Mycoplasma genitalium es un patógeno humano asociado con algunas enfermedades de transmisión sexual. Las técnicas proteómicas, además de otras técnicas en análisis de la expresión génica, tienen un papel muy importante en el entendimiento de los mecanismo(s) de patogénesis y fisiología bacteriana. El proteoma de Mycoplasma genitalium, modelo de célula mínima, ha sido extendido utilizando diferentes tecnologías y aproximaciones. El proteoma total de este microorganismo ha sido analizado mediante diferentes metodologías que ofrece la proteómica, gracias a las cuales se ha conseguido la identificación del 85.3% de los ORFs predichos. Además, se ha desarrollado el análisis del subproteoma de membrana. En este sentido, la fracción soluble en TX-114 ha sido analizada así como las proteínas de superficie celular utilizando el marcaje de proteínas de superficie mediante CyDye. Finalmente, la respuesta serológica frente a Mycoplasma genitalium de pacientes infectados y de donantes sanos ha sido analizada para conocer que proteínas bacterianas promueven la respuesta inmune. Por consiguiente, no solo se presenta el análisis proteómico más extenso de Mycoplasma genitalium, sino también el análisis proteico más completo de la membrana de Mycoplasma genitalium además de la respuesta serológica en humanos. / Mycoplasma genitalium is a human pathogen associated with several sexually transmitted diseases. Proteomic technologies, along with other methods for global gene expression analysis, play a key role in understanding the mechanisms of bacterial pathogenesis and physiology. The proteome of M. genitalium, model of a minimal cell, has been extended using a combination of different proteomic approaches and technologies. The total proteome of this microorganism has been analyzed using gel‐based and gel‐free approaches achieving the identification of 85.3% of the predicted ORFs. In addition, a comprehensive analysis of membrane subproteome has been performed. For this purpose, the TX‐114 soluble fraction has been analyzed as well as the surface proteins, using cell surface protein labeling with CyDye. Finally, the serological response of M. genitalium infected patients and healthy donors has been analyzed to identify proteins that trigger immunological response. Here we present the most extensive M. genitalium proteome analysis (85.3% of predicted ORFs) , a comprehensive M. genitalium membrane analysis, and a study of the human serological response to M. genitalium.