Thèse : Médecine : Paris : 1873. / N° d'ordre : 370.

Thèse doctorat : Médecine. Orthopédie - Substituts osseux : Université de Nantes : 2004. / Bibliogr. f. 73-84 [96 réf.].

Reproduction de : Thèse d'exercice : Médecine. Dermato-vénéréologie : Nantes : 2008. / Bibliogr.

Le macrophage constitue l’un des mécanismes de défense cellulaire contre les pathogènes. Le rôle principal du macrophage est l’initiation ainsi que la résolution de l’inflammation lors d’infection. Notre laboratoire s’intéresse au CD200, une molécule anti-inflammatoire présente sur les macrophages. Certaines études ont montré que le CD200 est impliqué dans la résolution de l’inflammation. Notre hypothèse était qu’une absence de CD200 augmente les fonctions inflammatoires des macrophages dérivés de la moelle osseuse (BMDMs) ce qui pourrait être causé par une modulation de la différenciation des BMDMs. Pour ce faire, nous avons utilisé des BMDMs différenciés avec un facteur de stimulation des colonies de granulocytes et de macrophages (GM-CSF) pendant 9 jours à partir de moelle osseuse de rats Sprague Dawley déficients pour le CD200 (CD200 KO) (générés par notre équipe). L’impact de l’absence du CD200 sur la différenciation et l’activation des BMDMs par stimulation au lipopolyssaccharide (LPS) a été étudié. L’expression de molécules présentatrices d’antigènes a été mesurée par cytométrie en flux, la sécrétion de cytokines par ELISA et la phagocytose par essai fluorométrique avec Pseudomonas aeruginosa. Au cours de la différenciation, les BMDMs augmentent l’expression de CD200 et CD200R. L’absence du CD200 altère l’expression des molécules associées à la présentation d’antigènes (MHCII, CD80 et CD86) lors de la différentiation. Par contre, l’absence du CD200 n’affecte pas la phagocytose. De plus, l’absence du CD200 diminue la sécrétion de cytokines suite à une stimulation au LPS. Ces résultats sont associés à une diminution de la surexpression du Toll-like receptor 4(TLR-4), le récepteur du LPS. En conclusion, l’absence de CD200 module la différenciation des BMDMs in vitro et,contrairement à notre hypothèse, l’absence du CD200 sur les BMDMs limite l’expression des molécules présentatrices d’antigènes et la sécrétion de cytokines. Les mécanismes de réponse aux pathogènes que l’absence du CD200 affecte sont encore inconnus, mais pourraient impliquer la voie du TLR-4. / The first line of cell defense against pathogens is the macrophages. The main function of this cell is to be able to maintain immune homeostasis. The CD200 is an anti-inflammatory molecule expressed by on many cell types, including macrophages. Some studies have shown that the CD200-CD200R pathway is involved in the resolution of inflammation. Our hypothesis was that the absence of CD200 on bone marrow derived macrophages (BMDMs) will change their differentiation pattern and increase their inflammatory functions. BMDMs were differentiated from Sprague Dawley rat’s bone marrow with GM-CSF for 9 days, and the expression of CD200 and CD200R was measured by flow cytometry. The inflammatory response of BMDMs from wild type and CD200 knock out rats (generated by our team) was measured after LPS stimulation. The expression of molecules associated with antigen presentation was quantified by flow cytometry. Cytokine secretion was measured by ELISA and phagocytosis activity was measured by a fluorescence assay with Pseudomonas aeruginosa. BMDMs increased CD200 and CD200R expression during the differentiation process. The absence of CD200 altered the expression of antigen presentation molecules (MHCII, CD80 and CD86) during the differentiation, but did not modulate the phagocytosis function of BMDMs. In addition, CD200 KO BMDMs secreted lower levels of proinflammatory and anti-inflammatory cytokines following LPS exposition. These results are associated with a reduction of TLR-4 overexpression, the LPS receptor. In conclusion, CD200 deficiency modulates the differentiation process of BMDMs and limits the expression of markers associated with pathogen-presentation and cytokines secretion. The implication of CD200 absence in pathogens response mechanism is still unknow but could include markers from the TLR-4 pathway.

Thèse de doctorat : Sciences de la vie et de la santé. Neurosciences : Paris 12 : 2004. / Thèse électronique uniquement consultable au sein de l'Université Paris 12 (Intranet). Titre provenant de l'écran-titre. Bibliogr. f. 80-93.

Mémoire numérisé par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal.

