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Maturação nuclear e citoplasmática de oócitos de cadelas colhidos em diferentes fases do ciclo estral e cultivados in vitro em meios sequenciais com hormônios e espermatozóides /

Apparício-Ferreira, Maricy. January 2010 (has links)
Orientador: Wilter Ricardo Russiano Vicente / Banca: Camila Infantosi Vannucchi / Banca: Lúcia Daniel Machado da Silva / Banca: Maria Denise Lopes / Banca: Marion Burkhardt Koivisto / Resumo: Este estudo foi realizado com o intuito de avaliar comparativamente os efeitos do emprego de meios seqüenciais com hormônios no desenvolvimento meiótico e citoplasmático de oócitos caninos durante o período de cultivo de 72 horas. Os oócitos foram coletados de 49 cadelas hígidas submetidas à ovariosalpingo-histerectomia ou ovariectomia, divididas em três grupos de acordo com seu status reprodutivo (fase folicular, lútea e anestro). Os óocitos foram aleatoriamente distribuídos em quatro sistemas de cultivo diferentes sendo o meio básico (MB) o TCM 199 suplementado. Os demais consistiam: no sistema A (controle) os oócitos foram maturados por 72 horas no (MB) com 10 UI/mL de hCG, 1 mg/mL de progesterona (P4) e 1 mg/mL de estradiol (E2), ou seja, expostos de forma contínua à estes hormônios; no sistema seqüenciado B os oócitos foram maturados no meio base com hCG por 48 horas e nas 24 horas adicionais no MB com P4; no sistema seqüenciado C os oócitos foram maturados no MB com hCG, P4 e E2 por 48 horas e nas 24 horas adicionais no MB com P4; no sistema D (controle) os oócitos foram maturados no MB, sem hormônios. Nos meios B e C, os hormônios foram suplementados nas mesmas concentrações empregadas no sistema A. Os resultados evidenciaram efeito positivo dos meios seqüenciais na progressão da meiose e na maturação citoplasmática (P<0,05). Não houve influência da condição reprodutiva das fêmeas doadoras nas taxas de maturação oocitária (P>0,05). A presença de espermatozóides nos meios de cultivo não teve efeito benéfico sobre as taxas de MII; em contrapartida, a porcentagem de oócitos degenerados aumentou consideravelmente (P>0,05). / Abstract: The aim of this work was to study the influence of different bi-phasic systems with gonadotrophins and steroids on meiotic and cytoplasmic development of canine oocytes cultured for 72 hours. Oocytes were collected after ovariohysterectomy or ovariectomy from 49 healthy bitches, divided into 3 groups according to their reproductive status (follicular, luteal and anestrous stages). Oocytes were randomly allocated in four different culture systems with the base medium (BM) consisting of TCM-199. The systems were as follows: in system A oocytes were matured for 72 h in BM with 10 UI/mL hCG, 1 mg/mL progesterone (P4), 1 mg/mL estradiol (E2); in bi-phasic system B oocytes were matured for 48 h in BM with hCG and for 24 h in BM with P4; in bi-phasic system C oocytes were matured for 48 h in BM with hCG, P4 and E2, and for 24 h in BM with P4. In system D (control), oocytes were cultured in BM without hormones. In sytems B and C hormones were supplemented at the same doses as in system A. The results suggest that the use of bi-phasic systems was beneficial for oocyte meiosis and cytoplasmic maturation (P<0,05). No difference was noticed with regards to the influence of reproductive status on maturation rates (P>0,05). The addition of spermatozoa to the medium had no benefit on MII stage rates (P>0,05); however, the percentage of degenerated oocytes has significantly increased. / Doutor
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Ciclo reprodutivo e análise ultraestrutural da espermatogênese de Cichla kelberi (TeLeostei: Perciformes: Cichlidae) /

Silva, Diógenes Henrique de Siqueira. January 2011 (has links)
Orientador: Carlos Alberto Vicentini / Banca: Classius de Oliveira / Banca: Sérgio Ricardo Batlouni / Resumo: O Cichla kelberi, espécie recentemente classificada e popularmente conhecida como tucunaré amarelo, é endêmico dos rios Araguaia e baixo Tocantins, sendo, entretanto, encontrado em muitas outras bacias, onde apresenta grande importância para a pesca profissional por seu alto valor econômico, devido a qualidade e sabor de sua carne, e pela pesca esportiva, como pode ser observado pelos campeonatos anuais de pesca ao tucunaré nos rios em que se encontra. Para entender esse rápido processo de ocupação e adaptação a novos ambientes, 78 exemplares de Cichla kelberi foram mensalmente coletados entre os meses de março de 2009 a fevereiro de 2010, com o auxílio de vara de pesca e anzol na Lagoa do Pernilongo (20º 29' 11,93"S, 51º 25' 33,27"O) e Ilha da Ferradura (20º 28' 27,11" S, 51º 25' 