O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de um preparado de anticorpos policlonais (PAP) contra bactérias ruminais específicas, Streptococcus bovis e Fusobacterium necrophorum, em parâmetros ruminais da fermentação, em vacas canuladas, adaptadas ou não a uma dieta de alta proporção de carboidratos prontamente fermentescíveis, após indução à acidose. O delineamento experimental utilizado foi o quadrado latino 3X3 replicado em arranjo fatorial de tratamentos 3X2, sendo 2 aditivos alimentares (PAP na apresentação em pó - PAPP e PAP na apresentação líquida - PAPL) mais um grupo controle (CON) e dois manejos de adaptação à dieta, resultando em seis tratamentos. O primeiro quadrado latino foi submetido a um protocolo de adaptação à dieta do tipo gradual ou step-up: dos dias D0 a D4 os animais receberam 100% de forragem; do D5 ao D9, 30% de concentrados e do D10 ao D14, 60% de concentrados. O segundo quadrado latino recebeu 100% de forragem do D0 ao D14 (sem adaptação). Nos D15 e D16, todos os animais receberam dieta com 80% de concentrados. Para as análises foram coletadas amostras de líquido ruminal a cada 3 horas a partir da 0h antes da alimentação até as 36h (D15 e D16) durante o desafio com uma dieta de 80% de concentrados. Os dados foram analisados pelo procedimento Mixed do SAS com nível de significância de 0,05. Foi observada interação entre tempo e adaptação (P<0,05) para pH ruminal com diferença entre método de adaptação nas 0, 3, 6, 9, 12 e 36 horas pós alimentação, quando o grupo não adaptado teve valores maiores que o grupo adaptado, sendo que na hora 24 ocorreu o contrário. Para a concentração de ácidos graxos de cadeia curta (AGCC), nas horas 0, 3, 6, 9 e 36 pós alimentação o grupo adaptado obteve maiores valores comparado ao grupo não adaptado. Para proporção molar de acetato, a 0 hora o grupo sem adaptação obteve valores maiores comparado ao grupo adaptado. Já nas horas 24, 27 e 30 o grupo com adaptação que obteve maiores valores. Para a proporção molar de propionato o grupo sem adaptação teve valores mais altos em comparação ao outro grupo das 3 às 36 horas pós alimentação. Quanto à proporção acetato:propionato (Ac:Pr) às 6, 12, 24, 27, 30 e 36 horas pós alimentação, o grupo de animais adaptados teve valores mais altos que o grupo não adaptado. Na proporção molar de butirato, o grupo de animais adaptados obteve maiores valores nas horas 0, 3, 6, 9, 12, 33 e 36. Para os valores de nitrogênio amoniacal (N-NH3), às 6 horas pós alimentação, o grupo não adaptado obteve maiores valores que o grupo adaptado (26,1 vs. 19,3, respectivamente). Nas horas 9, 30, 33 e 36 ocorreu o contrário. Observou-se também interação entre tempo e aditivo (P=0,0430) para a proporção molar de butirato. Porém, quando a análise foi realizada por tempo, nenhum efeito foi observado. Para os valores relativos de protozoários mensurados (Dasytricha, Isotricha, Epidinium, Diplodinium e Entodinium) apenas o Entodinium apresentou efeito de adaptação (P<0,0236) tendo sua proporção maior no grupo adaptado. Os valores de haptoglobina também não foram influenciados nem por aditivo nem por adaptação. O preparado de anticorpos policlonais não foi tão eficaz quanto a adaptação gradual à dieta de alto concentrado para controlar alterações dos parâmetros ruminais. / The objective of this trial was to evaluate the effects of polyclonal antibodies preparation (PAP) against specific rumen bacteria Streptococcus bovis and Fusobacterium necrophorum on rumen fermentation parameters in ruminally cannulated cows adapted or not to highly fermentable carbohydrates diets (HFC) after an acidosis challenge. The experimental design was two 3X3 Latin squares in a factorial arrangement of treatments 3X2 regarding two feed additives (PAP in powder presentation - PAPP and PAP in liquid presentation - PAPL) plus control group (CON) and two managements of diets adaptation, resulting in six treatments. The first Latin square had a step-up diet adaptation: from D0 to D4 100% forage; D5 to D9 30% of concentrates and D10 to D14 60% of concentrates. The second Latin square received 100% forage from D0 to D14. On D15 and D16, all animals received a diet with 80% of concentrates. For analysis, rumen fluid was sampled at 0 and every 3 h posfeeding totaling 36 h (D15 and D16) of challenge with a diet with 80% of