Submitted by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2016-04-18T19:08:00Z No. of bitstreams: 1 Liane da Silva de Vargas.pdf: 888943 bytes, checksum: cc7ef0cf94abe8b4f420fbb69931e8f2 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-18T19:08:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Liane da Silva de Vargas.pdf: 888943 bytes, checksum: cc7ef0cf94abe8b4f420fbb69931e8f2 (MD5) Previous issue date: 2014-01-27 / A crotamina, toxina isolada do veneno da Crotalus Durissus Terrificus (Cdt), é uma miotoxina polipeptídica, não enzimática, de caráter básico, que é composta por 42 resíduos de aminoácidos com peso molecular de 4.880 daltons. Conhecida por induzir a despolarização da membrana muscular esquelética pelo aumento da permeabilidade ao íon sódio, estudos demostraram que a toxina é capaz de promover a liberação de acetilcolina e dopamina no sistema nervoso central de ratos. Particularmente, estes neurotransmissores são importantes moduladores nos processos de formação da memória. Considerando a importância destes neurotransmissores nos processos mnemônicos, torna-se interessante estudar substâncias que possam atuar sobre eles, modulando assim os processos mnemônicos, muitas vezes prejudicados por disfunções cognitivas diversas do sistema nervoso central. Diante disso, este estudo investigou os efeitos da infusão intrahipocampal de crotamina na persistência da memória e nos parâmetros hematológicos e de estresse oxidativo em ratos . Foram utilizados 40 ratos Wistar machos de 3 meses de idade. Os experimentos foram realizados em duas etapas. Na etapa 1, posteriormente à implantação de cânulas hipocampais, a amostra foi dividida em dois grupos: controle e experimental. Ambos foram treinados nas tarefas de reconhecimento de objetos (RO) e esquiva inibitória (EI) para verificar os efeitos da crotamina sobre a consolidação e persistência das memórias de reconhecimento e aversiva, na etapa 2 foram realizadas avaliações de parâmetros hematológicos e de estresse oxidativo. A infusão de crotamina (1μg/μL, 1μL/lado) induziu a persistência da memória de reconhecimento e aversiva, ambas testadas 24 horas, 7, 14 e 21 dias após o treino e infusão da toxina. No entanto, a toxina promoveu processo inflamatório e toxicidade demonstrada pelas alterações nos parâmetros hematológicos e de estresse oxidativo.. Estes resultados demonstram uma notória possibilidade do uso da crotamina como instrumento farmacológico em doenças que envolvem comprometimento da persistência da memória, como as demências, no entanto, pesquisas adicionais são necessárias no intuito de buscar alternativas que minimizem os efeitos tóxicos da crotamina, viabilizando o seu uso. / The crotamine, a toxin isolated from the venom of Crotalus durissus terrificus (Cdt) is a polypeptide myotoxin, nonenzymatic, with basic character, which is composed of 42 amino acid residues with a molecular weight of 4,880 daltons. Known to induce depolarization of skeletal muscle by increasing membrane permeability to sodium ions, studies have shown that this toxin is able to promote the release of acetylcholine and dopamine in the central nervous system of rats. Particularly, these neurotransmitters are important modulators in the process of memory formation. Considering the importance of these neurotransmitters in mnemonic processes, it becomes interesting to study substances who can act on them, thereby modulating the mnemonic processes often hampered by various cognitive dysfunctions of the central nervous system. Thus, this study investigated the effects of intrahippocampal infusion of crotamine in persistence of memory and in hematological and oxidative stress parameters in rats. 40 male Wistar rats 3 months aged were used. The experiments were performed in two stages. In step 1, after the implantation of hippocampal cannulae, the sample was divided into two groups: experimental and control. Both were trained in the object recognition (OR) and inhibitory avoidance (IA) task to verify the effects of crotamine on consolidation and persistence of recognition and aversive memories, in step 2 were performed the evaluations of hematological and oxidative stress parameters. The infusion of crotamine (1μg/μl, 1μl/lado) improved the persistence of recognition memory (object recognition task) and aversive memory (inhibitory avoidance task), both tested 24 hours, 7, 14 and 21 days after training and toxin infusion. However, the toxin promoted inflammation and toxicity as demonstrated by serum changes in hematological and oxidative stress parameters. These results demonstrate a remarkable possibility of using crotamine as a pharmacological tool in diseases involving impairment of memory persistence, such as dementias, however, additional research is needed in order to seek alternatives that minimize the toxic effects of crotamine, enabling the its use.