54,53"O), no Reservatório de Jupiá, rio Paraná, Ilha Solteira, São Paulo, Brasil, onde foi introduzido. Foram definidas quatro classes de maturação gonadal para o ciclo reprodutivo anual do tucunaré amarelo C. kelberi. A definição das classes de Maturação Inicial, Maturação Intermediária, Maturação Final e Regressão, tiveram como base as alterações do epitélio germinativo testicular associado aos estágios das células germinativas presentes. A Classe de Maturação Inicial é caracterizada pela presença de um epitélio germinativo totalmente contínuo, cistos com células germinativas em todos os estágios de desenvolvimento, intensa atividade espermatogênica por todo o testículo e raros "clusters" periféricos, formados por espermatogônias primárias. A Classe de Maturação Intermediária inicia com o surgimento de um epitélio germinativo descontínuo na região anastomosada, com diminuição da espermatogênese e estocagem de espermatozóides nesta região. Os agrupamentos periféricos de espermatogônias ou "clusters" estão ausentes... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The Cichla kelberi, a recently classified specie and popularly known as yellow peacock bass, is endemic from the Araguaia an low Tocantins river, being, however, found in many other basins, where has great importance for the professional fishing for its high economic value due to the quality and flavor of their meat and fishing, as can be observed by annual championships of peacock in the rivers where it is. To understand this fast process of occupation and adaptation to new environments, 78 specimens of C. kelberi were caught monthly between the months of March 2009 to February 2010 with the aid of fishing pole and hook, from the Lagoa do Pernilongo (20º 29' 11,93"S, 51º 25' 33,27"O) and Ilha da Ferradura (20º 28' 27,11" S, 51º 25' 54,53"O), in the Jupiá Reservoir, Parana River, Ilha Solteira, São Paulo, Brazil, where it was introduced. It was defined four gonadal maturation class to the annual reproductive cycle of the yellow peacock bass C. kelberi. The definition of the Early Maturation, Mid Maturation, Final Maturation and Regression Classes, were based on the changes of the testicular germinal epithelium associated with the germ cell stages present. The Class of Early Maturation is characterized by the presence of a fully continuous germinal epithelium, cysts with germ cells at all stages of development, intense spermatogenic activity throughout the testis and rare "clusters" peripherals, consisting of primary spermatogonia. The Mid maturation Class starts with the appearance of a discontinuous germinal epithelium in the anastomosed region with spermatogenesis decrease and sperm storage in this region. The peripheral groups of spermatogonia or "clusters" are missing at the end of this class of maturation. In the Final Maturation Class the germinal epithelium discontinuity reaches the periphery of lobules... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Avaliação de genótipos de cana-de-açúcar para as condições edafoclimáticas de Aparecida do Taboado-MS /

Santos, Ana Carolina Araujo dos. January 2008 (has links)
Resumo: O presente trabalho teve como objetivo avaliar as características agronômicas e os atributos tecnológicos de dezesseis genótipos de cana-de-açúcar em primeira soca nas condições ambientais de Aparecida do Taboado - MS. O experimento foi realizado na Fazenda Macuton 3071, em um único ambiente. Os genótipos foram avaliados por delineamento de blocos ao acaso, com três repetições. As avaliações agronômicas foram realizadas de Outubro de 2006 a Setembro de 2007, que consistiram em: número de perfilhos, diâmetro e massa de colmo, número de internódios e área foliar. As avaliações tecnológicas foram: total de sólidos solúveis (brix), (pol (%)) (sacarose no caldo), pureza do caldo, fibra da cana, açúcares redutores (Ar (%)) do caldo e açúcar total recuperável (ATR) do caldo aos 254, 314, 344 e 374 dias após o primeiro corte. A área foliar e massa seca de folhas verdes, associadas aos outros componentes de produção, contribuíram para o melhor desempenho dos genótipos. Os clones CTC941150 e CTC921894 apresentaram maior TCH, respectivamente, 159,38 t ha-1 e 106,41 t ha-1 (colheita no mês de julho), os clones não diferiram entre si para as características tecnológicas, exceto para a variável fibra (maior valor apresentado pelo clone CTC941209 com 15,06% e o menor valor pelos clones CTC943218 e CTC921852, respectivamente, 11,66 e 11,93%). Para as condições características de um ambiente de produção "D", destacaram-se os clones CTC941150 e CTC921894. / Abstract: This study aimed to evaluated the agronomics charactheristics