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Avaliação e utilidade dos biomarcadores não invasivos IFABP e REG1α no monitoramento da destruição e da regeneração do epitélio intestinal em pacientes celíacos antes e depois da dieta sem glúten

Uenishi, Rosa Harumi 21 August 2017 (has links)
Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2017. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2017-12-01T21:02:02Z No. of bitstreams: 1 2017_RosaHarumiUenishi.pdf: 2178926 bytes, checksum: b286410fea09f6f7919250fcbe6ded8e (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2018-02-07T16:48:37Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_RosaHarumiUenishi.pdf: 2178926 bytes, checksum: b286410fea09f6f7919250fcbe6ded8e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-02-07T16:48:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_RosaHarumiUenishi.pdf: 2178926 bytes, checksum: b286410fea09f6f7919250fcbe6ded8e (MD5) Previous issue date: 2018-02-07 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES). / CONTEXTO: A biópsia intestinal da atrofia vilositária provocada pelo glúten em pacientes com doença celíaca (DC) é solicitado para definir o diagnóstico, porém esse método invasivo pode ser dispensado em crianças com os valores de IgA-tTG dez vezes acima do ponto de corte. Os biomarcadores não invasivos para constatar a lesão da mucosa intestinal denominados IFABP e Reg1α podem ser úteis no diagnóstico, no monitoramento da DC e nos casos de IgA deficiente. Sendo a IFABP detectada na destruição dos enterócitos e a Reg1α, regeneração desses. OBJETIVO: Avaliar os níveis séricos de IFABP e Reg1α em pacientes DC ao diagnóstico (DC-glúten) e os mesmos DC em tratamento (DC-GFD) e verificar o desempenho desses biomarcadores. MÉTODO: Nível sérico de IFABP e Reg1α foram testados em 55 pacientes DC coletados em épocas distintas, antes (DC-glúten) e depois do tratamento (DC-GFD). Os pacientes realizaram biópsia intestinal apenas na época do diagnóstico. A análise sorológica foi feita pelo teste ELISA para exames IFABP, Reg1α e IgA-tTG e exame de imunofluorescência indireta para IgA-EMA. A análise estatística utilizada para determinar a diferença entre os grupos foram teste t com posttest de Wilcoxon e curva ROC. Os dados foram considerados estatisticamente significativos quando p<0,05. RESULTADO: Detectou-se a nível sérico IFABP (p<0,001; 2.112,2pg/mL±1.035,9 versus 1.457,4pg/mL±660,5) e Reg1α (p<0,001; 838,4ng/L±687,9 versus 648,7ng/L±558,4). O desempenho dos biomarcadores IFABP (p<0,001) com AUC 0,70 (95% IC: 0,60 a 0,80) e Reg1α (p=0,26) com AUC 0,56 (95% IC: 0,45 a 0,66). CONCLUSÃO: Houve diferença entre os grupos DC ao diagnóstico e DC em tratamento nos níveis séricos dos biomarcadores IFABP e Reg1α. Entretanto ao verificar o desempenho dos exames a IFABP demonstrou ser regular e a Reg1α, ineficiente. / BACKGROUND: Intestinal biopsy of gluten-induced villous atrophy in patients with celiac disease (DC) is required to define diagnosis, but this invasive method may be dispensed in children with IgA-tTG ten times over the cut off value. Noninvasive biomarkers for detecting intestinal mucosal lesion called IFABP and Reg1α may be useful in diagnosis, monitoring of CD and in cases of IgA deficient. Since IFABP is detected in the destruction of enterocytes and Reg1α, regeneration of these. OBJECTIVE: To evaluate the serum levels of IFABP and Reg1α in DC patients at diagnosis (DC-gluten) and the same DC in treatment (DC-GFD) and to verify the performance of these biomarkers. METHOD: Serum level of IFABP and Reg1α were tested in 55 DC patients collected at different times, before and after treatment. The patients underwent intestinal biopsy only at the time of diagnosis. Serological analysis was performed by ELISA test for IFABP, Reg1α and IgA-tTG and indirect immunofluorescence test for IgA-EMA. The statistical analysis used to determine the difference between pared groups were t-test, followed by Wilcoxon posttest and ROC curve. Data were considered statistically significant when p<0,05. RESULTS: Serum levels of IFABP (p<0,001; 2.112,2pg/mL±1.035,9 versus 1.457,4pg/mL±660,5) and Reg1α (p<0,001; 838,4ng/L±687,9 versus 648,7 ng/L±558,4) were detected. The IFABP performance (p<0,001) with AUC 0,70 (95% CI: 0,60 to 0,80) and Reg1α (p=0,26) with AUC 0,56 (95% CI: 0,45 to 0,66). CONCLUSION: There was a difference between the DC groups at the diagnosis and the CD being treated in the serum levels of the biomarkers IFABP and Reg1α. However, when checking the performance of the tests, the IFABP was regular and the Reg1α was inefficient.
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Medidor não invasivo de alta tensão, tempo e exposição em aparelhos de raios x

