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Avaliação da atividade antioxidante e efeito sobre a melanogênese de extratos das folhas de Passiflora nitida KunthOliveira, Nívea Suely Melo de Oliveira 25 February 2011 (has links)
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Previous issue date: 2011-02-25 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Pigmentary disorders such as melasma, freckles, and ephelides have motivated the search for natural products with potential for skin whitening. Given that the main regulatory enzyme of melanin production, tyrosinase can be inhibited by polyphenols and antioxidants, extracts from leaves of Passiflora nitida Kunth, which have been reported as rich in polyphenols and have antioxidant effects, can act as inhibitors of melanogenesis. This study aimed to know the total phenols, the antioxidant effect on tyrosinase, the cytotoxicity and the effect on melanin content of extracts from leaves of P. nitida. Were assessed extracts aqueous by infusion (EAI), aqueous by maceration (EAM), hydroethanolic (EHE) and ethanolic (EE). The EAM showed higher antioxidant activity by DPPH method and by the inhibition of lipid peroxidation and tyrosinase. The percentages of phenolic compounds found in the extracts were EAM = 5.63 ± 0.06%; EAI = 5.10 ± 0.04%, EHE = 3.97 ± 0.08%, EE = 3.35 ± 0, 17%. The median inhibitory concentration (IC50) of DPPH by the extracts were EAM = 38.99 ± 1.56 mg / mL, EHE = 44.16 ± 1.69 mg / mL, EAI = 45.26 ± 0.96 mg / mL, EE = 48.44 ± 0.66 mg / mL and the IC50 of gallic acid was AG = 0.80 ± 0.03 mg / mL. The inhibition of lipid peroxidation reaction at 120 minutes were BHT = 67.55 ± 1.66%, EAI = 56.29 ± 2.63%, EAM = 60.98 ± 2.07%, EHE = 45.04 ± 3 22%, EE = 23.22 ± 3.83%. The extracts also inhibited the tyrosinase which IC50 of kojic acid, the EAI, EAM, EHE and EE respectively were: 0.001 ± 1, 475 ± 28, 440 ± 27, 879 ± 32, 901 ± 29 mg / mL. The cytotoxicity of EAM on NIH 3T3 fibroblasts, melanoma B16F10 and Melan-a melanocyte was time dependent. Was lower for fibroblasts and melanocytes than melanoma. The EAM showed no antioxidant activity in NIH 3T3. EAM at concentrations of 10 and 25 mg / ml in B16F10 induced increase of melanin content to 196 ± 15% and 217 ± 20% respectively and in Melan-a concentrations of 6.25, 12.50 and 25 mg / ml reduced the melanin content to 90 ± 8, 84.8 ± 0.6 and 54 ± 4% respectively. Thus, one can say that EAM was able to reduce the level of melanin in melanocytes, with greater cytotoxicity for melanoma than for fibroblasts and melanocytes. / Distúrbios de pigmentação tais como melasmas, sardas, manchas e efélides têm motivado a procura por produtos naturais com potencial clareador de pele. Tendo em vista que a principal enzima reguladora da produção de melanina, a tirosinase, pode ser inibida por polifenóis e antioxidantes, os extratos das folhas de Passiflora nitida Kunth, que já foram relatados como ricos em polifenóis e ter efeito antioxidante, podem funcionar como inibidores da melanogênese. Esse estudo visou conhecer o teor de fenóis totais, a atividade antioxidante o efeito sobre a tirosinase, a citotoxicidade e o efeito sobre o teor de melanina de extratos das folhas de P. nitida. Foram avaliados os extratos aquoso por infusão (EAI), aquoso por maceração (EAM), hidroetanólico (EHE) e etanólico (EE). O EAM apresentou maior atividade antioxidante pelo método do DPPH e pelo método de inibição da lipoperoxidação e da tirosinase. As porcentagens de fenóis totais encontradas nos extratos foram EAM = 5,63 ± 0,06 %; EAI = 5,10 ± 0,04 %; EHE = 3,97 ± 0,08 %; EE = 3,35 ± 0,17 %. As concentrações inibitórias medianas (CI50) do DPPH pelos extratos foram EAM = 38,99 ± 1,56 μg/mL, EHE = 44,16 ± 1,69 μg/mL, EAI = 45,26 ± 0,96 μg/mL; EE = 48,44 ± 0,66 μg/mL e a CI50 do ácido gálico foi AG = 0,80± 0,03 μg/mL. A inibição da lipoperoxidação aos 120 minutos de reação foram BHT = 67,55 ± 1,66 %, EAI = 56,29 ± 2,63 %, EAM = 60,98 ± 2,07 %, EHE = 45,04 ± 3,22 %, EE = 23,22 ± 3,83 %. Os extratos também inibiram a enzima tirosinase cujas CI50 