Cancer is one of the leading causes of death across the globe which needs appropriate and cost-effective treatment. Several recent studies have suggested that dietary intake of various flavonoids such as myricetin have a protective effect against different types of cancers and cardiovascular diseases. The present study was conducted to investigate the genoprotective and genotoxic effects of myricetin nano and bulk forms on the lymphocytes from pre-cancerous and multiple myeloma cancer patients compared to those from healthy individuals. Also, to investigate the protective potential of myricetin bulk and nano against the oxidative stress produced in vitro by 2- amino-1-methyl-6 phenylimidazo [4, 5-b] pyridine and reactive oxygen species- induced DNA damage using the Comet assay, micronucleus assay, cellular reactive oxygen species and glutathione detection assay, Western blotting, real-time polymerase chain reaction and immunofluorescence. Lymphocytes from the patient groups showed significantly higher levels of basal DNA damage compared to the lymphocytes from healthy individuals which was observed throughout the in vitro treatment. Myricetin in both forms has not induced any significant DNA damage in all of the investigative groups at selective lower concentrations; in fact, the results demonstrate a reduction in DNA damage upon treating with myricetin nano in lymphocytes from pre-cancerous patients demonstrated by significant reduction in micronuclei formation in mononucleated cells. DNA repair capacity of myricetin bulk and nano was determined by co-treating the drugs with hydrogen peroxide. Myricetin significantly reduced the oxidative stress related damage caused by hydrogen peroxide, where myricetin nano seemed to be more effective employing the Comet assay. In the presence of myricetin bulk and nano, the damaging effects of 2- amino-1-methyl-6 phenylimidazo [4,5-b] pyridine were considerably decreased, where myricetin nano was more effective. This could be because nanoparticles have a larger surface area which could improve their reactivity and also the reduction in size of the particles could improve the anti-cancer properties of this compound. Myricetin has shown genoprotective and anti-oxidant effects by demonstrating the potential to reduce DNA damage caused by over-production of reactive oxygen species and oxidative stress. It has also shown anti-cancer potential in the lymphocytes from multiple myeloma patients by regulating the apoptosis related proteins, dependent on oxidative stress. Therefore, this study suggests that myricetin supplementation in our regular diet with enhanced bioavailability could have potential health beneficial effects and possibly protect against various diseases including cancer.

Le myélome multiple (MM) est une hémopathie maligne de la lignée B qui se manifeste par <p>une accumulation de plasmocytes monoclonaux dans la moelle osseuse. Le MM se caractérise par <p>la nature inéluctable de ses rechutes de plus en plus réfractaires au traitement. Au sein de la moelle <p>osseuse, les cellules malignes interagissent avec leur microenvironnement notamment composé de <p>cellules stromales mésenchymateuses (CSM). Les CSM apportent un soutien aux cellules <p>plasmocytaires (PC) malignes via des interactions cellulaires directes (VLA-4, VCAM-1, CD44,…) <p>ou par la production de cytokines (IL-6, SDF1, VEGF,…). De ces interactions résulte l’apparition <p>d’altérations constitutives au sein des MM-CSM telles qu’une production réduite de dépôts de <p>calcium et une augmentation de la sécrétion de nombreux facteurs (IL-6, GDF-15, etc.). <p>L’objectif de ce travail est de mieux caractériser les anomalies constitutives (génomiques, <p>prolifératives, immunomodulatrices, etc.) des MM-CSM et d'évaluer l’impact des traitements reçus <p>par les patients sur ces anomalies. Ces analyses permettront de mieux définir le rôle des CSM dans <p>la physiopathologie et la progression de la maladie afin de mettre en évidence d’éventuelles cibles <p>thérapeutiques.<p>Compte tenu de l’altération de nombreux acteurs du cycle cellulaire mise en évidence par <p>notre analyse du profil d’expression génique des MM-CSM après comparaison avec celui des CSM <p>de donneurs sains (DS-CSM), nous avons décidé d’étudier leurs capacités prolifératives. Nos <p>observations démontrent que a) les MM-CSM sont caractérisées par une réduction de leur <p>clonogénicité et par un temps de doublement plus important par rapport aux DS-CSM b) l’entrée <p>précoce des MM-CSM en sénescence est confirmée par l'augmentation drastique du nombre de <p>cellules exprimant la « senescence-associated β-galactosidase », par l’augmentation de la taille <p>cellulaire, par l’expression spécifique de membres du « senescence-associated secretory profile » <p>(SASP) et par la surexpression de TP53 et TP21, deux facteurs importants du cycle cellulaire et de <p>la sénescence c) l’ostéoblastogenèse des MM-CSM est altérée en raison de ce processus de <p>sénescence, à savoir, une réduction de la production de calcium et une hausse précoce de l’activité<p>de la phosphatase alcaline des MM-CSM par rapport aux DS-CSM d) l’activité de support à <p>l’hématopoïèse des MM-CSM est augmentée (« increased Blast-Colony Forming Cells and LongTerm Culture Initiating Cells »). <p>Dans la seconde partie de ce travail, on s’est intéressée plus particulièrement aux capacités <p>immunomodulatrices des MM-CSM. Nous avons observé, par réaction mixte lymphocytaire et <p>stimulation mitogénique (PHA/IL-2), a) une réduction de l’inhibition de la prolifération des <p>lymphocytes T activés en présence de MM-CSM par rapport aux DS-CSM b) une inversion du ratio <p>Th17/Treg lorsque des lymphocytes T activés sont cultivés en présence de MM-CSM par rapport <p>aux DS-CSM ;les mécanismes potentiellement impliqués dans ces altérations ont été investigués c)<p>les MM-CSM présentaient une expression anormale du CD40/40L, VCAM1, ICAM-1, LFA-3 <p>HLA-DR et HLA-ABC et des taux d’IL-6 et d’IL-10 altérés ont été mesuré dans le milieu de <p>culture lorsque les lymphocytes T activés étaient cultivés en présence de MM-CSM par rapport aux <p>DS-CSM. <p>Nos résultats suggèrent que les MM-CSM entrent précocement en sénescence avec de <p>profondes altérations de leurs propriétés biologiques et notamment leur capacités <p>d'immunomodulation et de différenciation ostéogénique. Nous concluons que l’entrée en <p>sénescence des MM-CSM pourrait être à l’origine d’une altération du microenvironnement tumoral <p>qui favoriserait rechutes et résistances aux traitements. / Doctorat en Sciences biomédicales et pharmaceutiques / info:eu-repo/semantics/nonPublished