Made available in DSpace on 2012-05-07T14:43:52Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 000013.pdf: 11821845 bytes, checksum: 94301d35e16668f6243488fa8fa60808 (MD5) Previous issue date: 2006 / No presente trabalho, objetivou-se estudar alguns aspectos envolvidos na epidemiologia da leishmaniose visceral no município de Paulista, litoral norte do Estado de Pernambuco. Realizou-se um estudo retrospectivo dos casos humanos de leishmaniose visceral notificados em Paulista (1995-2006), o qual demonstrou ser a doença mais comum entre crianças e entre indivíduos do sexo masculino. Conduziuse um inquérito soroepidemiológico entre cães (semi)domiciliados (n=322), o qual revelou uma prevalência de anticorpos anti-Leishmania sp. de 40,3 porcento, a taxa mais alta já relatada em Pernambuco. A positividade no teste sorológico foi estatisticamente mais alta entre cães machos e jovens (p-valor £ 0,05). Realizaramse coletas sistemáticas com armadilhas luminosas do tipo CDC no intuito de estudar a fauna de flebotomíneos. A única espécie encontrada foi Lutzomyia longipalpis, a qual estava presente no entorno das casas (n=5), mas não dentro destas. Espera-se que os resultados obtidos a partir desse trabalho sirvam de base para a elaboração de novas estratégias para o controle da leishmaniose visceral no município de Paulista

Made available in DSpace on 2012-05-07T15:26:23Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 000009.pdf: 1751449 bytes, checksum: ac81ddcdfe698ad73e50c728791a4983 (MD5) Previous issue date: 2006 / O Brasil enfrenta atualmente a expansão e urbanização das leishmanioses com um grande número de casos humanos e cães positivos em várias cidades de grande e médio porte. [...] O presente trabalho avaliou aspectos epidemiológicos das leishmanioses relacionados à infecção canina e aosflebotomíneos em uma área endêmica do município de Santa Luzia/MG, com registros recentes de casos humanos autóctones de LVA e LTA. Foram realizadas coletassistematizadas mensais durante um ano, utilizando armadilhas luminosas de Falcão e não sistematizadas, com capturas manuais utilizando o capturador de Castro. As fêmeas capturadas foram identificadas e destinadas à verificação de infecção natural através da dissecção e detecção de DNA do parasito (PCR) em pools específicos contendo até 20 fêmeas cada. A densidade total de flebotomíneos foi correlacionada com dados climatológicos. No estudo da infecção canina foi verificada a soroprevalência, prevalência da infecção e da doença nos cães, utilizando técnicas sorológicas (RIFI e ELISA) e moleculares (PCR) para o diagnóstico. Foram utilizadas na PCR amostras clínicas de pele, medula óssea (de 43 cães sorologicamente positivos) e sangue periférico (202 cães). O isolamento e caracterização do parasito foram realizados utilizando amostras positivas da cultura de aspirado de medula óssea e amostras clínicas positivas dos 43 cães reativos na sorologia. Foi coletado um total de 1552 exemplares, sendo 1154 machos e 398 fêmeas, pertencentes a sete espécies de flebotomíneos, sendo a mais abundante a Lutzomyia whitmani (75 por cento) seguida por L. longipalpis (19 por cento), que são vetoras da LTA e LVA respectivamente. Não foi observada nenhuma correlação estatisticamente significativa entre a densidade total de flebotomíneos eos dados climatológicos durante o período de estudo. Foram dissecadas 102 fêmeas pertencentes a cinco espécies e em nenhuma foi observada a presença de formas flageladas.Para a detecção através da PCR foram constituídos 11pools a partir de 211 fêmeas vivas, pertencentes a cinco espécies. Em dois pools foi possível verificar infecção natural, sendo um de L. whitmani, infectado por L. braziliensis e um de L. cortelezzii infectado por L.chagasi. Estes resultados sugerem a possível participação de L. whitmani na transmissão da LTA na área de estudo e a necessidade de estudos mais aclaradores sobre o envolvimento de L. cortelezzii no ciclo de transmissão da LVA

Made available in DSpace on 2012-05-07T15:26:26Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 000015.pdf: 2033157 bytes, checksum: f87ad8be0823333f97678083458f51b3 (MD5) Previous issue date: 2007 / Neste estudo investigou-se a eficácia da PCR para o diagnóstico da leishmaniose visceral canina (LVC) e o desempenho da PCR-RFLP para a identificação da espécie de Leishmania. Além disso, a técnica PCR quantitativo em tempo real (qPCR) foi padronizada para a quantificação do número de cópias de kDNA. Foram analisadas amostras de pele, sangue e medula de 217 cães classificados como assintomáticos e sintomáticos. Com base nos resultados de exames sorológicos e parasitológicos convencionais, os animais foram divididos em dois grupos: cães com exames convencionais negativos (ECN = 70) e com exames convencionais positivos (ECP = 147). A presença do parasito em amostras clínicas foi investigada através da amplificação de um fragmento de 120 pb da região conservada do kDNA de Leishmania. Os resultados mostraram que a PCR detectou DNA do parasito até a concentração de 0,1 fg. As amostras pele e medula foram as mais adequadas para a realização do diagnóstico através da PCR. No grupo ECN, 95 por cento dos cães apresentaram PCR positiva em pelo menos uma amostra clínica e no grupo ECP, aproximadamente 96 por cento dos cães foram PCR positivos. A identificação da espécie de Leishmania através da PCR-RFLP revelou que 192 cães estavam infectados por Leishmania infantum chagasi e 2 por Leishmania braziliensis. A análise do real time PCR revelou que na medula dos cães com ECP havia maior número de cópias de DNA de Leishmania do que no sangue e que a comparação da carga parasitária entre os cães sintomáticos e assintomáticos não apresentou diferença significativa. Nossos resultados revelam que a PCR é sensível e útil para detecção de Leishmania em amostras clínicas de cães naturalmente infectados e que a PCR-RFLP mostrou ser uma ferramenta rápida e sensível para identificação de espécies. Além disso, o qPCR mostrou ser uma metodologia promissora para estudos de quantificação da carga de DNA de Leishmania