do ácido kojico, do EAI, EAM, EHE e EE respectivamente foram: 1 ± 0,001; 475 ± 28 ; 440 ± 27; 879 ± 32; 901 ± 29 μg/mL. A citotoxicidade do EAM sobre o fibroblasto NIH 3T3, o melanoma B16F10 e o melanócito Melan-a foi tempo dependente. Sendo menor para o fibroblasto e o melanócito. O EAM não apresentou atividade antioxidante em NIH 3T3. O EAM nas concentrações de 10 e 25 μg/mL em B16F10 induziu o aumento do teor de melanina para 196 ± 15 % e 217 ± 20 % respectivamente e em Melan-a nas concentrações de 6,25; 12,50 e 25 μg/mL reduziu o teor de melanina para 90 ± 8; 84,8 ± 0,6 e 54 ± 4 % respectivamente. Assim, pode-se dizer que o EAM foi capaz de diminuir o teor de melanina em melanócito, com maior citotoxicidade para melanoma do que para fibroblasto e melanócito.
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Avaliação da atividade citotóxica e melanogênica do complexo de platina (II) com derivado de hidantoína em melanoma / Evaluation of cytotoxic and melanogenic activity of the complex of platinum (II) with hydantoin derivative in melanoma.Filippin, Fernanda Branco 11 September 2013 (has links)
Considerando o melanoma a forma mais agressivas de câncer de pele e mais resistente aos tratamentos convencionais, o presente estudo teve como objetivo avaliar a atividade de um novo complexo de platina (II) com derivado de hidantoína (CX42) em células de melanoma humano e murino. Foram utilizados também para comparação células da pele (fibroblastos, queratinócitos e melanócitos) e os compostos cisplatina (CIS) e complexo de hidantoína isolado (NN10). Ensaios de viabilidade, ciclo e morte celular foram realizados. Investigou-se também a atividade da enzima tirosinase, principal enzima que regula a síntese de melanina durante o processo conhecido como melanogênese. Como resultados, obteve-se a diminuição da viabilidade celular e parada de ciclo na fase G0/G1 nas células de melanoma, principalmente na linhagem murina B16F10, frente ao composto CX42. Em células B16F10, foi possível observar estímulo na melanogênese, com aumento da atividade da enzima tirosinase. O CX42 apresentou uma atividade com efeito citostático nas células de melanoma, não sendo observado efeito citotóxico nas células da pele. Ainda, com a prévia estimulação da melanogênese, o CX42 apresentou-se mais efetivo, aumentando a morte celular em 40% por apoptose. Portanto, conclui-se que o CX42 diminuiu a viabilidade celular e seu efeito foi mais intenso quando as células apresentavam-se pigmentadas, demonstrando indução da tirosinase e da morte celular, atributo importante para potenciais novos fármacos anti-melanoma. / Since melanoma is one of the most aggressive forms of skin cancer and more resistant to conventional treatments, the present study aimed to evaluate the activity of a new platinum complex (II) with hydantoin derivative (CX42) in melanoma cells human and murine. Skin cells (fibroblasts, keratinocytes and melanocytes) were used as control and the compounds cisplatin (CIS) and hydantoin compound alone (NN10) were also evaluated. Viability assays, cell cycle analysis and cell death characterization were performed. Likewise, the activity of tyrosinase, the key enzyme that regulates melanin synthesis during the process known as melanogenesis, was also investigated. The results demonstrated a reduction in cell viability and cell cycle arrest in G0/G1 phase of murine melanoma B16F10 treated with CX42. In B16F10 cells, it was also observed melanogenesis stimulation with increased activity of tyrosinase. The CX42 showed a selective cytostatic effect on melanoma cells, however no toxic effects were observed in skin cells. In addition, with prior stimulation of melanogenesis, the CX42 demonstrated to be more effective, increasing apoptosis cell death in 40%. Therefore, the results demonstrated that CX42 decreased cell viability and the intensity of its effect is associated with cell pigmentation, demonstrating an association between tyrosinase high activity and induction of cell death which is an important attribute for new potential anti - tumoral drugs.
