Made available in DSpace on 2015-03-26T13:42:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 556442 bytes, checksum: 83f1236169675934d178ce9bc6f855fb (MD5) Previous issue date: 2007-03-13 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The genetic variability of 66 colonies of Partamona helleri collected in five locations of Minas Gerais state was estimated using ten microsatellites loci. Low levels of polymorphism were detected, getting 40% of polymorphic loci and 1,5 alleles/Iocus. The expected average heterozygosity for all the analyzed colonies was 0.180 and the observed average heterozygosity was 0.107. The analyzed subpopulations were well structured, with significant genetic variation (FST = 0.552). The analysis of molecular variance (AMOVA) revealed that 81.23% of the total genetic variability is explained by variation among populations, what confirms the structure observed. The grouping analysis of the colonies, did not reveal the formation of groups corresponding to their geographic origin. However, when grouping colonies according to localities, it was verified that the population of Viçosa was more genetically different from the others, and that populations of São Miguel do Anta, Teixeiras and Porto Firme were closer to that collected in Rio Vermelho, than to population of Viçosa, although Rio Vermelho was geographically more distant. More detailed studies, analyzing a larger number of colonies and using microsatellites primers specific for P. helleri, must be carried out in order to supply more conclusive information about the genetic variability of these bees. / A variabilidade genética de 66 colônias de Partamona helleri coletadas em cinco localidades do Estado de Minas Gerais foi estimada utilizando dez locos microssatélites. Baixos níveis de polimorfismos foram detectados, obtendo-se 40% de locos polimórficos e 1,5 alelos/loco. A heterozigosidade média esperada para todas as colônias analisadas foi 0,180 e a heterozigosidade média observada foi de 0,107. As subpopulações analisadas apresentaram forte estruturação, com significativa diferenciação genética (FST = 0,552). A análise de variância molecular (AMOVA) revelou que 81,23% da variabilidade genética total é explicada pela variação existente entre as populações, o que confirma a forte estruturação detectada. A análise de agrupamento de todas as colônias em conjunto, não revelou a formação de grupos correspondentes à origem geográfica das mesmas. Porém, ao agrupar as colônias por localidade, verificou-se que a população de Viçosa mostrou-se mais geneticamente diferente das demais, e que as populações de São Miguel do Anta, Teixeiras e Porto Firme mostraram-se geneticamente mais próximas daquela coletada em Rio Vermelho, do que da população de Viçosa, apesar de ser geograficamente mais distante. Estudos mais detalhados, analisando um maior número de colônias e utilizando primers microssatélites específicos para P. helleri, devem ser realizados a fim de fornecerem dados mais conclusivos sobre a variabilidade genética destas abelhas.

Made available in DSpace on 2015-04-22T22:02:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTACAO LUZ PIEDAD VIILLAREAL.pdf: 1064710 bytes, checksum: c2a90c98dd31ff419482cc3156edb69b (MD5) Previous issue date: 2009-12-15 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Stingless bees have gained attention because their importance as pollinators of a wide range of native plant species and because they represent an important income source for meliponicultors. In order to contribute to the knowledge of the chemical composition and antioxidant activity of pollen collected by the stingless bee Melipona seminigra Cockerell, 1919 (uruçú-boca-de-renda), an economical specie in the Amazon region, two samples were collected during two distinguished weather season in the Brazilian Amazon, dry (august 2008, 50 mm) and rainy (april 2008, 300 mm) season. The centesimal composition analysis showed that both samples have a similar nutritional value and all values are in accord to the recommended by the Brazilian Ministery of Agriculture, but carbohydrate contents, which were ca 10 % above. In both samples of pollen, the main botanical source was Miconia dispar (Melastomataceae) (rainy season: 53.19% and dry season: 95.60%) followed by pollen of different Myrtaceae species (rainy: 25.64% and dry 0.96%) and Mimosa pudica pollen (Fabaceae; rainy: 16.81% and dry: 3.44%). Aqueous and ethanolic extracts from samples collected in the two different seasons were prepared and the ethanolic extracts were fractionated by liquid-liquid partition into hexanes, ethyl acetate and hydroalcoholic fractions. The antioxidant activity of the extracts and fractions was determined by two different methods: DPPH· radical scavenging assay and the ferric reducing antioxidant power assay. In both cases, the ethanolic extracts were more active than the aqueous ones. The fractions were also assayed and the ethyl acetate fractions were the most active ones. The total phenolics contents as determined by the Folin-Ciocalteu assay have confirmed that the phenolic compounds were concentrated into these fractions. Fingerprinting analysis by RPHPLC of purified fractions obtained by solid phase extraction (RP-SPE) of ethanolic extracts of each characteristic seasonal period showed similar compositions. The phenylpropanoid, p-coumaric, and the flavonoids myricetin, quercetin and naringenin could be identified with the help of coelution method with authentic commercial standards. The main component of the fraction obtained by RP-SPE was purified by semi-preparative RP-HPLC and was identified by 1H NMR data as quercitrin (quercetin 3-O-rhamnopyranoside). / As abelhas sem ferrão vêm ganhando atenção devido à sua importância como polinizadoras de espécies vegetais nativas e por representarem uma importante fonte de renda para os meliponicultores. Com o propósito