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Isolamento e caracterização de bactérias autóctones de nódulos de Arachis hypogaea L. /

Scaquitto, Denilson César. January 2009 (has links)
Orientadora: Eliana Gertrudes Macedo Lemos / Banca: Miguel Luiz Menezes Freitas / Banca: Haroldo Alves Pereira Junior / Banca: Jackson Antonio Marcondes de Souza / Banca: Cristina Lacerda Soares Petrarolha Silva / Resumo: O amendoim (Arachis hypogaea L.) faz parte da família Fabaceae, que é capaz de associar-se com bactérias do gênero Rhizobium. Em solos onde o amendoim é cultivado tem-se a presença de uma população autóctone desta bactéria. A necessidade de inoculação das sementes de amendoim em solos contendo população autóctone tem sido sempre discutida. Com o objetivo de avaliar o efeito da inoculação de sementes de amendoim cultivado em vasos contendo vermiculita e a interação existente entre microrganismo-planta e microrganismo-microrganismo, foi realizado um experimento sob cultivo em casa de vegetação, em vasos de 0,5 L, com o cultivar IAC 886 e a IAC Tatu-ST, com três repetições. Os tratamentos foram constituídos de aplicação dos isolados individualmente e combinados com a estirpe padrão tipo SEMIA 6144, Bradyrhizoibium sp., recomendada pelo Ministério da Agricultura e sem aplicação de inoculante, sem aplicação de qualquer isolado. Houve interação entre o tipo de plantio e a aplicação de inoculante para todas as variáveis analisadas. Para a massa de matéria seca da parte aérea houve uma diferença significativa. O variável número de nódulos e o teor de Nitrogênio também apresentam diferenças quanto à aplicação, sendo que, em todos os casos foram superiores ao controle sem aplicação com os isolados nativos. / Abstract: Peanut (Arachis hypogaea L.) belonging to Fabacea family, is able of associating with bacteria from Rhizobium genus. In soils where peanut is grown, there is usually an autochthonous population of these bacterial, however, the need of inoculation in peanut seeds in soils containing autochthonous population has always been controversial subject. With the objective of evaluating the effects of peanut seeds inoculation cultivated in vases contend vermiculite and to verifying the interaction with plant regulators, an experiment was carried out in greenhouse conditions, with three repetitions containing Runner IAC 886 e IAC Tatu-ST cultivar. The treatments were constituted of application of the individually isolated and combined with the lineage standard Bradyrhizobium sp., SEMIA 6144, recommended by Bureau of the Agriculture. An interaction was observed between the type of plantation and the application of inoculants for all analysed variable. For the mass of dry matter of the aerial part it had a significant difference. The variable numbers of nodules and rate of Nitrogen also present differences related to the treatments, being that, in all the cases was greater to the control without application of the isolated natives. / Doutor
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Estabilidade aeróbia de silagens de planta e de grãos úmidos de milho /

Basso, Fernanda Carvalho. January 2010 (has links)
Resumo: Objetivou-se avaliar a estabilidade aeróbia de silagens de planta e de grãos úmidos de milho com a utilização de inoculante microbiano, bem como o uso de filme plástico de baixa permeabilidade ao oxigênio associado ao filme convencional. Para tanto foram conduzidos três experimentos. No primeiro e segundo experimentos os objetivos foram avaliar os efeitos de doses de Lactobacillus buchneri (5x104, 1x105, 5x105 e 1x106 UFC/ g) sobre as características fermentativas, a dinâmica microbiológica, a estabilidade aeróbia e o valor nutricional de silagens de planta e de grãos úmidos de milho. No terceiro experimento, objetivou-se avaliar o efeito do filme plástico de baixa permeabilidade ao oxigênio associado ao filme convencional sobre a perdas na armazenagem e a estabilidade aeróbia de silagem de planta de milho, em silo tipo superfície. O L. buchneri é eficiente no controle de leveduras e fungos filamentosos, assim como melhora a estabilidade aeróbia da silagem de planta e de grãos úmidos de milho e não afeta o valor nutricional. O filme de baixa permeabilidade ao oxigênio associado ao filme convencional é eficiente na manutenção das características fermentativas, no controle da população de leveduras e na redução de perdas, principalmente quando a fatia de retirada é menor / Abstract: Aimed to evaluate the aerobic stability of plant and of high moisture corn silage with the use of microbial inoculant and oxygen barrier film associated with conventional film. Therefore, three experiments were conducted. In the first and second experiments the objectives were to evaluate the effects of Lactobacillus buchneri doses (5x104, 1x105, 5x105 and 1x106 CFU/g) on the fermentation characteristics, microbial dynamics, aerobic stability and nutritional value of plant and of grain moisture corn silage. The third experiment aimed to evaluate the effect of oxygen barrier film associated with conventional film under the storage losses and aerobic stability of plant corn silage in a horizontal silo. The L. buchneri is effective in control of yeasts and molds, and improve the aerobic stability of plant and of high moisture corn silage and do not affect nutritional value. The oxygen barrier film is effective in maintaining the fermentation characteristics, in yeasts population control and loss reduction, mainly when the feedout rate is lower / Orientador: Ricardo Andrade Reis / Coorientador: Thiago Fernandes Bernardes / Coorientador: Ana Claudia Ruggieri / Banca: Clóves Cabreira Jobim / Banca: Antonio Fernando Bergamaschine / Mestre
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Alterações microbiológicas e químicas na silagem de cana-de-açúcar (Saccharum officinarum L.) in natura e queimada, inoculadas ou não, com Lactobacillus buchneri /