e the technological attributes of the sixteen genotypes in the first ratoon crop when growth in the environmental conditions of the Aparecida do Taboado - MS. The experiment was conducted at the Farm Macuton 3071, on a Onisoil. The genotypes were evaluated on a randomized complete block design with three replications. The agronomic evaluations were carried out from October of 2006 to September of 2007 and consisting of: tillers number, diameter and weigth of stalk, nodes an leaf area. The technological avaliation were: total solubles solids (brix) in the juice, sucrose (pol (%)) in the juice, juice purity, cane fiber, reducing sugars (Ar (%)) in the juice and recoverable total sugar (ATR) in the juice at 254,314,344 and 374 days after the first cut. The leaf area and dry mass of green leaf, associated to others components of production, contributed to the best performance of the genotypes. The clones CTC941150 and CTC921894 presented TCH bigger, respectively, 159,38 t ha-1 and 106,41 t ha-1 (harvest in the July), the clones did not differ between you for the technological characteristics, except for the variable fiber (bigger value presented by the clone CTC941209 with 15,06 % and the least value for the clones CTC943218 and CTC921852, respectively, 11,66 and 11,93 %). For the characteristic conditions of an environment of production "D", they stood out the clones CTC941150 and CTC921894. / Orientador: Francisco Maximino Fernandes / Coorientador: Antônio César Bolonhezi / Banca: João Antonio da Costa Andrade / Banca: Denizart Bolonhezi / Mestre
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Maturadores associados à boro e silício aplicados via foliar em cana-de-açúcar (Saccharum spp.) /

Leite, Glauber Henrique Pereira, 1978- January 2010 (has links)
Orientador: Carlos Alexandre Costa Crusciol / Banca: Gaspar Henrique Korndorfer / Banca: João Domingos Rodrigues / Banca: Rogério Peres Soratto / Banca: Rafaella Rossetto / Banca: Benetido Apparecido Braz / Resumo: O trabalho teve por objetivo estudar a eficácia da aplicação foliar de boro e silício associados ou não à maturadores, com diferentes mecanismos de ação, e as alterações fisiológicas e bioquímicas na cana-de-açúcar, suas implicações na produtividade, qualidade tecnológica e rebrota da soqueira, tanto em aplicação de início como de final de safra. Para tanto, a pesquisa foi composta de experimentos conduzidos nos meses de setembro de 2006 e 2007 (momento da aplicação dos tratamentos envolvendo a variedade de cana-de-açúcar de maturação médiatardia SP80-3280) e março de 2007 e 2008 (momento da aplicação dos tratamentos envolvendo a variedade de cana-de-açúcar de maturação precoce RB855453). Os experimentos foram conduzidos nas Fazendas Santa Maria e Bosque, situadas no município de Igaraçu do Tietê, Estado de São Paulo, pertencente ao GRUPO COSAN - Unidade Barra. Os tratamentos consistiram na aplicação de 16 (dezesseis) tratamentos, divididos em 2 (dois) experimentos distintos, representados conforme a seguir: Experimento 1 - aplicação de 3 (três) maturadores com diferentes mecanismos de ação, sendo classificados como inibidores (Glifosate e Sulfometuron metil) e retardante do crescimento vegetal (KNO3) e a testemunha (maturação natural), associados ou não à aplicação foliar de boro e; Experimento 2 - aplicação dos maturadores supracitados e a testemunha (maturação natural), associados ou não à aplicação foliar de silício. O delineamento experimental utilizado nos experimentos foi o em blocos casualizados, com cinco repetições. O estudo da aplicação foliar de boro, associado ou não a compostos químicos com diferentes mecanismos de ação (Glifosate, KNO3 e Sulfometuron metil), no início das safras 2007 e 2008, possibilitou as seguintes conclusões: a) o micronutriente isolado ou associado aos agentes químicos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The work aimed to study the effectiveness of foliar application of boron and silicon, with and without maturation, with different mechanisms of action, and physiological and biochemical alterations in sugarcane, its implications on productivity, quality and technological regrowth stump, both application early as the end of harvest. For this, the research consisted of experiments conducted during September 2006 and 2007 (when the treatments involving the variety of sugarcane in medium-late maturing SP80-3280) and March 2007 and 2008 (when the treatments involving the variety of sugarcane early ripening RB855453). The experiments were conducted in Santa Maria and Bosque Farms, located in the municipality of Igaraçu Tietê, São Paulo, which belongs to the group COSAN - Barra. The treatments