No presente estudo foi realizado a análise qualitativa da remoção do magma dentinário do terço apical de raízes curvas, quando submetidos a irrigação convencional, irrigação ultrassônica passiva e irrigação sônica. Como corpos de prova, foram utilizados 62 canais mésio-vestibulares com curvatura entre 20° e 40° de molares inferiores. Todos os condutos, após odontometria, foram instrumentados com o sistema rotatório até a lima F2. Destes, dois condutos foram utilizados como controle negativo, e os outros sessenta foram divididos aleatoriamente em três grupos experimentais conforme sua irrigação final: G1- irrigação convencional com seringa e agulha; G2- irrigação ultrassônica passiva; G3- irrigação sônica com sistema EndoActivator®. Em todos os grupos experimentais, foram utilizados 5mL de EDTA 17% por 1 minuto e 5mL de NaOCl 2,5% por 30 segundos. A observação da região apical, após clivagem, foi realizada através de microscopia eletrônica de varredura em aumento de 1000X. Isto posto, as imagens obtidas foram avaliadas por 3 examinadores calibrados pelo sistema de 3 pontos. Da análise dos resultados, pelo teste de Kruskal-Wallis, pode-se observar que os sistemas sônico e ultrassônico removeram significativamente o magma dentinário, sem diferença estatística entre os grupos. Quando comparados estes sistemas com a irrigação convencional, ambos mostraram-se mais eficientes, sendo os dois grupos estatisticamente diferentes do grupo convencional. Conclui-se que a irrigação sônica e irrigação ultrassônica passiva apresentam resultados semelhantes, aumentando a remoção do magma dentinário no terço apical de raízes curvas. / The aim of this study is to qualitative evaluate, the smear layer removal in the apical third of curved canals, after sonic, ultrasonic and conventional irrigation. Sixty two mesiobuccal root canals of mandibular molar with curvature degree between 20 and 40 degrees, were shaped with rotary system ProTaper® until file F2, and occasionally divided into three experimental groups (n=20) and one control group (n=2). The control group received no final irrigation after fitting of the master cone. The experimental groups received those final irrigations: G1- conventional irrigation with no agitation of the irrigant; G2- passive ultrasonic irrigation; G3- sonic irrigation with EndoActivator® system. In all groups, a final irrigation with 5mL EDTA 17% for 1 minute and 5mL NaOCl 2,5% for 30 seconds was procedure. Root canals were split longitudinally and subjected to scanning electron microscopy at a magnification of 1000X. The presence of smear layer was evaluated by three calibrated observers using a three-score scale. The differences in smear layer scores between the experimental groups were analyzed with Kruskal-Wallis test. Concerning the activations groups, both removed significantly smear layer, with no statistical significant difference. There were statistical significant differences when comparing this systems with conventional irrigation, the activation systems removed significantly more smear layer. The sonic and ultrasonic irrigation, in a similar way, enhance the removal of the smear layer, in the apical third of curved canals.

O presente estudo teve por objetivo avaliar in vitro a eficiência dos sistemas de irrigação (convencional, ultrassônica e EndoSafe), na remoção do magma dentinário de canais mesiais curvos de molares inferiores, por meio de microscopia eletrônica de varredura. Foram utilizados canais mesiais com curvatura entre 200 e 400, de 47 molares inferiores, preparados com Reciproc (instrumento R25). Destes, dois condutos foram utilizados como controle negativo, e os outros foram divididos aleatoriamente em três grupos experimentais conforme a sua irrigação final: IC irrigação convencional com seringa e agulha; PUI irrigação ultrassônica passiva; EndoSafe irrigação com o sistema EndoSafe. Em todos os grupos foram utilizados 5mL de EDTA e 5mL de NaOCl por 30 segundos cada. A observação da região apical, após clivagem, foi realizada através de microscopia eletrônica de varredura em aumento de 1000X. Posteriormente, as imagens obtidas foram avaliadas por 3 examinadores calibrados pelo sistema de três pontos. Da análise dos resultados, pelo teste de Kruskal-Wallis, pode-se observar que o grupo ultrassônico e o EndoSafe apresentaram melhores resultados quando comparados ao grupo convencional, com diferença estatística entre os grupos (PIU: 40%; EndoSafe: 26,7% e IC: 6,7%; sem magma dentinário). Concluiu-se que a irrigação ultrassônica apresenta melhores resultados em comparação aos outros grupos, aumentando a remoção do magma dentinário no terço apical de raízes curvas. / The present study aimed to evaluate in vitro the efficiency of irrigation systems (conventional, ultrasound and EndoSafe system), on removing the smear layer of curved mesial root canals of mandibular molars by means of scanning electron microscopy to evaluate. Fourty seven mesial canals were used with curvature degree between 200 and 400, and were shaped with rotary system Reciproc (R25 instrument). Two of these were used as negative control, and the others were randomly divided into three groups according to their final irrigation: IC - irrigation with conventional syringe and needle; PUI - passive ultrasonic irrigation; EndoSafe - EndoSafe irrigation system. In all groups, 5mL of EDTA, and 5 mL of NaOCl was used for 30 seconds each. Root canals were split longitudinally and subjected to scanning electron microscopic at a magnification of 1000X. The presence of smear layer was evaluated by three calibrated observers using a three-score scale. Analyzing the results, using Kruskal-Wallis test, it could be observed that ultrasonic group and EndoSafe system showed better results when compared to the conventional group, statistical significance between groups (PIU: 40%; EndoSafe: 26.7% and CI: 6.7%; without smear layer). It was concluded that ultrasonic irrigation performs better compared to the other groups, increasing the removal of the smear layer in the apical third of curved roots.

