Melanophryniscus dorsalis, conhecido popularmente por flamenguinho, pertence à família Bufonidae (Anura) e apresenta coloração aposemática, com uma linha vermelha médio-dorsal num fundo preto e manchas vermelhas na parte ventral. A espécie possui tamanho pequeno, hábito de vida diurno e reprodução explosiva ligada a grandes precipitações. Seu habitat é caracterizado por campos ou vegetação baixa de dunas em solo arenoso nas zonas costeiras do Rio Grande do Sul e sul de Santa Catarina. É considerada como vulnerável nas listas vermelhas da IUCN, brasileira e do estado do Rio Grande do Sul e em perigo no estado de Santa Catarina. Acredita-se que a espécie tenha sofrido declínios populacionais e sua principal ameaça seja a perda e degradação do habitat devido à urbanização. A fragmentação causada pela degradação do habitat pode levar a um isolamento das populações, e consequente diminuição na dispersão, aumento da endogamia e redução da variabilidade genética, podendo ocasionar diminuição do fitness, bem como a capacidade de adaptação a mudanças ambientais. Com o objetivo de avaliar a diversidade genética e estruturação populacional de M. dorsalis, foram desenvolvidos marcadores microssatélites e aplicados em populações da espécie ao longo de sua distribuição. Primers foram desenhados para nove loci de microssatélites desenvolvidos, e caracterizados em 35 indivíduos pertencentes a duas populações. Estes nove loci foram utilizados em 80 espécimes, oriundos de 10 locais amostrados entre Laguna (SC) e Rio Grande (RS) englobando toda a distribuição conhecida. A heterozigosidade média observada variou entre 0,47 e 0,64 e o número médio de alelos entre 3,33 e 6,44 nas populações amostradas. Os resultados obtidos mostraram um indício na estruturação genética influenciada por canais d’água como barreiras geográficas ao fluxo gênico, proporcional à distância entre as margens de cada rio ou canal avaliado. O isolamento por distância também foi um fator de diferenciação genética entre as populações amostradas. Foi observada evidência de endogamia em várias localidades, que pode estar relacionada ao modo de reprodução explosiva da espécie. Porém, as três populações testadas para gargalo de garrafa não apresentaram resultados significativos com exceção da localidade de Ilha dos Marinheiros para um dos modelos de mutação testados, podendo estar relacionado ao isolamento de uma pequena população num ambiente insular e a uma distância considerável das demais populações. Mesmo não demonstrando efeitos de gargalo, é necessária especial atenção à espécie pela constante degradação e fragmentação de seu habitat. As populações devem ser tratadas como diferentes unidades de manejo devido a sua estruturação genética apresentada e vê-se a necessidade da criação de mais unidades de conservação ao longo da distribuição de M. dorsalis, para a conservação efetiva da diversidade genética. / Melanophryniscus dorsalis, known as “flamenguinho”, belongs to the Bufonidae Family (Anura), has aposematic color with a red middorsal line in a black background and red spots on their ventral portion. The species has small body size, diurnal habits and explosive breeding during heavy rainfalls. Its habitat is characterized by restricted dunes environment with little vegetation cover, along the seacoast of Rio Grande do Sul and south of Santa Catarina states. The species is considered as vulnerable in IUCN’s, Brasilian’s and Rio Grande do Sul state’s Red Lists and endangered in the Red List of Santa Catarina state. It is believed that M. dorsalis has undergone population declines and is being threatened mainly for the loss and decline of its habitat due to urbanization. Fragmentation caused by these factors may lead to populations’ isolation and less migration between populations, higher levels of inbreeding and genetic variability reduction, and may cause lower fitness, as also less adaptability toward climate changes. The objective in this study was to evaluate genetic diversity and population structure of M. dorsalis, throughout its distribution. For that, microsatellite markers were developed and characterized into 35 individuals belonging to two populations. Primers were designed for nine microsatellite loci, which were used into 80 specimens from ten distinct localities between Laguna (SC) and Rio Grande (RS). Mean observed heterozygosity ranged from 0.47 to 0.64 while the mean number of alleles, from 3.33 to 6.44 on sampled populations. Results recovered showed an evidence of genetic structure influenced by water channels as geographic barriers for gene flow, according to their range between shores. Isolation by distance was also a factor of genetic differentiation among populations sampled. Evidence of inbreeding was observed in several localities, which might be related to species’ explosive breeding behavior. Although, the three populations tested for bottlenecks didn’t show significant results with exception of Ilha dos Marinheiros locality for one of mutational models tested. This may be connected to the isolation of a small population in an island. Even without demonstrating bottleneck effects, careful attention toward the species is necessary. Populations must be treated separately as different management units due to the genetic structure observed and there’s a need for the creation of more conservation units throughout M. dorsalis distribution in order to conserve genetic diversity effectively.

