Submitted by Anderson Silva (avargas@icict.fiocruz.br) on 2012-05-25T16:58:53Z No. of bitstreams: 1 carolina_r_oliveira_ioc_pb_0015_2010.pdf: 3062249 bytes, checksum: d10c05b137f114e42d406ad40e28433a (MD5) / Made available in DSpace on 2012-05-25T16:58:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 carolina_r_oliveira_ioc_pb_0015_2010.pdf: 3062249 bytes, checksum: d10c05b137f114e42d406ad40e28433a (MD5) Previous issue date: 2010 / Fundação Oswaldo Cruz e CNPQ / Universidade Estácio de Sá. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A malária continua sendo uma das doenças parasitárias mais importantes do mundo, sendo responsável por 300-500 milhões de casos por ano. A resistência dos plasmódios aos medicamentos antimaláricos e dos vetores aos inseticidas agrava ainda mais a situação. Neste contexto, o desenvolvimento de novos métodos terapêuticos e profiláticos é de suma importância. Apesar dos esforços, uma vacina eficaz ainda não foi desenvolvida. Atualmente sabe-se que a resposta imune antiplasmódio pode ser responsável pela proteção e patogênese da doença. Porém, os mecanismos envolvidos na imunidade protetora e/ou patológica ainda não estão esclarecidos. Assim sendo, o presente trabalho objetiva avaliar as alterações hematológicas e o perfil imunofenotípico de células mononucleares de sangue periférico de indivíduos naturalmente infectados por P. vivax (n=47) ou por P. falciparum (n=24) provenientes de área endêmica brasileira (PV-RO), na fase aguda e de convalescença. Para isso, sangue dos voluntários foi coletado para realização do exame parasitológico, do hemograma completo e para obtenção de células mononucleadas para a avaliação do perfil imunofenotípico através de citometria de fluxo. As populações alvo incluíram células CD4 +, CD8+, linfócitos T, Tγδ, células CD3- e subpopulações produtoras de diferentes citocinas (IFN-γ, TNF-α, IL-2, IL-4, IL-10); células NK, NKT e subpopulações (CD4+ e CD8+); células B e subpopulações (incluindo populações produtoras de TGF-β). Na fase aguda, pacientes com malária vivax e falciparum apresentaram plaquetopenia, leucopenia e aumento no número de bastões e também apresentaram um aumento no percentual de células CD4+CD8- e redução no percentual de células B CD5-CD11b-. Pacientes com P. vivax apresentaram aumento no percentual de: células CD4+, CD8+, TCRγδ+ e CD3- produtoras de TNF-α; células CD8 ativadas, células T e células CD3- produtoras de IL-10; células B expressando TGF-β. Nos indivíduos infectados por P. falciparum foi observado um aumento de células T TNF-α+ e redução de células T citotóxicas. Na fase de convalescença, os dois grupos apresentaram redução de células Tγδ e CD3- produtoras de TNF-α; células CD3-IL-2+; células CD3-IL-10+. Apenas os indivíduos infectados com P. vivax apresentaram redução de CD4+CD8-; células B CD5+CD11b-; células CD8+ produtoras de TNF-α e de TNF-α e IFN-γ de forma simultânea; além do aumento de células B CD5-CD11b-. Tanto o pacientes com P. falciparum quanto com o P. vivax apresentaram significante diminuição no número de linfócitos e apenas algumas subpopulações celulares circulantes se encontravam alteradas. Entretanto, alterações significativas no perfil de expressão de citocinas foram observadas principalmente nos pacientes com P. vivax. Dentro desse contexto, na fase aguda da malária por P. vivax houve aumento tanto no percentual de células com marcação para citocinas do tipo 1 quanto para citocinas do tipo 2. Como todos os pacientes incluídos no trabalho apresentaram malária não complicada, pode-se supor que o mais importante no controle da gravidade da doença é justamente o balanço entre resposta pró e anti-inflamatória. / Malaria remains one of the most important parasitic diseases in the world, being responsible for 300-500 millions cases annually. The resistance of Plasmodium to antimalarial drugs and the resistance of vectors to insecticides worsens the situation. In this context, the development of new therapeutics and prophylactics methods is extremely important. Despite efforts, an effective vaccine has not been developed. Presently it is known that the antiplasmodial immune response may be responsible for the protection and pathogenesis of the disease. However, the mechanisms involved in protective and / or pathological immunity remain unclear. Therefore, this study aims to evaluate the hematological and immunophenotypic profile of peripheral blood mononuclear cells of naturally infected individuals with P. vivax (n = 47) or P. falciparum (n = 24) from an endemic area of Brazil (PV-RO), on the acute phase and convalescence. To achieve the objective, volunteers' blood was collected for parasitological examination, hemogram and to obtain mononuclear cells to evaluate the immunophenotypic profile using flow cytometry. The target populations included CD4+, CD8+, T lymphocytes, Tγδ, CD3- cells, and subpopulations producing different cytokines (IFN-γ, TNF-α, IL-2, IL-4, IL-10); NK, NKT cells and subpopulations (CD4+ e CD8+); B cells and subpopulations (including populations that produces TGF-β). In the acute phase, patients with falciparum and vivax malaria had thrombocytopenia, leukopenia and an increased number of band cells and also presented an increased percentage of CD4+CD8- besides a reduction in the percentage of CD5-CD11b- B cells. Patients with P. vivax showed an increase in the percentage of TNF-α producing CD4+, CD8+, TCRγδ+ and CD3- cells; activated CD8 T cells and CD3-cells that produces IL-10; TGF-β expressing B cells. In P. falciparum infected individuals it was observed an increase in T cell TNF-α+ and a reduction of cytotoxic T cells. In the convalescence, both groups presented a reduction in TCRγδ+TNF-α+, CD3- TNF-α +, CD3-IL-2+ and CD3-IL-10+ cells. Only those individuals infected with P. vivax showed a decrease of CD4+ CD8-; CD5+CD11b- B cells; CD8+ cells that express TNF-α and TNF-α and IFN-γ simultaneously; besides there is an increase of CD5-CD11b- B-cell. Either patients with P. falciparum as in P. vivax infected individuals a significant decrease in the number of lymphocytes was observed, however only a few circulating lymphocyte subsets were altered. Indeed, significant changes in the cytokines expression profile were observed in the P. vivax patients. Within this context, in the acute phase of P. vivax malaria there was an increase in both the percentage of type 1 and type 2 cytokines producing cells. As all patients included in the study had uncomplicated malaria, it can be assumed that the most important in controlling the severity of the disease is precisely the balance between the pro and anti- inflammatory response.