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Avaliação histomorfológica, morfométrica e de características biomecânicas das membranas pericárdicas bovinas submetidas a um novo meio de conservação (ERS®-04-09-11-16-21)RODRÍGUEZ-SALAS, Ernesto 24 February 2006 (has links)
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Previous issue date: 2006-02-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Search for materials, methods and means of conservation of membranes and tissues has been accomplished either for preservation of anatomic pieces or for utilization in homologue and heterologue transplants. In the present work, a bibliographical review about materials and means of conservation of biological membranes utilized in surgery procedures was realized. Three experiments aimed at: (I) – Determine concentration of the antibiotics benzilpeniciline, sulphate of estreptomicine and anfotericine B in the environment of conservation ERS®-04-09-11-16-21; (II) – Characterize morphology and histopathology of the BPMs (III) – Evaluate biomechanical characteristics of BPMs conserved in the environment proposed. Initially, 10 BPMs were collected, which registered an average weight of 21g after processed. In order to determine concentration of peniciline, a dosage taking weight into account weight was used, whereas for sulphate of estreptomicine and anfotericine B, procedure used in cell cultivation was adapted. Final results indicated dosages of 2,0 mg/ml; 0,035 mg/ml e 0,030 mg/ml respectively. In experiment II – four samples were collected and sectioned in 10 fragments of 2 cm2, determining weight, size and thickness, according to treatments T-0 - In natura; T-30 -, T-60 e T-90, respectively at 30, 60 and 90 days after collecting. Morphometrical results demonstrated augmentation of thickness, size and weight of BPMs in the several timings in relation to in natura state and histopathological studies (optic and electronic microscopy) brought to evidence maintenance of BPMs structure, although an enlargement of spacing between collagen fibers took place. Fibroblasts presented varied degrees of vacuolization and necrosis at all timings. In the third experiment, same procedure of collecting and conservation as in experiment II were obeyed. Size of samples was of 13 cm x 20 cm for evaluation of thickness, maximum force, tension and expansion through computerized dynamometer EMIC. Taking all results into account, we come to the conclusion is the environment proposed is capable of maintaining the BPMs free of contaminants for a period of 90 days with the same morphological pattern and collagen fibers arrangement. The BPMs conserved in the environment and maintained under refrigeration temperature 12±2ºC can be used in surgery procedures in an ideal period of between 13 and 69 days given conservation of capacity of expasion and augmentation of maximum force and thickness. A reduction of tension to which BMP was submitted because of timing was also observed, which does not endanger use of BPMs in surgery procedures such as reconstitution of articular capsules, herniorafies, reparation surgeries of thick traumatisms with loss of conjunctive tissue, and so forth. / A busca de materiais, métodos e meios de conservação de membranas e tecidos vêm sendo realizada seja para preservação de peças anatômicas ou para uso nos transplantes homólogos e heterólogos. No presente trabalho foi realizada uma revisão bibliográfica sobre os materiais e meios de conservação de membranas biológicas utilizadas em procedimentos cirúrgicos. Três experimentos objetivaram: (I) - Determinar a concentração dos antibióticos benzilpenicilina, sulfato de estreptomicina e anfotericina B no meio de conservação ERS®04-09-11-16-21; (II) - Caracterizar a morfologia e histopatologia das MPBs (III) - Avaliar as características biomecânicas das MPBs, conservadas no meio proposto. Inicialmente, foram coletadas 10 MPBs, que após processadas, registraram peso médio de 21 g. Para determinação da concentração de penicilina, utilizou-se a dosagem atendendo ao peso, enquanto que para o sulfato de estreptomicina e anfotericina B, adaptou-se o procedimento utilizado em cultivo celular. Os resultados finais indicaram dosagens de 2,0 mg/ml; 0,035 mg/ml e 0,030 mg/ml nesta ordem respectivamente. No experimento II – quatro amostras foram coletadas e seccionadas em 10 fragmentos de 2 cm2, determinando-se peso, tamanho e espessura, segundo os tratamentos T-0 - In natura; T-30 -, T-60 e T-90, respectivamente aos 30, 60 e 90 dias da coleta. Os resultados morfofométricos demonstraram aumento de espessura, tamanho e peso das MPBs nos diversos tempos em relação ao estado in natura e estudos histopatológicos (microscopia óptica e eletrônica) evidenciaram a manutenção da estrutura das MPBs, apesar de haver um maior espaçamento entre as fibras colágenas. Os fibroblastos apresentaram graus variados de vacuolização e necrose em todos os tempos. No terceiro experimento, obedeceram-se aos mesmos procedimentos de coleta e conservação do experimento II. Já, o tamanho das amostras foi de 13 cm x 20 cm para avaliação da espessura, força máxima, tensão e alongamento por meio de dinamômetro computadorizado EMIC. Tendo em vista todos os resultados, conclui-se que o meio proposto é capaz de manter as MPBs livres de contaminantes por um de 90 dias com o mesmo padrão morfológico e arranjo das fibras colágenas. As MPBs conservadas no meio e mantidas em temperatura de refrigeração 12±2ºC podem ser utilizadas em procedimentos cirúrgicos num período ideal entre 13 e 69 dias dado pela conservação da capacidade de alongamento e pelo aumento da força máxima e espessura. Houve também uma redução da tensão a que foi submetida a MPB, em função do tempo, o que não compromete o uso das MPBs em procedimentos cirúrgicos como reconstituição de cápsulas articulares, herniorafias, cirurgia reparadora de extensos traumatismos com perda de tecido conjuntivo, entre outros.
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