Submitted by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2017-11-27T19:32:55Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO INGRIDD AYSLANE TORRES DE ARAÚJO RIBEIRO.pdf: 1926799 bytes, checksum: 7d4fd05aa11b1cf0750980c710b1305d (MD5) / Made available in DSpace on 2017-11-27T19:32:55Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO INGRIDD AYSLANE TORRES DE ARAÚJO RIBEIRO.pdf: 1926799 bytes, checksum: 7d4fd05aa11b1cf0750980c710b1305d (MD5) Previous issue date: 2016-08-03 / CAPES / Os microrganismos fitopatogênicos em condições ambientais favoráveis podem constituir um fator limitante à exploração econômica de plantas, uma vez que, causam vários danos às culturas como podridão, murcha, cancro e até a morte do vegetal. Geralmente o controle dos fitopatogénos e insetos praga é realizado através da aplicação de pesticidas sintéticos. No entanto, o uso excessivo e indiscriminado deses pesticidas tem levado a vários problemas, incluindo a poluição ambiental, efeitos secundários na saúde humana e desenvolvimento de populações de insetos resistentes. Por isso, a busca de formas alternativas para o controle de pragas e doenças de plantas tem sido estimulada. Os óleos essenciais (OE’s) são misturas de compostos voláteis que possuem diversas atividades biológicas. O gênero Croton é o maior da família Euphorbiaceae e algumas das suas espécies apresentam atividades inseticida e antimicrobiana. Este estudo investigou a composição química do óleo essencial (OE) das folhas de Croton rudolphianus, bem como os seus efeitos inseticida e repelente sobre Sitophilus zeamais, e atividade antimicrobiana contra bactérias fitopatogênicas. O OE foi extraído por hidrodestilação e a sua caracterização química foi realizada por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (CG-EM). O potencial inseticida foi avaliado através de ensaios de toxicidade por contato, fumigação e ingestão. Além disso, o efeito repelente foi avaliado. Por sua vez, o efeito antimicrobiano foi avaliado através da determinação das concentrações mínima inibitória (CMI) e mínima bactericida (CMI e CMB, respectivamente) utilizando as bactérias fitopatogênicas Acidovorax citrulli, Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum, Ralstonia solanacearum, Xanthomonas campestris pv. campestres, Xanthomonas campestris pv. malvacearum, Xanthomonas campestris pv. viticola. Um total de 77 compostos foi identificado no OE de C. rudolphianus, sendo o composto majoritário o metil chavicol (20,55%), seguido de (E)-cariofileno (11,21%), biciclogermacreno (10,23%), germacreno D (7,51%) e limoneno (7,01%). O OE apresentou atividade inseticida contra adultos de S. zeamais por contato (LC50 70,64 μL/mL), fumigação (melhor taxa de mortalidade de 43,75% a uma concentração de 64 μL/L) e ingestão (LC50 107,26 μL/g). Além disso, o OE exerceu efeitos em dois parâmetros nutricionais (taxa de consumo relativo e eficiência de conversão da comida ingerida) dos insetos e foi atraente para S. zeamais adultos. OE de C. rudolphianus mostrou atividade antifitopatogênica contra cinco bactérias, Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum, Ralstonia solanacearum, Xanthomonas campestris pv. campestres, Xanthomonas campestris pv. malvacearum, Xanthomonas campestris pv. vitícola, com o melhor valor de MIC e MBC de 1,56 e 25 μL/mL (contra Ralstonia solanacearum e Pectobacterium carotovorum subsp., respectivamente). Esses resultados demonstrar que o OE de C. rudolphianus é uma potencial alternativa no controle de S. zeamais e de bactérias fitopatogênicas. / Phytopathogenic microorganisms under favorable environmental conditions can be a limiting factor for the economic exploitation of plants, since they cause several damages to the crops cultivations as rot, wilt, canker and even the death of plant. Generally the control of phytopathogens and pest insects is carried out through the application of synthetic pesticides. However, the excessive and indiscriminate use of theses synthetic pesticides has led to several problems, including environmental pollution, side effects in human health and development of resistant insect populations. Because of this, search for alternative ways to control pests and plant diseases has been stimulated. The essential oils (EO’s) are mixtures of volatile compounds that have several biological activities. The Croton genus is the major of the family Euphorbiaceae and some of its species showed insecticidal and antimicrobial activity. This study investigated the chemical composition of the essential oil (EO) from Croton rudolphianus leaves, as well as its insecticidal and repellent effects on Sitophilus zeamais, and antimicrobial activity against phytopathogenic bacteria. The EO was extracted by hydrodistillation and its chemical characterization was performed by gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC-MS). The insecticidal potential was evaluated through assays of contact, fumigation and ingestion toxicity. Besides that, the repellent effect was evaluated. In turn, the antimicrobial effect was evaluated through the determination of the minimum inhibitory and minimum bactericidal concentrations (MIC and MBC, respectively) using the phytopathogenic bacteria Acidovorax citrulli, Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum, Ralstonia