Orientadores: Eliana Cotta de Faria, José Eduardo Tanus dos Santos / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-16T16:38:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Zago_VanessaHelenadeSouza_M.pdf: 4029424 bytes, checksum: 82a248a89f7f9c4b4bee67ad6c6f0d07 (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: O óxido nítrico (NO) é produzido no endotélio vascular pela óxido nítrico sintase endotelial (eNOS), enzima regulada negativamente pela presença do polimorfismo T- 786C, levando à disfunção endotelial. A lipoproteína de alta densidade (HDL) têm funções anti-aterogênicas bem estabelecidas, incluindo mecanismos que aumentam a atividade da eNOS. As estatinas são fármacos que possuem, dentre seus efeitos pleiotrópicos, a melhora na função do endotélio e na composição da HDL. Dada a importância tanto da expressão quanto da atividade da eNOS para a função endotelial, bem como dos efeitos pleiotrópicos das estatinas sobre estas duas variáveis, avaliamos os parâmetros bioquímicos e a composição das sub-frações de HDL (HDL2 e HDL3) após uso de placebo e atorvastatina em uma amostra populacional de 30 indivíduos, divididos em dois grupos: 15 indivíduos portadores do polimorfismo T-786C do gene da eNOS (CC) e 15 não portadores (TT). Duzentos indivíduos foram genotipados, e pareamos conforme idade e IMC 15 indivíduos TT e 15 indivíduos CC, que receberam placebo e/ou atorvastatina na dose de 10mg/dia, por 14 dias. Os parâmetros séricos analisados foram determinados através de métodos bioquímicos enzimáticos, radiométricos, nefelométricos e microultracentrifugação. Mediu-se lípides, lipoproteínas, composição das sub-frações da HDL (HDL2 e HDL3), apolipoproteínas, atividade da proteína de transferência de colesteril éster, metabólitos do NO e proteína C reativa. Após o uso da estatina, como esperado, drásticos efeitos redutores foram observados tanto nos lípides, lipoproteínas, apolipoproteínas e de forma independente do polimorfismo, além da redução de ácidos graxos livres nos portadores do genótipo CC. Nas sub-frações a relação lípides/proteínas foi reduzida tanto em HDL2 quanto em HDL3.O aumento da atividade da CETP nos portadores foi corrigido pela estatina e os níveis de ácidos graxos livres reduziram-se de maneira polimorfismo-dependente, em oposição à redução observada do nitrito, que foi polimorfismo-independente. usPCR e Lp(a) não se modificaram. A atorvastatina pode ter atuado sobre o transporte reverso de colesterol através da redução da atividade da lipase hepática e aumento de atividade da PLTP. Foram observadas interações genótipo/tratamento limítrofes para CETP e Lp(a). Estes resultados sugerem que o tratamento com estatinas pode ser relevante na prevenção primária da aterosclerose em portadores do polimorfismo, independentemente de modificações lipídicas séricas. Portanto estes indivíduos se beneficiariam com o uso de estatinas através da modulação da atividade da CETP e redução da concentração de ácidos graxos livres. / Abstract: Nitric oxide (NO) is produced in the vascular endothelium by endothelial nitric oxide synthase (eNOS), an enzyme negatively regulated by the presence of the T-786C polymorphism, leading to endothelial dysfunction. High-density lipoproteins (HDL) have well-established anti-atherogenic functions, for example mechanisms that enhance eNOS activity. Statins are drugs that have pleiotropic effects, such as the improvement in endothelial function and beneficial composition of HDL. Taking into account both the activity of eNOS on endothelial function, and the validity of the pleiotropic effects of statins, we evaluated the biochemical parameters and the composition of subfractions of HDL (HDL2 and HDL3) after use of placebo and atorvastatin at a dose of 10mg/day for 14 days, in a population sample of 30 individuals divided into two genotype groups of the T-786C polymorphism of the eNOS gene: CC (carriers) or TT (non-carriers). Two hundred individuals were genotyped, and the selected groups paired by age and BMI. The serum parameters analyzed were determined using biochemical enzymatic, radiometric, nephelometric and microultracentrifugation methods. We measured lipids, lipoproteins, the composition of sub-fractions of HDL (HDL2 and HDL3), apolipoproteins, activity of cholesteryl ester transfer protein, NO metabolites and hsCRP. After statin, as expected, drastic effects were observed both in lipids, lipoproteins, apolipoproteins, independently of the polymorphism. In HDL sub-fractions the ratio lipid/protein was smaller in both HDL2 and HDL3. CETP activity and free fatty acids were reduced in a polymorphism-dependent manner, and the reduction of nitrite was polymorphism-independent. hsCRP did not change. Atorvastatin may have acted on the reverse cholesterol transport by reducing the activity of hepatic lipase, increased PLTP activity and reducing CETP. There was a genotype/drug interaction effect on CETP and Lp(a). These results suggest that statin treatment may be relevant for primary prevention of atherosclerosis in patients with the polymorphism, irrespective of serum lipid changes. These individuals would benefit from the use of statins because of reduction of CETP activity and free fatty acids. / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientadores: Andrei Carvalho Sposito, Eliana Cotta de Faria / Texto em português e inglês / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-25T06:33:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Parra_ElianeSoler_D.pdf: 3645332 bytes, checksum: 085ab65e147faa7a1f1684591c22e6d8 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: A lipoproteína de alta densidade (HDL) é um complexo heterogêneo e versátil