Il est maintenant établi que les cellules souches mésenchymateuses (MSC), résident dans la même niche que les cellules souches hématopoïétiques (HSC), au sein de la moelle osseuse (MO). Il est connu que la pression en O2 (pO2) de la niche est inférieure à la normale, soit moins de 5% pO2 contre 12-15 % pO2 dans le sang artériel. Cette hypoxie a des conséquences sur le métabolisme, en protégeant les cellules contre le stress oxydatif et en favorisant leur caractère multipotent. Notre hypothèse est que les MSC cultivées en hypoxie devraient être plus proches de leur condition physiologique, donc plus multipotentes. Des MSC de la MO humaine ont été cultivées en pO2 de 21% et 5%. Leur morphologie, capacité de différenciation en ostéocytes et adipocytes, et transcriptome ont été comparés à différents passages. Nous avons observé un ralentissement de la prolifération à des temps précoces à pO2 5%, caractérisée par une inhibition de l'expression de gènes impliqués dans la réplication et le cycle cellulaire, puis une augmentation à des passages tardifs. Les gènes codant pour des molécules d'adhérence et de la matrice extracellulaire sont stimulés par l'hypoxie. A des temps tardifs, la capacité de différenciation des MSC est stimulée en hypoxie, les cellules présentent un aspect plus immature et une diminution de synthèse des mitochondries. Surtout, l'hypoxie stimule la synthèse de « gènes de la plasticité » suivant le logiciel « Gene Ontology », et de gènes impliqués dans le développement épithélial et neuronal. En conclusion, la culture des MSC de MO en hypoxie semble plus physiologique et pourrait être utile pour des applications en médecine régénératrice / It is now settled that mesenchymal stem cells (MSC), reside in the same microenvironment or niche than hematopoietic stem cells (HSC), within the bone marrow (BM). It is also known that the O2 tension (pO2) of the niche is below 5% as compared to 21% O2 in the air and 12-15% in the arterial blood. As developed in our recent review, this physiological hypoxia protects stem cells from oxidative stress and maintains their multipotential state. Our hypothesis is that MSC cultured in hypoxia should be closer to their physiological condition and therefore more "multipotent". MSC from human BM were cultured et 21% and at 5% pO2. Their morphology, their ability to differentiate into osteocytes and adipocytes, and their transcriptome were compared at different passages. We observed a decrease of proliferation rate in early times in hypoxia, characterized by inhibition of the expression of genes involved in cell replication and cell cycle, and an increase in later passages. Whatever the passage, the genes encoding adhesion molecules and extracellular matrix are stimulated by hypoxia. At later times, the ability of MSC differentiation is stimulated by hypoxia, the cells look to be more immature and show decreased synthesis of mitochondria. Indeed, hypoxia stimulates the synthesis of plasticity genes according to "Gene Ontology" (GO) terms, and of several genes involved in neuronal- and epithelial-cell development. In conclusion, the culture of MSC from BM in hypoxia seems to be more physiological and may be useful for regenerative medicine applications.

La présence synchrone de métastases hépatiques (MH) et carcinose péritonéale (CP)d'origine colorectale (CRC) est associée à une survie globale médiocre et est traditionnellement considérée comme une contre-indication à l’approche chirurgicale curative. Cependant, suite aux résultats encourageants après traitement chirurgicale, quelques séries ont rapporté une survie prolongée atteignant 3 ans chez des patients sélectionnés, ce qui suggère qu’un traitement chirurgicale curative est possible. À ce jour, en cas de chirurgie majeure hépatique et péritonéale associée, aucune stratégie thérapeutique n'a été établie, Nous avons postulé que la régénération hépatique après une résection hépatique pourrait favoriser la croissance de la CP. Nous avons construit un modèle animal immunnocompetent de CP limitée. L'objectif de l’étude était d'analyser les effets de l’hépatectomie majeure et de la régénération hépatique dans notre modèle murin de PC et le processus d'angiogenèse associé. En outre, nous avons analysée une cohorte prospective multicentrique de patients ayant eu une résection hépatique et une chirurgie cytoréductive avec HIPEC synchrone. L'objectif de cette étude était d'évaluer les outcomes et identifier les facteurs pronostiques afin d'optimiser la sélection des candidats au traitement chirurgical et de déterminer la stratégie chirurgicale optimale. / The synchronous presence of liver metastases (LM) and peritoneal carcinomatosis (PC)from colorectal cancer (CRC) is associated with poor outcome and is traditionally considered acontraindication to any surgical approach. However, few series reported a prolonged survival aftersurgical management, reaching 3 years in selected patients thus suggesting that a curative surgicalmanagement may be possible. To date, no standard management pathway has been established,especially if a major liver and peritoneal surgery has to be performed. We postulated that liverregeneration after liver resection could promote PC growth. We constructed an immunocompetentanimal model of limited PC. The objective of our study was to analyze the effects of major LR andliver regeneration after hepatectomy on peritoneal carcinomatosis growth and the associatedangiogenesis process. Furthermore, we have analyzed a prospective international cohort of patientsundergoing synchronous liver resection and cytoreductive surgery with HIPEC. The aim of this studywas to describe the outcomes, to identify variables potentially related to poor outcome, in order toestablish future guideline for the management of these patients, to optimize the selection of candidatesfor surgical treatment and determine the best surgical strategy.

Thèse de doctorat : Pharmacologie : Nancy 1 : 2008. / Titre provenant de l'écran-titre.

Thèse d'exercice : Médecine : Nancy 1 : 2009. / Titre provenant de l'écran-titre.