Orientador: Patrícia Jacqueline Thyssen / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-17T13:21:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Grella_MaiconDiego_M.pdf: 5100969 bytes, checksum: 37d1acc8cdeb7eba3791c8e14b39db4d (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: Muitos levantamentos faunísticos de dípteros que foram e têm sido realizados atualmente no Brasil são precários por relatarem a presença de espécimes até níveis taxonômicos superiores ao de espécie. Dentre uma série de dificuldades que contribuem para isso estão a ausência de chaves taxonômicas para certos grupos e a insuficiência na descrição de caracteres em algumas das chaves existentes. Assim, o avanço de quaisquer outros trabalhos que queiram investigar a biologia, ecologia ou dinâmica desses organismos na natureza ou em laboratório estará comprometido, já que não é possível associar tais estudos a categorias abstratas tal como 'morfotipos'. As chaves taxonômicas interativas, elaboradas com auxílio de programas computacionais, quando comparadas às convencionais podem ser extremamente vantajosas por apresentarem banco de imagens, glossário de termos técnicos, serem mais dinâmicas no processo de inserção de novos caracteres, além de permitirem ao usuário a seleção de qualquer caráter sem uma ordem pré-determinada, garantindo maior flexibilidade durante o processo de identificação. Para elaboração das chaves interativas usando a plataforma JAVA e software Lucid® foram levantados caracteres e estados de caracteres para 20 espécies de moscas (Diptera: Calliphoridae) registradas para o Brasil, quer sejam de importância médica, veterinária ou forense. A identificação de algumas espécies de califorídeos usando a plataforma computacional não foi significativamente mais rápida quando comparada a feita por meio das chaves dicotômicas tradicionais, porém o número de erros de diagnóstico foi menor entre os usuários de chaves interativas. De qualquer modo, a chave interativa ainda pode ser superior por apresentar opções tais como exclusão, seleção ou priorização de caracteres sem exigir que o usuário siga uma ordem específica ou pré-determinada. O desenvolvimento de quaisquer ferramentas que auxiliem na busca pela identificação de um organismo, principalmente entre estudantes e profissionais não taxonomistas, é ainda mais valioso por fornecer um melhor entendimento para o conhecimento da diversidade de determinados grupos e para a descoberta de espécies novas na natureza. O trabalho final encontra-se disponível e publicado na web / Abstract: Many of the dipteran faunistic surveys carried out in the past, and the ones being conducted at the present in Brazil are precarious, because they report on the presence of specimens at taxonomic levels higher than species. The reasons for that are the lack of taxonomic keys to certain groups, and insufficient descriptions of morphological characters in some of the extant keys. Thus, the success of any study that aims to investigate the biology, ecology, and dynamics of these organisms in nature or in laboratory will be damaged, because it is not possible to associate these studies with abstract categories such as 'morphotypes'. Interactive taxonomic keys, prepared with the aid of computer programs, can be extremely advantageous when compared to conventional keys, because they contain image banks, glossary of technical terms, are more dynamic in the process of adding new characters, and allow the selection of any character without a predetermined order, ensuring greater flexibility during the identification process. For the production of interactive keys using JAVA platform and Lucid¿ software, we determined characters and states of characters for 20 species of flies (Diptera: Calliphoridae) of medical, veterinary and forensic importance from Brazil. The identification process using a Java platform was not significantly faster when compared to that done by traditional dichotomous keys, but the number of diagnostic errors was lower among users of interactive keys. Anyway, the interactive key may be superior to present options such as deletion, selection or prioritization of characters without requiring the user to follow a specific or predetermined order. The development of any tools that can aid in the identification of an organism, especially for students and non-taxonomist professionals, is even more valuable by providing a better understanding on the diversity of certain groups and on the discovery of new species in nature. The final work will be available and posted on the web / Mestrado / Parasitologia / Mestre em Parasitologia