SILVA, José Nivon da. Estudo do teste rápido imunoenzimático através do antígeno recombinante rk39 para diagnóstico de leishmaniose visceral americana : correlação clínico-terapêutica . 2004. 112 f. Dissertação (Mestrado em Patologia) - Universidade Federal do Ceará. Fortaleza, Fortaleza, 2004. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2011-12-21T15:27:44Z No. of bitstreams: 1 2004_dis_jnsilva.pdf: 540512 bytes, checksum: 39b5c9becfaad01660c8ff86c8b41912 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-02-01T14:12:29Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2004_dis_jnsilva.pdf: 540512 bytes, checksum: 39b5c9becfaad01660c8ff86c8b41912 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-02-01T14:12:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2004_dis_jnsilva.pdf: 540512 bytes, checksum: 39b5c9becfaad01660c8ff86c8b41912 (MD5) Previous issue date: 2004 / ABSTRACT The visceral leishmaniasis diagnostic confirmation or Kala-azar is performed by detection of the parasite through direct methods of amastigotes within macrophages or monocytes, spleen aspirated, hepatic, bone marrow, lymph node histopathological and peripheral blood smear, with wide variation in sensitivity in accordance with the site searched, being the gold standard of Leishmaniasis sp . The specific antibodies for diagnostic of visceral leishmaniasis by ELISA, indirect immunofluorescence reaction and direct agglutination tests have high sensitivity and specificity cross reactions with limited by trypanosomatids and mycobacterium, including tuberculosis, leprosy, Chagas disease , leishmaniasis cutaneous and histoplasmosis. The Montenegro intradermal test is always negative during the active phase of the disease, and is based on immune memory bound on lymphocyte Th1. The purpose of this work was to highlight the importance of quick test for the detection of antibody anti-leishmania chagasi using recombinant rK39 antigen that presented sensitivity of 99.2%. There were serological by ELISA tests that presented sensitivity of 80%, and the indirect immunofluorescence reaction to Kala-azar with sensitivity of 82%. The gold-standard diagnosis made for all examinations was the direct microscopic search on parasite bone marrow aspirated and positivity was 71%, in a survey in tertiary hospitals in Fortaleza-CE. The immunoenzymatic reaction to quick test in tape containing rK39 Antigen has high sensitivity and specificity allowing immediate diagnosis and in the early beginning of treatment, in addition to confirm high-density epitopes exclusively for the Leishmaniasis genus, because there was no cross reactions among several diseases tested. We found evidence of IgG anti-leishmaniasis chagasi antibodies persistently -positive in patients treated appropriately for kala-azar, supporting with evidence that rK39 does not define disease activity and establishes criteria for cure, strengthening that other homogenizing are investigated by a positive result in individual from endemic area of Kala-azar, in disease carrier of febrile hepatosplenomegaly and pancytopenia . The quick test Rk39 must be read and interpreted immediately up to a maximum of 10 minutes driving clinical decision-making, and that its deployment as diagnostic helper method should be part of the laboratorial routine services, particularly in secondary and tertiary health endemic regions of visceral leshmaniasis . Keywords: American visceral leishmaniasis. Kala-azar. Recombinant K39 Antigen. Kala-azar through rK39 antigen diagnostic. / A confirmação diagnóstica de leishmaniose visceral ou calazar é realizada através da detecção do parasito por métodos diretos, através do encontro de formas amastigotas no interior de macrófagos ou monócitos, em aspirado esplênico, hepático, medula óssea, histopatológico de linfonodo e esfregaço do sangue periférico, com ampla variação de sensibilidade de acordo com o sítio pesquisado, constituindo-se o padrão-ouro a visualização de Leishmania sp. A pesquisa de anticorpos específicos para triagem diagnóstica da leismaniose visceral através do ELISA, reação de imunofluorescência indireta e os testes de aglutinação direta possuem sensibilidade alta e especificidade limitada pelas reações cruzadas com tripanosomatídeos e micobactérias, incluindo-se tuberculose, hanseníase, doença de Chagas, e ainda, leishmaniose tegumentar e histoplasmose. O teste intradérmico de Montenegro é sempre negativo durante a fase ativa da doença, e baseia-se na memória imunológica dependente de linfócitos Th1. O ojetivo deste trabalho foi evidenciar a relevância do teste rápido para detecção de anticorpo anti-leishmania chagasi utilizando o antígeno recombinante rK39 que apresentou sensibilidade de 99,2%. Foram realizados testes sorológicos pelo ELISA que apresentou sensibilidade de 80%, e a reação de imunofluorescência indireta para calazar com sensibilidade de 82%. O gold-standard diagnóstico empregado para todos exames foi a pesquisa microscópica direta do parasito no aspirado de medula óssea e a positividade foi de 71%, em uma pesquisa realizada em hospitais terciários de Fortaleza-CE. A reação imunoenzimática para teste rápido em fita contendo antígeno rK39 apresentou elevada