concentrates. Data were analyzed by MIXED procedure with a significance level of 0.05. An interaction between time and adaptation (P<0,05) was observed for ruminal pH. At 0, 3, 6, 9, 12 and 36 h postfeeding, the non-adapted group had higher values compared to the adapted group and at 24 h postfeeding, the inverse was observed. For total short-chain fatty acids concentration, at 0, 3, 6, 9 and 36 h postfeeding, the adapted group had higher values compared to non-adapted group. For molar proportion of acetate at 0h postfeeding, the non-adapted group had higher values than the adapted group, and at 24, 27 and 30h, the adapted group had greater values than the non-adapted group. For molar proportion of propionate the non-adapted group had greater values compared to the adapted group from 3 to 36h postfeeding. For acetate:propionate (Ac:Pr) ratio at 6, 12, 24, 27, 30 and 36 h postfeeding, the adapted group had greater values compared to the nonadapted group. For butyrate molar proportion at 0, 3, 6, 9, 12, 33 and 36h postfeeding the adapted group had greater values than the non-adapted group. For ammonia nitrogen (NH3- N) concentration at 6h, the non-adapted group had greater values than the adapted group (26.1 vs. 19.3, respectively), however at 9, 30, 33 and 36h postfeeding, the adapted group had higher values compared to the non-adapted group. It was also observed an interaction between time and additive (P=0.0430) for butyrate molar proportion, but when the analysis was performed by time no effect was observed. For the relative values of protozoa measured (Dasytricha, Isotricha, Epidinium, Diplodinium and Entodinium) only Entodinium presented adaptation effect (P<0.0236) with a higher proportion in the adapted group. Haptoglobin values was also not influenced (P>0.05) by additive or adaptation effect. Polyclonal antibodies preparation was not as effective as the gradual adaptation to the diet high concentrate to control changes of ruminal parameters.

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de um preparado de anticorpos policlonais (PAP) contra bactérias ruminais específicas, Streptococcus bovis e Fusobacterium necrophorum, em parâmetros ruminais da fermentação, em vacas canuladas, adaptadas ou não a uma dieta de alta proporção de carboidratos prontamente fermentescíveis, após indução à acidose. O delineamento experimental utilizado foi o quadrado latino 3X3 replicado em arranjo fatorial de tratamentos 3X2, sendo 2 aditivos alimentares (PAP na apresentação em pó - PAPP e PAP na apresentação líquida - PAPL) mais um grupo controle (CON) e dois manejos de adaptação à dieta, resultando em seis tratamentos. O primeiro quadrado latino foi submetido a um protocolo de adaptação à dieta do tipo gradual ou step-up: dos dias D0 a D4 os animais receberam 100% de forragem; do D5 ao D9, 30% de concentrados e do D10 ao D14, 60% de concentrados. O segundo quadrado latino recebeu 100% de forragem do D0 ao D14 (sem adaptação). Nos D15 e D16, todos os animais receberam dieta com 80% de concentrados. Para as análises foram coletadas amostras de líquido ruminal a cada 3 horas a partir da 0h antes da alimentação até as 36h (D15 e D16) durante o desafio com uma dieta de 80% de concentrados. Os dados foram analisados pelo procedimento Mixed do SAS com nível de significância de 0,05. Foi observada interação entre tempo e adaptação (P<0,05) para pH ruminal com diferença entre método de adaptação nas 0, 3, 6, 9, 12 e 36 horas pós alimentação, quando o grupo não adaptado teve valores maiores que o grupo adaptado, sendo que na hora 24 ocorreu o contrário. Para a concentração de ácidos graxos de cadeia curta (AGCC), nas horas 0, 3, 6, 9 e 36 pós alimentação o grupo adaptado obteve maiores valores comparado ao grupo não adaptado. Para proporção molar de acetato, a 0 hora o grupo sem adaptação obteve valores maiores comparado ao grupo adaptado. Já nas horas 24, 27 e 30 o grupo com adaptação que obteve maiores valores. Para a proporção molar de propionato o grupo sem adaptação teve valores mais altos em comparação ao outro grupo das 3 às 36 horas pós alimentação. Quanto à proporção acetato:propionato (Ac:Pr) às 6, 12, 24, 27, 30 e 36 horas pós alimentação, o grupo de animais adaptados teve valores mais altos que o grupo não adaptado. Na proporção molar de butirato, o grupo de animais