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Caracterização fisiológica e enzimática de Metarhizium spp. por eletroforese, análise em meios específicos e a atividade quitinolítica a partir da degradação da cutícula de Boophilus microplus

FERREIRA, Ubirany Lopes January 2004 (has links)
Made available in DSpace on 2014-06-12T15:03:34Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4519_1.pdf: 6728814 bytes, checksum: 0a2bf9b9ce453a0afed50516c47bdecf (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2004 / Foi verificado neste trabalho a atividade quitinolítica de Metarhizium spp. a partir da degradação da cutícula de Boophilus microplus, além das atividades lipolítica, amilolítica e proteolítica em meios basais, como também estudos do crescimento fúngico em três diferentes meios de cultura e isoenzimáticos. Foram observados maiores valores de atividade enzimática na linhagem CG291C (Metarhizium flavoviride var. flavoviride reisolada de B. microplus) em meio contendo cutícula de B. microplus para atividade quitinolítica, CG434C (M. anisopliae var. acridum reisolada de B. microplus) e CG434 (M. anisopliae var. acridum) lipolítica, CG442C (M. anisopliae var. acridum reisolada de B. microplus) proteolítica e CG442 (M. anisopliae var. acridum) para amilolítica. O meio BDA induziu o maior crescimento e esporulação, e entre os meios líquidos, Czapeck e Massa de arroz propiciaram maior peso da matéria seca. A análise eletroforética em gel de poliacrilamida demonstrou variações no número e posições das bandas, em cada um dos sistemas estudados. Foi observada maior variação nos perfis das bandas com relação às proteínas totais, em todas as linhagens, variando de uma a oito bandas com mobilidade relativa diferenciada. No sistema esterase as linhagens CG291 (Metarhizium flavoviride var. flavoviride) e CG291C (Metarhizium flavoviride var. flavoviride reisolada de B. microplus) apresentaram o mesmo perfil e mobilidade relativa o que diferiu das demais linhagens estudadas, revelando polimorfismo. Na visualização do gel para fosfatase ácida, apenas as linhagens CG291 e CG291C mostraram perfis idênticos com cinco bandas de mesma mobilidade relativa e revelando grande polimorfismo nas demais linhagens. No sistema superóxido dismutase as linhagens CG434, CG434c, CG442 e CG442C não apresentaram bandas. De modo geral, todas as linhagens mostraram padrões diferentes indicando uma variação fenotípica
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Termotolerância de Metarhizium spp. e efeito de sua formulação sobre a virulência para Rhipicephalus microplus expostos à condições estressantes de temperatura e umidade / Thermotolerance of Metarhizium spp. and effect of the formulation on the virulence for Rhipicephalus mucroplus exposed to stressful conditions of temperature and humidity

Muniz, Elen Regozino 01 April 2015 (has links)
Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-11-13T14:16:38Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Elen Regozino Muniz - 2015.pdf: 5452848 bytes, checksum: 01e704bb99491be79de20d410d521a0f (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-11-13T14:18:52Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Elen Regozino Muniz - 2015.pdf: 5452848 bytes, checksum: 01e704bb99491be79de20d410d521a0f (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-13T14:18:52Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Elen Regozino Muniz - 2015.pdf: 5452848 bytes, checksum: 01e704bb99491be79de20d410d521a0f (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2015-04-01 / Rhipicephalus microplus, known as tick of the cattle, cause great economic losses each year in Brazil. Entomopathogenic fungi stand out as an alternative to the exclusive control and indiscriminate use of the chemical. However, ambient temperature above the threshold considered optimal for these organisms can interfere with your biology, and compromise their development and effectiveness. In the present study evaluated biological parameters seven strains of Metarhizium spp. (IP1, IP34, IP46, IP60, IP119, IP125 and IP146) originated from the Central Brazil, incubated at 32 ± 0.5°C or 27 ± 1°C. In addition, the virulence was assessed for each strain of R. microplus engorged females. IP119, Metarhizium anisopliae s.s., was selected among the other isolates for virulence tests against R. microplus submitted with stressful temperature condition (32 ± 0.5°C) or low relative humidity (RH = 75%) to present considerable heat tolerance and virulence in the screening tests. Tests with conidia formulated in oil-water emulsion (liquid vaseline 5%), carboxymethylcellulose gel or emulgel 5% were conducted to evaluate the conidial thermotolerance when exposed to 45°C for 4 hours or 6 hours, and to test the efficacy of formulated to control engorged female R. microplus the stressful conditions of temperature (32°C) and low humidity (RH = 75%). It was concluded that a constant temperature of 32°C or exposure for a few hours at 45°C is stressful condition for the isolates. The conidia IP119 when bathed in liquid vaseline jelly were more tolerant of exposure to 45°C for 4 hours. IP119 was shown to be virulent for engorged female R. microplus, being the oil-water emulsion 5% of the most effective formulation. / Rhipicephalus microplus, conhecido como carrapato-dos-bovinos, causa grandes percas econômicas por ano no Brasil. Fungos entomopatogênicos se destacam como controle alternativo ao uso exclusivo e indiscriminado do químico. Contudo, a temperatura ambiente acima do limiar considerado ótimo para estes organismos pode interferir na sua biologia, e comprometer seu desenvolvimento e eficácia. No presente estudo foram avaliados parâmetros biológicos de sete linhagens de Metarhizium spp. (IP1, IP34, IP46, IP60, IP119, IP125 e IP146), originados do cerrado do Centro-Oeste brasileiro, incubados a 32±0,5°C ou 27±1°C. Além disso, foi avaliada a virulência de cada linhagem para fêmeas ingurgitadas de R. microplus. Metarhizium anisopliae s.s., IP119, foi selecionado dentre os demais isolados para os testes de virulência contra R. microplus submetidos a com condição de temperatura estressante (32±0,5°C) ou em baixa umidade relativa (UR=75%) por apresentar notável tolerância ao calor e virulência nos testes de triagem. Testes com os conídios formulados em emulsão óleo-água (vaselina líquida 5%), gel carboximetilcelulose ou emulgel 5% foram realizados para avaliar a termotolerância dos conídios quando expostos a 45°C por 4 ou 6 horas, e testar a eficácia dos formulados para o controle de fêmeas ingurgitadas de R. microplus nas condições estressantes de temperatura (32°C) e umidade baixa (UR=75%). Concluiu-se que a constante temperatura de 32°C ou a exposição por poucas horas a 45°C foi condição estressante para os isolados estudados. Os conídios de M. anisopliae s.s. (IP119) quando banhados em emulsão óleo-água 5% foram mais tolerantes em exposição a 45°C por 4 horas. M. anisopliae s.s. (IP119) mostrou ser virulento para fêmeas ingurgitadas de R. microplus, tendo sido a emulsão óleo-água 5% a formulação mais eficaz.

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