sensibilidade e especificidade permitindo diagnóstico imediato e início precoce do tratamento, além de confirmar alta densidade de epítopos exclusivamente para o gênero Leishmania, pois não houve reações cruzadas dentre várias doenças testadas. Detectamos títulos de anticorpos IgG anti-leishmania chagasi persistentemente positivos em pacientes tratados adequadamente para calazar, corroborando com evidências de que o rK39 não define doença em atividade e nem estabelece critérios de cura, fortalecendo que outras possibilidades diagnósticas sejam investigadas mediante um resultado positivo em indivíduo procedente de zona endêmica para calazar, em paciente portador de hepatoesplenomegalia febril e pancitopenia. O teste rápido rk39 deverá ter sua leitura imediatamente relizada e interpretada em até no máximo 10 minutos, objetivando tomada de decisões clínicas, e que sua implantação como método auxiliar de diagnóstico deveria fazer parte da rotina laboratorial, particularmente de serviços secundários e terciários de saúde em regiões endêmicas para leshmaniose visceral.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Pós-graduação em Medicina Tropical, 2017. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2018-05-10T15:51:27Z No. of bitstreams: 1 2017_GiseleLorrannaSilvaSantos.pdf: 4328936 bytes, checksum: 89b09ef90bf026a6818550242065f97b (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2018-05-29T20:25:05Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_GiseleLorrannaSilvaSantos.pdf: 4328936 bytes, checksum: 89b09ef90bf026a6818550242065f97b (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-29T20:25:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_GiseleLorrannaSilvaSantos.pdf: 4328936 bytes, checksum: 89b09ef90bf026a6818550242065f97b (MD5) Previous issue date: 2018-05-29 / A leishmaniose visceral é uma doença negligenciada, endêmica na Ásia, África, Américas e na região do Mediterrâneo. Cerca de 1,5 a 2 milhões de novos casos ocorrem a cada ano no mundo, sendo que aproximadamente 350 milhões estão sob risco de adquirir a doença e esta é responsável por 70 mil mortes anuais. A evolução clínica depende principalmente da resposta imune do hospedeiro. O cão é considerado o principal reservatório urbano do agente Leismania infantum que é transmitido pelo flebotomíneo Lutzomya longipalpis. Várias proteínas de secreção clássica e de superficie da Leishmania foram testadas como potenciais antígenos. Por outro lado, algumas proteínas intracelulares são capazes de modular a resposta imune do hospedeiro por serem mais imunogênicas e terem sofrido menos pressão seletiva evolutivamente. Durante a infecção, estas moléculas são liberadas após a destruição de amastigotas intracelulares por macrófagos ativados, mas, também podem ser excretadas por caminhos de secreção não-clássicos. Vários antígenos intracelulares, tais como proteínas de choque térmico,as proteínas ribossômicas e as histonas foram investigadas como possíveis vacinas contra diferentes espécies de Leishmania e como marcadores diagnósticos. As proteínas Rab1-GTPase e ADF/Cofilina foram surpreendentemente classificadas como potenciais fatores de virulência e moduladores da resposta imunológica, assim como as proteínas intracelulares mencionadas anteriormente. Desta forma, estudos adicionais que venham permitir melhorias nos metodos diagnósticos e que poderão favorecer a prevenção e o controle desta doença, representam uma perspectiva de melhoria da qualidade de vida da população, principalmente em áreas endêmicas. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar o potencial imunogênico das proteínas Rab1-GTPase e ADF/Cofilina, expressar e purificar as duas proteinas recombinantes e submetê-las a uma avaliação diagnóstica sorológica pelo metódo ELISA. A proteína Rab1-GTPase apresentou mais sitios possíves para epitopos de células B em relação a ADF/Cofilina. No entanto, a ADF/Cofilina possui poucas regiões conservadas, quando avaliadas pelo alinhamento múltiplo. O teste ELISA permitiu testá-las quanto à capacidade de serem reconhecidas por soro de cães infectados com LVC. Todavia, faz-se necessário aumentar o número de amostras e realizar novos testes que possibilitem determinar a sua sensibilidade, especificidade, valor preditivo positivo, valor preditivo negativo e a acurácia como alvos diagnósticos da LVC em testes sorológicos. / Visceral leishmaniasis is a neglected disease, endemic in Asia, Africa, the Americas and the Mediterranean region. Approximately 1.5 to 2 million new cases occur every year around the world, with approximately 350 million being at risk of acquiring the disease and accounting for 70,000 annual deaths. The clinical course depends mainly on the immune response of the host. The dog is considered the main urban reservoir of the agent Leismania infantum which is transmitted by the sandfly Lutzomya longipalpis. Several classical and surface secretory proteins of Leishmania were tested as potential antigens. On the other hand, some intracellular proteins are able to modulate the immune response of the host because they are more immunogenic and have suffered less selective pressure evolutionarily. During infection, these molecules are released after the destruction of intracellular amastigotes by activated macrophages, but they may also be excreted by non-classical secretory pathways. Several intracellular antigens, such as heat shock proteins, ribosomal proteins and histones were investigated as possible vaccines against different Leishmania species and as diagnostic markers. Rab1GTPase and ADF/Cofilin proteins were surprisingly classified as potential virulence factors