Avaliou-se a citotoxicidade do hipoclorito de sódio a 1%, do digluconato de clorexidina a 2% e do Endoquil e seus efeitos na liberação de citocinas e de óxido nítrico em culturas de macrófagos peritoniais murinos. As substâncias sofreram diluições de 1.000 e 10.000 vezes: Grupo Controle, meio de cultura meio McCoy`s 5A® modificado e apirogênico; Grupo Hipoclorito de sódio a 1% (diluições A 0,001 e B 0,0001); Grupo Digluconato de Clorexidina a 2% (diluições A 0,002 e B 0,0002); Grupo Endoquil a 10% (diluições A 0,01 e B 0,001). Foram utilizados 70 camundongos da linhagem C57Bl/6j fêmeas. Após anestesia e sacrifício realizou-se a coleta do exudato celular por meio da injeção e aspiração de meio McCoy`s 5A® modificado na cavidade abdominal dos animais. O ensaio da atividade citotóxica foi realizado pelo Método do MTT nos períodos: curto prazo (4 e 12 horas); médio prazo (24, 48 e 72 horas) e longo prazo (5 e 7 dias). A absorbância dos poços foi lida em Leitora de Elisa a 550 nm. Os valores obtidos foram comparados com os valores do padrão, calculando-se assim a viabilidade e o número de células presentes de cada grupo avaliado em função do tempo. A quantificação in vitro das citocinas IL-1, IL-1, IL-6 e TNF- foi realizada por meio de imunoensaio do tipo Elisa, utilizando-se kit Quantikine® M murine. A análise da síntese de óxido nítrico foi conduzida segundo a metodologia de Griess, na qual o óxido nítrico é convertido a nitrito, sendo este último detectado colorimetricamente. Cada grupo experimental foi analisado em dois tempos de observação (24 e 48h), com estímulo de LPS ou não, em duplicatas. Os dados foram submetidos ao teste estatístico de análise de variância e, quando necessário, complementados pelo teste de Tukey. Após 12 horas, o grupo tratado com clorexidina na diluição A apresentou diminuição significativa da viabilidade celular em relação aos grupos tratados com hipoclorito de sódio e Endoquil; este declínio estendeu-se para 24, 48 e 72 horas quando provocou morte celular. Em 5 e 7 dias, ocorreu redução da viabilidade em todos os grupos, com diferença significante para o grupo da clorexidina. Em relação às citocinas e óxido nítrico: o hipoclorito de sódio e a clorexidina induziram a produção e exacerbaram o efeito do LPS sobre as IL-1 e IL-1 , respectivamente, enquanto que o Endoquil diminuiu estes efeitos; a clorexidina inibiu o efeito estimulatório do LPS, diminuindo a síntese de IL- 6; juntamente com o Endoquil, a clorexidina diminuiu a síntese de TNF- , enquanto que o hipoclorito aumentou esta produção em 24 horas; mesmo estimulados com LPS, o hipoclorito e a clorexidina comprometeram a síntese de óxido nítrico, em 24horas e, após 48 horas, apenas a clorexidina manteve a inibição. / The cytotoxicity of 1% sodium hypochlorite, of 2% chlorhexidine digluconate and of Endoquil and its effects on cytokine release and nitric oxide were evaluated in culture of murine peritoneal macrophages. Substances were diluted 1,000 and 10,000 times: Control Group with culture medium using McCoy 5A`s® modified and apirogenic, Group Sodium Hypochlorite 1% (dilutions A - 0.001 and B - 0.0001); Group Chlorhexidine Digluconate 2% (dilutions A - 0.002 and B - 0.0002); Group Endoquil 10% (dilutions A - 0.01 and B - 0.001).70 female mice of strain C57BL/6J were used. After anesthesia and sacrifice, middle McCoy`s® 5A modified was injected in the abdominal cavity of animals and then the cellular exudate was aspirated. The cytotoxicity assay was performed by MTT method in the periods: short term (4 and 12 hours), medium term (24, 48 and 72 hours) and long term (5 to 7 days). The absorbance of the wells was read on ELISA reader at 550 nm. The values were compared with standard values, observing the viability and cell number in each group as a function of time. The in vitro quantification of cytokines IL-1, IL-1, IL-6 and TNF- was performed using an ELISA-type immunoassay, using the kit Quantikine® M Murine. Analysis of nitric oxide synthesis was conducted according to the Griess assay, in which nitric oxide is converted to nitrite, the latter being detected colorimetrically. Each experimental group was analyzed at two time points (24 and 48h) with stimulation of LPS or not, in duplicates. The data were submitted to statistical analysis of variance and, where necessary, complemented by Tukey test. After 12 hours, the group treated with chlorhexidine with dilution A significantly decreased cell viability when compared to the groups treated with sodium hypochlorite and Endoquil. This decline has extended to 24, 48 and 72 hours, when cell death occurred. After 5 and 7 days occured the reduction of viability in all groups, with significant differences for the chlorhexidine group. In relation to cytokines and nitric oxide: sodium hypochlorite and chlorhexidine induced the production and exacerbated the effect of LPS on IL-1 and IL-1 , respectively, while Endoquil decreased these effects;chlorhexidine inhibited the stimulatory effect of LPS, reducing the synthesis of IL- 6; just as Endoquil chlorhexidine decreased the synthesis of TNF-, but hypochlorite increased production in 24 hours; even stimulated with LPS, sodium hypochlorite and chlorhexidine undertook the synthesis of nitric oxide in 24 hours and, after 48 hours only chlorhexidine kept inhibition.

Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antibacteriana das soluções Tetraclean®, MTAD® e modificações desta formulação sobre uma cepa de Enterococcus faecalis pelo teste de contato direto e frente ao biofilme. Na metodologia de contato direto, uma suspensão de E. faecalis foi exposta às soluções irrigadoras, por períodos de 30 s, 1, 3 e 10 min, e um agente neutralizante foi utilizado. As colônias viáveis foram quantificadas após diluições seriadas e cultura em placas de ágar. Para determinação do número inicial de UFC, água esterilizada foi usada como controle. Para o crescimento do biofilme, amostras de biofilme dentário foram suspensas em BHI (Brain Heart Infusion), e incubadas por 14 dias em anaerobiose, tendo como substrato, discos de hidroxiapatita. Após o período de incubação, os biofilmes foram expostos às soluções irrigadoras por períodos de 30 s, 1 e 3 min. Os biofilmes corados com o Live/Dead Baclight stain (Molecular Probes, Europe BV), que diferencia células viáveis (verde) e células não-viáveis (vermelho) foram observados na microscopia confocal. As imagens do biofilme obtidas pelo software EZ-C1 for Nikon foram transferidas para análise quantitativa da proporção de células viáveis sobre o total de células do biofilme para o software Imaris 5.0. No teste de contato direto, o Tetraclean® eliminou completamente o E. faecalis em 30 s, enquanto o MTAD® e o MTAD® + CTR 0,01% eliminaram após 10 min, e o MTAD® + CTR 0,1% resultou em culturas negativas após 3 min de contato com a suspensão bacteriana. Quando removido o Tween 80 do MTAD®, e acrescida a CTR 0,01%, obteve-se culturas negativas após 1 minuto. Os resultados obtidos pelo método de exposição ao biofilme confirmaram os achados do teste de contato direto. / Abstract: The aim of this study was to evaluate the antibacterial effect of MTAD® and Tetraclean®. The tests were performed on Enterococcus faecalis using the direct exposure test and an in vitro biofilm model. Alternative formulations to MTAD® were also included in the experiments: MTAD® + 0.01% cetrimide (CTR); MTAD® + 0.1% CTR; MTAC (the detergent Tween 80 was substituted for cetrimide) with 0.01% CTR and MTAC (0.1% CTR). In the direct exposure test, a bacterial suspension was mixed with the irrigation solutions. After 30 seconds, 1 minute, 3 minutes and 10 minutes, an inactivator agent was used. The number or viable colonies were calculated after serial 10-fold dilutions and culture in agar plates. To calculate the initial number of colonies, sterilized water was used as a control. Dental biofilm samples were suspended in BHI broth and incubated in anaerobic conditions in hidroxiapatite discs. After incubation for 14 days, the biofilms were exposed to the irrigation solutions for 30 seconds, 1 minute and 3 minutes. Live/Dead Baclight stain (Molecular Probes, Europe BV) was used to diferentiate viable cells (Green) and non viable cells (Red). The samples were observed in the Confocal Laser Microscope. The biofilm images in 3D obtained in the EZ-C1 for Nikon software were transfered to quantitative analysis in the Imaris 5.0 software. The software calculated the ratio of green cells. In the direct exposure test, Tetraclean® and MTAC (0.1% CTR) erradicated E. faecalis in 30 s. MTAD® and MTAD® + 0.01% CTR eliminated E. faecalis after 10 min. MTAD® + 0.1% CTR resulted in negative culture after 3 min. Negative cultures were obtained after 1 min when MTAC (0.01% CTR) was used. The findings from the biofilm exposure method confirmed the results from direct exposure test. The Kruskal-Wallis statistical analysis showed a significant difference in time exposure to irrigant (P<0.001). / Orientador: Mario Roberto Leonardo / Coorientador: Markus Haapasalo / Banca: Mario Tanomaru Filho / Banca: Idomeo Bonetti Filho / Banca: Izabel Yoko