adaptados obteve maiores valores nas horas 0, 3, 6, 9, 12, 33 e 36. Para os valores de nitrogênio amoniacal (N-NH3), às 6 horas pós alimentação, o grupo não adaptado obteve maiores valores que o grupo adaptado (26,1 vs. 19,3, respectivamente). Nas horas 9, 30, 33 e 36 ocorreu o contrário. Observou-se também interação entre tempo e aditivo (P=0,0430) para a proporção molar de butirato. Porém, quando a análise foi realizada por tempo, nenhum efeito foi observado. Para os valores relativos de protozoários mensurados (Dasytricha, Isotricha, Epidinium, Diplodinium e Entodinium) apenas o Entodinium apresentou efeito de adaptação (P<0,0236) tendo sua proporção maior no grupo adaptado. Os valores de haptoglobina também não foram influenciados nem por aditivo nem por adaptação. O preparado de anticorpos policlonais não foi tão eficaz quanto a adaptação gradual à dieta de alto concentrado para controlar alterações dos parâmetros ruminais. / The objective of this trial was to evaluate the effects of polyclonal antibodies preparation (PAP) against specific rumen bacteria Streptococcus bovis and Fusobacterium necrophorum on rumen fermentation parameters in ruminally cannulated cows adapted or not to highly fermentable carbohydrates diets (HFC) after an acidosis challenge. The experimental design was two 3X3 Latin squares in a factorial arrangement of treatments 3X2 regarding two feed additives (PAP in powder presentation - PAPP and PAP in liquid presentation - PAPL) plus control group (CON) and two managements of diets adaptation, resulting in six treatments. The first Latin square had a step-up diet adaptation: from D0 to D4 100% forage; D5 to D9 30% of concentrates and D10 to D14 60% of concentrates. The second Latin square received 100% forage from D0 to D14. On D15 and D16, all animals received a diet with 80% of concentrates. For analysis, rumen fluid was sampled at 0 and every 3 h posfeeding totaling 36 h (D15 and D16) of challenge with a diet with 80% of concentrates. Data were analyzed by MIXED procedure with a significance level of 0.05. An interaction between time and adaptation (P<0,05) was observed for ruminal pH. At 0, 3, 6, 9, 12 and 36 h postfeeding, the non-adapted group had higher values compared to the adapted group and at 24 h postfeeding, the inverse was observed. For total short-chain fatty acids concentration, at 0, 3, 6, 9 and 36 h postfeeding, the adapted group had higher values compared to non-adapted group. For molar proportion of acetate at 0h postfeeding, the non-adapted group had higher values than the adapted group, and at 24, 27 and 30h, the adapted group had greater values than the non-adapted group. For molar proportion of propionate the non-adapted group had greater values compared to the adapted group from 3 to 36h postfeeding. For acetate:propionate (Ac:Pr) ratio at 6, 12, 24, 27, 30 and 36 h postfeeding, the adapted group had greater values compared to the nonadapted group. For butyrate molar proportion at 0, 3, 6, 9, 12, 33 and 36h postfeeding the adapted group had greater values than the non-adapted group. For ammonia nitrogen (NH3- N) concentration at 6h, the non-adapted group had greater values than the adapted group (26.1 vs. 19.3, respectively), however at 9, 30, 33 and 36h postfeeding, the adapted group had higher values compared to the non-adapted group. It was also observed an interaction between time and additive (P=0.0430) for butyrate molar proportion, but when the analysis was performed by time no effect was observed. For the relative values of protozoa measured (Dasytricha, Isotricha, Epidinium, Diplodinium and Entodinium) only Entodinium presented adaptation effect (P<0.0236) with a higher proportion in the adapted group. Haptoglobin values was also not influenced (P>0.05) by additive or adaptation effect. Polyclonal antibodies preparation was not as effective as the gradual adaptation to the diet high concentrate to control changes of ruminal parameters.