consisted of applying 16 (sixteen) treatments, divided into 2 (two) separate experiments, represented as follows: Experiment 1 - the application of three (3) maturation with different mechanisms of action and is classified as inhibitors (Glyphosate and Sulfomethuron methyl) and plant growth retardant (KNO3) and control (natural ripening), with and without foliar application of boron and Experiment 2 - maturation application above and the control (natural ripening), associated or not with foliar application of silicon. The experimental design used in the experiments was a randomized block with five replications. The study of foliar application of boron, with or without the chemical compounds with different mechanisms of action (Glyphosate, KNO3 and Sulfomethuron methyl) at the beginning of the harvest 2007 and 2008, allowed the following conclusions: a) the micronutrient alone or in combination with agents chemical (Glyphosate, KNO3 and Sulfomethuron methyl) induced significant changes in acid invertase activity and neutral, albeit as different intensities and the mechanism of action of chemical... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor
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Avaliação dos efeitos da inibição da maturação nuclear e de antioxidantes sobre a maturação oocitária, fecundação e desenvolvimento embrionário bovino in vitro /

Barreto, Letícia Siqueira de Sá. January 2007 (has links)
Orientador: Gisele Zoccal Mingoti / Banca: Claudia Lima Verde Leal / Banca: Flávio Vieira Meirelles / Banca: Joaquim Mansano Garcia / Banca: César Roberto Esper / Resumo: O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos da suplementação do meio de maturação com roscovitina, butirolactona I, cisteamina e b-mercaptoetanol na maturação oocitária e suas conseqüências na fecundação e desenvolvimento embrionário bovino in vitro, além da variabilidade da freqüência de danos ao DNA embrionário. Oócitos foram maturados a 38,8oC em atmosfera de 5% CO2 em ar em meio TCM-199 suplementado com 0,6% BSA, 0,5 mg FSH, 100 UI hCG e 1 mg estradiol/mL (controle - C), adicionado de 50 æM de cisteamina (CC) ou 50 æM de bmercaptoetanol (CM). O grupo padrão do laboratório (S) foi suplementado com 10% de SFB como fonte protéica. Os oócitos em meio suplementado com butirolactona I ou roscovitina foram pré-maturados por 24 horas em meio TCM-199 suplementado com 0,3% BSA, antibiótico e piruvato, de acordo com os grupos: 100 æM de butirolactona I (CB), 100 æM de butirolactona I + 50 æM de cisteamina (CBC), 100 æM de butirolactona I + 50 æM de b-mercaptoetanol (CBM), 25 æM de roscovitina (CR), 25 æM de roscovitina + 50 æM de cisteamina (CRC) e 25 æM de roscovitina + 50 æM de b-mercaptoetanol (CRM). Após o cultivo de pré-maturação, foram transferidos para gotas com meio controle para maturação por 8, 16 e 24 horas, para avaliação da maturação nuclear e citoplasmática, e dosagem da [GSHi]. A fecundação foi realizada após 24 horas do início do cultivo de maturação (grupos sem inibidores), e 20 horas (grupos com inibidores). O cultivo de desenvolvimento foi realizado em meio SOF-Modificado suplementado com 0,5% de BSA e 2,5% de SFB à temperatura de 38,8ºC por 192 horas. Observou-se que a butirolactona I é capaz de bloquear a maturação meiótica de maneira reversível e mais eficiente que a roscovitina, e que os antioxidantes não interferiram na retomada da maturação nuclear...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of this work was to evaluate the effects of maturation media supplementation with roscovitine, butyrolactone I, cysteamine and - mercaptoethanol on oocyte maturation and the consequences on fertilization and bovine embryo development in vitro, and also DNA damage frequency in embryos. Oocytes were matured at 38.8°C under a 5% CO2 in air environment, in TCM-199 medium supplemented with 0.6% BSA, 0.5 mg FSH, 100 IU hCG and 1 mg estradiol/mL (control group - C) and with either 50 æM cysteamine (CC group) or 50 æM b-mercaptoethanol (CM group). The standard group of the laboratory (S group) was supplemented with 10% FCS as protein source. The oocytes in which groups were pre-incubated for 24 hours with butyrolactone I and roscovitine in TCM-199 medium supplemented with 0.3% BSA, antibiotic and pyruvate were culturedaccording to the groups: 100 æM butyrolactone I (CB), 100 æM butyrolactone I + 50 æM cysteamine (CBC), 100 æM butyrolactone I + 50 æM b-mercaptoethanol (CBM), 25 æM roscovitine (CR), 25 æM roscovitine + 50 æM cysteamine (CRC) and 25 æM roscovitine + 50 æM bmercaptoethanol (CRM). After the pre-incubation, the oocytes were transferred to the control maturation medium for 8, 16 and 24 hours for evaluation of nuclear and cytoplasmic maturation and [GSHi] dosage. For IVF, the oocytes were fertilized at 24 hours after the beginning of maturation (groups without inhibition), or 20 hours (groups with inhibition). Embryo culture was in SOF-Modified medium supplemented with 0.5% BSA and 2.5% FCS at 38.8ºC for 192 hours. We observed that butyrolactone I is capable of reversibly blocking meiotic maturation more effectively than roscovitine, and that addition of antioxidants did not interferewith resumption of nuclear maturation...(Complete abstract, acess undermentioned eletronic address) / Doutor
