Orientadores: Luis Antonio Violin Pereira, Suzana de Fatima Paccola Mesquita / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-06T21:14:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Garcia_PatrickVianna_M.pdf: 2397318 bytes, checksum: 8b518ea012a3a11e92ce5775536bee0f (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: O epidídimo de mamíferos, através da secreção de proteínas andrógeno-dependentes, é responsável pela maturação dos espermatozóides visando o processo de fecundação, alterando-os em características morfológicas e bioquímicas. O criptorquidismo é uma condição patológica congênita na qual os testículos e epidídimos permanecem alojados na cavidade abdominal do organismo, causando a interrupção da espermatogênese e a ausência de espermatozóides no epidídimo, bem como atrofia e alterações histológicas que comprometem a função do epitélio germinativo do testículo e do epitélio secretor do epidídimo. A orquidopexia consiste no posicionamento dos testículos e epidídimos à topologia normal, contudo há ainda relatos de casos de infertilidade pós-orquidopexia. Alterações no epidídimo não revertidas pela orquidopexia poderiam ser co-responsabilizadas pelo baixo índice de fertilidade em indivíduos pós-orquidopexia. O objetivo deste estudo foi descrever em camundongos C57BL/6 as alterações histológicas e estereológicas causadas pelo criptorquidismo experimental e a possível reversibilidade destas alterações pela orquidopexia. Adicionalmente, foram determinadas e comparadas as concentrações séricas de testosterona e o número e o volume do núcleo das células de Leydig em camundongos controles, submetidos à condição de criptorquidismo experimental e à orquidopexia. A condição criptorquídica causou reduções significativas nos parâmetros estereológicos avaliados, contudo as alterações epididimárias foram menos acentuadas do que as verificadas para testículos. Após a orquidopexia, os valores de todos os parâmetros no epidídimo atingiram valores significativamente semelhantes aos controles. A dosagem sérica de testosterona não foi significativamente diferente em nenhum grupo analisado. A persistência da redução no número de células de Leydig na condição criptorquídica associada à não variação dos níveis de testosterona sugerem um mecanismo compensatório da atividade das células de Leydig. Os resultados demonstram que as alterações epididimárias causadas pelo criptorquidismo podem ser revertidas pela orquidopexia. Assim, a orquidopexia pode ser considerada um método eficaz para restauração da espermatogênese e alterações histológicas da cabeça do epidídimo causadas pelo criptorquidismo e, desta forma, sugere-se que a infertilidade, pós-orquidopexia, não deve ser correlacionada às alterações sofridas pela cabeça do epidídimo / Abstract: The mammalian epididymis, through secretion of androgen-dependents proteins, is responsible for maturation of the sperm aiming fecundation process, modifying the sperm in theirs morphological and biochemical features. Cryptorchidism is a pathological condition in which testis and epididymis are retained in the abdominal cavity, resulting in interruption of the spermatogenesis and absence of sperm in the epididymis as well as atrophy and histological alterations that compromise the function of germinative epithelium of the testicle and secretor epithelium of epididymis. Orquidopexy restored the normal topology of testis and epididymis, however there are relates of cases of infertility pos-orchidopexy. Epididymis alterations not reverted by orchidopexy could be coresponsable for decrease fertility potential pos-orchidopexy. The aim of this study was to describe in mice (C57BL/6) by histology and stereological parameters the alterations induced by experimental cryptorchidism in epididymis and testis and the possible reversibility of these alterations by orchidopexy. Additionally were determined and compared serum levels of testosterone, number and nuclear volume of Leydig cells in mice controls and mice submitted to experimental cryptorchidism and orchidopexy. The cryptorchidic conditions caused significantly reduction of stereological parameters that were analyzed, however the epididymal alterations were less decreased than testicular alterations. After orchidopexy, the values of all parameters in the epididymis were significantly similar to controls. The serum testosterone levels were not significantly different among the groups analyzed. The decreased number and nuclear volume of Leydig cells in cryptorquidic