and modulators of the immune response, as well as the intracellular proteins mentioned above. In this way, additional studies that allow improvements in the diagnostic methods and that may favor the prevention and control of this disease represent a perspective of improving the quality of life of the population, especially in endemic areas. Thus, the objective of this study was to evaluate the immunogenic potential of the Rab1-GTPase and ADF/Cofilin proteins, to express and purify the two recombinant proteins and to submit them to a serological diagnostic evaluation by the ELISA method. The Rab1-GTPase protein showed more possible sites for B cell epitopes compared to ADF/Cofilin. However, ADF/Cofilin has few conserved regions when evaluated by multiple alignment. The ELISA test allowed them to be tested for serum recognition of LVC-infected dogs. However, it is necessary to increase the number of samples and perform new tests to determine their sensitivity, specificity, positive predictive value, negative predictive value and accuracy as LVC diagnostic targets in serological tests

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, 2008. / Submitted by Natália Cristina Ramos dos Santos (nataliaguilera3@hotmail.com) on 2009-09-18T19:35:15Z No. of bitstreams: 1 2008_ErikaGoncalvesAfonsoMaues.pdf: 2724033 bytes, checksum: 2cbc5f45ab5c70d7861a2cce292d4e35 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2010-03-08T16:21:26Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_ErikaGoncalvesAfonsoMaues.pdf: 2724033 bytes, checksum: 2cbc5f45ab5c70d7861a2cce292d4e35 (MD5) / Made available in DSpace on 2010-03-08T16:21:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_ErikaGoncalvesAfonsoMaues.pdf: 2724033 bytes, checksum: 2cbc5f45ab5c70d7861a2cce292d4e35 (MD5) Previous issue date: 2008 / Foi realizado um estudo descritivo do tipo série de casos, retrospectivo e prospectivo, com o objetivo de avaliar a classificação de formas graves e de risco para óbito segundo o Manual de Leishmaniose Visceral Grave, Normas e Condutas, 2005 do Ministério da Saúde e a resposta ao tratamento com Glucantime® e a derivados de anfotericina B, em crianças com leishmaniose visceral, atendidas em centro de referência em Palmas TO, no período de janeiro de 2005 a outubro de 2007. A amostra foi constituída de 34 pacientes no estudo retrospectivo, com 64,7% classificados como graves, tratados com antimoniato de N-metilglucamina (Glucantime®) e 19 crianças no estudo prospectivo com 78,9% no grupo de formas graves, tratadas com derivados de anfotericina B. O sexo feminino e a faixa etária entre 1 a 5 anos foram os mais acometidos nos 2 grupos. No estudo retrospectivo, Palmas foi o município de procedência mais freqüente entre os 34 pacientes incluídos (79,4%) e no prospectivo, 11 (57,9 %) pacientes foram encaminhados de outros municípios. A febre e a palidez foram as ocorrências clínicas mais frequentemente observadas, não havendo diferença significante em relação às mesmas entre os grupos de tratamento. Os critérios que contribuíram para a gravidade clínica foram: infecção bacteriana secundária, toxemia, anemia grave, distúrbio da coagulação, idade abaixo de 6 meses e icterícia. O principal critério de gravidade encontrado nos dos 2 grupos de tratamento foi a infecção, destacando-se a pneumonia em 68,1 % no grupo tratado com Glucantime® e em 93,4 % no grupo da anfotericina B. Não houve diferença significante entre a proporção de melhora até a alta e de alta, bem como não foi possível avaliar os critérios de risco para o óbito, pelo fato de a amostra ter sido pequena e a proporção de óbitos semelhantes entre os grupos. Serão necessários estudos para a validação dos critérios de risco para o óbito e de avaliação de impacto do uso de drogas leishmanicidas mais potentes. _________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The present consists of a descriptive study with a retrospective and a prospective part, with the aim to consider the classification of the serious forms and the risk for death as described in the Manual of Visceral Leishmaniasis (VL) (2005), of Health Ministery, and the treatment results using Glucantime® and anphotericin B derivates, in children with VL seen in a reference hospital in Palmas, Tocantins, form January of 2005 to October of 2007. The samping consisted of 34 patients in the retrospective study, with 64,7% classified as serious forms and treated with N-metilglucamina antimoniate (Glucantime®) and 19 children of the prospective study, with 78,9% classified as serious forms and treated with anphotericin B derivates. Children between 1 and 5 years and of female sex were more affected in both groups. In the retrospective study, 79,4% of the patients were from Palmas While in the prospective one, 57,9% came from other cities. The fever and the parlor were most frequently observed, but there was no significant difference between the groups of treatement. The criteria that contributed for clinical seriousness were: secondary bacterial infection, toxemia, serious anemia. Coagulation disturbance, age below 6 months and jaundice. The principal seriousness criteria found in the two groups was infection, specially pneumonia in 68,1% of the Glucantime® group and in 93, 4% of the patients treated with anphotericin B. There Was no significant difference between the proportions of discharges. It was not possible to consider the risks criteria for death because of the small samping and the equal proportion of deaths between the two groups. Studies will be necessary to validate the risks criteria fo death and consider the impact of using potent leishmanicidal drugs.