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Alzheimer s disease (AD) is biochemically characterized by the occurrence of extracellular deposits of amyloid beta peptide (Aβ) and intracellular deposits of the hyperphosphorylated tau protein, which are causally related to the pathological hallmarks senile plaques and neurofibrillary tangles. Monoamine oxidase B (MAO-B) activity, an enzyme involved in the oxidation of biogenic monoamines, is particularly high around the senile plaques and increased in AD patients in middle to late clinical stages of the disease. Selegiline, a selective and irreversible MAO-B inhibitor, improves learning and memory in AD patients. Notwithstanding, its mechanism of action is still not completely known. The current study aimed to investigate whether selegiline improves the Aβ25-35 induced cognitive deficit in the object recognition task in mice. In addition, we investigated whether selegiline alters MAO-B and MAO-A activities in the hippocampus, perirhinal and remaining cerebral cortices of Aβ25-35-injected mice. Acute (1 and 10 mg/kg, p.o., immediately post-training) and subchronic (10 mg/kg, p.o., seven days after Aβ25-35 injection and immediately post-training) administration of selegiline reversed the cognitive impairment induced by Aβ25-35 (3 nmol, i.c.v.). Acute administration of selegiline (1 mg/kg, p.o.) in combination with Aβ25-35 (3 nmol) decreased MAO-B activity in the perirhinal and remaining cerebral cortices. Acute administration of selegiline (10 mg/kg, p.o.) decreased MAO-B activity in hippocampus, perirhinal and remaining cerebral cortices, regardless of Aβ25-35 or Aβ35-25 treatment. MAO-A activity was not altered by selegiline or Aβ25-35. In summary, the current findings further support a role for MAO-B in the cognitive deficits observed in AD. / A doença de Alzheimer (DA) é bioquimicamente caracterizada por depósitos extracelulares de peptídeo beta amiloide (Aβ) e de proteína tau hiperfosforilada, que são causalmente relacionadas com as características patológicas, placas neuríticas e emaranhados neurofibrilares. A atividade da monoamina oxidase B (MAO-B), uma enzima envolvida na oxidação de monoaminas biogênicas, é particularmente elevada ao redor das placas senis e aumenta nos pacientes com DA em estágios clínicos de moderado a grave. A selegilina, um inibidor seletivo e irreversível da MAO-B, é relatada por melhorar a memória e o aprendizado em pacientes com DA. Porém, seu mecanismo de ação ainda não é completamente conhecido. O presente estudo teve como objetivo investigar se a selegilina melhora o déficit cognitivo induzido por Aβ25-35. na tarefa de reconhecimento de objetos em camundongos. Além disso, investigou-se a atividade da MAO-A e da MAO-B no hipocampo, no córtex cerebral e no córtex perirrinal de camundongos injetados com Aβ25-35 e com selegilina. Administração aguda (1 e 10 mg/kg, p.o., imediatamente pós-treino) e subcrônica (10 mg/kg, p.o., por sete dias depois da injeção do Aβ25-35 e imediatamente pós-treino) de selegilina preveniu o prejuízo da memória induzido pelo Aβ25-35 (3 nmol, icv). A administração aguda de selegilina (1 mg/kg, p.o.) em combinação com Aβ25-35 (3 nmol) diminuiu a atividade da MAO-B no córtex perirrinal e córtex cerebral. A administração aguda de selegilina (10 mg/kg, p.o.) diminuiu a atividade da MAO-B no hipocampo, no córtex cerebral e no córtex perirrinal independentemente da presença de Aβ25-35. A atividade da MAO-A não foi alterada pelo tratamento com selegilina ou Aβ25-35 em nenhuma das estruturas estudadas. Em resumo, os dados atuais suportam um papel adicional para a MAO-B no déficit cognitivo observado na DA.