and 632 were followed. Four hundred fifty-two patients (71.5%) had confirmed
infection and 112 (24.8%) were hospitalized. More than 90% were over 15 years of age,
and 235 were female (52.0%). In 328 patients, it was possible to classify the type of
infection, and 248 (75.6%) of these had a secondary infection. 188 (41.6%) were
classified as FD, 238 (52.6%) as DwC and 26 (5.8%) with DG. Compared to those aged
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over 15 years, spontaneous bleeding, severe abdominal pain and plasma extravasation
were more frequent in children under 15 years of age (p <0.05). There was one death of
a 16-year-old. During two years of follow-up, viral RNA was identified in 243 (40.5%)
of 600 patients evaluated in these tests, where the four serotypes were identified: 91
(37.4%) with DENV-1, 4 (1.6%) with DENV-2, 13 (5.3%) with DENV-3 and 135
(55.5%) with DENV-4. A higher frequency of some symptoms of severity was observed
(thrombocytopenia, spontaneous bleeding and severe abdominal pain) in DENV-1
serotype compared to DENV-4. Eighty percent of patients with DENV-4 had a
secondary infection. In the phylogenetic study of DENV-4 envelope gene, genotype II
was identified.
Conclusion: The present study described clinically and molecularly a large dengue
epidemic that occurred in a state of Brazil's Central Region, which revealed the
concurrent circulation of the four serotypes, the frequency of clinical signs of disease
severity in children aged under 15 years and in people with DENV-1 infection. It also
identified the current genotype of the most common serotype in the epidemic. These
findings should serve as a warning sign for the health authorities because we are
experiencing a significant dispersion of serotypes situation worldwide. / Contexto: Dengue é a arbovirose que mais cresce no mundo, infectando quase 390
milhões de pessoas. Ela é causada pelos vírus dengue que possui quatro sorotipos
(DENV1-4). Todos os sorotipos podem causar a doença, que varia de formas
assintomáticas a graves e podem levar a óbito. No Brasil em 2010 houve a reemergência
do sorotipo DENV-4 após 28 anos. No ano de 2013, foi registrada a maior epidemia da
história com mais de 1,4 milhão de casos e circulação do quatro sorotipos. Na Região
Central do Brasil, Estado de Goiás, após a entrada sorotipo DENV-4, em 2011, pela
primeira vez na região, em 2013, aconteceu uma grande epidemia onde foi registrado
mais de 10% dos casos do Brasil, com maior frequência do DENV-4 seguido pelo
DENV-1. Neste cenário foi realizado um estudo com os objetivos de caracterizar o
perfil clínico e molecular dos pacientes com dengue, estabelecer se houve associação
entre marcadores de gravidade clínica e laboratorial com os sorotipos virais infectantes
e caracterizar geneticamente o vírus da dengue mais frequente que circulou na epidemia
de 2012/2013 em Goiânia – GO.
Metodologia: Foi realizado um estudo clínico prospectivo com pacientes suspeitos de
dengue atendidos em oito unidades de saúde (cinco públicas, sendo dois hospitais e três
de nível secundário; três hospitais privados) de referência de janeiro de 2012 a julho de
2013. Os pacientes foram abordados em três momentos diferentes e avaliados por
clínicos que coletaram informações clínicas e sócio-demográficas. Também houve
coleta de sangue para realização de exames complementares (Hg, AST e ALT) e
exames confirmatórios da infecção por dengue (IgM, IgG, NS1 e RT-PCR). Foi
realizado ainda o sequenciamento do gene do envelope do vírus dengue tipo 4. Os
pacientes com confirmação da infecção por dengue foram classificados quanto à forma
clínica da doença de acordo com a Organização Mundial de Saúde,
Principais achados: Foram recrutados 650 pacientes, dos quais 18 foram excluídos e
632 foram seguidos. Quatrocentos e cinquenta e dois pacientes (71,5%) tiveram a
infecção confirmada. Destes, 112 (24,8%) foram hospitalizados. Mais de 90% tinham
idade superior a 15 anos e 235 (52,0%) eram do sexo feminino. Para 328 pacientes foi
possível classificar o tipo de infecção e destes, 248 (75,6%) tiveram infecção
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secundária. Classificou-se como FD 188 indivíduos (41,6%), 238 (52,6%) com DwC e
26 (5,8%) com DG. Sangramento espontâneo, dor abdominal intensa e extravasamento
de plasma foram mais freqüentes em menores de 15 anos de idade, quando comparado
aos maiores de 15 anos (p<0,05). Houve um óbito de um adolescente de 16 anos de
idade. O RNA viral foi identificado em 243 (40,5%) de 600 pacientes investigados por
estes exames, onde foi identificados os quatros sorotipos DENV-1 em 91 pacientes
(37,4%) DENV-2 em 4 (1,6%), DENV-3 em 13 (5,3%) e DENV-4 em 135 (55,5%) nos
dois anos de acompanhamento. Foi observada uma frequência maior de alguns sintomas
de gravidade (plaquetopenia, sangramentos espontâneos e dor abdominal intensa) no
sorotipo DENV-1 comparado ao DENV-4. Oitenta por cento dos pacientes com DENV-
4 tiveram infecção secundária. No estudo de filogenia do gene do envelope do DENV-4
foi identificado o genótipo II.
Conclusão: Foi descrito clínica e molecularmente uma grande epidemia que ocorreu em
um Estado da Região Central do Brasil que revelou a circulação concomitante dos
quatros sorotipos virais, frequência de sinais de gravidade em menores de 15 anos de
idade e em pessoas com infecção pelo DENV-1. Identificou-se ainda o genótipo
circulante do sorotipo mais freqüente na epidemia. Estas constatações devem servir de
sinal de alerta para as autoridades de saúde, pois nos encontramos em situação de
grande dispersão dos sorotipos em todo o mundo.
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