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Análise morfológica das sensilas antenais das abelhas Melipona interrupta Latreille, 1811 e Melipona seminigra Friese,1903

Campos, Douglas de 24 June 2016 (has links)
Submitted by Gizele Lima (gizele.lima@inpa.gov.br) on 2017-04-04T18:52:20Z No. of bitstreams: 2 Dissertação Mestrado_PPG-ENTOMOLOGIA_Douglas de Campos.pdf: 4251712 bytes, checksum: 665f3099667589043250d9e99cff911e (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-04T18:52:20Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação Mestrado_PPG-ENTOMOLOGIA_Douglas de Campos.pdf: 4251712 bytes, checksum: 665f3099667589043250d9e99cff911e (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-06-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Sensilla are sensory structures found in flagellomeres in greater quantity in antennas and extent in other parts of the head. The sensilla have multiple sensory modalities, are categorized as mechanoreceptors, chemoreceptors, thermoreceptors, or hygroreceptors and are CO2-sensitive. This study aimed to identify the types of sensilla and their distribution along the antenna present in individuals of both sexes and castes of stingless bees Melipona interrupta and M. seminigra. The bees were obtained in colonies from Meliponário do Grupo de Pesquisas em Abelhas (GPA) of the Instituto Nacional de Pesquisas da Amazônia (INPA). The antennas were removed and fixed in Zamboni solution and remained in this fixative for 24 hours; washed with saline, 0.9% NaCl, were then dehydrated in acetone solution with increasing concentrations (50%, 70%, 90%, 95% and acetone PA) for 10 minutes each; PA acetone three washes were done in the last material was remained in 0.5 mL of acetone to evaporate all content. The antennas were mounted on stubs for plating with gold and photographed in a scanning electron microscope in the Thematic Laboratory Microscopy Optics and Electronics - LTMOE at INPA. Thirteen different types of sensillum were found in M. interrupta and M. seminigra individuals: sensilla trichodea (ST) (trichodea type I to VI), setae, chaeticum, basiconic, placoidea, coeloconic, ampullacea and campaniform. In both species the sensilla trichodea type I is the most abundant found between the sexes and castes, the sensilla STIII are exclusively found of the first segment, that in males the first antennal segment is smaller than the females, but there is no significant differences in number of STIII between the sexes. STII can be found the first segment to the distal segment is greater number in female of both species. STV is exclusive of the last antennal segment in the distal segment in both species and sexes, sensilla basicônic is exclusive to females, and the number of workers of SB in M. interrupta and M. seminigra increases every segment near the antennal apex. The function chemoreceptor sensillum this must be exercised by another sensilla in males, such as the sensillum placodea, because it is present in larger amount in the male antenna in both species. The other sensilla are distributed homogeneously by the antenna. This work represents a breakthrough in understanding the sensory organs of M. interrupta and M. seminigra and can serve as a basis for further work in this area with this or other insect species, however, more complementary studies to scanning electron microscopy and electrophysiology, electroantennography should be performed to investigate what these sensilla functions play in the studied species. / Sensilas são estruturas sensoriais encontradas em maior quantidade nos flagelômeros e em menor quantidade em outras partes da cabeça dos insetos. As sensilas possuem várias modalidades sensoriais, como olfato, gustação, mecanorrecepção, termorrecepção e higrorrecepção. Este trabalho teve como objetivo identificar os tipos de sensilas e a sua distribuição ao longo da antena presentes em indivíduos de ambos os sexos e castas das