solanacearum, Xanthomonas campestris pv. campestres, Xanthomonas campestris pv. malvacearum, Xanthomonas campestris pv. viticola. A total of 77 compounds were identified in the EO from C. rudolphianus, where the major compound was methyl chavicol (20,55%), following by (E)-caryophyllene (11,21%), bicyclogermacrene (10,23%) germacrene D (7,51%) and limonene (7,01%). The EO showed insecticidal activity against S. zeamais adults by contact (LC50 70.64 μL/mL), fumigation (the best mortality rate of 43,75% at 64 μL/L) and ingestion (LC50 107.26 μL/g). In addition, the oil exerted effects on nutritional parameters ( relative consumption rate and efficiency in conversion of ingested food) of insects and it was attractive to S. zeamais adults. EO of C. rudolphianus showed anti-phytopathogenic activity against five bacteria (Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum, Ralstonia solanacearum, Xanthomonas campestris pv. campestres, Xanthomonas campestris pv. malvacearum, Xanthomonas campestris pv. vitícola), with the best MIC and MBC values of 1,56 and 25 μL/mL (against Ralstonia solanacearum e Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum, respectively). These results showed that the C. rudolphianus oil is a potential alternative in the control of S. zeamais and phytopathogenic bacteria.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:34:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2096.pdf: 2883888 bytes, checksum: 14ee3b8f3f2831e4e82bdcea414da0f8 (MD5) Previous issue date: 2007-08-10 / Universidade Federal de Sao Carlos / This present thesis describes the development of analytical methodologies involving the HPLC-PDA-MS/MS coupling to verify the production of both polar and non-polar metabolites in orange trees produced by grafting Citrus sinensis onto Citrus limonea. By the use of such kind of method, it was possible to verify the production of both polymethoxy and glycosyl flavonoids. This method was then applied to plants with symptoms of two different diseases, Citrus Sudden Death (MSC) and Greening. Regarding this last disease, the methodologies were focused on detection of some analogous of benzoic acid like gentisic acid, orbicularin, salicylic acid and glycosyl salicylic acid. Another part of this work was focused on isolation and characterization of Alternariol (AOL) and Alternariol Monomethyl Ether (AME), mycotoxins produced in vitro by a phytopathogenic strain of Alternaria alternata and the molecule tenuazoic acid. These mycotoxins were also monitored using HPLC-DAD for 30 days in an attempt to find out a possible profile of their production. In addition, an analytical method involving HPLC-MS/MS was developed, validated and applied to quantify the amounts of AOL and AME in different parts of tangerines (i.e., on flavedo and on albedo tissues) with and without symptoms of Alternaria Brown Spot disease. The levels of such substances were about 17.4 ± 1.0 μg/kg of AOH and 3.5 ± 0.2 μg/kg of AME on flavedo. Some inhibition tests against Guinardia citricarpa, related to Black Spot disease, were also done with some isolated compounds. Five of these compounds showed to have 100% of inhibition in this test at concentration of 500 μg/mL: benzoic acid, 3,4,5-trimethoxibenzoic acid, 3,4-dimethoxibenzoic acid, and the glycosyl flavonoids naringin and rutin. / Este trabalho descreve o desenvolvimento de metodologias de análise para metabólitos polares e de polaridade intermediária presentes em laranjeiras provenientes da enxertia de Citrus sinensis sobre Citrus limonea usando HPLC-DAD-MS/MS. Através deste método, foram detectados flavonóides glicosilados e polimetoxilados. O método também foi aplicado na análise de plantas com sintomas da doença Morte Súbita dos Citros (MSC). Neste mesmo contexto foram analisadas plantas sadias e com sintomas da doença Greening com o objetivo de monitorar moléculas derivadas do ácido benzóico como o ácido gentísico, orbicularina, ácido salicílico e ácido salicílico glicosilado (ácido β-O-D glucosilsalicilico). Um outro estudo realizado neste trabalho tratou do isolamento e identificação das micotoxinas alternariol (AOH) e alternariol monometil éter (AME), além do ácido tenuazônio, produzidas in vitro pelo microrganismo fitopatogênico de citros Alternaria alternata. A produção destas micotoxinas foi monitorada através de HPLC-DAD ao longo de trinta dias de cultivo do microrganismo com a finalidade de construir uma curva de produção destas moléculas. Validou-se também um método usando HPLC-MS/MS para quantificar as micotoxinas AOH e AME nas cascas de tangerina (albedo e flavedo) com sintomas de mancha marrom de alternaria (MMA), onde encontrou-se 17.4 ± 1.0 μg/kg de AOH e 3.5 ± 0.2 μg/kg de AME no flavedo de tangerina. Por fim, foram realizados ensaios de inibição do fungo fitopatogênico de citros Guignardia citricarpa, causador da doença pinta preta, através do método de germinação de esporos em placa de poliestireno. As substâncias que apresentaram praticamente 100% de inibição foram dois derivados do ácido benzóico, o ácido 3,4,5-trimetoxibenzóico e o ácido 3,4-dimetoxibenzóico, e os flavonóides glicosilados naringina e rutina. Essas quatro substâncias, na concentração de 500 μg/mL, foram capazes de inibir por completo a germinação dos esporos de G. citricarpa.