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Avaliação da atividade citotóxica e melanogênica do complexo de platina (II) com derivado de hidantoína em melanoma / Evaluation of cytotoxic and melanogenic activity of the complex of platinum (II) with hydantoin derivative in melanoma.Fernanda Branco Filippin 11 September 2013 (has links)
Considerando o melanoma a forma mais agressivas de câncer de pele e mais resistente aos tratamentos convencionais, o presente estudo teve como objetivo avaliar a atividade de um novo complexo de platina (II) com derivado de hidantoína (CX42) em células de melanoma humano e murino. Foram utilizados também para comparação células da pele (fibroblastos, queratinócitos e melanócitos) e os compostos cisplatina (CIS) e complexo de hidantoína isolado (NN10). Ensaios de viabilidade, ciclo e morte celular foram realizados. Investigou-se também a atividade da enzima tirosinase, principal enzima que regula a síntese de melanina durante o processo conhecido como melanogênese. Como resultados, obteve-se a diminuição da viabilidade celular e parada de ciclo na fase G0/G1 nas células de melanoma, principalmente na linhagem murina B16F10, frente ao composto CX42. Em células B16F10, foi possível observar estímulo na melanogênese, com aumento da atividade da enzima tirosinase. O CX42 apresentou uma atividade com efeito citostático nas células de melanoma, não sendo observado efeito citotóxico nas células da pele. Ainda, com a prévia estimulação da melanogênese, o CX42 apresentou-se mais efetivo, aumentando a morte celular em 40% por apoptose. Portanto, conclui-se que o CX42 diminuiu a viabilidade celular e seu efeito foi mais intenso quando as células apresentavam-se pigmentadas, demonstrando indução da tirosinase e da morte celular, atributo importante para potenciais novos fármacos anti-melanoma. / Since melanoma is one of the most aggressive forms of skin cancer and more resistant to conventional treatments, the present study aimed to evaluate the activity of a new platinum complex (II) with hydantoin derivative (CX42) in melanoma cells human and murine. Skin cells (fibroblasts, keratinocytes and melanocytes) were used as control and the compounds cisplatin (CIS) and hydantoin compound alone (NN10) were also evaluated. Viability assays, cell cycle analysis and cell death characterization were performed. Likewise, the activity of tyrosinase, the key enzyme that regulates melanin synthesis during the process known as melanogenesis, was also investigated. The results demonstrated a reduction in cell viability and cell cycle arrest in G0/G1 phase of murine melanoma B16F10 treated with CX42. In B16F10 cells, it was also observed melanogenesis stimulation with increased activity of tyrosinase. The CX42 showed a selective cytostatic effect on melanoma cells, however no toxic effects were observed in skin cells. In addition, with prior stimulation of melanogenesis, the CX42 demonstrated to be more effective, increasing apoptosis cell death in 40%. Therefore, the results demonstrated that CX42 decreased cell viability and the intensity of its effect is associated with cell pigmentation, demonstrating an association between tyrosinase high activity and induction of cell death which is an important attribute for new potential anti - tumoral drugs.
