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Leishmaniose tegumentar americana em cães no Estado do Paraná, Brasil. Avaliação do risco epidemiológico usando como ferramenta a reação em cadeia pela polimerase (PCR)

Marquez, Ellen de Souza January 2010 (has links)
Orientador : Profª. Drª. Vanete Thomaz Soccol / Co-orientador : Prof. Dr. ItaLmar Teodorico Navarro / Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Tecnologia, Programa de Pós-Graduação em Processos Biotecnológicos. Defesa: Curitiba, 07/07/2010 / Inclui referências : f. 18-21-52-58-81-88-115-119 / Área de concentração: Saúde Humana e Animal / Resumo
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Leishmanioses : estudos epidemiológicos e o conhecimento da população de Formiga, Minas Gerais

Menezes, Júlia Alves January 2014 (has links)
Submitted by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2015-04-08T17:29:05Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao_JuliaAlvesMenezes.pdf: 8169141 bytes, checksum: e9d42a2ead6ef64ee95391cdf978633c (MD5) / Approved for entry into archive by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2015-04-08T17:29:18Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertacao_JuliaAlvesMenezes.pdf: 8169141 bytes, checksum: e9d42a2ead6ef64ee95391cdf978633c (MD5) / Approved for entry into archive by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2015-04-08T17:30:01Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertacao_JuliaAlvesMenezes.pdf: 8169141 bytes, checksum: e9d42a2ead6ef64ee95391cdf978633c (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-08T17:30:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao_JuliaAlvesMenezes.pdf: 8169141 bytes, checksum: e9d42a2ead6ef64ee95391cdf978633c (MD5) Previous issue date: 2014 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisa René Rachou. Belo Horizonte, MG, Brasil / No Novo Mundo, as leishmanioses constituem um grupo de doenças negligenciadas, com alta prevalência mundial e que podem assumir formas graves. Elas são transmitidas ao homem pela picada de flebotomíneos, existindo uma gama de reservatórios, sendo o cão o principal hospedeiro urbano. Neste contexto, as leishmanioses, principalmente a forma visceral zoonótica, tem se urbanizado no Brasil e em várias partes do mundo. O objetivo do presente trabalho foi estudar alguns aspectos epidemiológicos das leishmanioses e o conhecimento da população sobre a doença no município de Formiga, MG. Estes aspectos se referem principalmente à fauna flebotomínica e à infecção canina. Para se conhecer a fauna flebotomínica, foram realizadas coletas sistemáticas mensais entre maio 2012 e abril 2013 utilizando armadilhas luminosas HP em 24 peridomicílios. Os exemplares foram identificados e sua densidade relacionada a fatores climáticos e ambientais. O estudo da frequência da leishmaniose canina foi realizado através da coleta de sangue de 570 cães e posterior análise sorológica (DPP® e ELISA) e molecular (LnPCR). As amostras positivas no LnPCR foram submetidas ao sequenciamento e PCR-RFLP a fim de determinar a espécie de Leishmania. Todos os locais de captura entomológica e os endereços dos cães positivos foram georreferenciados sobre a malha urbana do município e correlacionados aos casos humanos e a fatores ambientais locais. A população foi entrevistada a partir de um questionário quantitativo validado que abordou conceitos relevantes sobre a doença e sobre as condições do peridomicílio. Foram capturados 224 flebotomíneos de 10 espécies diferentes, sendo Lutzomyia longipalpis (35,3%), Lutzomyia cortelezzii (33,5%) e Lutzomyia whitmani (18,3%) as mais abundantes. Foi observada correlação estatisticamente significativa (p<0,05) entre a densidade total de flebotomíneos e a precipitação e temperatura. Em relação aos cães, a taxa de infecção encontrada, considerando os testes sorológicos e o molecular, foi de 19,1%. O sequenciamento e a PCR-RFLP permitiram identificar as espécies Leishmania infantum e Leishmania braziliensis infectando os cães. As análises espaciais demonstraram que L. whitmani (99,8%) se concentra nas proximidades de extensas áreas verdes e em distâncias de até 200m da vegetação. Lutzomyia