Ito / Banca: Antonio Carlos Pizzolitto / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:32Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2004-02-18Bitstream added on 2014-06-13T20:41:57Z : No. of bitstreams: 1 yamashita_jc_dr_arafo.pdf: 1654679 bytes, checksum: ea4cab55ba1e8890848c0a5afe9fc1d2 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O objetivo deste estudo foi avaliar a microbiota presente no sistema canais radiculares antes e após o preparo biomecânico; e as condições histopatológicas da reparação apical e periapical após preparo biomecânico dos canais radiculares de dentes com reação periapical crônica. Foram utilizados 78 canais radiculares de dentes de cães, os quais, após indução de lesão periapical, foram submetidos ao preparo biomecânico utilizando as seguintes soluções irrigadoras: solução de digluconato de clorexidina a 2%, de hipoclorito de sódio a 2,5% ou soro fisiológico. Um grupo controle não recebeu preparo biomecânico. Foram realizadas culturas microbiológicas antes e após 30 dias do preparo biomecânico. Após este período os animais foram mortos para processamento e análise histopatológica. O estudo microbiológico demonstrou que houve redução dos microrganismos nos grupos que utilizaram soluções antimicrobianas (p<0,05), com melhor resultado para a solução de clorexidina. Os grupos que utilizaram solução fisiológica controle apresentaram aumento de microrganismos. No estudo histopatológico, foi observado, de um modo geral, infiltrado inflamatório periapical severo e em grande extensão, severo espessamento do ligamento periodontal e grandes áreas de reabsorção óssea e apical em todos os grupos (p>0,05). Concluiu-se que o emprego de soluções irrigadoras antimicrobianas durante o preparo biomecânico promove redução da microbiota endodôntica, sem a sua eliminação do sistema de canais radiculares em dentes de cães com lesão periapical. A solução de clorexidina a 2% proporcionou maior redução da microbiota que a solução de hipoclorito de sódio a 2,5% (p<0,05). Porém, os resultados histopatológicos demonstram que somente o preparo biomecânico não foi capaz de criar condições para reparação dos tecidos apicais e periapicais. / The aim of this study was to evaluate the microorganisms in the root canal system before and after biomechanical preparation and the apical and periapical repair after this biomechanical preparation. The study was performed in 78 root canals of dog's teeth with induced chronic periradicular lesion. There were used the following endodontic irrigating solutions: 2% chlorhexidine digluconate solution; 2.5% sodium hypochlorite solution, saline solution and a control group without biomechanical preparation. The microbiological sampling were performed before and 30 days after the biomechanical preparation. After this period the animals were killed to histological analysis. In the microbiologic study, the results showed that the antimicrobial solutions used reduced the number of microorganisms (p<0.05). The chlorhexidine solution showed better performance. The group that used saline solution and the control group presented an increased number of microorganisms. The histological results showed a severe periapical inflammation, severe thickness of periodontal ligament, apical and osseous resorption in all groups (p>0.05). It was concluded that the antimicrobial endodontic solution reduced but not eliminated the microorganisms present in root canals of dogþs teeth with necrosis and periapical lesion. The chlorhexidine solution was more effective in reducing the number of microorganisms than sodium hypochlorite solution (p<0.05). Although, the histopathological results showed that the biomechanical preparation alone was not capable to promote an adequate condition for the apical and periapical tissues repair.

