Tyrimo metodai: Ląstelių sėjimo metodika; ląstelių tankio nustatymas; ląstelių gyvybingumo nustatymas MTT testu; neuronų žūties įvertinimas fluorescencinės mikroskopijos metodu; viduląstelinių RS kiekio įvertinimas; ekstraląstelinių RS kiekio įvertinimas; statistinė analizė. Tyrimo tikslas: Ištirti įvairių koncentracijų lektinų, išskirtų iš Phaseolus vulgaris L., antioksidacinį/ prooksidacinį poveikį ir įtaką C6 ląstelių gyvybingumui. Tyrimo uždaviniai: 1. Atlikti literatūros duomenų analizę apie lektinų, išskirtų iš Phaseolus vulgaris L., biologinį poveikį; 2. Nustatyti įvairių koncentracijų lektinų, išskirtų iš Phaseolus vulgaris L., antioksidacinį/prooksidacinį aktyvumą; 3. Nustatyti įvairių koncentracijų lektinų poveikį C6 ląstelių kultūros gyvybingumui. Tyrimų rezultatai: 1. Buvo matuojami vandenilio peroksido pokyčiai esant 1 - 10 µg lektino koncentracijoms ir nustatyta, kad skirtingų koncentracijų lektinas neveikia neutralizuojančiai vandenilio peroksido kiekio. 2. Atlikti vandenilio peroksido matavimai DMEM terpėje su 1 - 10 µg lektino koncentracijoms parodė, kad lektinas, priklausomai nuo jo koncentracijos, negeneruoja laisvųjų radikalų. 3. Buvo matuojamas glioblastomos C6 ląstelių gyvybingumas su MTT po 24 valandų ir nustatyta, kad didėjant lektino koncentracijai ląstelių gyvybingumas sparčiai mažėjo: 5 µg koncentracijos lektinas gyvybingumą sumažino beveik 2 kartus (iki 57,2111.16%), o 10 µg koncentracijos lektinas ląstelių gyvybingumą sumažino beveik 13... [toliau žr. visą tekstą] / Methods: The cell cultivation method; measurement of cell density; determination of cell viability with MTT assay; assessment of neuronal death with fluorescent microscopy; measurement of intracellular RS; measurement of extracellular RS; statistical analysis. The aim of research: To investigate antioxidative/prooxidative effects of different concentrations of the lectin, isolated from Phaseolus vulgaris L., and influence on the viability of the C6 cells. Goals of the study: 1. To perform an analysis of the literature on the biological effects of lectin, isolated from Phaseolus vulgaris L.; 2. To determine antioxidative/prooxidative activity of different concentrations of the lectin, isolated from Phaseolus vulgaris L.; 3. To determine effect on viability of the C6 cell culture using different concentrations. Results: 1. Concentrations of hydrogen peroxide were measured with 1 - 10 µg concentrations of lectin and it was found, that different concentrations of lectin did not neutralize hydrogen peroxide. 2. Measurements of hydrogen peroxide in DMEM medium with 1-10 mg concentrations of lectin showed, that the lectin, depending on it's concentration, did not generate free radicals. 3. Viability of cells was measured in C6 glioblastoma cells with MTT after 24 hours and it was found, that when concentration of lectin increased, viability of cells rapidly decreased: 5 µg concentration of lectin reduced the viability of almost 2 times ( up to 57.21% ± 11.16% ) and at 10 µg... [to full text]

Darbo tikslas: Kokybinė - kiekybinė baltymų frakcijų, praturtintų lektinais, iš Urtica dioica L. žolės, sausojo ekstrakto analizė ir antimikrobinio poveikio įvertinimas. Darbo uždaviniai: 1. Išskirti baltymų frakcijas, praturtintas lektinais, iš Urtica dioica L. šviežios ir džiovintos žolės bei sausojo ekstrakto; 2. Sausos Urtica dioica L. žolės frakcijose nustatyti baltymų dalelių dydį; 3. Įvertinti baltymų frakcijų, išskirtų iš Urtica dioica L. šviežios ir džiovintos žolės bei sausojo ekstrakto, hemagliutinacinį aktyvumą; 4. Kiekybiškai įvertinti baltymų kiekį gautose frakcijose; 5. Atlikti kiekybinę lektinų analizę pagal hemagliutinacijos titrą; 6. Įvertinti lektinais praturtintų frakcijų, išskirtų iš Urtica dioica L. džiovintos žolės bei sausojo ekstrakto, antimikrobinį aktyvumą. Darbo metodai: 1. Lektinais praturtintas baltymų frakcijas išskyrėme, taikydami tirpalų prisotinimą amonio sulfatu iki skirtingos procentinės koncentracijos; 2. Lektinai identifikuoti, pritaikius triušio eritrocitų hemagliutinacijos reakciją; 3. SDS – PAGE elektroforezės metodu nustatytas frakcijų dalelių dydis; 4. Bradfordo metodu kiekybiškai įvertinta baltymų sudėtis išskirtose frakcijose; 5. Lektinai kiekybiškai įvertinti pagal hemagliutinacinį aktyvumą; 6. Antibakterinis aktyvumas įvertintas standžiosiose Miulerio – Chintono agaro mitybos terpėse cilindriukų metodu. Tyrimo rezultatai: 1. Hemagliutinacinis aktyvumas nustatytas visose išskirtose baltymų frakcijose. 