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Eficácia da mistura de glifosato a outros maturadores na cana-de-açúcar (Saccharum spp.) /

Siqueira, Gabriela Ferraz de, 1980. January 2009 (has links)
Orientador: Carlos Alexandre Costa Crusciol / Banca: Marcelo de Almeida Silva / Banca: Raffaella Rossetto / Resumo: A maturação natural, em início de safra, pode ser deficiente, mesmo em variedades precoces e o emprego de maturadores químicos destaca-se como uma ferramenta importante para antecipar o processo de maturação, promover melhorias na qualidade da matéria-prima a ser processada, otimizar os resultados agro-industriais e econômicos e auxiliar no planejamento da safra. Dentre os produtos utilizados, o glifosato é um dos que proporciona maior eficiência na antecipação da colheita, contudo, frequentemente diminui a rebrota da soqueira reduzindo a produtividade do canavial na safra posterior. Técnicos e produtores têm misturado o glifosato a outros maturadores, sem embasamento técnico-científico, acreditando melhorar a eficiência desses e como forma de redução de custo. O projeto teve por objetivo estudar a eficácia da mistura de glifosato a sulfometuron metil ou etil-trinexapac, e as alterações fisiológicas na cana-de-açúcar bem como suas implicações na produtividade, qualidade tecnológica e na rebrota da soqueira, em aplicação em início de safra. O projeto de pesquisa foi instalado e conduzido nos anos agrícolas de 2007 e 2008 em cana soca, em área pertencente ao GRUPO COSAN, Unidade Barra, no município de Igaraçu do Tietê, Estado de São Paulo. O delineamento experimental utilizado foi em blocos casualizados com cinco repetições. O experimento foi constituído de seis tratamentos: 1 - testemunha, sem aplicação de maturador, 2 - aplicação de glifosato (produto comercial Roundup), 3 - aplicação de sulfometuron metil (produto comercial Curavial), 4 - aplicação de etil-trinexapac (produto comercial Moddus), 5 - aplicação da mistura glifosato + sulfometuron metil e 6 - aplicação da mistura glifosato + etil-trinexapac. As doses... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The natural maturation, early harvest, may be poor, even in early varieties and the use of chemical ripeners stands out as an important tool to advance the maturation process, further improvements in the quality of raw material to be processed, optimize results agro-industrial and economic and assist in the planning of the harvest. Among the products used, glyphosate is one that provides greater efficiency in anticipation of the harvest, however, often reduces the regrowth of the ratoon cane reducing the productivity of sugarcane in crop later. Technicians and producers have mixed the glyphosate with other ripeners, without basement technical-scientific, believing to improve the efficiency and as to reduce costs. The project aimed to study the effectiveness of the mixture of glyphosate to sulfometuron methyl or ethyltrinexapac, and physiological changes in sugar cane and its implications on productivity, technological quality and in the regrowth of the ratoon cane in application beginning of the season. The study was installed and conducted in the years 2007 and 2008 in ratoon cane, in area belonging to the COSAN GROUP, Barra Unit, in Igaraçu do Tietê, São Paulo. The experimental design was in a randomized block design with five replications. Each experiment consisted of six treatments (1 - control, without application of ripener, 2 - application of glyphosate (commercial product Roundup), 3 - application of sulfometuron methyl (commercial product Curavial), 4 - application of ethyl-trinexapac (commercial product Moddus), 5 - application of the mixture glyphosate + sulfometuron methyl and 6 - application of the mixture glyphosate + ethyl-trinexapac. The doses were, respectively: 0,4 L c.p. ha-1, 20 g ha-1, 0,8 L c.p. ha-1, 0,2 L c.p. ha-1 + 15 g c.p. ha-1 e 0,2 L c.p. ha-1 + 0,5 g c.p. ha-1. The variety... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

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