Banca: Marcia Carneiro Valera Garakis / Banca: Antonio Olavo Cardoso Jorge / Banca: Giulio Gavini / Banca: Brenda Paula Figueiredo de Almeida Gomes / Banca: Caio Cezar Randi Ferraz / Resumo: Sabendo do envolvimento de endotoxinas e diferentes metaloproteinases da matriz (MMPs) no desenvolvimento de alterações periapicais, o objetivo desta pesquisa foi avaliar e correlacionar a presença de endotoxinas e MMP-3, MMP-8 e MMP-9 em canais radiculares de dentes com necrose pulpar e lesão periapical antes, durante e após a realização do preparo biomecânico (PBM) utilizando associação de diferentes agentes irrigantes e medicação intracanal. Foram selecionados 33 dentes unirradiculares com diagnóstico de necrose pulpar e que apresentavam lesão periapical visível radiograficamente. Imediatamente após a abertura coronária foi realizada a 1ª coleta do conteúdo do canal radicular. Em seguida, todos os canais tiveram os terços cervical e médio preparados utilizando 4 instrumentos oscilatórios (EndoEze) com NaOCl 2,5% como agente irrigante. Após, para preparo manual do terço apical, os dentes foram divididos em 3 grupos de acordo com o protocolo de irrigação: G1) NaOCl 2,5% (4 limas manuais); G2) NaOCl 2,5% (2 limas manuais) + água de cal [Ca(OH)20,14%] (2 limas manuais) e G3) NaOCl 2,5% (2 limas manuais) + polimixina B (2 limas manuais). Após PBM foi realizada a 2ª coleta e após o uso do EDTA foi realizada a 3ª coleta. A 4ª coleta foi realizada 14 dias após a colocação da medicação intracanal [pasta de clorexidina gel 2% + Ca(OH)2]. A quantificação de endotoxinas foi realizada através do teste cinético cromogênico do lisado de amebócitos de Limulus (LAL) e a quantificação de MMPs pelo teste imunoenzimático ELISA. Os resultados foram analisados estatisticamente [Kruskal-Wallis e teste de Dunn (5%) e Correlação Ordinal de Sperman]. Foi observada presença de endotoxinas em 100% dos casos e o grupo G3 foi o que apresentou maiores valores de redução de endotoxinas da 1ª para 2ª coleta (97%), sendo estatisticamente semelhante a G2 (84,2%) e... / Abstract: It is know that endotoxin and various matrix metalloproteinases (MMPs) are involved in the development of periapical lesions. The purpose of this study was to evaluate and correlate the presence of endotoxins and MMP- 3, MMP-8 and MMP-9 in root canals of teeth with necrotic pulp and periapical lesion before, during and after the biomechanical preparation (PBM) using a combination of different irrigations solutions and intracanal dressing. Thirty-three single-root teeth with a diagnosis of pulp necrosis and periapical lesion radiographically visible were selected. Immediately after the coronal opening was collected the first sample from the root canal content. Then, all canals were prepared (cervical and middle thirds) by oscillatory instruments (EndoEze) and irrigated by 2.5% NaOCl. After, a manual preparation was made for the apical third and the teeth were divided into three groups according to the irrigation protocol: G1) 2.5% NaOCl (4 manual files); G2) 2.5% NaOCl (2 manual files) + [Ca (OH)2 0.14%] (2 manual files) and G3) 2.5% NaOCl (2 manual files) + polymyxin B (2 manual files). After the PBM, the second sample was collected; then the third collect was performed after using EDTA final flush. The fourth sample was collected 14 days after placing the dressing [2% chlorhexidine gel + Ca(OH)2]. Quantification of endotoxins was performed by a kinetic chromogenic lysate from amoebocytes of Limulus (LAL) and quantification of MMPs by ELISA assay. The results were analyzed statistically by Kruskal-Wallis and Dunn's test (5%) and ordinal Spearman correlation. Presence of endotoxin was observed in 100% of cases and G3 showed the greatest reduction of endotoxins from the 1st to the 2nd samples (97%), being statistically similar to G2 (84.2%) and different from G1 (49.4%) (p<0.05). The intracanal dressing promoted a significant reduction of endotoxin, no difference among the groups. For...

Orientador: Juliane Maria Guerreiro Tanomaru / Banca: Evandro Watanabe / Banca: Milton Carlos Kuga / Resumo: Este estudo objetivou avaliar o pH, o teor de cloro disponível e a atividade antibacteriana de soluções irrigadoras endodônticas isoladas e associadas frente ao Enterococcus faecalis pelo teste de contato direto (in vitro) e em canais radiculares contaminados (ex vivo). A análise de pH foi realizada por meio de pHmetro digital e o teor de cloro pelo método da iodometria. Na metodologia de contato direto, uma suspensão de E. faecalis foi exposta aos seguintes irrigantes: GI- Solução de hipoclorito de sódio (NaOCl) a 2,5%; GII- NaOCl a 2,5% + ácido cítrico a 10% 7:3 (em volume); GIII- NaOCl a 2,5% + vinagre de maça 5:5 (em volume); GIV- Ácido cítrico a 10%; GV- Vinagre de maça. Os períodos de contato foram 30 segundos, 1, 3 e 10 minutos. O número de unidades formadoras de colônia por mililitro de solução (UFC/mL) foi determinado após diluições decimais seriadas e semeadura em placas de Tryptic Soy Agar (TSa). Como controle negativo foi utilizado solução fisiológica esterilizada. Em outro