2. Didžiausiu... [toliau žr. visą tekstą] / Aim of experiment: The qualitative – quantitaive analysis and antibacterial activity evaluation of lectin enriched protein fractions from Urtica dioica L. fresh and dry herb and dry extract; Experiment tasks: 1. To extract the lectin enriched protein fractions from Urtica dioica L. fresh and dry herb and dry extract; 2. To assess the size of protein particles from Urtica dioica L. dry herb by SDS-PAGE assay; 3. To determine the hemagglutinating activity of lectin enriched fractions from Urtica dioica L. fresh and dry herb and dry extract; 4. To evaluate the protein amount in prepared fractions by Bradford assay; 5. To analyse the lectin amount by hemagglutination titre; 6. To evaluate the antibacterial activity of lectin enriched fractions from Urtica dioica L. fresh and dry herb and dry extract; Methods: 1. We used the precipitation with ammonium sulphate for the extraction of lectin enriched protein fractions; 2. Lectins were identified by hemagglutination assay; 3. We determined the size of protein particles using SDS-PAGE method. 4. We evaluated protein amount in fractions by Bradford assay; 5. Lectin quantity was evaluated by hemagglutination titer; 6. We evaluated the antibacterial activity on solid medium with Peni cylinders. Results: 1. The hemagglutinating activity was found in all protein fractions. 2. Maximum of hemagglutinating activity (2,95) was noticed in the first lectin enriched protein fraction from fresh Urtica dioica L. herb. 3. The particle size was... [to full text]

R. Staršelskytės magistro baigiamasis darbas/ mokslinė vadovė prof. N. Savickienė; Konsultantės: dr. Annabella Vitalone, prof. Gabriela Mazzanti, dr. Antonella Di Sotto; Lietuvos sveikatos mokslų universiteto, Farmacijos fakulteto, Farmakognozijos katedra. – Kaunas. Romos universiteto La Sapienza, Fiziologijos ir farmakologijos katedra. – Roma. Darbo tikslas: baltymų frakcijų, praturtintų lektinais, išskirtų iš Urtica doica L. žolės, antimutageninio, citotoksinio ir antioksidacinio aktyvumo įvertinimas. Darbo uždaviniai: 1. Įvertinti Urtica dioica L. baltymų frakcijų įtaką Salmonella typhimurium ir Escherichia coli kamienų mutageniškumui, naudojant AMES testo metodą. 2. Ištirti Urtica dioica L. baltymų frakcijų citotoksiškumą HepG2 ląstelių proliferacijai, naudojant MTT dažo redukcijos reakcijos metodą. 3. Ištirti Urtica dioica L. baltymų frakcijų antioksidacinį aktyvumą, naudojant modelinius ABTS (2,2-azino-bis-(3-etilbenztiazolin-6-sulfono rūgšties)) ir superoksido radikalus. Metodai: 1. Lektinais praturtintų baltymų frakcijų antimutageniškumas tiriamas AMES testo metodu (grįžtamosios mutacijos modeliu in vitro) su S9 metabolinės aktyvacijos sistema (supernatantu iš žiurkių (paveiktų fenobarbitalio/β-naftoflavono mišiniu) kepenų lątelių mitochondrijų) ir be S9 metabolinės aktyvacijos sistemos. Eksperimentui naudojami trys bakterijų kamienai: S. typhimurium TA98, S. typhimurium TA100 ir E. coli WP2uvrA. 2. Citotoksiškumas nustatomas MTT dažo redukcijos reakcijos metodu... [toliau žr. visą tekstą] / Rasa Staršelskytė master thesis/ Supervisor of the research paper: prof. Nijolė Savickienė1 Consultants: PhD Annabella Vitalone, prof. Gabriela Mazzanti, PhD Antonella Di Sotto2 1Department of Pharmacognosy, Faculty of pharmacy, Lithuanian University of Health Sciences, Lithuania 2Department of Physiology and Pharmacology, Sapienza University of Rome, Italy Objective of work: evaluation of antimutagenicity, cytotoxicity and antioxidant activity of lectin-enriched protein fractions from herb of Urtica dioica L. Main tasks: 1. To evaluate antimutagenic activity of lectin-enriched protein fractions by bacterial reverse mutation assay. 2. To determine cytotoxicity of lectin-enriched protein fraction by the tetrazolium dye (MTT) colorimetric assay. 3. To evaluate antioxidant activity of lectin-enriched protein fraction against ABTS-free radical and superoxide-radical. Methods: 1. The antimutagenicity was studied in a bacterial reverse mutation assay (Ames test), both in the absence and presence of an exogenous metabolic activator S9 (the liver postmitochondrial supernatant of rats treated with the mixture phenobarbital/β-naphthoflavone to induce the hepatic microsomal enzymes). A set of three strains, S. typhimurium TA98, S. typhimurium TA100 and E. coli WP2uvrA, was used. 2. Cytotoxicity was determined by the tetrazolium dye (MTT) colorimetric assay in HepG2 human hepatoblastoma cell line. 3. The antioxidant activity was evaluated by ABTS-free radical scavenging activity test... [to full text]