de partículas com variações funcionais resultantes da integração de uma vasta gama de componentes, como apolipoproteínas, receptores, transportadores, enzimas e fosfolípides, com ações indiretas ou diretas sobre o seu metabolismo. Além disso, as concentrações plasmáticas do colesterol da HDL (HDL-C) e seu tamanho representam importantes fatores inversos ao desenvolvimento de doenças cardiovasculares, particularmente em indivíduos em prevenção primária. A proteína de transferência de colesterol esterificado (CETP) desempenha uma função importante no transporte reverso do colesterol (TRC) que é umas das principais funções antiaterogênicas da HDL. No entanto, a atividade da CETP é inversamente associada às concentrações de HDL-C e ao tamanho da partícula. Adicionalmente, HDL grande demonstra ser mais efetiva no efluxo do colesterol, parte integrante do TRC, comparada à partícula de HDL menor. Nesse contexto, o objetivo do estudo foi avaliar, em indivíduos livres de doença aterosclerótica manisfesta, a associação entre o tamanho da HDL e a redução da atividade da CETP induzida geneticamente com a carga aterosclerótica carotídea. Utilizamos para esse fim dois polimorfismos da CETP, TaqIB e I405V, que foram bem caracterizados funcionalmente e encontrados frequentemente na população. Assim, os objetivos desta tese foram: (i) investigar se a presença dos polimorfismos TaqIB e I405V do gene da CETP está associada às concentrações de HDL-C e à aterosclerose carotídea subclínica (n=207); (ii) pesquisar se, além das concentrações de HDL-C, o tamanho da partícula de HDL está associado à aterosclerose subclínica (n=284). Para estes estudos foram determinados os perfis lipídicos, lipoproteícos e apoproteícos, proteína C-reativa (PCR), anticorpos anti-LDL oxidada, atividades das proteínas CETP e de transferência de fosfolípides (PLTP), HDL2 e HDL3 e o diâmetro da HDL. Os polimorfismos TaqIB e I405V da CETP também foram detectados. A espessura da camada íntima-medial da artéria carótida comum (EIMc) foi mensurada por ultrassonografia. Na presença do menor alelo dos polimorfismos TaqIB e I405V da CETP, EIMc correlacionou-se inversamente com atividade da CETP e positivamente com atividade da PLTP e anticorpos anti-LDL oxidada. Na análise multivariada, a presença do menor alelo do polimorfismo TaqIB, mas não do I405V, foi associado a um aumento de 5,1 vezes de risco de maior EIMc. No entanto, a atividade da CETP não diferiu entre os grupos de presença e ausência do menor alelo do polimorfismo TaqIB. Com relação ao tamanho das partículas, HDL maiores foram associadas a menores EIMc e foram melhores indicadores de risco de aterosclerose carotídea subclínica comparadas às concentrações de HDL-C. Em conclusão, o aumento do tamanho da HDL tem associação independente com a carga aterosclerótica e, embora o polimorfismo TaqIB também se associe, sua interação parece ser independente da atividade da CETP / Abstract: High-density lipoproteins ( HDL ) are a group of heterogeneous and complex particles with versatile functional changes resulting from the integration of a wide range of components, such as apolipoproteins, receptors, transporters, enzymes and phospholipids with indirect or direct actions on your metabolism. In addition, plasma concentrations of HDL cholesterol (HDL -C) and its size are inversely related to the development of cardiovascular diseases, particularly in primary prevention in individuals. The cholesterol ester transfer protein (CETP) plays an important role in reverse cholesterol transport (RCT), which is one of the main functions of HDL. However, CETP activity is inversely related to HDL-C and particle size. Additionally, largest HDL particles have demonstrated a higher cholesterol efflux capacity. In this context, the aim of the study was to evaluate, in individuals free of manifest atherosclerotic disease, the association between the size of HDL and CETP activity genetically induced with carotid atherosclerosis burden. We used for this purpose, two polymorphisms of CETP TaqIB and I405V, which have been well characterized functionally and often found in the population. The objectives of this thesis were: (i) to investigate whether the presence of polymorphisms I405V and TaqIB of CETP gene is associated with HDL-C and subclinical carotid atherosclerosis (n= 207); (ii) to investigate if, in addition to HDL-C, the particle size of HDL is associated with atherosclerosis (n= 284). We determined lipid, lipoprotein profiles and apolipoprotein, C-reactive protein (CRP), antibodies against oxidized LDL, CETP and phospholipid transfer protein (PLTP) activities, HDL2 and HDL3 and HDL size. The TaqIB and I405V CETP polymorphisms were also analyzed. Common carotid artery intima-media thickness (cIMT) was measured using ultrasonography. In the presence of the minor alleles of the TaqIB and I405V polymorphisms of CETP, cIMT was inversely correlated with CETP activity and positively with PLTP activity and antibodies against oxidized LDL. In multivariate analysis, the presence of the minor allele of the TaqIB polymorphism, but not the I405V, was associated with a 5.1 times increased risk of higher cIMT. However, CETP activity did not differ between the presence and absence of minor allele groups of the TaqIB polymorphism. Regarding HDL size, increased HDL size was associated with lower cIMT and was better marker of risk of subclinical carotid atherosclerosis compared to HDL-C. In conclusion, increased size of HDL is independently associated with atherosclerotic and, although TaqIB polymorphism is also associated, its interaction seems to be independent of CETP activity / Doutorado / Clinica Medica / Doutora em Clínica Médica