Melanophryniscus dorsalis, conhecido popularmente por flamenguinho, pertence à família Bufonidae (Anura) e apresenta coloração aposemática, com uma linha vermelha médio-dorsal num fundo preto e manchas vermelhas na parte ventral. A espécie possui tamanho pequeno, hábito de vida diurno e reprodução explosiva ligada a grandes precipitações. Seu habitat é caracterizado por campos ou vegetação baixa de dunas em solo arenoso nas zonas costeiras do Rio Grande do Sul e sul de Santa Catarina. É considerada como vulnerável nas listas vermelhas da IUCN, brasileira e do estado do Rio Grande do Sul e em perigo no estado de Santa Catarina. Acredita-se que a espécie tenha sofrido declínios populacionais e sua principal ameaça seja a perda e degradação do habitat devido à urbanização. A fragmentação causada pela degradação do habitat pode levar a um isolamento das populações, e consequente diminuição na dispersão, aumento da endogamia e redução da variabilidade genética, podendo ocasionar diminuição do fitness, bem como a capacidade de adaptação a mudanças ambientais. Com o objetivo de avaliar a diversidade genética e estruturação populacional de M. dorsalis, foram desenvolvidos marcadores microssatélites e aplicados em populações da espécie ao longo de sua distribuição. Primers foram desenhados para nove loci de microssatélites desenvolvidos, e caracterizados em 35 indivíduos pertencentes a duas populações. Estes nove loci foram utilizados em 80 espécimes, oriundos de 10 locais amostrados entre Laguna (SC) e Rio Grande (RS) englobando toda a distribuição conhecida. A heterozigosidade média observada variou entre 0,47 e 0,64 e o número médio de alelos entre 3,33 e 6,44 nas populações amostradas. Os resultados obtidos mostraram um indício na estruturação genética influenciada por canais d’água como barreiras geográficas ao fluxo gênico, proporcional à distância entre as margens de cada rio ou canal avaliado. O isolamento por distância também foi um fator de diferenciação genética entre as populações amostradas. Foi observada evidência de endogamia em várias localidades, que pode estar relacionada ao modo de reprodução explosiva da espécie. Porém, as três populações testadas para gargalo de garrafa não apresentaram resultados significativos com exceção da localidade de Ilha dos Marinheiros para um dos modelos de mutação testados, podendo estar relacionado ao isolamento de uma pequena população num ambiente insular e a uma distância considerável das demais populações. Mesmo não demonstrando efeitos de gargalo, é necessária especial atenção à espécie pela constante degradação e fragmentação de seu habitat. As populações devem ser tratadas como diferentes unidades de manejo devido a sua estruturação genética apresentada e vê-se a necessidade da criação de mais unidades de conservação ao longo da distribuição de M. dorsalis, para a conservação efetiva da diversidade genética. / Melanophryniscus dorsalis, known as “flamenguinho”, belongs to the Bufonidae Family (Anura), has aposematic color with a red middorsal line in a black background and red spots on their ventral portion. The species has small body size, diurnal habits and explosive breeding during heavy rainfalls. Its habitat is characterized by restricted dunes environment with little vegetation cover, along the seacoast of Rio Grande do Sul and south of Santa Catarina states. The species is considered as vulnerable in IUCN’s, Brasilian’s and Rio Grande do Sul state’s Red Lists and endangered in the Red List of Santa Catarina state. It is believed that M. dorsalis has undergone population declines and is being threatened mainly for the loss