abelhas sem ferrão Melipona interrupta e M. seminigra. As abelhas foram obtidas em colônias do Meliponário do Grupo de Pesquisas em Abelhas (GPA) do Instituto Nacional de Pesquisas da Amazônia (INPA). As antenas foram retiradas e fixadas em solução Zamboni e mantidas nesse fixador por 24 horas; lavadas com solução fisiológica, NaCl a 0,9 %, em seguida foram desidratadas em solução de acetona em concentrações crescentes (50%, 70%, 90%, 95% e acetona PA) por 10 minutos em cada uma; em acetona PA foram feitas três lavagens, na última o material foi deixado em 0,5 mL de acetona até evaporar todo conteúdo. As antenas foram montadas em suportes para metalização com ouro e fotografadas em microscópio eletrônico de varredura no Laboratório Temático de Microscopia Óptica e Eletrônica – LTMOE no INPA. Foram encontrados treze tipos de sensilas diferentes nos indivíduos de M. interrupta e M. seminigra: Sensilas tricóides (ST) (tricóides do tipo I ao VI), setae, céticas, basicônicas, placóides, celocônicas, ampuláceas e campaniforme. Em ambas as espécies a sensila tricóide tipo I é a mais abundante entre os sexos e castas, a sensila STIII é exclusiva do primeiro segmento, sendo que nos machos o primeiro segmento antenal é menor que os das fêmeas, mas não há diferença significatica no número de STIII entre os sexos. STII pode ser encontrada do primeiro segmento até o ápice antenal, está em maior número nas fêmas de ambas espécies. STV é exclusiva do último segmento antenal na porção distal do segmento em ambas as espécies e sexos, sensila basicônica é exclusiva das fêmeas, e o número de SB das operárias de M. interrupta e M. seminigra aumenta a cada segmento próximo ao ápice antenal. A função quimiorreceptora dessa sensila deve ser exercida por outra sensila nos machos, como por exemplo a sensila placóide, pois a mesma está presente em maior quantidade na antena dos machos em ambas as espécies. As demais sensilas estão distribuídas de forma homogênea em menor número pela antena. Esse trabalho representa um avanço no conhecimento dos órgãos sensoriais de M. interrupta e pode servir como base para mais trabalhos nessa área com essa ou outras espécies de insetos, no entanto, mais estudos complementares a microscopia eletrônica de varredura como eletrofisiologia, eletroantenografia devem ser realizados para investigar quais funções essas sensilas desempenham nas espécies estudadas.
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Composição química e atividade antioxidante do pólen coletado pela abelha sem ferrão: Melipona seminigra Cockerell, 1919

Villarreal, Luz Piedad Sanchez 15 December 2009 (has links)
Made available in DSpace on 2015-04-22T22:02:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTACAO LUZ PIEDAD VIILLAREAL.pdf: 1064710 bytes, checksum: c2a90c98dd31ff419482cc3156edb69b (MD5) Previous issue date: 2009-12-15 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Stingless bees have gained attention because their importance as pollinators of a wide range of native plant species and because they represent an important income source for meliponicultors. In order to contribute to the knowledge of the chemical composition and antioxidant activity of pollen collected by the stingless bee Melipona seminigra Cockerell, 1919 (uruçú-boca-de-renda), an economical specie in the Amazon region, two samples were collected during two distinguished weather season in the Brazilian Amazon, dry (august 2008, 50 mm) and rainy (april 2008, 300 mm) season. The centesimal composition analysis showed that both samples have a similar nutritional value and all values are in accord to the recommended by the Brazilian Ministery of Agriculture, but carbohydrate contents, which were ca 10 % above. In both samples of pollen, the main botanical source was Miconia dispar (Melastomataceae) (rainy season: 53.19% and dry season: 95.60%) followed by pollen of different Myrtaceae species (rainy: 25.64% and dry 0.96%) and