Vittori, Juliano. January 2009 (has links)
Orientador: Ruben Pablo Schocken-Iturrino / Banca: Hélio José Montassier / Banca: Alessandra Aparecida Medeiros / Resumo: Visando suplementar ruminantes no período seco, a cana-de-açúcar nos últimos anos tem sido bastante pesquisada e empregada como volumoso alternativo, principalmente na forma de silagem. Na ensilagem desta forrageira, principalmente quando utilizada após queima do canavial, ocorre uma alta atividade de leveduras epífitas que convertem os carboidratos solúveis da forragem em etanol, gás carbônico e água, levando a elevadas perdas de matéria seca, aumento no teor de fibra em detergente neutro e diminuição de consumo. Buscando amenizar esses problemas temse pesquisado inoculantes bacterianos compostos por bactérias ácido-produtoras, tais como o Lactobacillus buchneri. Sendo assim, objetivando avaliar os efeitos antimicrobianos e químicos na silagem de cana-de-açúcar queimada e inoculada com Lactobacillus buchneri, quatro silos de superfície foram analisados por meio dos seguintes tratamentos: cana-de-açúcar crua sem aditivo; cana-de-açúcar crua inoculada com L. buchneri; cana-de-açúcar queimada sem aditivo e cana-de-açúcar queimada e inoculada com L. buchneri. As amostragens foram efetuadas após 0, 21, 49, 77 e 105 dias de utilização dos silos, sendo retiradas do centro e superfície do painel. Houve redução na população de leveduras e fungos filamentosos nas silagens inoculadas e aumento nas queimadas. Constatou-se maior população de microrganismos na camada superficial, além de maiores valores de pH e nitrogênio amoniacal. Ocorreram menores perdas de matéria seca na silagem de cana-de-açúcar queimada e inoculada em relação ao seu controle. As silagens apresentaram os fungos filamentosos Aspergillus, Penicillium, Trichoderma, Rhizopus e Neurospora após abertura, verificando-se redução na frequência dos mesmos ao longo do período. O inoculante exerceu um efeito redutor na população de leveduras e na perda de MS sendo esse efeito potencializado pela... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: In order to supplement ruminants's diets in dry period, sugarcane in the last years has been researched and processed as silage to used as an alternative food. In this ensilage process, mainly after sugar cane plantation have been set on fire, occurs a high activity of yeasts that convert the soluble carbohydrates of the forage in ethanol, carbon dioxide and water, leading to dry matter losses, increase in fiber content and decrease in the intake. In a way to solve those problems bacterial inoculants produced with acid-producers bacteria's, such as Lactobacillus buchneri, have been researched. Considering this the aim of the present study was to evaluate the microbiological and chemical effects on burned sugarcane silage when inoculated with Lactobacillus buchneri. Four silos type surface were analyzed using the following treatments: sugarcane without additives; sugarcane inoculated with L. buchneri; burned sugarcane without additives; and burned sugarcane inoculated with L. buchneri. The samples were taken after 0, 21, 49, 77 and 105 days after opening the silos and they were taken from the center and the surface of the panel. There was a reduction in the population of yeasts and filamentous fungi in inoculated silages and an increase of them in burned silages. There was a greater population of microorganisms in the superficial layer, in addition to higher pH values and ammoniacal nitrogen. The burned silage inoculated with L. buchneri showed the least amount of losses of dry matter in comparison to the control sample. The fungi Aspergillus, Penicillium, Trichoderma, Rhizopus and Neospora were found in the silages after opening the silos and the frequency of these microorganisms decreased with the passing of time. The inoculating had an reduccing effect in the yeast's population and in the loss of DM, and this effect was enhanced by the burn of the sugarcane... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Enumeração celular pela quantificação absoluta por PCR em tempo real de culturas de bradirrizóbios /