and decline of its habitat due to urbanization. Fragmentation caused by these factors may lead to populations’ isolation and less migration between populations, higher levels of inbreeding and genetic variability reduction, and may cause lower fitness, as also less adaptability toward climate changes. The objective in this study was to evaluate genetic diversity and population structure of M. dorsalis, throughout its distribution. For that, microsatellite markers were developed and characterized into 35 individuals belonging to two populations. Primers were designed for nine microsatellite loci, which were used into 80 specimens from ten distinct localities between Laguna (SC) and Rio Grande (RS). Mean observed heterozygosity ranged from 0.47 to 0.64 while the mean number of alleles, from 3.33 to 6.44 on sampled populations. Results recovered showed an evidence of genetic structure influenced by water channels as geographic barriers for gene flow, according to their range between shores. Isolation by distance was also a factor of genetic differentiation among populations sampled. Evidence of inbreeding was observed in several localities, which might be related to species’ explosive breeding behavior. Although, the three populations tested for bottlenecks didn’t show significant results with exception of Ilha dos Marinheiros locality for one of mutational models tested. This may be connected to the isolation of a small population in an island. Even without demonstrating bottleneck effects, careful attention toward the species is necessary. Populations must be treated separately as different management units due to the genetic structure observed and there’s a need for the creation of more conservation units throughout M. dorsalis distribution in order to conserve genetic diversity effectively.

Melanophryniscus dorsalis, conhecido popularmente por flamenguinho, pertence à família Bufonidae (Anura) e apresenta coloração aposemática, com uma linha vermelha médio-dorsal num fundo preto e manchas vermelhas na parte ventral. A espécie possui tamanho pequeno, hábito de vida diurno e reprodução explosiva ligada a grandes precipitações. Seu habitat é caracterizado por campos ou vegetação baixa de dunas em solo arenoso nas zonas costeiras do Rio Grande do Sul e sul de Santa Catarina. É considerada como vulnerável nas listas vermelhas da IUCN, brasileira e do estado do Rio Grande do Sul e em perigo no estado de Santa Catarina. Acredita-se que a espécie tenha sofrido declínios populacionais e sua principal ameaça seja a perda e degradação do habitat devido à urbanização. A fragmentação causada pela degradação do habitat pode levar a um isolamento das populações, e consequente diminuição na dispersão, aumento da endogamia e redução da variabilidade genética, podendo ocasionar diminuição do fitness, bem como a capacidade de adaptação a mudanças ambientais. Com o objetivo de avaliar a diversidade genética e estruturação populacional de M. dorsalis, foram desenvolvidos marcadores microssatélites e aplicados em populações da espécie ao longo de sua distribuição. Primers foram desenhados para nove loci de microssatélites desenvolvidos, e caracterizados em 35 indivíduos pertencentes a duas populações. Estes nove loci foram utilizados em 80 espécimes, oriundos de 10 locais amostrados entre Laguna (SC) e Rio Grande (RS) englobando toda a distribuição conhecida. A heterozigosidade média observada variou entre 0,47 e 0,64 e o número médio de alelos entre 3,33 e 6,44 nas populações amostradas. Os resultados obtidos mostraram um indício na estruturação genética influenciada por canais d’água como barreiras