Mimosa pudica pollen (Fabaceae; rainy: 16.81% and dry: 3.44%). Aqueous and ethanolic extracts from samples collected in the two different seasons were prepared and the ethanolic extracts were fractionated by liquid-liquid partition into hexanes, ethyl acetate and hydroalcoholic fractions. The antioxidant activity of the extracts and fractions was determined by two different methods: DPPH· radical scavenging assay and the ferric reducing antioxidant power assay. In both cases, the ethanolic extracts were more active than the aqueous ones. The fractions were also assayed and the ethyl acetate fractions were the most active ones. The total phenolics contents as determined by the Folin-Ciocalteu assay have confirmed that the phenolic compounds were concentrated into these fractions. Fingerprinting analysis by RPHPLC of purified fractions obtained by solid phase extraction (RP-SPE) of ethanolic extracts of each characteristic seasonal period showed similar compositions. The phenylpropanoid, p-coumaric, and the flavonoids myricetin, quercetin and naringenin could be identified with the help of coelution method with authentic commercial standards. The main component of the fraction obtained by RP-SPE was purified by semi-preparative RP-HPLC and was identified by 1H NMR data as quercitrin (quercetin 3-O-rhamnopyranoside). / As abelhas sem ferrão vêm ganhando atenção devido à sua importância como polinizadoras de espécies vegetais nativas e por representarem uma importante fonte de renda para os meliponicultores. Com o propósito de contribuir ao conhecimento da composição química e atividade antioxidante do pólen coletado pela abelha sem ferrão Melipona seminigra Cockerell, 1919 (uruçú-boca-de-renda), espécie muito procurada na região, duas amostras de pólen foram coletadas durante dois períodos característicos da região Amazônica, o chuvoso (abril de 2008, pluviosidade de 300 mm) e o seco (agosto de 2008, pluviosidade de 50 mm). A composição centesimal indicou que as duas amostras apresentam um valor nutricional similar e dentro dos parâmetros recomendados pelo Ministério da Agricultura, com exceção do teor de carboidratos que foi 10 % superior ao valor de referência. Nas duas amostras de pólen, Miconia dispar (Melastomataceae) foi o pólen predominante (periodo chuvoso: 53,19 % e seco: 95,60 %). Outros tipos de pólen identificados foram da família Myrtaceae (período chuvoso 25,64% e seco 0,96%) e da espécie Mimosa pudica (Fabaceae; período chuvoso 16,81% e período seco 3,44%). A partir dessas amostras foram preparados extratos aquosos e etanólicos. Estes últimos foram fracionados por partição líquido-líquido, resultando nas frações hexânica, acetato de etila e hidroalcoólica. A atividade antioxidante dos extratos e das frações foi determinada por dois ensaios: capacidade de seqüestro do radical livre difenilpicrilhidrazilo (DPPH·) e capacidade redutora de Fe(III). Em ambos os ensaios, observou-se que os extratos etanólicos foram os mais ativos, quando comparado aos aquosos. Das frações analisadas, as frações acetato de etila apresentaram a maior atividade antioxidante. O teor de fenólicos totais determinado pelo método de Folin-Ciocalteau confirmou que os compostos fenólicos se concentraram nessas frações. Perfis cromatográficos das frações purificadas por extração em fase sólida a partir dos extratos etanólicos de cada periodo foram obtidos por CLAE em fase reversa e mostraram-se bastante similares. Com o auxílio de padrões comerciais e utilizando o método da coeluição foi possível identificar a presença do fenilpropanoide, ácido p-cumárico e dos flavonóides: miricetina, quercetina e naringenina. O componente principal da fração obtida por extração em fase sólida do extrato etanólico da época de chuva foi ainda purificado por CLAE em fase reversa em escala semi-preparativa. Os dados espectroscópicos (RMN de 1H) dessa substância indicaram tratar-se da quercetina-3-O-ramnosídeo (quercetrina).