experimento, 110 dentes humanos unirradiculados tiveram seus canais radiculares contaminados com E. faecalis e incubados a 37°C por 21 dias. As substâncias analisadas foram: GI- NaOCl a 2,5%; GII- NaOCl a 2,5% + ácido cítrico a 10% 7:3 (em volume); GIII- NaOCl a 2,5% + vinagre de maça 5:5 (em volume); GIV- Vinagre de maçã; GV- Solução de clorexidina a 2%; GVIÁcido peracético a 1%; GVII- Solução salina fisiológica. Coletas microbiológicas foram realizadas imediatamente após preparo biomecânico e decorrido o período de sete dias. Após diluições decimais seriadas, alíquotas foram semeadas em placas de TSa e a contagem de UFC/mL determinada. Os resultados foram submetidos aos testes ANOVA, Tukey e Bonferroni, com nível de significância de 0,05. A associação do NaOCl a 2,5% com ácido cítrico ou vinagre de maça promoveu redução de pH e teor de... (Resumo completo, clicar acesso / Abstract: This study aimed to evaluate the pH, the available chlorine content and the antibacterial activity of endodontic irrigants and associations against Enterococcus faecalis by direct exposure test (in vitro) and within infected root canals (ex vivo). The pH was recorded using a digital pH meter and the chlorine content was measured by a standard iodine/thiosulfate titration method. In the direct exposure test, a bacterial suspension was mixed with the following irrigants: GI- 2,5% sodium hypochlorite solution (NaOCl); GII- 2,5% NaOCl + 10% citric acid 7:3 (at volume); GIII- 2,5% NaOCl + apple vinegar 5:5 (at volume); GIV- 10% citric acid; GV- apple vinegar. The contact times were 30 seconds, 1, 3 and 10 minutes. The number of colony-forming units per millilitre (UFC/mL) was calculated after serial 10-fold dilutions and culture in Tryptic Soy Agar (TSa) plates. Sterilized physiologic solution was used as negative control. In another experiment, the root canals of 110 human single-rooted teeth were infected with E. faecalis and incubated at 37°C for 21 days. The analysed substances were: GI- 2,5% NaOCl; GII- 2,5% NaOCl + 10% citric acid 7:3 (at volume); GIII- 2,5% NaOCl + apple vinegar 5:5 (at volume); GIV- apple vinegar; GV- 2% chlorhexidine solution; GVI- 1% peracetic acid; GVIIphysiologic saline solution. Microbiological samples were collected immediately after the biomechanical preparation and after 7 days. After serial 10-fold dilutions and culture in TSa plates, UFC/mL counts were determined. The results were submitted to ANOVA, Tukey and Bonferroni test, with a level of significance established at 0.05. The pH and the chlorine content reduced at associations of 2,5% NaOCl with citric acid or apple vinegar. In the direct exposure test, pure and associated NaOCl were capable of killing E. faecalis after 30 seconds. Citric acid did the same... (Complete abstract, click electronic access below) / Mestre

Orientador: Idomeo Bonetti Filho / Coorientador: Juliane Maria Guerreiro Tanomaru / Banca: Renato de Toledo Leonardo / Banca: Milton Carlos Kuga / Banca: Evandro Watanabe / Banca: Manoel Eduardo de Lima Machado / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar a efetividade antibacteriana de soluções irrigadoras e do sistema Endox Plus no preparo de canais radiculares. Capítulo 1 - Para comparar a efetividade antibacteriana da solução de hipoclorito de sódio (NaOCl), MTAD BioPure e do Sistema Endox Plus durante o preparo biomecânico, foram utilizadas 70 raízes de dentes humanos unirradiculados contaminadas com cepa de E. faecalis (ATCC 29212) e incubadas por 21 dias. Os espécimes foram divididos em cinco grupos: GI- Sistema Endox Plus, GII- NaOCl 2.5 % /MTAD, GIII- NaOCl 2,5% /EDTA, GIV- solução salina (controle positivo), GV- Controle negativo (sem instrumentação/irrigação). Foi realizada a análise microbiológica das amostras por meio de diluições seriadas e a contagem das UFCs. Os dados obtidos foram analisados estatisticamente por ANOVA e Tukey post-hoc (p < 0,05). Todos os espécimes mostraram crescimento bacteriano após o período de contaminação com similar contagem de UFC/mL log, sem diferença estatística entre os grupos. Após os procedimentos houve uma redução da quantidade de bactérias em todos os grupos, exceto no controle negativo. Não houve diferenças estatísticas significantes entre os GI e GIV. Os grupos II e III não mostraram crescimento bacteriano, mostrando diferença estatística com os outros grupos. Na coleta final, houve um aumento na contagem bacteriana nos grupos I, II, III e IV, sem diferença significativa entre eles. Porém, houve diferença na proliferação bacteriana quando comparados com a coleta pós-preparo. O sistema Endox Plus demonstrou a menor efetividade antibacteriana quando comparado às soluções de NaOCl 2,5% /MTAD e NaOCl 2,5% /EDTA e, todos os procedimentos avaliados permitiram a proliferação bacteriana após 7 dias, mostrando a permanência... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of this study is to evaluate the antimicrobial effectiveness of irrigating solutions and the Endox Plus system in the treatment of the root canals. Chapter I- In order to compare the antimicrobial effectiveness of sodium hypochlorite solution (NaOCl), MTAD Biopure and Endox Plus system during chemomechanical preparation, were used 70 single-rooted human teeth, which were contaminated with the strain of E. faecalis (ATCC 29212) and incubated for 21 days. The specimens were divided into five groups: GI- Endox Plus system, GII- NaOCl 2.5% /MTAD, GIII- NaOCl 2.5% /EDTA, GIV- saline solution (positive control), GV- negative control (without instrumentation/irrigation). Microbiological analysis of the samples consisted in evaluation of the CFUs. The data obtained were statistically analyzed by ANOVA tests and Tukey post-hoc (p<0.05). The specimens showed bacterial growth after the initial incubation period with similar counting of CFU/mL log, with no statistical difference among the groups. After the procedures there was a decrease of the amount of bacteria in all groups, except in the negative control. There were no statistically differences between the GI and GIV. The GII and GIII didn't show bacterial growth, showing statistical differences with the other groups. In the final sample, bacterial counts increased in groups I, II, III, IV, with no statistically significant differences among the groups, but there was a difference when compared to the post-instrumentation sample. The Endox Plus system presented the lowest antibacterial effectiveness when compared to the solutions of NaOCl 2.5% /MTAD y NaOCl 2.5% /EDTA and all the evaluated procedures allowed the recovery of bacteria 7 days after treatment, demonstrating persistence of infection in the root canal system. Chapter II- The antibacterial... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Avaliou-se a citotoxicidade do hipoclorito de sódio a 1%, do digluconato de clorexidina a 2% e do Endoquil e seus efeitos na liberação de citocinas e de óxido nítrico em culturas de macrófagos peritoniais murinos. As substâncias sofreram diluições de 1.000 e 10.000 vezes: Grupo Controle, meio de cultura meio McCoy`s 5A® modificado e apirogênico; Grupo Hipoclorito de sódio a 1% (diluições A 0,001 e B 0,0001); Grupo Digluconato de Clorexidina a 2% (diluições A 0,002 e B 0,0002); Grupo Endoquil a 10% (diluições A 0,01 e B 0,001). Foram utilizados 70 camundongos da linhagem C57Bl/6j fêmeas. Após anestesia e sacrifício realizou-se a coleta do exudato celular por meio da injeção e aspiração de meio McCoy`s 5A® modificado na cavidade abdominal dos animais. O ensaio da atividade citotóxica foi realizado pelo Método do MTT nos períodos: curto prazo (4 e 12 horas); médio prazo (24, 48 e 72 horas) e longo prazo (5 e 7 dias). A absorbância dos poços foi lida em Leitora de Elisa a 550 nm. Os valores obtidos foram comparados com os valores do padrão, calculando-se assim a viabilidade e o número de células presentes de cada grupo avaliado em função do tempo. A quantificação in vitro das citocinas IL-1, IL-1, IL-6 e TNF- foi realizada por meio de imunoensaio do tipo Elisa, utilizando-se kit Quantikine® M murine. A análise da síntese de óxido nítrico foi conduzida segundo a metodologia de Griess, na qual o óxido nítrico é convertido a nitrito, sendo este último detectado colorimetricamente. Cada grupo experimental foi analisado em dois tempos de observação (24 e 48h), com estímulo de LPS ou não, em duplicatas. Os dados foram submetidos ao teste estatístico de análise de variância e, quando necessário, complementados pelo teste de Tukey. Após 12 horas, o grupo tratado com clorexidina na diluição A apresentou diminuição significativa da viabilidade celular em relação aos grupos tratados com hipoclorito de sódio e Endoquil; este declínio estendeu-se para 24, 48 e 72 horas quando provocou morte celular. Em 5 e 7 dias, ocorreu redução da viabilidade em todos os grupos, com diferença significante para o grupo da clorexidina. Em relação às citocinas e óxido nítrico: o hipoclorito de sódio e a clorexidina induziram a produção e exacerbaram o efeito do LPS sobre as IL-1 e IL-1 , respectivamente, enquanto que o Endoquil diminuiu estes efeitos; a clorexidina inibiu o efeito estimulatório do LPS, diminuindo a síntese de IL- 6; juntamente com o Endoquil, a clorexidina diminuiu a síntese de TNF- , enquanto que o hipoclorito aumentou esta produção em 24 horas; mesmo estimulados com LPS, o hipoclorito e a clorexidina comprometeram a síntese de óxido nítrico, em 24horas e, após 48 horas, apenas a clorexidina manteve a inibição. / The cytotoxicity of 1% sodium hypochlorite, of 2% chlorhexidine digluconate and of Endoquil and its effects on cytokine release and nitric oxide were evaluated in culture of murine peritoneal macrophages. Substances were diluted 1,000 and 10,000 times: Control Group with culture medium using McCoy 5A`s® modified and apirogenic, Group Sodium Hypochlorite 1% (dilutions A - 0.001 and B - 0.0001); Group Chlorhexidine Digluconate 2% (dilutions A - 0.002 and B - 0.0002); Group Endoquil 10% (dilutions A - 0.01 and B - 0.001).70 female mice of strain C57BL/6J were used. After anesthesia and sacrifice, middle McCoy`s® 5A modified was injected in the abdominal cavity of animals and then