conditions not associated with variations of the serum testosterone levels suggest a compensatory mechanism of the Leydig cells activity. The results showed that alterations in caput of epididymis and interruption of spermatogenesis caused by cryptorchidism can be reverted by orchidopexy, suggesting that the infertility, pos-orchidopexy, does not have to be correlated to the alterations suffered by the caput of the epididymis / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Rejane Maira Goes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-14T18:19:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pinto_MariaEtelvina_D.pdf: 7979906 bytes, checksum: 0558bfd8fbc931f0f8dfcc8ad0957763 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: O gerbilo da Mongólia (Meriones unguiculatus) tem sido utilizado de maneira crescente em estudos sobre o sistema genital masculino. Alguns aspectos da espermatogênese e o ciclo do epitélio seminífero dessa espécie são conhecidos, mas investigações sobre o desenvolvimento pós-natal do testículo e diferenciação das suas principais populações celulares são incipientes. Assim, o objetivo desse estudo foi avaliar os eventos envolvidos com a diferenciação das células germinativas e de Leydig durante o desenvolvimento pós-natal, estabelecer o período de maturação testicular, e descrever a dinâmica das populações de células de Leydig do nascimento à senilidade. Foram utilizados gerbilos machos com 1-6 dias, 1-8 semanas, 3 e 18 meses de idade. Os diferentes tipos celulares foram identificados com base em microscopia de luz de alta resolução, microscopia eletrônica de transmissão e imunocitoquímica para marcadores específicos da linhagem germinativa (VASA) e das células de Leydig adultas (enzimas 3ß-hidroxiesteróide desidrogenase - 3ß-HSD e 11ß-hidroxiesteróide esteróide desidrogenase 1- 11ß-HSD1). Reações imunocitoquímicas para o receptor de andrógeno (AR), para o marcador de células em proliferação (PCNA) e técnica para marcação de células apoptóticas (TUNEL), bem como análises estereológicas dos componentes testiculares e determinação dos níveis séricos de testosterona e estrógeno também foram efetuadas. O processo de migração dos gonócitos para a membrana basal no gerbilo se estende até a segunda semana pós-natal, sendo seguido da sua rápida diferenciação em proespermatogonias. Diferentemente de outros roedores, os eventos relativos à maturação dos gonócitos e sua diferenciação em células da linhagem espermatogonial é mais longo, ocorrem assincronicamente entre os cordões seminíferos e estão associados à perda de sensibilidade ao andrógeno. O desenvolvimento da população de células de Leydig adultas (CLA) envolve quatro estágios progressivos de maturação: as células de Leydig adultas progenitoras, as recém-formadas, as imaturas e as maduras, as quais surgiram, respectivamente com duas, quatro, cinco e seis semanas de idade. As células de Leydig adultas maduras exibem núcleo excêntrico e irregular e um canalículo citoplasmático perinuclear. Também apresentam heterogeneidade funcional em relação à expressão do AR e da enzima 11ß-HSD1. As mudanças que ocorrem no insterstício testicular do gerbilo durante o desenvolvimento pós-natal são muito similares às encontradas em outros roedores, no entanto, o número de células de Leydig fetais permanece constante até a senilidade. Adicionalmente, o surgimento e aumento da população de células de Leydig adultas ocorrem mais tardiamente em relação a outros roedores. A análise histológica indicou que a maturidade testicular no gerbilo ocorre por volta da décima segunda semana de idade. Os níveis séricos de testosterona aumentaram expressivamente a partir da sexta semana de idade, enquanto os de estrógeno permaneceram constantes até a décima segunda semana de idade. Nos animais senis houve uma queda acentuada de ambos os hormônios. O comprometimento da síntese de esteróides nesse último período decorre do prejuízo funcional das CLA. O presente estudo fornece um panorama abrangente do desenvolvimento testicular do gerbilo da Mongólia, ampliando o conhecimento sobre a biologia reprodutiva dessa espécie e proporcionado os fundamentos para o desenvolvimento de estudos experimentais. / Abstract: The Mongolian gerbil (Meriones unguiculatus) has been increasingly used with studies on the male genital system. Some aspects of spermatogenesis and the seminiferous epithelium cycle of this species are known, but investigations about the postnatal development of testis and differentiation