Made available in DSpace on 2016-05-02T13:01:25Z (GMT). No. of bitstreams: 2 8.pdf: 1289683 bytes, checksum: e1caa36f39d2f265e8121f108fb42651 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2015 / A identificação em tempo hábil dos pacientes com leishmaniose visceral (LV) com maior risco de morte é de fundamental importância para reduzir a letalidade,recidiva, gravidade e outras complicações da doença e/ou toxicidade do medicamento, por meio da instituição de medidas profiláticas e terapêuticas oportunas. O presente estudo teve como principal objetivo identificar os fatores associados ao óbito por leishmaniose visceral em pacientes de um hospital público de referência, do estado do Piauí, do período de janeiro de 2006 a dezembro de2013. Trata-se de um estudo caso-controle onde foram avaliados prontuários médicos e fichas de notificação do Sistema Nacional de Agravos de Notificação SINAN do setor de Vigilância em Saúde da Fundação Municipal de Saúde de Teresina. As variáveis analisadas foram sexo e idade do paciente, procedência, manifestações clínicas (sinais e sintomas) na admissão, dados laboratoriais, comorbidades e dias de evolução da doença. (...) o modelo apresentou-se como um modelo que se ajusta bem aos dados observados. O modelo final encontrado apresenta fatores simples de serem identificados no momento da admissão ou até 48 após internação do paciente, acelerando a implantação das condutas clínicas adequadas,melhorando o monitoramento clínico e laboratorial dos pacientes durante o tratamento. Os dados obtidos podem servir de base para elaboração de escores prognósticos, conforme a realidade local, aprimorando as estratégias clínicas com os pacientes. No entanto, é imprescindível a capacitação e atualização dos profissionais de saúde para o reconhecimento precoce dos sinais e sintomas clínicos observados, a fim de proporcionar um melhor acompanhamento dos pacientes a partir da atenção básica. / The identification in time of patients with visceral leishmaniasis (VL) with higher risk of death is of crucial important for the reduction of mortality, recurrence, severity and other complications of the disease and/or toxicity of the drug through application of opportune prophylactic and therapies. This study aimed to identify factors associated with death by visceral leishmaniasis in patients of a public hospital of reference in the State of Piauí, in the period from January 2006 to December 2013. This is a case-control study where there were evaluated medical records and reporting forms of the National System for Notifiable Diseases -SINAN of the Health Surveillance sector of the Municipal Health Foundation of the city of Teresina. The variables analyzed were gender and age of the patient, origin, clinical manifestations (signs and symptoms) at admission, laboratory data, comorbidities and days of evolution of the disease. (...) The results are significant because after fit test (Hosmer and Lemeshow test), the model was presented as a model that fits well to the observed data. The final model found shows simple factors to be identifiedat the time of admission or up to 48 hours after admission of the patient, accelerating the deployment of appropriate clinical management, improving theclinical and laboratory monitoring of patients during treatment. The data can be the basis for development of prognostic scores, according to local conditions, improving clinical strategies with patients. However, the training and updating of health professionals is essential for the early detection of clinical signs and symptoms observed in order to provide better monitoring of patients from primary care. (AU)^ien

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Núcleo de Medicina Tropical, 2011. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2012-05-18T15:59:01Z No. of bitstreams: 1 2012_EdvarYuriPachecoSchubach.pdf: 1291703 bytes, checksum: fef36e4b8793edd323eba5d1f25c3009 (MD5) / Approved for entry into archive by Marília Freitas(marilia@bce.unb.br) on 2012-05-23T11:28:19Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_EdvarYuriPachecoSchubach.pdf: 1291703 bytes, checksum: fef36e4b8793edd323eba5d1f25c3009 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-05-23T11:28:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_EdvarYuriPachecoSchubach.pdf: 1291703 bytes, checksum: fef36e4b8793edd323eba5d1f25c3009 (MD5) / A leishmaniose visceral representa um importante problema em saúde pública para o Brasil, sendo o cão doméstico a principal fonte de infecção para o vetor. O objetivo deste estudo foi validar a técnica de imunocromatografia rápida de duplo percurso para o diagnóstico da leishmaniose visceral canina em amostras de sangue total e soro de cães. A amostra foi composta por 428 cães domiciliados selecionados por conveniência em dois bairros de uma região endêmica na cidade de Fortaleza, Ceará. De cada cão examinado, foram coletados 5µL de sangue periférico da ponta de orelha para realização do teste rápido em sangue total, 5 mL de sangue da veia jugular para obtenção do soro utilizado na realização