longipalpis está mais associado à rede hidrográfica, se concentrando, principalmente, nas faixas distantes até 400m de um curso d’água. Para o município, flebotomíneos, cães positivos e casos humanos estão geograficamente relacionados, embora com pouca sobreposição de suas áreas de ocorrência. O estudo sobre o conhecimento da população revelou que os moradores de Formiga desconhecem completamente a doença (93%) e que 95% deles estão sob algum fator de risco. A existência de flebotomíneos comprovadamente vetores de leishmaniose visceral e tegumentar associado ao fato de existirem cães infectados com espécies, tanto dermotrópicas quanto viscerotrópicas do parasito, sugerem que no município está ocorrendo um ciclo de transmissão de leishmanioses visceral. Além disso, pode ocorrer um possível surgimento de casos humanos de leishmaniose tegumentar. Dessa forma, fica evidente que medidas de vigilância e controle precisam ser urgentemente estabelecidas na cidade para se evitar a dispersão e os óbitos por leishmaniose na região. / Leishmaniases in the New World are neglected diseases with high prevalence worldwide and may assume severe forms. They are transmitted to humans by the bite of sand flies and exhibit a range of wild and domestic reservoirs including the dog as the main urban host. In this context, especially zoonotic visceral leishmaniasis form has urbanized in Brazil and around the world. The aim of this work was to study some epidemiological aspects of leishmaniasis and the population’s knowledge about the disease in Formiga, Minas Gerais State. Those aspects are mainly related to the phlebotomine fauna and canine infection. To determine the sand fly fauna, monthly systematic collections were performed between May 2012 and April 2013 using HP light traps in 24 peridomicile. Specimens were identified and their density related to climatic and environmental conditions. The study of the frequency of canine leishmaniasis was performed by collecting blood samples from 570 dogs and subsequent serologic (DPP and ELISA) and molecular (LnPCR) analysis. The LnPCR positive samples were subjected to sequencing and PCR-RFLP to determine the Leishmania species. All the entomological capture sites and addresses of positive dogs were georeferenced on the urban grid of the city and correlated to human cases and local environmental factors. The population was interviewed using a validated quantitative questionnaire addressing relevant concepts about the disease and the conditions of the peridomicily. Two hundred twenty-four phlebotomines from 10 different species were captured, where Lutzomyia longipalpis (35.3%), Lutzomyia cortelezzii (33.5%) and Lutzomyia whitmani (18.3%) were the most abundant. Statistically significant correlation (p <0.05) was observed between total sandfly density and precipitation and temperature. Regarding the dogs, the rate of infection found by considering the serologic and molecular assays was 19.1%. Sequencing and PCR-RFLP allowed the identification of the species Leishmania infantum and Leishmania braziliensis infecting dogs. The spatial analysis showed that L. whitmani (99.8%) is concentrated close to green areas and up to a distance of 200m from vegetation. Lutzomyia longipalpis is most associated with the hydrographic network, concentrating mainly on the distances up to 400m alongside the water. For the Formiga city, phlebotomines, positive dogs and human cases are geographically related, although poor overlap of their occurrence areas has been observed. The study on the knowledge of the population revealed that the residents of Formiga are completely unaware of the disease (93%) and that 95% of them are under some risk factor. The existence of proven sandflies vectors of visceral and tegumentary leishmaniasis and the existence of infected dogs - with both dermotrophic as visceral species - suggest that the city is experiencing a cycle of transmission of visceral leishmaniasis. Besides, the city may be also iin risk of an outbreak of tegumentary human cases. It is clear that surveillance and control measures need to be urgently established in the town to avoid dispersion and deaths per leishmaniasis in the region.