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:55:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 614632 bytes, checksum: eac726a0efd1eec87578c9745a474e81 (MD5) Previous issue date: 2014-02-26 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / This work aimed to evaluate the effects of ruminal and/or abomasal protein supplementation in cattle fed tropical forages on nutritional variables, degradation of insoluble fiber, activity of fibrolytic enzymes and rumen bacterial communities profile. Two experiments were carried out sequentially, and in the same way, differing only on the forage quality that was defined based on crude protein content: medium quality (784 g of crude protein/ kg of dry matter) and high quality (986 g of crude protein/ kg of dry matter). Four Nellore young bulls, averaging 227±11 kg body weight and fitted with ruminal and abomasal cannullas, were used. The following treatments were evaluated: control (only forage), ruminal nitrogenous compounds supplementation (daily supply of 230 g of crude protein in the rumen), abomasal nitrogenous compounds supplementation (daily supply of 230 g of crude protein in the abomasum), and ruminal and abomasal nitrogenous compounds supplementation (daily supply of 230 g of protein, being 115 g in the rumen and 115 g in the abomasum). Casein was used as protein source for supplementation and basal diet consisted of Tifton 85 (Cynodon spp) hay. Two 4 x 4 Latin squares experimental trials, balanced for residual effects, with four treatments, four animals and four experimental periods lasting 29 days each, were implemented sequentially, one for each forage as stated above. There were no effects (P>0.05) of supplementation scheme or forage quality on organic matter (OM) intake. On the other hand, neutral detergent fiber (NDF) intake was higher (P<0.05) when animals were fed high quality forage. The total digestibility of OM was increased (P<0.05) by supplementation and by increasing forage quality. The digestibility coefficient of NDF was not affected by supplementation scheme (P>0.05), but was increased by the enhancing in forage quality. The apparent ruminal nitrogen balance (RNB) was increased (P<0.05) when animals were supplemented in rumen or in both rumen and abomasum cannula. It is worth highlighting that no supplementation or exclusively abomasal supplementation led to negative values of RNB. The apparent nitrogen balance (NB) was increased (P>0.05) when high quality forage was fed to the animals and by supplementation, no matter if the supplement was infused into rumen, abomasum or both. Ruminal supplementation enhanced (P<0.05) the concentration of rumen ammonia nitrogen (RAN). Although, animals supplemented in rumen and abomasum or exclusively in abomasum did not exhibit increase in RAN concentrations (P>0.05) when compared to no supplemented animals. The bacterial richness and diversity (Shannon-Wiener index) associated with the solid phase of rumen digesta were not affected (P>0.05). However, richness and diversity associated with the liquid phase were increased (P<0.05) by the improvement in forage quality. NDF degradation rate (kp) was enhanced (P<0.05) by ruminal supplementation. Carboximetilcellulase activity was decreased (P<0.05) by the abomasal and ruminal/abomasal supplementation. Xylanase activity was decreased (P<0.05) by both post-ruminal supplementation schemes, when high quality forage was fed to the animals. It was not detected correlations among variables associated with bacterial diversity and activity and variables associated with nutritional performance, excepted for the positive correlation between kp and RNB Clustering analyses based on the Unweighted Pair Group Method (UPGMA) evidenced that distinct bacterial communities are associated with liquid and solid fraction, independently of the forage quality. Clustering analyses also showed that forage quality affects the diversity of liquid phase associated bacteria, even though, effects on solid phase was not clear. None of the evaluations related to the microbial community were able to detect clear effects of supplementation on the microbial community diversity. Improving forage quality enhances fiber digestibility, nitrogen balance and modifies the bacterial community associated with liquid phase. On the other hand, protein supplementation enhances the nitrogen retention in animal body. / Objetivou-se avaliar os efeitos da suplementação proteica ruminal e/ou abomasal em bovinos consumindo forragens tropicais sobre as características nutricionais, a atividade enzimática fibrolítica, a degradação in vitro da fibra insolúvel e o perfil da comunidade bacteriana ruminal. Dois experimentos foram