Investigou-se a existência de relação entre células normais de triatomíneos, formas evolutivas do T.cruzi e hospedeiros mamíferos. Hemócitos do vetor de espécies hematófagas não infectadas (Triatoma infestans, T. palidipennis, Dipetalogaster maximus, Rhodnius prolixus e Panstrongylus megistus) foram reconhecidos por soros de pacientes e camundongos infectados com Trypanosoma cruzi, por meio da técnica de imunofluorescência, enquanto que os hemócitos de um inseto fitófago, Diactor billineatus (ninfas e adultos) não foram reconhecidos pelos mesmos soros. Uma parcial reação cruzada foi observada entre hemócitos de T. infestans e soros de portadores de leishmaniose , o que não ocorreu com as amostras de portadores de doenças autoimunes, infecção com HIV e indivíduos normais. O tratamento de hemócitos com metaperiodato de sódio aboliu a fluorescência, mostrando que antígenos carboidratos estão envolvidos. O uso de lectinas marcadas revelou que N acetil-d-glicosamina, manose, glicose e βgal fazem parte da estrutura celular. O immunoblotting com extrato de hemócitos foi realizado com soros de pacientes chagásicos crônicos antes e depois do tratamento específico. Estes soros de ambos casos foram absorvidos com tripomastigotas e epimastigotas. Um número considerável de bandas desapareceu nos soros tratados com tripomastigotas, mas não com epimastigotas. Proteínas de 61-70, 41-50, 31-40 e 21-30 kDa foram as envolvidas no processo de absorção. Após a quimioterapia, as bandas de 121-130, 91-100, 81-90 e 61-60 kDa desapareceram nos soros não absorvidos. Um grupo de camundongos fêmeas A/Sn foi imunizado com hemolinfa livre de hemócitos (HL) e outro grupo com hemócitos (Hc) e desafiados com 5x102 tripomastigotas sangüícolas.(cepa Y). Picos de parasitemia dos camundongos HL e Hc foram observados um ou dois dias após o grupo controle. Apesar da parasitemia de ambos os grupos ter sido baixa, o grupo HL apresentou 43% de mortalidade, enquanto que o grupo Hc mostrou apenas 14 % de mortalidade. As citocinas IFNγ e TNFα estão envolvidas no processo de proteção,\' assim como óxido nítrico e anticorpos líticos. Os hemócitos induziram uma redução de IL-10, inibindo a resposta Th2. Desde que os hemócitos e tripomastigotas compartilham epítopos comuns, epítopos de hemócitos devem ser melhor estudados em virtude de seu potencial uso no imunodiagnóstico, imunoproteção e avaliação terapêutica. / Immunological relationship between normal triatomine cells, developmental life-cycle stages of T. cruzi and infected mammal hosts was investigated. Hemocytes from uninfected hematophagous vector species of triatomines (Triatoma infestans, T. palidipennis, Dipetalogaster maximus, Rhodnius prolixus and Panstrongylus megistus) were recognized by sera from patients and mice infected with Trypanosoma cruzi, by means of immunofluorescence assay (IFA), whereas hemocytes from a phytophagous bug, Diactor billineatus (nymphs and adults) were not recognized by the same sera. Hemocytes from T. infestans were partially recognized by leishmaniasis sera, but, not by samples from patients with autoimmune diseases, HIV positive sera. The treatment of hemocytes with sodium metaperiodate practically abolished the fluorescence staining, indicating the presence of carbohydrate antigens. These antigens were revealed be comprised of N acetyl-D-glucosamine, mannose and glucose and βgal, by means of fluorescent labelled lectins. Sera from chronic chagasic patients before and after the chemotherapy were reactive with hemocytes of P. megistus on immunoblotting, and the same sera previously absorbed with formaldehyde fixed cultured epimastigotes as well trypomastigotes. On immunoblotting a substantial number of bands diminished with sera absortion with trypomastigotes, but not with epimastigotes. Proteins of 61-70, 41-50, 31-40 and 21-30 kDa were the major proteins involved in the process of serum absorptions. After chemotherapy, protein bands of 121-130, 91-100, 81-90 and 51-60 kDa disappeared in unabsorbed sera. A group of female A/Sn mice were immunized with hemolymph free of hemocytes (MHL) and other group with hemocytes (MHC). Animais were challenged with 5x102 bloodstream trypomastigotes (Y strain). Parasitemia peaks of MHL and MHC groups were observed one or two days after the control group. In spite of the parasitemia for both groups was about 63% lower than the control group, the mortality for the MHL was 43%, differing from the MHC, which was 14% only. The Cytokines, IFNγ and TNFα, were shown to be involved in the protection of immunized mice, and also the nitric oxide and complement dependent lytic antibodies. Hemocytes showed to play a role in the reduction of the IL-10 production, inhibiting Th2 response. Thus, hemocytes and trypomastigotes share common epitopes, and these epitopes are potentially useful for immunodiagnosis, immunopratection, and evaluation of chemotherapic efficiency in Chagas\' disease control.

Bed bugs (Hemiptera:Cimicidae) are a common, hematophagous ectoparasite of humans and other animals, and are experiencing an international resurgence. Cimicids have been implicated in the transmission many disease agents, including various Bartonella species, however disease transmission has not yet been confirmed. Bartonella spp. are transmitted by a variety of arthropods, including fleas, lice and sand flies, and it is speculated that bed bugs may also serve as a potential vector. In this study, we used an artificial membrane to feed two groups of adult Cimex lectularius rabbit blood, either infected or uninfected with Bartonella henselae. After two weeks, the presence of Bartonella henselae was assessed via PCR, and salivary glands from infected and uninfected bed bugs were dissected and processed for transmission electron microscopy. We were unable to visually identify Bartonella henselae in the images, and therefore unable to confirm the role of bed bugs in B. henselae transmission.