de contribuir ao conhecimento da composição química e atividade antioxidante do pólen coletado pela abelha sem ferrão Melipona seminigra Cockerell, 1919 (uruçú-boca-de-renda), espécie muito procurada na região, duas amostras de pólen foram coletadas durante dois períodos característicos da região Amazônica, o chuvoso (abril de 2008, pluviosidade de 300 mm) e o seco (agosto de 2008, pluviosidade de 50 mm). A composição centesimal indicou que as duas amostras apresentam um valor nutricional similar e dentro dos parâmetros recomendados pelo Ministério da Agricultura, com exceção do teor de carboidratos que foi 10 % superior ao valor de referência. Nas duas amostras de pólen, Miconia dispar (Melastomataceae) foi o pólen predominante (periodo chuvoso: 53,19 % e seco: 95,60 %). Outros tipos de pólen identificados foram da família Myrtaceae (período chuvoso 25,64% e seco 0,96%) e da espécie Mimosa pudica (Fabaceae; período chuvoso 16,81% e período seco 3,44%). A partir dessas amostras foram preparados extratos aquosos e etanólicos. Estes últimos foram fracionados por partição líquido-líquido, resultando nas frações hexânica, acetato de etila e hidroalcoólica. A atividade antioxidante dos extratos e das frações foi determinada por dois ensaios: capacidade de seqüestro do radical livre difenilpicrilhidrazilo (DPPH·) e capacidade redutora de Fe(III). Em ambos os ensaios, observou-se que os extratos etanólicos foram os mais ativos, quando comparado aos aquosos. Das frações analisadas, as frações acetato de etila apresentaram a maior atividade antioxidante. O teor de fenólicos totais determinado pelo método de Folin-Ciocalteau confirmou que os compostos fenólicos se concentraram nessas frações. Perfis cromatográficos das frações purificadas por extração em fase sólida a partir dos extratos etanólicos de cada periodo foram obtidos por CLAE em fase reversa e mostraram-se bastante similares. Com o auxílio de padrões comerciais e utilizando o método da coeluição foi possível identificar a presença do fenilpropanoide, ácido p-cumárico e dos flavonóides: miricetina, quercetina e naringenina. O componente principal da fração obtida por extração em fase sólida do extrato etanólico da época de chuva foi ainda purificado por CLAE em fase reversa em escala semi-preparativa. Os dados espectroscópicos (RMN de 1H) dessa substância indicaram tratar-se da quercetina-3-O-ramnosídeo (quercetrina).

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-03-21T11:45:18Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1176471 bytes, checksum: 070e4cf7c2176f1dece9bc1c70cfe745 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-21T11:45:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1176471 bytes, checksum: 070e4cf7c2176f1dece9bc1c70cfe745 (MD5) Previous issue date: 2003-07-29 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Este trabalho identificou os sítios de síntese da membrana peritrófica larvas da abelha Melipona quadrifasciata anthidioides (Lepeletier) (Hymenoptera, Meliponini). Para isto uma peritrofina de larvas de 4o instar foi isolada e usada para produzir anticorpo policlonal em camundongos. Os anticorpos foram utilizados em experimentos para imunolocalizações desta peritrofina na membrana peritrófica e no ventrículo através de técnicas de imunohistoquímica e imunocitoquímica com o auxílio de microscopia de luz e eletrônica. Foi realizado também um experimento para detecção de quitina na composição química da membrana peritrófica de larvas através da técnica WGA/FITC. Os resultados mostraram que a membrana peritrófica de larvas de 4o instar possui o aspecto de um filme peritrófico, entretanto apresentando um material gelatinoso sobre sua superfície externa. Quanto à imunolocalização da peritrofina no ventrículo de larvas pôde-se evidenciar que a mesma é secretada através das microvilosidades das células epiteliais ao longo de todo o ventrículo, porém sendo a porção anterior deste órgão o principal sítio de produção. Os mesmos experimentos acima foram realizados com ventrículos de abelhas adultas, mas os resultados foram negativos em relação à reação antígeno-anticorpo anti-peritrofina. Os resultados obtidos na detecção de quitina foram positivos somente na membrana peritrófica, pois este polissacarídeo no interior da célula possui constituição diferente daquela após ser secretado. Finalmente, considerando a presença da peritrofina em todo o epitélio ventricular, conclui-se que a membrana peritrófica em larvas de Melipona quadrifasciata anthidioides corresponde ao tipo-I. / This work identified the synthesis sites of the peritrophic membrane in larvae of the stingless bee Melipona quadrifasciata anthidioides (Lepeletier) (Hymenoptera, Meliponini). A peritrophin from 4th instar larvae was isolated and used to produce polyclonal antibody in mouse. This antibody was used in immunolocalization tests of this peritrophin in the peritrophic membrane and midgut epithelium for both light and electron microscopies. Detection of chitin in the peritrophic membrane was performed with WGA/FITC. Results showed that the peritrophic membrane from 4th instar larvae has the aspect of a peritrophic film, but with a gelatinous material on its outer surface. The peritrophin-55 kDa, in the midgut larvae, was found to be secreted through epithelial cells microvilli along the whole midgut, even so being the anterior end of the midgut the main production site. The same experiments were performed with midgut of adult bees, but the results were negative in relation to the antibody anti-peritrophins. The results to chitin detection were only positive in the peritrophic membrane. These results are discussed in relation to peritrophic membrane data available to the insects. Finally, considering the peritrophin presence in the whole midgut epithelium, it is addressed that the peritrophic membrane in larvae of Melipona quadrifasciata anthidioides is of the type-I.