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Caracterização fenotípica e molecular de bactérias com atividade antagônicas isoladas do tegumento de Melipona seminigra (Hymenoptera: Apidae: Meliponini)

Paskinn, Henriette Soares Pereira 10 May 2013 (has links)
Submitted by Geyciane Santos (geyciane_thamires@hotmail.com) on 2015-08-20T14:55:07Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Henriette Soares Pereira Paskinn.pdf: 1749750 bytes, checksum: a27b1ad66bc6a166ea02a478efd07806 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-08-24T20:19:41Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Henriette Soares Pereira Paskinn.pdf: 1749750 bytes, checksum: a27b1ad66bc6a166ea02a478efd07806 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-08-24T20:23:45Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Henriette Soares Pereira Paskinn.pdf: 1749750 bytes, checksum: a27b1ad66bc6a166ea02a478efd07806 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-08-24T20:23:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação - Henriette Soares Pereira Paskinn.pdf: 1749750 bytes, checksum: a27b1ad66bc6a166ea02a478efd07806 (MD5) Previous issue date: 2013-05-10 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Evidence has shown that the integument of social bees has a primary protective barrier with antimicrobial properties. Various types of bacteria inhabit the seed coat of healthy social bees and can interact antagonistically against bacteria or not, contributing to the health and function of the nest. Despite its likely importance in maintaining the balance of the hive, few studies have focused on the characterization of the microbiota of this tissue, since the exoskeleton is considered largely responsible for the evolutionary success of insects, not only for the protection and support that gives them, but also the interface between the animal and is environment, and can also act as a carrier and vector of microorganisms. Thus, the main objective of this study was to isolate and identify bacteria with antagonistic activity in front of pathogenic bacteria (Staphylococcus aureus ATCC 25927 and ATCC 29212 Enteroccus faecalis) by biochemical tests and 16S rRNA gene amplification. In this study it was found Staphylococus coagulase negative and positive, Serratia liquefacies and Enterococcus sp. The genera and species of bacteria found in this study were able to produce substances in the course of their growth in vitro, exerting bactericidal or bacteriostatic effect against gram-positive and are largely related to social insects. This feature may suggest that interactions between stingless bees and bacteria are at a level of association such that both are essential for both insect as microorganisms. / Evidências demonstram que o tegumento de abelhas sociais apresenta uma barreira de proteção primária com propriedades antimicrobianas. Diversos tipos de bactérias habitam o tegumento de abelhas sociais saudáveis e podem interagir de forma antagônica frente a bactérias benéficas ou não, contribuindo para a saúde e funções do ninho. Apesar de sua provável importância na manutenção do equilíbrio da colméia, poucos estudos tem se voltado para a caracterização da microbiota deste tecido, visto que o exoesqueleto é considerado como um dos grandes responsáveis pelo sucesso evolutivo dos insetos, não somente pela proteção e ao suporte que lhes confere, mas também a interface que representa entre o animal e o meio ambiente, podendo também atuar como transportador e vetor de microrganismos. Sendo assim, o principal objetivo deste trabalho foi isolar e identificar bactérias com atividade antagônica contra bactérias patogênicas (Staphylococcus aureus ATCC 25927 e Enteroccus faecalis ATCC 29212) por meio de testes bioquímicos e amplificação do gene 16S rRNA. Neste trabalho encontrou-se Staphylococus coagulase negativo e positivo, Serratia liquefacies e Enterococcus sp. Os gêneros e espécies bacterianas encontrados neste estudo foram capazes de produzir substâncias, exercendo efeito bactericida ou bacteriostático contra gram- positivos, no curso de seu crescimento in vitro e são amplamente relacionados com insetos sociais. Tal característica pode sugerir que interações entre abelhas sem ferrão e bactérias estão num patamar de associação tal que sejam imprescindíveis para ambos, tanto inseto quanto microrganismos.
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Perfil de fenólicos e propriedades bioativas de méis de abelhas sem ferrão (Melipona semingra merrille) do Estado do Amazonas.