Stropa, Karla Cristina. January 2009 (has links)
Resumo: O teor protéico da semente de soja pode chegar a 42%, o que demanda uma alta quantidade de nitrogênio. Bradyrhizobium elkanii e Bradyrhizobium japonicum são bactérias fixadoras de nitrogênio que estabelecem uma simbiose com a soja convertendo o nitrogênio atmosférico em amônia, que é o composto assimilável pela planta. A maximização desta simbiose em termos de produtividade são alcançados por meio da inoculação com estirpes de bradirrizóbios, através de inoculantes comerciais. O objetivo deste trabalho consistiu em enumerar células bacterianas de inoculantes de 1, 2 e 4 anos a partir da data de fabricação e avaliar a sobrevivência das células em sementes de soja em 4, 24 e 48 h após inoculação. Os resultados de contagem das unidades formadoras de colônias (UFC) foram confrontados com a técnica de quantificação absoluta por PCR (reação em cadeia da polimerase) em tempo real (qaPCR). Os números foram coerentes em ambas as técnicas em relação à proporção nos tempos de inoculação e nos inoculantes em análise, porém a qaPCR apresentou melhor acurária e rapidez nos resultados, detectando as células incultiváveis. As células resistiram sob dessecação até t=24 h, com queda considerável em todos os inoculantes após 48 h sob dessecação. Provavelmente esta queda é resultado de alteração bioquímica e fisiológica de seu metabolismo, dispondo de mecanismos defensivos às condições adversas para sua sobrevivência. A enumeração por qaPCR pode ser usada como prova, em casos de variação encontrada na quantificação por diferentes laboratórios, considerando que o método por UFC apresenta muitas variáveis e não incluem células viáveis não cultiváveis (VBNC). O fato do estado fisiológico dos rizóbios em inoculantes ser bastante variável ao longo do período de armazenamento, a enumeração celular seja pelo método de plaqueamento... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Soybean grains contain up 42% of protein, so this crop requires high amounts of nitrogen for plant development. Bradyrhizobium elkanii and Bradyrhizobium japonicum are nitrogen fixing bacteria that establish symbiosis with soybean, converting the atmospheric nitrogen into ammonia that is the assimilable inorganic nitrogen compound for the plant. The optimization of this symbiosis and the success of biological nitrogen fixation (BNF) are reached by inoculating the seeds with strains of bradyrhizobia, using commercial inoculants. The aim of this work consisted in the enumeration of bacterial cells of inoculants 1, 2, and 4 years old counting from the date of manufacture and in the evaluation of surviving cells under desiccation in soybean seeds after 4h, 24h, and 48 h. The results of counting of the colony forming colonies (CFU) were correlated with those of obtained using absolute quantification by PCR (realtime PCR qaPCR). The values were coherent in both the techniques in relation to the ratio in times of inoculation and the inoculants properly. However, qaPCR was quicker and more occurat; and also allowed detection of the non-culturable cells. The cells resisted under desiccation until t=24 h, with considerable fall in all the inoculants after 48h under desiccation. This was probably due to by biochemical and physiological changes in its metabolism, making use of defensive mechanisms to the adverse conditions for its survival. qaPCR enumeration could be used as a proof when variation in cell counting by different laboratories occurs. Considering that CFU based method present a lot of variables and do not account live cells in viable but non culturable (VBNC). The fact of the physiological state in rhizobia inoculants be sufficiently changeable throughout the storage period, the cellular enumeration for both methods do not reveal real state of the biological system in question... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Jackson Antônio Marcondes de Souza / Coorientadora: Eliana Gertrudes Macedo Lemos / Banca: Manoel Victor Franco Lemos / Banca: Emanuel Maltempi de Souza / Mestre

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