do teste em condições de laboratório, além de três fragmentos de pele íntegra da região escapular utilizados para exames parasitológicos. Destes, dois foram acondicionados em solução salina estéril com antibiótico e antifúngico para isolamento de Leishmania em cultura e um em formol 10% tamponado para realização do exame histopatológico e de imunohistoquímica. Os animais positivos em pelo menos um desses três exames foram considerados casos e os negativos nos três exames foram considerados controles ou não-casos. Na avaliação do teste rápido no sangue com leitura visual, no soro com leitura eletrônica e no soro com leitura visual, foram estimadas, respectivamente, sensibilidade de 87,5% (IC95% 66,5 a 96,7), 88% (IC95% 67,5 a 96,8) e 88% (IC95% 67,5 a 96,8) e especificidade de 73,3% (IC95% 67,7 a 78,4), 69,2% (IC95% 63,7 a 74,3) e 68,2% (IC95% 62,2 a 74,3). A concordância entre a leitura visual e eletrônica no soro foi classificada como quase perfeita, índice Kappa = 0,88 (IC95% 0,83 a 0,93). O valor preditivo positivo para 7.9% de prevalência observada na amostra do estudo foi 21.9%. A análise de sensibilidade revelou que o valor preditivo positivo permaneceu abaixo de 50% em cenários com prevalência de 20%. O bom desempenho do teste rápido no sangue com leitura visual sugere que o mesmo possa ser indicado como exame de triagem para uso na rotina de campo e que ferramentas para leitura eletrônica não sejam necessárias para confirmação do resultado, porém seu uso associado a outros testes, utilizando estratégias de testagem sequencial ou paralela em algoritmos específicos deve ser avaliado, assim como a sua comparação formal com os testes atualmente disponíveis na rotina, para aproveitar da melhor maneira possível as facilidades da sua aplicação em condições de campo. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Visceral leishmaniasis is a major public health problem in Brazil where the domestic dog is the main source of infection for the vector. The objective of this study was to validate a dual path platform rapid chromatographic immunoassay for diagnosis of canine visceral leishmaniasis in whole blood and serum samples. The study sample consisted of 428 resident dogs selected by convenience from two districts of an endemic region of the city of Fortaleza, Ceará. Five micro liters of peripheral blood were collected from the tip of the ear to perform the rapid test in whole blood; 5 mL of blood from the jugular vein were collected to obtain serum for testing under laboratory conditions, and three fragments of intact skin from the scapular region were obtained for parasitological examination. Two skin fragments were stored in sterile saline with antibiotics and antifungal agents for isolation of Leishmania in culture and one fragment was stored in 10% buffered formalin for performing the histopathology and immunohistochemistry procedures. Positive animals in at least one of those three parasitological tests were classified as cases and negative animals in all the three tests were considered non-cases. Rapid test sensitivities were 87.5% (CI95% 66,5 to 96,7), 88% (CI95% 67,5 to 96,8%) and 88% (CI95% 67,5 to 96,8); and specificities were 73.3% (CI95% 67,7 to 78,4), 69,2% (CI95% 63,7 to 74,3) and 68,2% (CI95% 62,2 to 74,3) in whole blood submitted to visual reading; serum submitted to electronic reading and serum submitted to visual reading; respectively. The agreement between visual and electronic reading of serum samples was classified as almost perfect, Kappa index = 0.88 (CI95% 0.83 to 0.93). Positive predictive value for a 7.9% prevalence observed in the study sample was 21.9%. Sensitivity analysis revealed that positive predicted value remained below 50% in scenarios of prevalence as high as 20%. The performance of the rapid test in whole blood samples submitted to visual reading suggests that it could be indicated as the screening test for routine use in the field and that tools for electronic reading would be unnecessary to confirm the final result. However, its use in conjunction with other serological assays, using sequential or parallel testing strategies in specific algorithms should be evaluated, as well as its forma comparison with the currently available tests for canine visceral leishmaniasis diagnosis.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, 2007. / Submitted by Rebeca Araujo Mendes (bekinhamendes@gmail.com) on 2009-12-22T00:13:19Z No. of bitstreams: 1 2007_VanessaVianaCardoso.pdf: 1910167 bytes, checksum: a55c514050e76b694ea5803428ab0065 (MD5) / Approved for entry into archive by Carolina Campos(carolinacamposmaia@gmail.com) on 2010-01-07T18:45:04Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2007_VanessaVianaCardoso.pdf: 1910167 bytes, checksum: a55c514050e76b694ea5803428ab0065 (MD5) / Made available in DSpace on 2010-01-07T18:45:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2007_VanessaVianaCardoso.pdf: 1910167 bytes, checksum: a55c514050e76b694ea5803428ab0065 (MD5) Previous issue date: 2007 / A leishmaniose visceral é caracterizada pela visceralização da