Silva, Isnandia Andrea Almeida da 26 February 2013 (has links)
Made available in DSpace on 2015-04-17T14:49:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ArquivoTotal.pdf: 2749122 bytes, checksum: 0133f1478c7f201fb6e4243815f6e3dc (MD5) Previous issue date: 2013-02-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Melipona semingra merrillae is a honey producing stingless bee species, whose honey properties are native to the Amazon Region, honey, honey whose properties are still poorly known. In the present study honey samples produced by Melipona seminigra merrillae in seven counties from Amazonas state Brazil, namely: Boca do Acre (BAJ), Pauni (PAU), Manaus (MAO), Rio Preto da Eva (RP), Lábrea (LAB), Maués (ME) and Coari (CO) were investigated. The study was performed studying the physic-chemical characteristics (pH, acidity, ash, proteins, hydroxymethylfurfural, and reducing sugars), thermal degradation profile, antioxidant activity, antimicrobial activity and profile of phenolic compounds. In the study of the antioxidant properties were prepared methanol extracts and ethyl acetate fractions of the honeys, in which samples were performed tests for the evaluation of the antioxidant activity (DPPH, ABTS, HO, β-carotene/linoleic acid system and FRAP). The data of the melissopalynological analysis characterized four of the seven honeys and monoflorals. In relation to the physic-chemical analyses, most of the parameters analyzed showed average values adequate for the human consumption, with the exception of moisture and reducing sugars. The thermogravimetric data showed that all the honey samples displayed a similar thermal degradation profile. As for the antimicrobial activities, the ethyl acetate fractions of the samples LAB, ME and CO presented the best results with minimal inhibitory concentration (MIC) varying from 256 to 512 μg.mL-1. The promising results of antioxidant activity found in honey, extracts and fractions can be explained by the presence of phenolic compounds: gallic acid, 3,4-dihydroxybenzoic acid, 4-hydroxybenzoic acid, trans-trans abscisic acid, cis-trans abscisic acid, vanillic acid, syringic acid, coumaric acid, cinnamic acid and the flavonoids taxifolin, naringenin, luteolin and catechol, whose presence in Brazilian honeys is reported for the first time. Taxifolin was identified in all the samples, in contents ranging from 3.87 to 67.2 mg/100g of honey, suggesting that it is a phenolic indicator for the honeys produced by the species. The total phenolic contents were expressive for the evaluated samples, what could support the consumption of these honeys as a functional food. / Melipona semingra merrillae é uma espécie de abelha sem ferrão, nativa da Região do Amazonas, melífera, cujas propriedades do mel ainda são pouco conhecidas. Neste estudo foram analisadas amostras de mel produzidas por Melipona seminigra merrillae em sete municípios do Estado do Amazonas: Boca do Acre (BAJ), Pauni (PAU), Manaus (MAO), Rio Preto da Eva (RP), Lábrea (LAB), Maués (ME) e Coari (CO). Quanto à origem botânica, características físico-químicas (pH, acidez, cinzas, proteínas, hidroximetilfurfural, atividade de água e açúcares redutores), perfil de degradação térmica, atividade antioxidante (DPPH, ABTS, HO, sistema β-caroteno/ácido linoléico e FRAP), atividade antimicrobiana, conteúdo e perfil de compostos fenólicos. Os dados da análise melissopalinológica caracterizaram quatro dentre os sete méis analisados como monoflorais. Com relação às análises físico-químicas os resultados revelaram que a maioria dos parâmetros físico-químicos investigados apresentou valores médios adequados para o consumo humano, o que possibilita a exploração deste produto. Os dados das análises termogravimétricas por sua vez indicaram que todas as amostras de méis têm o perfil de degradação térmica semelhante. Os resultados da atividade antioxidante mostraram-se promissores para os méis, os extratos e as frações. Quanto à atividade antimicrobiana as amostras LAB, ME, e CO apresentaram melhores resultados. Na determinação do perfil fenólico foram identificados os seguintes compostos: Ácido gálico, 3,4-di-hidroxibenzóico, 4-hidroxibenzóico, catecol, Trans-trans- abscísico, Cis-trans- abscísico, vanílico, siríngico, salicílico, cumárico, cinâmico, e os flavonóides taxifolina, naringenina e luteolina, o que justifica a atividade antioxidante relevante do mel. A taxifolina foi identificada em todas as amostras com teores variando de 3,8 mg/100g a 67,2 mg/100g de mel, sugerindo ser um indicador fenólico dos méis produzidos pela espécie. Ao nosso conhecimento este é o primeiro relato do composto fenólico catecol em mel. Os teores de conteúdo de fenólicos totais foram bastante expressivos para todas as amostras avaliadas, o que poderia fundamentar o consumo destes méis como alimento funcional.

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