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Estudo in silico de moléculas inibidoras da melanogêneseBARROS, Karina Anunciada 16 October 2015 (has links)
Submitted by Irene Nascimento (irene.kessia@ufpe.br) on 2016-09-08T19:08:46Z
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Previous issue date: 2015-10-16 / A partir dos parâmetros eletrônicos obtidos com a Teoria do Funcional Densidade, realizamos um estudo Quantitativo da Relação Estrutura Atividade (QSAR) de derivados de cetonatiossemicarbazonas e de ácidos kójico e benzoico para analisar o potencial de inibição da melanogênese destes compostos. Utilizando técnicas computacionais em conjunção com uma Regressão linear múltipla, obtivemos uma expressão capaz de prever a concentração inibitória (IC50) destes compostos e dos demais aqui propostos. Para a previsão da IC50 foram utilizados os seguintes parâmetros eletrônicos e físico-químicos: afinidade eletrônica (EA), gap de energia (HHL), momento de dipolo (μ) e o logaritmo do coeficiente de partição [octanol/água](LogP). Para as cetonatiossemicarbazonas os descritores eletrônicos que proporcionaram uma boa correlação linear com a IC50 experimental foram: a carga atômica do nitrogênio N2 e a EA. Para as demais moléculas avaliadas nesta pesquisa, além desses parâmetros, foram incluídos o potencial de ionização (IP), a energia do atracamento molecular (G), eletronegatividade absoluta (), dureza (), maciez (S), logaritmo do coeficiente de solubilidade (LogS), volume molar (VM) e o coeficiente de Hansch (). Como resultado da QSAR, os descritores que proporcionaram a melhor correlação linear com a IC50 experimental foram: a HHL e o VM. Na análise QSAR dos derivados dos ácidos kójico e benzoico foi utilizado um conjunto de treinamento formado por dez moléculas e um grupo de teste constituído por duas moléculas para uma validação cruzada tipo boostrap. Os cálculos de G se restringiram a encontrar o valor da energia livre de interação dos derivados dos ácidos kójico e benzoico e da enzima tirosinase por meio da formação do complexo ligante-tirosinase. Os valores das energias de interação obtidos para as moléculas propostas se revelaram promissores, visto que apresentaram valores mais baixos do que o obtido para o complexo ácido kójico-tirosinase. Em todas as análises QSAR, os valores dos parâmetros estatísticos de validação, como coeficiente de correlação, desvio-padrão, teste de Fischer e do nível geral de confiabilidade do modelo, estão dentro do esperado para um bom modelo estatístico. Os modelos obtidos fornecem uma boa previsão das atividades biológicas investigadas neste trabalho apontam para novos compostos candidatos com potencial para inibição da melanogênese. / We have carried ant studies of QSAR using electronic structure derived parameters be the means of Density Functional Theory (DFT) calculations for derivatives of ketonethiosemicarbazones, kojic acid and benzoic acid. The aim was to evaluate the melanogenesis inhibiting potential of these compounds, by using this procedure and performing a Multiple Linear Regression we obtained an expression able to predict the inhibitory concentration (IC50) of the compounds studied here. In predicting the IC50 we used the electronic and physical-chemical parameters of electron affinity (EA), energy gap (HHL), dipole of moment (μ) and the [octanol/water] logarithm of the partition coefficient (LogP). For ketonethiosemicarbazones the electronic parameters that provide a good linear correlation with experimental IC50 are the atomic charge of nitrogen N2 and the EA. For the other molecules analyzed in this study, in addition to these parameters it is included ionization potential (IP), molecular docking of energy (G), absolute electronegativity (), hardness(), softness (S), partition coefficient of molar solubility (LogS), molar volume (VM) and Hansch coefficient (). We found that the parameters leading to the best linear correlation with experimental IC50 are the interaction energy and the molar volume. In the QSAR analysis of derivatives of the benzoic and kojic acids it is used a training group formed by ten molecules and a test group formed of two molecules to realize a bootstrap-type cross validation. The calculations of the molecular docking are restricted to values of free energy of derivatives of the benzoic and kojic acids and to the enzyme tyrosinase forming the tyrosinase-ligand complex. In all QSAR analysis, the statistical validation such as correlation coefficient, standard deviation, Fisher test and the model reliability are in that range expected for a good statistical model. As a conclusion, we show that our model gives a good prediction of the biological activities, which allow us to indicate new compounds with potential in inhibiting melanogenesis.