realizados sequencialmente diferindo apenas na qualidade do feno ofertado, sendo de média qualidade (78,4 g de proteína bruta/kg de matéria seca) e alta qualidade (98,6 g de proteína bruta/kg de matéria seca), respectivamente. Os procedimentos experimentais foram os mesmos para ambas as forragens. Foram utilizados quatro novilhos Nelore, não castrados, com peso corporal médio de 227±11 kg, fistulados no rúmen e no abomaso. Foram avaliados os seguintes esquemas de suplementação: controle (somente forragem); suplementação nitrogenada ruminal (fornecimento diário de 230 g de proteína suplementar no rúmen); suplementação nitrogenada abomasal (fornecimento diário de 230 g de proteína suplementar no abomaso) e suplementação nitrogenada ruminal e abomasal (fornecimento diário de 230 g de proteína suplementar, sendo 115 g no rúmen e 115 g no abomaso). A alimentação volumosa basal foi constituída por feno de tifton 85 (Cynodon spp) e como fonte de compostos nitrogenados suplementares foi utilizada a caseína (caseína pura, Labsynth). O experimento foi conduzido segundo delineamento em quadrado latino 4 x 4 balanceado para efeitos residuais, sendo dois quadrados sequenciais, um para cada forragem, com quatro esquemas de suplementação, quatro animais e quatro períodos experimentais com 29 dias em cada quadrado. Não foram observados efeitos (P>0,05) da qualidade da foragem ou do esquema de suplementação sobre o consumo de matéria orgânica (MO). Por outro lado, o consumo de fibra em detergente neutro (FDN) foi superior (P<0,05) quando forragem de alta qualidade foi ofertada aos animais. O coeficiente de digestibilidade total da MO foi incrementado (P>0,05) pela suplementação e pela melhoria na qualidade da forragem. O coeficiente de digestibilidade da FDN não foi afetado pelo esquema de suplementação (P>0,05), mas foi superior quando os animais receberam forragem de alta qualidade (P<0,05). O balanço aparente de compostos nitrogenados no rúmen (BNR) foi ampliado (P<0,05) pela suplementação no rúmen e no rúmen-abomaso. Ressalta-se que a ausência de suplementação ou a suplementação exclusiva no abomaso proporcionam valores negativos de BNR. O balaço aparente de compostos nitrogenados no organismo animal foi ampliado (P<0,05) pelo fornecimento de suplemento, independentemente do local de suplementação, e pelo fornecimento de forragem de melhor qualidade A suplementação no rúmen incrementou (P<0,05) a concentração de nitrogênio amoniacal ruminal (NAR). Por outro lado, animais recebendo suplementação no rúmen e abomaso ou exclusivamente no abomaso apresentaram concentrações de NAR similares (P>0,05) a animais não suplementados. A riqueza e a diversidade microbiana da fase sólida da digesta ruminal não foram afetadas (P>0,05). Entretanto, a riqueza e a diversidade bacteriana associada à fase líquida da digesta ruminal foram incrementadas (P<0,05) pela melhoria na qualidade da forragem. A taxa de degradação da FDN foi ampliada (P<0,05) pela suplementação no rúmen. A atividade da carboximetilcelulase foi reduzida (P<0,05) pela suplementação no abomaso e rúmen-abomaso. A atividade da xilanase foi deprimida (P<0,05) pela suplementação pós-ruminal somente quando forragem de alta qualidade foi fornecida aos animais. Não foi observada correlação (P>0,05) entre as variáveis associadas à atividade enzimática e diversidade microbiana e as características ligadas ao desempenho nutricional, exceção feita à correlação positiva (P<0,05) entre a taxa de degradação da FDN e o BNR. A avaliação multivariada da diversidade permitiu evidenciar que comunidades bacterianas distintas estão associadas às frações líquida e sólida, independente da qualidade da forragem ofertada. Percebeu- se que a variação na qualidade da forragem influencia a diversidade microbiana associada à fração líquida do fluido ruminal, embora não tenha exercido tal efeito sobre a fração sólida. Em nenhuma avaliação percebeu-se efeito claro do esquema de suplementação sobre o perfil da comunidade microbiana ruminal. A melhoria da qualidade da forragem amplia a digestibilidade da fibrae a retenção de nitrogênio e é capaz de modificar a comunidade bacteriana associada à fração liquida do conteúdo ruminal. A suplementação proteica, por sua vez, independentemente do local de suplementação, amplia a retenção de nitrogênio no organismo animal.