of the main cell populations are incipient. The objective of this study was to evaluate the events involved in differentiation of germ cells and Leydig cells during postnatal development, establish the period of testicular maturation, and describe the dynamics of Leydig cells population from birth to senility. Male gerbils were used with 1-6 days, 1-8 weeks, 3 and 18 months of age. The different cell types were identified based on light microscopy, high-resolution transmission electron microscopy and immunocytochemistry for specific markers of germ line (VASA) and adult Leydig cells (enzyme 3 ß-hydroxysteroid dehydrogenase - 3 ß-HSD and 11 ß- hydroxysteroid steroid dehydrogenase 1 - 11 ß-HSD1). Reactions observed for the androgen receptor (AR), for cell proliferation marker (PCNA), technique for marking apoptotic cells (TUNEL), stereological analysis of testicular components and determination of serum levels of testosterone and estrogen were also made. The process of gonocytes migration to the basement membrane in the gerbil extends to the second postnatal week, being followed by their rapid differentiation to proespermatogonia. Unlike other rodents, the events on the gonocytes maturation and differentiation into espermatogonial cell lineage are longer, occur asynchronously between the seminiferous cords and are associated with loss of sensitivity to androgen. The development of the adult Leydig cells (ALC) population involves four progressive stages of maturation: the adult Leydig cell progenitor, newly formed, immature and mature, which appeared respectively with two, four, five and six weeks of age. Mature ALC exhibit irregular and eccentric nuclei and a perinuclear cytoplasmic canaliculus. Also present functional heterogeneity in expression of AR and the enzyme 11 ß-HSD1. The changes occurring in gerbil testicular insterstitium during postnatal development are very similar to those found in other rodents, however, the number of fetal Leydig cells remains constant until senility. Additionally, the emergence and increase of ALC population occur later in relation to other rodents. Histological analysis indicated that the testicular maturity in the gerbil occurs around the twelfth week of age. Serum levels of testosterone significantly increased from the sixth week of age, while the estrogen remained constant until the twelfth week of age. In senile animals there were a sharp fall of both hormones. The impairment of the steroid synthesis in this last period comes from the functional injury of the CLA. This study provides a comprehensive overview of the testicular development of the Mongolian gerbil, expanding knowledge about the reproductive biology of this species and providing the foundation for the development of experimental studies. / Doutorado / Biologia Celular / Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Mary Anne Heidi Dolder / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-17T22:42:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gomes_MarcosdeLuccaMoreira_D.pdf: 17022356 bytes, checksum: 8f52bd976bb7a3f25e260b1c7c06dc69 (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: A espécie Heteropterys aphrodisiaca é amplamente utilizada como afrodisíaca. Estudos mostram o potencial efeito estimulante sobre o tamanho das vesículas seminais e de populações de células de Leydig em ratos, ambos andrógenos dependentes. Neste trabalho foi proposto o tratamento com a infusão de H. aphrodisiaca aliado ao exercício de resistência física com o intuito de observar seus efeitos nos testículos de ratos. Foram utilizados ratos Wistar (90 dias) divididos em 4 grupos (n=10, cada): controles - água, sedentário e com treinamento físico; tratados com H. aphrodisiaca (104mg/kg/dia) sedentário e com treinamento físico. O experimento teve duração total de 56 dias. Foi realizada dosagem de testosterona plasmática e avaliados parâmetros morfométricos e estereológicos do parênquima testicular. No epitélio seminífero, foram contados os números de células germinativas e somáticas, calculando-se o rendimento da espermatogênese, índices mitótico e meiótico e eficiência e capacidade de células de Sertoli. Foi realizado Western Blotting para quantificação da concentração de receptores de andrógeno, e TUNEL para determinação de porcentagem de células apoptóticas. A concentração de testosterona circulante foi significativamente maior nos animais tratados e sedentários. Os diâmetros médios tubulares dos animais treinados foram maiores quando