leishmânia pelo sistema fagocítico-mononuclear. A expressão clínica da doença depende de fatores como a espécie e virulência da cepa e o tipo de resposta do sistema imunitário, características individuais, genética e o meio ambiente em que o indivíduo está inserido. O glucantime continua sendo a droga de primeira escolha no tratamento desta doença e a resposta clínica ao tratamento depende da inter-relação de vários fatores. O objetivo deste trabalho foi avaliar a influência do glucantime sobre a função dos monócitos e neutrófilos de crianças com leishmaniose visceral. Foram avaliados os parâmetros clínico-evolutivos e a função dos fagócitos de 23 crianças com leishmaniose visceral e 18 crianças controles sem a doença. A capacidade fagocitária dos monócitos e neutrófilos e a capacidade microbicida foram avaliadas antes, após 48 h e ao final do tratamento com glucantime. O teste de fagocitose foi realizado utilizando-se Saccharomyces cerevisiae, pelos receptores que reconhecem padrões moleculares de patógenos e pelos receptores que reconhecem os componentes do complemento e porção Fc da IgG. A produção de ânions superóxido foi avaliada pelo teste do nitroblue tetrazolium. A desnutrição foi mais freqüente entre as crianças com leishmaniose visceral, e o escore z da estatura para idade (E/I) mostrou relação direta com a capacidade microbicida. Infecção bacteriana foi observada em 35% das crianças, sendo o pulmão o local mais freqüentemente acometido. Hepatite ocorreu em 74% dos casos e insuficiência hepática foi observada em uma criança. Provavelmente houve hepatotoxidade em 13% dos casos. O tamanho do baço mostrou relação inversa com a concentração de hemoglobina e com o índice fagocitário dos monócitos. Observou-se melhora da febre em 61% das crianças no sétimo dia de tratamento, redução do tamanho do baço e do fígado das crianças em 55% e 54%, respectivamente, na segunda semana, melhora da pancitopenia com aumento em 20% da concentração de hemoglobina, em 46% no número de glóbulos brancos e em 67% no número das plaquetas e tendência à diminuição das enzimas hepáticas na segunda semana de tratamento. Houve dois óbitos devidos a insuficiência respiratória e hepática. O índice fagocitário de neutrófilos e monócitos estava aumentado nas crianças com leishmaniose visceral antes do tratamento, devido ao aumento da média de levedura ingeridas por fagócito, o que sugere um aumento na expressão de receptores para complemento e porção Fc das IgG nestes fagócitos, induzidas pela infecção parasitária. Entretanto, observamos uma diminuição na capacidade microbicida dos fagócitos nas crianças com leishmaniose visceral antes do tratamento específico. O tratamento com o glucantime contribuiu para a melhora dos parâmetros clínicos e laboratoriais e aumentou a capacidade microbicida dos fagócitos. Entretanto, esta droga modulou negativamente a capacidade fagocitária. Mostramos a ação desta droga como moduladora da resposta do sistema de fagócitos. A aumentada capacidade fagocitária associada com a diminuída produção de moléculas microbicidas pode fazer parte dos mecanismos de escape do parasita da resposta imune do hospedeiro e o tratamento com o antimonial possivelmente está atuando como um mecanismo de contra-escape, aumentando a competência microbicida destas células. ___________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Visceralizing of leishmaniasis is in part due to the mononuclear phagocyte system. The clinical manifestations depend on several factors as parasite and virulence of the strain, the type of immune response, genetic and environment. The meglumine antimoniate remains the first choice for the treatment of the disease and the cure depends on several factors. This work aimed to evaluate the influence of meglumine antimoniate on phagocytosis and superoxide production by phagocytes from visceral leishmaniasis children. Phagocytosis was assessed in 16 infected children, before, 9 children 48h after treatment and in 16 children at the end of the therapy, and in 18 normal control, using Saccharomyces cerevisiae, through pattern recognition receptors and opsonin receptors. The production of superoxide was assessed by the nitroblue tetrazolium test. Clinical and laboratorial parameters of 23 children were evaluated and followed up. The malnutrition was frequent in children with visceral leishmaniasis and the z score height for age showed positive relationship with the microbicidal capacity. Bacterial infection was observed in 35% of the diseased children and the lung was the most frequent site of infection. Acute hepatitis was observed in 74% of the cases and hepatic insufficiency was present in one patient. In 13% of the cases hepatotoxicity was observed, probably secondary to meglumine antimoniate use. The spleen size showed negative relationship with the hemoglobin concentration and phagocytic index of monocytes. The fever decreased in 61% of the children in the seventh day of treatment. After two weeks there was 55% and 54% reduction of spleen and liver, respectively, 20% increase of hemoglobin concentration, 