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Desenvolvimento de emulsões utilizando extrato seco de Passiflora Nitida KunthRibeiro, Priscilla Tobias 27 February 2015 (has links)
Submitted by Kamila Costa (kamilavasconceloscosta@gmail.com) on 2015-06-29T18:32:01Z
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Previous issue date: 2015-02-27 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / The Passiflora nitida is a species of Amazonian flora still little studied that added to its antioxidant potential, reported in the literature, mainly due to the presence of phenols and flavonoids, arouses the interest for use in a product. The objective of this study was to develop a semi-solid formulation with rejuvenating activity and whitening of the skin. The plant drug was collected at Embrapa-AM, the dry extract obtained by sprinkler in spray dryer was prepared in three different concentrations (plant-drug solvent). In the characterization of the raw material plant tests as loss on drying, particle size by sieving, extractive content, ash content, phytochemical screening were performed with the plant drug. With the dry extract was made using laser particle size tests, analysis of specific surface area, fluorescence x-rays, thermal analysis, dry residue, phenol and total flavonoids, DPPH, ABTS, tyrosinase inhibition activity, chelating activity and reducing potential. Further, semisolid formulations were developed conducted the pre-test stability, primary stability, accelerated stability, rheological studies, and spreadability. Subsequently, tests were performed in cell culture to evaluate the cytotoxicity and the ability to reduce melanogenesis and inhibiting tyrosinase. It was also determined the total flavonoid content by UV-Visible esctrofotometria both the dry extract as in the formulation. In characterizing the plant drug loss on drying was 9.08%, the powder was classified as coarse powder. The extractive yield was 17.16% and the ash content was 5.43%. In the phytochemical screening results were strongly positive for flavônicos glycosides. The dry extract was classified as fine powder with average particle diameter of 25.06 μM and pores of the mesopore type. The chemicals found by the fluorescence X-ray technique are Ca, K, Cl, S, P, Si, Mg, Na and Br. In the thermal analysis, there are four thermal events observed in the DSC curve and four loss event mass in the TG / DTG curve. For the dry extract 7.5% the result of total phenols was 18.9%, total flavonoid 4.1%. IC50 of DPPH was 31.5 μg/mL, IC50 of ABTS was 21.8 μg/mL, IC50 inhibition of tyrosinase was 437 μg/mL. The extract showed no chelating activity and reducing potential of 29.7% at a concentration of 50 μg/mL. In the development of formulations, eighteen bases were manipulated and from below, various formulations were tested in pre-stability. Four formulations followed for primary stability and for accelerated stability. In accelerated stability LB12 with 3% Passiflora nitida was the formulation selected, the rheological profile showed pseudoplastic behavior with thixotropy and good spreadability. The dry extract and the formulation showed no cytotoxicity, ability to reduce both showed melanogenesis, but did not inhibit tyrosinase in cell culture. The total flavonoid content was 1.2% for dry extract and 0.2% for the formulation. The dried extract of Passiflora nitida has in vitro antioxidant activity and capacity reduction of melanogenesis. The results provided the establishment of dry extract of the quality control parameters, and provide the data as: formulation, physical and chemical specifications and stability, for the regularization of the cosmetic product at the National Health Surveillance Agency Sanitária- ANVISA. In this way, managed to get a semi-solid cosmetic product with Amazon bioactive, - Passiflora nitida dry extract, safe, stable and