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Análise espacial das leishmanioses no município de Divinópolis, Minas Gerais, Brasil

Teixeira Neto, Rafael Gonçalves January 2014 (has links)
Submitted by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2015-04-15T12:20:48Z No. of bitstreams: 1 Tese_DIP_RafaelGoncalvesTeixeiraNeto.pdf: 9728378 bytes, checksum: 9aa64df9a24c4ed1f3ed10cd3eba51d5 (MD5) / Approved for entry into archive by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2015-04-15T12:20:58Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese_DIP_RafaelGoncalvesTeixeiraNeto.pdf: 9728378 bytes, checksum: 9aa64df9a24c4ed1f3ed10cd3eba51d5 (MD5) / Approved for entry into archive by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2015-04-15T12:21:07Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese_DIP_RafaelGoncalvesTeixeiraNeto.pdf: 9728378 bytes, checksum: 9aa64df9a24c4ed1f3ed10cd3eba51d5 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-15T12:21:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_DIP_RafaelGoncalvesTeixeiraNeto.pdf: 9728378 bytes, checksum: 9aa64df9a24c4ed1f3ed10cd3eba51d5 (MD5) Previous issue date: 2014 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisa René Rachou. Belo Horizonte, MG, Brasil / As Leishmanioses compreendem um grupo de doenças parasitárias, distribuídas em países tropicais e subtropicais, em ciclos zoonóticos e antroponóticos e constituem um grave problema de saúde pública. No Brasil, as leishmanioses eram caracterizadas como endemias rurais, no entanto, casos autóctones vêm sendo notificados em centros urbanos e sua distribuição vem se ampliando consideravelmente. O município de Divinópolis é considerado região endêmica para Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA) e a ocorrência de Leishmaniose Visceral (LV) apesar de recente, vem se expandindo nos últimos anos. Com base neste cenário, o presente estudo objetivou ampliar o conhecimento sobre a situação epidemiológica da LV e da LTA no município de Divinópolis, enfatizando a distribuição espacial dos hospedeiros vertebrados e dos casos humanos na área urbana. Um total de 102 pequenos mamíferos foi capturado no período de um ano em cinco áreas de mata espalhadas na zona urbana do município e em 15 residências com casos de LTA ou LV notificados entre 2005 e 2010. Deste total, três exemplares foram identificados naturalmente infectados por Leishmania através da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). Também foi avaliada a distribuição espacial dos casos humanos de LTA notificados entre os anos de 2007 e fevereiro de 2013. A circulação de Leishmania infantum foi confirmada através do isolamento do parasito em cães soropositivos. Foi realizado um inquérito sorológico para Leishmaniose Visceral Canina (LVC) em toda a zona urbana do município utilizando uma amostragem estratificada e uma prevalência de 3%. Dos 3.652 cães avaliados distribuídos nos 11 estratos do município 169 apresentaram sorologia positiva, com prevalência estimada de 4,62% (3,95 – 5,31). Todas as quadras amostradas no inquérito da LVC e casos humanos de LV ocorridos no municipio foram georreferenciados. A análise de dependência espacial confirmou que existe uma correlação positiva entre a ocorrência de LVC e casos humanos de LV. Estes achados contribuem para a compreensão da epidemiologia da LTA e da LV no município de Divinópolis e podem auxiliar na definição de áreas prioritárias para a implementação de medidas de controle. / The Leishmaniases comprise a group of parasitic diseases, distributed in tropical and subtropical countries in zoonotic and anthroponotic cycles and are a serious public health problem. In Brazil, leishmaniases were characterized as rural endemic diseases, however, autochthonous cases have been reported in urban centers and their distribution has expanded considerably. The municipality of Divinópolis is considered an endemic area for American Cutaneous Leishmaniasis (ACL) and the occurrence of Visceral Leishmaniasis (VL) although recent, has expanded in recent years. Based on this scenario, the present study aimed to increase knowledge of the epidemiological situation of VL and ACL in the municipality of Divinópolis, emphasizing the spatial distribution of vertebrate hosts and human cases in the urban area. A total of 102 small mammals were captured during one year in five forest areas scattered in the urban area and 15 residences with cases of ACL or VL reported between 2005 and 2010. From these, three specimens were identified naturally infected by Leishmania by Polymerase Chain Reaction (PCR). We also evaluated the spatial distribution of human cases of ACL reported between the years 2007 and February 2013. Leishmania infantum circulation has been confirmed by isolation of parasites in seropositive dogs. A serological for Canine Visceral Leishmaniasis (CVL) was conducted across the urban area using a stratified sampling and a prevalence of 3%. Among the 3,652 evaluated dogs distributed in 11 strata of the city 169 had a positive serology, with an estimated prevalence of 4.62% (3.95 to 5.31). All blocks sampled in the survey of CVL and human cases of VL occurring in the municipality were georeferenced. The spatial dependence analysis confirmed a positive correlation between the occurrence of CVL and human cases of VL. These findings contribute to the understanding of the epidemiology of ACL and VL in Divinópolis city and can assist in definition of priority areas for the implementation of control measures.