the cellular exudate was aspirated. The cytotoxicity assay was performed by MTT method in the periods: short term (4 and 12 hours), medium term (24, 48 and 72 hours) and long term (5 to 7 days). The absorbance of the wells was read on ELISA reader at 550 nm. The values were compared with standard values, observing the viability and cell number in each group as a function of time. The in vitro quantification of cytokines IL-1, IL-1, IL-6 and TNF- was performed using an ELISA-type immunoassay, using the kit Quantikine® M Murine. Analysis of nitric oxide synthesis was conducted according to the Griess assay, in which nitric oxide is converted to nitrite, the latter being detected colorimetrically. Each experimental group was analyzed at two time points (24 and 48h) with stimulation of LPS or not, in duplicates. The data were submitted to statistical analysis of variance and, where necessary, complemented by Tukey test. After 12 hours, the group treated with chlorhexidine with dilution A significantly decreased cell viability when compared to the groups treated with sodium hypochlorite and Endoquil. This decline has extended to 24, 48 and 72 hours, when cell death occurred. After 5 and 7 days occured the reduction of viability in all groups, with significant differences for the chlorhexidine group. In relation to cytokines and nitric oxide: sodium hypochlorite and chlorhexidine induced the production and exacerbated the effect of LPS on IL-1 and IL-1 , respectively, while Endoquil decreased these effects;chlorhexidine inhibited the stimulatory effect of LPS, reducing the synthesis of IL- 6; just as Endoquil chlorhexidine decreased the synthesis of TNF-, but hypochlorite increased production in 24 hours; even stimulated with LPS, sodium hypochlorite and chlorhexidine undertook the synthesis of nitric oxide in 24 hours and, after 48 hours only chlorhexidine kept inhibition.

No presente estudo foi realizado a análise qualitativa da remoção do magma dentinário do terço apical de raízes curvas, quando submetidos a irrigação convencional, irrigação ultrassônica passiva e irrigação sônica. Como corpos de prova, foram utilizados 62 canais mésio-vestibulares com curvatura entre 20° e 40° de molares inferiores. Todos os condutos, após odontometria, foram instrumentados com o sistema rotatório até a lima F2. Destes, dois condutos foram utilizados como controle negativo, e os outros sessenta foram divididos aleatoriamente em três grupos experimentais conforme sua irrigação final: G1- irrigação convencional com seringa e agulha; G2- irrigação ultrassônica passiva; G3- irrigação sônica com sistema EndoActivator®. Em todos os grupos experimentais, foram utilizados 5mL de EDTA 17% por 1 minuto e 5mL de NaOCl 2,5% por 30 segundos. A observação da região apical, após clivagem, foi realizada através de microscopia eletrônica de varredura em aumento de 1000X. Isto posto, as imagens obtidas foram avaliadas por 3 examinadores calibrados pelo sistema de 3 pontos. Da análise dos resultados, pelo teste de Kruskal-Wallis, pode-se observar que os sistemas sônico e ultrassônico removeram significativamente o magma dentinário, sem diferença estatística entre os grupos. Quando comparados estes sistemas com a irrigação convencional, ambos mostraram-se mais eficientes, sendo os dois grupos estatisticamente diferentes do grupo convencional. Conclui-se que a irrigação sônica e irrigação ultrassônica passiva apresentam resultados semelhantes, aumentando a remoção do magma dentinário no terço apical de raízes curvas. / The aim of this study is to qualitative evaluate, the smear layer removal in the apical third of curved canals, after sonic, ultrasonic and conventional irrigation. Sixty two mesiobuccal root canals of mandibular molar with curvature degree between 20 and 40 degrees, were shaped with rotary system ProTaper® until file F2, and occasionally divided into three experimental groups (n=20) and one control group (n=2). The control group received no final irrigation after fitting of the master cone. The experimental groups received those final irrigations: G1- conventional irrigation with no agitation of the irrigant; G2- passive ultrasonic irrigation; G3- sonic irrigation with EndoActivator® system. In all groups, a final irrigation with 5mL EDTA 17% for 1 minute and 5mL NaOCl 2,5% for 30 seconds was procedure. Root canals were split longitudinally and subjected to scanning electron microscopy at a magnification of 1000X. The presence of smear layer was evaluated by three calibrated observers using a three-score scale. The differences in smear layer scores between the experimental groups were analyzed with Kruskal-Wallis test. Concerning the activations groups, both removed significantly smear layer, with no statistical significant difference. There were statistical significant differences when comparing this systems with conventional irrigation, the activation systems removed significantly more smear layer. The sonic and ultrasonic irrigation, in a similar way, enhance the removal of the smear layer, in the apical third of curved canals.