geográficas ao fluxo gênico, proporcional à distância entre as margens de cada rio ou canal avaliado. O isolamento por distância também foi um fator de diferenciação genética entre as populações amostradas. Foi observada evidência de endogamia em várias localidades, que pode estar relacionada ao modo de reprodução explosiva da espécie. Porém, as três populações testadas para gargalo de garrafa não apresentaram resultados significativos com exceção da localidade de Ilha dos Marinheiros para um dos modelos de mutação testados, podendo estar relacionado ao isolamento de uma pequena população num ambiente insular e a uma distância considerável das demais populações. Mesmo não demonstrando efeitos de gargalo, é necessária especial atenção à espécie pela constante degradação e fragmentação de seu habitat. As populações devem ser tratadas como diferentes unidades de manejo devido a sua estruturação genética apresentada e vê-se a necessidade da criação de mais unidades de conservação ao longo da distribuição de M. dorsalis, para a conservação efetiva da diversidade genética. / Melanophryniscus dorsalis, known as “flamenguinho”, belongs to the Bufonidae Family (Anura), has aposematic color with a red middorsal line in a black background and red spots on their ventral portion. The species has small body size, diurnal habits and explosive breeding during heavy rainfalls. Its habitat is characterized by restricted dunes environment with little vegetation cover, along the seacoast of Rio Grande do Sul and south of Santa Catarina states. The species is considered as vulnerable in IUCN’s, Brasilian’s and Rio Grande do Sul state’s Red Lists and endangered in the Red List of Santa Catarina state. It is believed that M. dorsalis has undergone population declines and is being threatened mainly for the loss and decline of its habitat due to urbanization. Fragmentation caused by these factors may lead to populations’ isolation and less migration between populations, higher levels of inbreeding and genetic variability reduction, and may cause lower fitness, as also less adaptability toward climate changes. The objective in this study was to evaluate genetic diversity and population structure of M. dorsalis, throughout its distribution. For that, microsatellite markers were developed and characterized into 35 individuals belonging to two populations. Primers were designed for nine microsatellite loci, which were used into 80 specimens from ten distinct localities between Laguna (SC) and Rio Grande (RS). Mean observed heterozygosity ranged from 0.47 to 0.64 while the mean number of alleles, from 3.33 to 6.44 on sampled populations. Results recovered showed an evidence of genetic structure influenced by water channels as geographic barriers for gene flow, according to their range between shores. Isolation by distance was also a factor of genetic differentiation among populations sampled. Evidence of inbreeding was observed in several localities, which might be related to species’ explosive breeding behavior. Although, the three populations tested for bottlenecks didn’t show significant results with exception of Ilha dos Marinheiros locality for one of mutational models tested. This may be connected to the isolation of a small population in an island. Even without demonstrating bottleneck effects, careful attention toward the species is necessary. Populations must be treated separately as different management units due to the genetic structure observed and there’s a need for the creation of more conservation units throughout M. dorsalis distribution in order to conserve genetic diversity effectively.