46% increase of leukocytes and 67% increase of platelets and showed tendency to reduction of hepatic enzymes. There were two deaths due to hepatic insufficiency and respiratory failure. The phagocytic index of monocytes and neutrophils was increased in children with visceral leishmaniasis before treatment due to an increase of the median of ingested S. cerevisiae by phagocyte. This suggests an increase of opsonin receptors expression induced by parasitic infection. However, it was observed reduction of microbicidal capacity of phagocytes in children with visceral leishmaniasis before specific treatment. The antimoniate treatment contributed to improve the clinical and laboratorial parameters and the microbicidal capacity of phagocytes. However, the antimoniate modulated negatively the phagocytic capacity. The increased phagocytic capacity associated with the reduction of microbicidal molecules may play a role in the escape mechanism of the parasite from the host immune response and the antimonial treatment is probably acting as a counter escape mechanism, therefore increasing the microbicidal capability of these cells.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:53Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-11-10Bitstream added on 2014-06-13T19:22:42Z : No. of bitstreams: 1 santiago_meb_dr_jabo.pdf: 510527 bytes, checksum: 23f153f852b4ef52ff4f3278f8a62f07 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O presente estudo investiga in vitro a ação leishmanicida do imunomodulador fosfolinoleato-palmitoleato de magnésio e amônio proteico (PMAPA) e sua ação citotóxica em células mononucleares, e in vivo seu efeito imunomodulador em cães naturalmente infectados por Leishmania spp. Para avaliar a viabilidade celular após a ação do P-MAPA utilizou-se o ensaio colorimétrico com (3 - (4,5-dimetil-2-il) -2,5-difenil tetrazolium brometo (MTT), onde células mononucleares derivadas de sangue periférico foram cultivadas com diferentes concentrações de P- MAPA; 0, 50, 100 e 200 μg/mL em ambiente úmido a 37°C, com 5% de CO2 por 72 horas. A ação leishmanicida do imunomodulador foi avaliada pelo mesmo método utilizando-se a forma promastigosta de Leishmania (L.) chagasi. Para avaliar a ação terapêutica do PMAPA, vinte cães sem raça definida, com sintomas clínicos compatíveis com leishmaniose e positivos na detecção de anticorpos anti-leishmania pelo método ELISA, foram tratados. Dez cães receberam 15 doses do imunomodulador (2,0 mg/kg), por via intramuscular, e dez receberam solução fisiológica como placebo. Os grupos foram acompanhados para observação da remissão de sinais clínicos, no grupo tratado e controle foram colhidas amostras de pele antes e após a administração do imunomodulador para quantificação da carga parasitária, ao final do tratamento amostras de sangue periférico foram utilizadas para o isolamento de mononucleares e investigação do perfil linfocitário do tipo T e produção das citocinas IL-10, IFN-gama e IL-2 em sobrenadante de cultura celular. A quantificação da carga parasitária nas amostras de pele foi realizada pelo método da PCR em tempo real. O perfil linfocitário do tipo T foi realizado por citometria de fluxo, e a quantificação das citocinas em sobrenadante de cultura... / This study investigates the in vitro leishmanicidal action of the immunomodulator-phospholinoleate palmitoleato magnesium and ammonium protein (P-MAPA) together with its cytotoxic action in mononuclear cells. It also investigates, in vivo, its immunomodulatory effect in dogs naturally infected by Leishmania spp. To assess cell viability after the action of P-MAPA, the colorimetric assay with (3 - (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT) was used. There mononuclear cells derived from peripheral blood and were cultured with different concentrations of P-MAPA, 0, 50, 100 and 200 μg/mL in a humid environment at 37 ° C with 5% CO2 for 72 hours. The leishmanicidal action of immunomodulators was evaluated using the same method to form promastigosta of Leishmania (L.) chagasi. To assess the therapeutic action of P-MAPA, twenty mongrel dogs, with clinical symptoms compatible with leishmaniasis and positive detection of anti-leishmania antibodies by ELISA assay were treated. Ten dogs received 15 doses of the immunomodulator (2.0 mg / kg) intramuscularly, and ten received saline solution as placebo. The groups were followed for observation of clinical signs of remission; in the both groups, skin samples were collected before and after administration of the immunomodulator to quantify the parasite load. At the end of treatment, peripheral blood samples were used for the isolation of mononuclears, the profile investigation of type T lymphocytes, together with the production of IL-10, IFN-gamma and IL-2 cytokines in cell culture supernatant. The quantification of parasite load in the samples was performed by PCR in real time. The profile of type T lymphocytes was performed by flow cytometry, and quantification of cytokines in culture supernatants by ELISA capture... (Complete abstract click electronic access below)