with the antioxidant activities and whitening of the skin, proven in vitro. / A Passiflora nitida é uma espécie da flora amazônica ainda pouco estudada que somada ao seu potencial antioxidante, relatado na literatura, devido principalmente à presença de fenóis e flavonoides, desperta o interesse para aplicação em um produto. O objetivo do presente trabalho foi desenvolver uma formulação semissólida com atividade rejuvenescedora e clareadora da pele. A droga vegetal foi coletada na Embrapa-AM, o extrato seco obtido por aspersão em spray dryer foi preparado em três diferentes concentrações (droga vegetal-solvente). Na caracterização da matéria-prima vegetal testes como perda por dessecação, granulometria por tamisação, teor extrativo, teor de cinzas, triagem fitoquímica foram realizados com a droga vegetal. Com o extrato seco foram realizados os testes de granulometria a laser, análise da área superficial específica, fluorescência de raios-x, análises térmicas, resíduo seco, teor de fenóis e flavonoides totais, DPPH, ABTS, atividade de inibição da tirosinase, atividade quelante e potencial redutor. Na sequência, foram desenvolvidas formulações semissólidas e realizado os testes de pré-estabilidade, estabilidade preliminar, estabilidade acelerada, estudo reológico, espalhabilidade. Posteriormente, foram realizados testes em cultura de células para avaliar a citotoxicidade e a capacidade de reduzir a melanogênese e inibir a tirosinase. Também foi determinado o teor de flavonoides totais por esctrofotometria UV-Visível tanto no extrato seco como na formulação. Na caracterização da droga vegetal a perda por dessecação foi de 9,08 %, o pó foi classificado como grosso. O teor extrativo foi de 17,16 % e o teor de cinzas foi de 5,43 %. Na triagem fitoquímica o resultado foi fortemente positivo para heterosídeos flavônicos. O extrato seco foi classificado como pó finíssimo, com diâmetro médio de partículas de 25,06 μM e poros do tipo mesoporos. Os elementos químicos encontrados pela técnica de fluorescência de raios-x foram Ca, K, Cl, S, P, Si, Mg, Na e Br. Na análise térmica, temos quatro eventos térmicos observados na curva de DSC e quatro eventos de perda de massa na curva de TG/DTG. Para o extrato seco a 7,5% o resultado de fenóis totais foi de 18,9 %, flavonoides totais de 4,1 %. A CI50 do DPPH foi de 31,5 μg/mL, CI50 do ABTS foi de 21,8 μg/mL, CI50 da inibição de tirosinase foi de 437 μg/mL. O extrato não apresentou atividade quelante e o potencial redutor foi de 29,7 % na concentração de 50 μg/mL. No desenvolvimento das formulações, dezoito bases foram manipuladas, a partir das quais várias formulações foram testadas na pré-estabilidade. Quatro formulações seguiram para estabilidade preliminar e estabilidade acelerada. A formulação selecionada na estabilidade acelerada foi a LB12 com 3% de Passiflora nitida. A LB12 3% apresentou comportamento pseudoplástico com tixotropia e boa espalhabilidade. O extrato seco e a formulação não apresentaram citotoxicidade e ambos apresentaram capacidade de reduzir a melanogênese. Entretanto, não houve inibição da tirosinase em cultura de células. O teor de flavonoides totais foi de 1,2 % para o extrato seco e de 0,2% para a formulação. O extrato seco de Passiflora nitida possui, in vitro, atividade antioxidante e capacidade de redução da melanogênese. Os resultados possibilitam o estabelecimento de parâmetros de controle de qualidade do extrato seco, e fornecem dados como: formulação, especificações físico-químicas e estabilidade, para a regularização do produto cosmético junto a Agência Nacional de Vigilância Sanitária- ANVISA. Desta maneira, conseguimos obter um produto cosmético semissólido com o bioativo amazônico - extrato seco de Passiflora nitida, seguro, estável e com as atividades antioxidante e clareadora da pele, comprovadas in vitro.
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