O processo de especiação é lento e gradual e a não completa compreensão deste processo ao longo da história do conhecimento nos remete a problemas clássicos sobre a classificação dos organismos. Neste trabalho, conduzimos um estudo sobre os padrões filogeográficos e evolutivos de duas espécies irmãs parapátricas de sapinhos de barriga-vermelha Melanophryniscus dorsalis e M. montevidensis, listadas como mundialmente ameaçadas segundo a IUCN , além de um estudo aplicado com o uso de modelos de nicho ecológico identificando áreas de interesse a conservação para ambas as espécies. Através dos modelos consensos baseados nos algoritmos BIOCLIM, GARP e Máxima entropia e da análise de “Hotspot” áreas de alta adequabilidade ambiental foram identificadas para ambas as espécies. A validação em campo de modelos preliminares indicou a ausência de indivíduos em locais de alta adequabilidade. Expedições a campo também revelaram uma série de novos pontos de ocorrência, entre os limites da distribuição, e a confirmação de registros historicamente omitidos por listas regionais, nacional e mundial de espécies ameaçadas. Para este estudo propomos cinco “hotspots” de grande interesse na conservação e preservação de ambas as espécies. Os dados moleculares, obtidos através do Cytb e COI, indicam claramente um processo de especiação ocorrendo com M. dorsalis e M. montevidensis com um ancestral comum para ambas as espécies datando entre 3 e 3,5 milhões de anos. A rede da haplótipos, para ambas as espécies nos dois marcadores, é do tipo estrela com um haplótipo central e uma série de outros com uma ou poucas mutações partindo do haplótipo central, indicando expansão demográfica e também demonstrando alta variabilidade. A população mais ao norte de M. dorsalis, na localidade de Mar Grosso no município de Laguna (SC), merece uma atenção especial por se tratar de uma Unidade de Manejo (UM) por seus indivíduos apresentarem uma viii frequência única de alelos. Segundo a definição de UM, a estratégia indicada para esta população é a delimitação de uma área específica e monitoramento da população. Os resultados obtidos neste trabalho provêm um conjunto de informações importantes em nível específico para a implementação de um banco de dados nacional sobre espécies ameaçadas. Os dados gerados neste estudo também serão integrados ao Plano Nacional de Ação para a conservação e preservação dos anfíbios e répteis ameaçados de extinção da região sul do Brasil (PAN SUL) gerido pelo Instituto Chico Mendes de conservação da Biodiversidade. / The speciation process is commonly slow and gradual and the incompletely understand of this process throughout the history of knowledge leads us to the classic problems of the organism classification. In this work, we conducted a study on the phylogeographic and evolutionary patterns of two parapatric sister species of red-bellied-toads Melanophryniscus dorsalis and M. montevidensis, listed as globally threatened according to the IUCN, as well as an applied study using ecological niche models to identify areas for conservation interest for both species. Through consensus models based on algorithms BIOCLIM, GARP and Maximum Entropy and the hotspot analysis, areas of high environmental suitability were identified for both species. Field validation of preliminary models also indicated the absence of individuals in areas of high suitability. Field expeditions also revealed new occurrence points within the boundaries of the distribution, and confirmation records historically omitted by regional, national and global lists of threatened species. For this study we propose five hotspots of great interest in the conservation and preservation of both species. Molecular data obtained through Cytb and COI, clearly indicate the speciation process occurring with M. dorsalis and M. montevidensis with a common ancestor to both species dated between 3 and 3.5 million years. The haplotype network for both markers in both species are star-like which consist of a center haplotype with a series of haplotyps with one or few mutations starting from the central haplotype indicates demographic expansion and also shows high variability. The north population found in M. dorsalis, at the locality of Mar Grosso in the city of Laguna, needs special attention because it is a Management Unit (MU) by his individuals present a single frequency alleles. According to the definition of MU, the strategy indicated for this population is the delimitation of a specific area and population monitoring. x The results obtained in this study provide important information set on specific level for the implementation of a national database on endangered species. The generated data in this study will also be integrated into the National Plan of Action for the conservation and preservation of reptiles and amphibians threatened by extinction in southern Brazil (PAN SUL) managed by the Chico Mendes Institute for Biodiversity Conservation.