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Epidemiologia das leishmanioses no distrito de Barra do Guaicui, município de Várzea da Palma, Minas Gerais, Brasil

Sanguinette, Cristiani de Castilho January 2015 (has links)
Submitted by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2016-09-08T13:19:05Z No. of bitstreams: 1 Tese_DIP_CristianideCastilhoSanguinette - T_97.pdf: 18450256 bytes, checksum: 4cda2f86042db8ee71128cabc8d9436b (MD5) / Approved for entry into archive by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2016-09-08T18:05:56Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese_DIP_CristianideCastilhoSanguinette - T_97.pdf: 18450256 bytes, checksum: 4cda2f86042db8ee71128cabc8d9436b (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-08T18:05:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_DIP_CristianideCastilhoSanguinette - T_97.pdf: 18450256 bytes, checksum: 4cda2f86042db8ee71128cabc8d9436b (MD5) Previous issue date: 2015 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou. Belo Horizonte, MG, Brasil / As leishmanioses são um complexo de doenças e sua epidemiologia somente pode ser compreendida pelo conhecimento de todos os elos que compõem seu ciclo de transmissão, como reservatórios, vetores e espécies de parasitos envolvidos e suas relações ecológicas. O objetivo deste trabalho foi estudar a epidemiologia das leishmanioses no distrito de Barra do Guaicui, município de Várzea da Palma, Minas Gerais. Foram realizadas no ano de 2012 cinco coletas de flebotomíneos em 24 casas da área urbana e doze coletas durante os anos de 2013 e 2014 em três ambientes distintos (urbano, transição e mata), utilizando armadilhas luminosas HP. As fêmeas coletadas foram identificadas e submetidas à verificação de infecção natural pela dissecção do tubo digestório e a detecção de DNA do parasito (LnPCR) em amostras individuais. Para o segundo período de estudo foram verificados e comparados os padrões de distribuição, a riqueza, uniformidade, e abundância dos flebotomíneos nas diferentes áreas. Para o estudo dos hospedeiros silvestres e sinantrópicos de Leishmania foram instaladas duas armadilhas, uma do tipo Sherman e outra do tipo gaiola, em cada uma das casas amostradas para o ano de 2012 e, além destes pontos foram definidas três trilhas, com 15 armadilhas tipo Sherman e 15 tipo gaiola por trilha, em área limítrofe ao perímetro urbano. No ano de 2013 as coletas de pequenos mamíferos foram conduzidasnos mesmos pontos de coleta dos flebotomíneos e utilizando a mesma metodologia. O estudo da infecção dos pequenos mamíferos foi realizado utilizando técnicas moleculares. Um total de 5.831 flebotomíneos pertencentes a quinze espécies e oito gêneros foi coletado e identificado. A espécie mais prevalente foi Nyssomyia intermedia, seguida de Lutzomyia longipalpis, importantes vetoras dos agentes etiológicos da forma tegumentar e visceral em humanos, respectivamente. A área urbana teve a maior abundância enquanto a área de transição teve a maior diversidade e uniformidade de espécies. Nyssomyia intermedia foi a espécie mais abundante na área urbana, enquanto Evandromyia evandroi foi a mais abundante na área de transição e Ev. lenti na área silvestre. Nenhuma forma flagelada foi encontrada pela técnica da dissecção. Foi detectada a presença de DNA de Leishmania nas seguintes espécies: Ny. intermedia (0,9%), Lu. longipalpis (2,9%), Ev. termitophila (3,0%), Ev. sallesi (1,8%), Ev. evandroi (1,5%), Ev. neivai (1,1%), Ev lenti (0,9%) e Ev. walkeri (9,0%) todas com DNA de parasitos do complexo Le. braziliensis. Nyssomyia intermedia (0,3%), Ev. evandroi (1,5%), Ev. lenti (1,8%), Ev. sallesi (1,2%), Lu. longipalpis (0,58%), Ny. neivai (1,1%) e Psathyromyia lutziana (33,3%) apresentaram positividade para parasitos do complexo Le. donovani. Das 47 amostras positivas para a presença de DNA de Leishmania, 34 (72,3%) eram provenientes da área urbana, três (6,4%) da área de transição e dez (21,3%) da área de mata. A fauna de pequenos mamíferos foi composta pelas espécies Rattus rattus (19,4%), Didelphis albiventris (44,4%) e Thricomys apereoides (36,1%). Rattus rattus foi capturado apenas na área urbana, T. apereoides apenas na área silvestre e D. albiventris nos três ambientes amostrados. As duas últimas espécies foram encontradas infectadas por Le. braziliensis na área de mata e na de transição, respectivamente. Nossos resultados contribuem para a compreensão do processo gradual de sinantropização das espécies de flebotomíneos encontradas no estado de Minas Gerais, demostrando que o município de Várzea da Palma apresenta todas as características necessárias para a expansão das leishmanioses, visceral e tegumentar. / Leishmaniasis are a complex of diseases and their epidemiology is understood only if all the links that compound its transmission cycle are known, such as reservoirs, vectors and parasites species and their ecological relationships. The aim of this research was to study the epidemiology of leishmaniasis in the District of Barra do Guaicui, municipality of Varzea da Palma, Minas Gerais State, Brazil. Five collections of phlebotomines were performed in 2012 in 24 houses in the urban area and another twelve collections from 2013 to 2014 in three distinct environments (urban, transition and wild forest), utilizing HP light traps. The collected females were identified and submitted to natural infection assessment through dissection of the digestive tract and parasite DNA detection (LnPCR) in individual samples. For the second period of study it was verified and compared the distribution richness, uniformity and abundance of sand flies in the different areas. For the study of wild and synanthropic hosts of Leishmania two traps were installed in each house sampled during 2012 and three tracks in a boundary area of urban perimeter were set, with 15 Sherman traps and 15 “cage” traps per track. Collections of small mammals were performed in 2013, in the same collections points of sand flies and with the same methodology used in 2012. The detection of Leishmania infection in small mammals was carried out through molecular techniques. A total of 5.831 phlebotomines belonging to fifteen species and eight genera were collected and identified. The most frequent species was Nyssomyia intermedia followed by Lutzomyia longipalpis, which are important vectors of the etiologic agents of cutaneous and visceral leishmaniasis in humans, respectively. The urban area had the highest abundance while the transition area has the highest diversity and uniformity of species. Nyssomyia intermedia was the most abundant species of the urban area, while Evandromyia evandroi was the most abundant in the transition area and Ev. lenti in the wild area. No flagellate forms were found by the dissection technique. Leishmania DNA was detected in the following species: Ny. intermedia (0,9%), Lu. longipalpis (2,9%), Ev. termitophila (3,0%), Ev. sallesi (1,8%), Ev. evandroi (1,5%), Ev. neivai (1,1%), Ev lenti (0,9%) and Ev. walkeri (9,0%), all of them with DNA of Le. braziliensis complex. Nyssomyia intermedia (0,3%), Ev. evandroi (1,5%), Ev. lenti (1,8%), Ev. sallesi (1,2%), Lu. longipalpis (0,58%), Ny. neivai (1,1%) and Psathyromyia lutziana (33,3%) presented positivity for the Le. donovani complex. Out of 47 Leishmania positive samples, 34 (72,3%) were from the urban area, three (6,4%) from the transition area and ten (21,3%) from the wild area. The small mammals fauna was composed by the species Rattus rattus (19,4%), Thricomys apereoides (36,1%) and Didelphis albiventris (44,4%) . Rattus rattus was captured exclusively in urban area, T. apereoides only in the forest area and D. albiventris in the three environments. The last two animals were found infected by Le. braziliensis in the wild and transitional areas, respectively. Our results contributes to understand the gradual process of synanthropism of the sand flies species found in the state of Minas Gerais, demonstrating that the municipality of Varzea da Palma has all the necessary characteristics for the expansion of leishmaniasis, visceral and cutaneous.

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