comparados aos dos animais sedentários. Não ocorreram variações significativas quanto ao volume do tecido intersticial, na proporção de macrófagos, espaço linfático e vasos sanguíneos. Entretanto, ocorreram diminuições significativas na proporção de tecido conjuntivo em ambos os grupos que receberam a infusão vegetal. Houve aumentos significativos do diâmetro e volume nucleares das células de Leydig dos animais treinados. Houve diminuição significativa do número de células de Leydig por grama de parênquima testicular nos animais controle/treinados quando comparados aos outros grupos experimentais. O grupo tratado/treinado apresentou o maior índice de mitoses espermatogoniais, sendo significativamente maior que a média do grupo sedentário/tratado. As curvas de rendimento e índice mitótico possuem mesmo padrão de distribuição, entretanto, para o índice meiótico, o grupo sedentário/tratado mostrou as maiores médias quando comparado aos dois grupos controle, sedentário e treinado. Não houve alteração de índices apoptóticos tampouco na concentração de receptores androgênicos entre os grupos experimentais. O protocolo de treinamento aplicado no presente experimento não acarretou em danos no parênquima testicular, como tem sido afirmado em outros experimentos envolvendo exercício aeróbico. Contudo, a infusão de nó-de-cachorro parece influenciar tanto no estímulo de células de Leydig, com aumento do volume celular, quanto no comportamento espermatogonial, induzindo mitoses e aumentando o rendimento geral do processo espermatogênico / Abstract: The species Heteropterys aphrodisiaca is traditionally used as an aphrodisiac. Some studies showed its stimulating potential of seminal vesicle and Leydig cell population growth, both androgen dependent. In this study, we proposed to observe the effects of H. aphrodisiaca infusion treatment combined with endurance exercise protocol. For this investigation, 40 adult Wistar rats (90 days) were used (4 groups, n = 10 each): two controls receiving water, sedentary and trained, and two treated with H. aphrodisiaca (104mg/kg/dia), sedentary and trained. The experiment lasted for 56 days. Plasma testosterone concentration was measured by radioimmunoassay. Morphometrical and stereological parameters were evaluated from the testicular parenchyma. The numbers of somatic and germ cells were estimated by counting the seminiferous epithelium cell population. Also, the spermatogenic yield, meiotic and mitotic index, efficiency and capacity of Sertoli cells were estimated. Western blotting was performed to quantify the concentration of androgen receptors, and TUNEL technique to determine the percentage of apoptotic cells within the seminiferous tubules. Control/trained animals showed a significant decrease in body mass gain compared to sedentary animals. The testosterone concentrations were significantly higher in treated/sedentary animals. The mean tubular diameters of trained animals were higher when compared to sedentary animals. There were no significant differences regarding the volume of interstitial tissue, the proportion and volume of macrophages, lymphatic space and blood vessels. However, the treated/sedentary group showed lower connective tissue content compared with the control/sedentary, as well as the diminished volume of Leydig cells, compared with the treated/trained group. There was a significant increase of both nuclear diameter and volume of Leydig cells in trained animals. On the other hand, there was a significant decrease of Leydig cell number per gram of testicular parenchyma in control/trained animals. Considering the spermatogenesis dynamics, both treated groups showed the highest spermatogenic yield, in relation to the control/trained group. The treated/trained group showed the highest index of spermatogonial mitosis - significantly higher than the sedentary/treated one. Spermatogenic yield and mitotic index showed the same distribution pattern when plotted on graphs; however, the meiotic index was significantly higher only in the sedentary/treated group. The apoptotic indexes, as well as the androgen receptor concentrations were not affected by the protocols employed. Treatment with the plant infusion did not lead to an increase of the parameters analyzed. However, the infusion seems to stimulate either the Leydig cell (increase of cell volume) or the spermatogonial behavior, inducing more mitosis and increasing the spermatogenic yield / Doutorado / Biologia Celular / Doutor em Biologia Celular e Estrutural