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Prospecção de proteínas e genes de isolados de Bacillus thurigiensis associados ao desenvolvimento do controle biológico de praga em canade- açúcar (Saccharum spp.)MARTINS, Paulo Geovani Silva 11 March 2016 (has links)
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Previous issue date: 2016-03-11 / CAPES / A cultura da cana-de-açúcar possui importância econômica para o Brasil pela
produção de açúcar e etanol. No entanto, parte da produção é ameaçada pelo
ataque de insetos-praga, destacando-se a broca da cana-de-açúcar (Diatraea
saccharalis), que causa graves perdas econômicas. O controle biológico é
alternativo ao controle químico e consiste no emprego de inimigos naturais como
patógenos, que regulam a população de insetos-praga em níveis nãoprejudiciais.
Dentre os patógenos destaca-se a bactéria Bacillus thuringiensis
(Bt) que produz toxinas, codificadas pelos genes cry, no formato de cristais
proteicos com atividade entomotóxica para diversas ordens de insetos. O
presente trabalho teve como objetivo o isolamento e caracterização de novas
estirpes de Bt com potencial entomotóxico para controle biológico da D.
saccharalis em cana-de-açúcar. Amostras de solo coletadas possibilitaram o
isolamento de 97 colônias bacterianas com características fenotípicas
compatíveis para Bt. O DNA extraído foi amplificado com primers para os genes
cry1, cry2 e cry9, ativos contra dípteros e lepidópteros. Em 11,4% e 12,4% dos
isolados foram constatados os genes cry2 e cry9, respectivamente, e 10 destes
patogenicidade variando entre 3,47% a 20,05% para D.saccharalis. Após
comparação dos perfis proteômicos dos isolados Bt.Pri 4.7, Bt.Pri 4.29, Bt.CDi
1.3 e Bt.CDi 1.11, de maior e menor potencial patogênico de cada classe gênica,
foram identificadas proteínas como a shikimato quinase, envolvida na produção
de toxinas em Bt, e que auxiliam o entendimento da patogênese deste microorganismo. / Sugarcane production has economical importance to Brazil, especially due to
production of sugar and ethanol. However, a proportion of the production is lost
owing to damage of pest insects, including sugarcane borer (Diatraea
saccharalis), which cause severe economical lost in the sugar/ethanol industry.
Biological control, alternatively to chemical control, which cause damage to
human health and environment, is based on use of natural enemies such as
pathogens that regulated pest insects population to a non-prejudicial level.
Among pathogens, especially bacteria Bacillus thuringiensis (Bt) that produce
toxins, encoding by cry genes, which are protein crystal with entomotoxicity
activity for diverse insect orders. The present work aims to isolate and
characterize new strains of Bt with potential entomotoxicity to biological control of
D. saccharalis in sugarcane. Soil samples collected allowed the isolation of 97
bacterial colonies phenotypically compatible to Bt. DNA extracted was used in
PCR reaction using primers to amplify cry1, cry2 and cry9 genes, with activity
against Lepidoptera and Diptera. In 11.4 and 12.4% of the strains was observed
fragments with pattern expected for cry2 and cry9 genes, respectively, and ten
isolated shown pathogenicity ranging from 3.47% to 15.62% for D.saccharalis.
After comparing the proteomic profiles of the isolates Bt.Pri 4.7 Bt.Pri 4.29,
Bt.CDi 1.3 and Bt.CDi 1.11 of major and minor pathogenic potential of every
gene class proteins were identified as shikimate kinase, involved in the
production of Bt toxins, and assist the understanding of the pathogenesis of this
microorganism.
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