O processo de especiação é lento e gradual e a não completa compreensão deste processo ao longo da história do conhecimento nos remete a problemas clássicos sobre a classificação dos organismos. Neste trabalho, conduzimos um estudo sobre os padrões filogeográficos e evolutivos de duas espécies irmãs parapátricas de sapinhos de barriga-vermelha Melanophryniscus dorsalis e M. montevidensis, listadas como mundialmente ameaçadas segundo a IUCN , além de um estudo aplicado com o uso de modelos de nicho ecológico identificando áreas de interesse a conservação para ambas as espécies. Através dos modelos consensos baseados nos algoritmos BIOCLIM, GARP e Máxima entropia e da análise de “Hotspot” áreas de alta adequabilidade ambiental foram identificadas para ambas as espécies. A validação em campo de modelos preliminares indicou a ausência de indivíduos em locais de alta adequabilidade. Expedições a campo também revelaram uma série de novos pontos de ocorrência, entre os limites da distribuição, e a confirmação de registros historicamente omitidos por listas regionais, nacional e mundial de espécies ameaçadas. Para este estudo propomos cinco “hotspots” de grande interesse na conservação e preservação de ambas as espécies. Os dados moleculares, obtidos através do Cytb e COI, indicam claramente um processo de especiação ocorrendo com M. dorsalis e M. montevidensis com um ancestral comum para ambas as espécies datando entre 3 e 3,5 milhões de anos. A rede da haplótipos, para ambas as espécies nos dois marcadores, é do tipo estrela com um haplótipo central e uma série de outros com uma ou poucas mutações partindo do haplótipo central, indicando expansão demográfica e também demonstrando alta variabilidade. A população mais ao norte de M. dorsalis, na localidade de Mar Grosso no município de Laguna (SC), merece uma atenção especial por se tratar de uma Unidade de Manejo (UM) por seus indivíduos apresentarem uma viii frequência única de alelos. Segundo a definição de UM, a estratégia indicada para esta população é a delimitação de uma área específica e monitoramento da população. Os resultados obtidos neste trabalho provêm um conjunto de informações importantes em nível específico para a implementação de um banco de dados nacional sobre espécies ameaçadas. Os dados gerados neste estudo também serão integrados ao Plano Nacional de Ação para a conservação e preservação dos anfíbios e répteis ameaçados de extinção da região sul do Brasil (PAN SUL) gerido pelo Instituto Chico Mendes de conservação da Biodiversidade. / The speciation process is commonly slow and gradual and the incompletely understand of this process throughout the history of knowledge leads us to the classic problems of the organism classification. In this work, we conducted a study on the phylogeographic and evolutionary patterns of two parapatric sister species of red-bellied-toads Melanophryniscus dorsalis and M. montevidensis, listed as globally threatened according to the IUCN, as well as an applied study using ecological niche models to identify areas for conservation interest for both species. Through consensus models based on algorithms BIOCLIM, GARP and Maximum Entropy and the hotspot analysis, areas of high environmental suitability were identified for both species. Field validation of preliminary models also indicated the absence of individuals in areas of high suitability. Field expeditions also revealed new occurrence points within the boundaries of the distribution, and confirmation records historically omitted by regional, national and global lists of threatened species. For this study we propose five hotspots of great interest in the conservation and preservation of both species. Molecular data obtained through Cytb and COI, clearly indicate the speciation process occurring with M. dorsalis and M. montevidensis with a common ancestor to both species dated between 3 and 3.5 million years. The haplotype network for both markers in both species are star-like which consist of a center haplotype with a series of haplotyps with one or few mutations starting from the central haplotype indicates demographic expansion and also shows high variability. The north population found in M. dorsalis, at the locality of Mar Grosso in the city of Laguna, needs special attention because it is a Management Unit (MU) by his individuals present a single frequency alleles. According to the definition of MU, the strategy indicated for this population is the delimitation of a specific area and population monitoring. x The results obtained in this study provide important information set on specific level for the implementation of a national database on endangered species. The generated data in this study will also be integrated into the National Plan of Action for the conservation and preservation of reptiles and amphibians threatened by extinction in southern Brazil (PAN SUL) managed by the Chico Mendes Institute for Biodiversity Conservation.

O processo de especiação é lento e gradual e a não completa compreensão deste processo ao longo da história do conhecimento nos remete a problemas clássicos sobre a classificação dos organismos. Neste trabalho, conduzimos um estudo sobre os padrões filogeográficos e evolutivos de duas espécies irmãs parapátricas de sapinhos de barriga-vermelha Melanophryniscus dorsalis e M. montevidensis, listadas como mundialmente ameaçadas segundo a IUCN , além de um estudo aplicado com o uso de modelos de nicho ecológico identificando áreas de interesse a conservação para ambas as espécies. Através dos modelos consensos baseados nos algoritmos BIOCLIM, GARP e Máxima entropia e da análise de “Hotspot” áreas de alta adequabilidade ambiental foram identificadas para ambas as espécies. A validação em campo de modelos preliminares indicou a ausência de indivíduos em locais de alta adequabilidade. Expedições a campo também revelaram uma série de novos pontos de ocorrência, entre os limites da distribuição, e a confirmação de registros historicamente omitidos por listas regionais, nacional e mundial de espécies ameaçadas. Para este estudo propomos cinco “hotspots” de grande interesse na conservação e preservação de ambas as espécies. Os dados moleculares, obtidos através do Cytb e COI, indicam claramente um processo de especiação ocorrendo com M. dorsalis e M. montevidensis com um ancestral comum para ambas as espécies datando entre 3 e 3,5 milhões de anos. A rede da haplótipos, para ambas as espécies nos dois marcadores, é do tipo estrela com um haplótipo central e uma série de outros com uma ou poucas mutações partindo do haplótipo central, indicando expansão demográfica e também demonstrando alta variabilidade. A população mais ao norte de M. dorsalis, na localidade de Mar Grosso no município de Laguna (SC), merece uma atenção especial por se tratar de uma Unidade de Manejo (UM) por seus indivíduos apresentarem uma viii frequência única de alelos. Segundo a definição de UM, a estratégia indicada para esta população é a delimitação de uma área específica e monitoramento da população. Os resultados obtidos neste trabalho provêm um conjunto de informações importantes em nível específico para a implementação de um banco de dados nacional sobre espécies ameaçadas. Os dados gerados neste estudo também serão integrados ao Plano Nacional de Ação para a conservação e preservação dos anfíbios e répteis ameaçados de extinção da região sul do Brasil (PAN SUL) gerido pelo Instituto Chico Mendes de conservação da Biodiversidade. / The speciation process is commonly slow and gradual and the incompletely understand of this process throughout the history of knowledge leads us to the classic problems of the organism classification. In this work, we conducted a study on the phylogeographic and evolutionary patterns of two parapatric sister species of red-bellied-toads Melanophryniscus dorsalis and M. montevidensis, listed as globally threatened according to the IUCN, as well as an applied study using ecological niche models to identify areas for conservation interest for both species. Through consensus models based on algorithms BIOCLIM, GARP and Maximum Entropy and the hotspot analysis, areas of high environmental suitability were identified for both species. Field validation of preliminary models also indicated the absence of individuals in areas of high suitability. Field expeditions also revealed new occurrence points within the boundaries of the distribution, and confirmation records historically omitted by regional, national and global lists of threatened species. For this study we propose five hotspots of great interest in the conservation and preservation of both species. Molecular data obtained through Cytb and COI, clearly indicate the speciation process occurring with M. dorsalis and M. montevidensis with a common ancestor to both species dated between 3 and 3.5 million years. The haplotype network for both markers in both species are star-like which consist of a center haplotype with a series of haplotyps with one or few mutations starting from the central haplotype indicates demographic expansion and also shows high variability. The north population found in M. dorsalis, at the locality of Mar Grosso in the city of Laguna, needs special attention because it is a Management Unit (MU) by his individuals present a single frequency alleles. According to the definition of MU, the strategy indicated for this population is the delimitation of a specific area and population monitoring. x The results obtained in this study provide important information set on specific level for the implementation of a national database on endangered species. The generated data in this study will also be integrated into the National Plan of Action for the conservation and preservation of reptiles and amphibians threatened by extinction in southern Brazil (PAN SUL) managed by the Chico Mendes Institute for Biodiversity Conservation.