Laan, Flavio Tadeu van der January 1996 (has links)
Neste trabalho, propõe-se desenvolver um medidor para controle de qualidade em RX diagnóstico, que permite medidas rápidas de alta tensão, tempo e exposição em aparelhos de RX, de modo não invasivo, baseado na leitura frontal do feixe. A unidade é composta de dois diodos fotovoltaicos como transdutores, amplificadores de corrente, como condicionadores de sinais e de um sistema de aquisição e processamento, para o tratamento do sinal digital. 0 medidor permite a medida da alta tensão de pico (kVp), taxa de exposição (R/min), e do tempo de exposição (s) em aparelhos de RX, na faixa de 50 a 150 kVp. As medidas são realizadas num sistema microprocessado, programadas por teclado e apresentadas num display alfanumérico. São memorizadas e transferidas a um microcomputador por meio de uma saída serial / This work contains a development of an instrument for non invasive as well fast measurement of essential parameters related to quality control of X-ray equipment's using only the frontal reading of the beam intensity. The unit is composed of a data acquisition system for reading two Photovoltaic diodes sensor, for measurement of Peak Kilovoltage (kVp), Exposure Rate (R/min) and Exposure Time (s) of the x-ray equipment. The measurements are performed with microprocessed instrumentation, with programmed keyboard ability, alphanumeric display, memory data storage and serial output to microcomputer connection.
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Medidor não invasivo de alta tensão, tempo e exposição em aparelhos de raios x

Laan, Flavio Tadeu van der January 1996 (has links)
Neste trabalho, propõe-se desenvolver um medidor para controle de qualidade em RX diagnóstico, que permite medidas rápidas de alta tensão, tempo e exposição em aparelhos de RX, de modo não invasivo, baseado na leitura frontal do feixe. A unidade é composta de dois diodos fotovoltaicos como transdutores, amplificadores de corrente, como condicionadores de sinais e de um sistema de aquisição e processamento, para o tratamento do sinal digital. 0 medidor permite a medida da alta tensão de pico (kVp), taxa de exposição (R/min), e do tempo de exposição (s) em aparelhos de RX, na faixa de 50 a 150 kVp. As medidas são realizadas num sistema microprocessado, programadas por teclado e apresentadas num display alfanumérico. São memorizadas e transferidas a um microcomputador por meio de uma saída serial / This work contains a development of an instrument for non invasive as well fast measurement of essential parameters related to quality control of X-ray equipment's using only the frontal reading of the beam intensity. The unit is composed of a data acquisition system for reading two Photovoltaic diodes sensor, for measurement of Peak Kilovoltage (kVp), Exposure Rate (R/min) and Exposure Time (s) of the x-ray equipment. The measurements are performed with microprocessed instrumentation, with programmed keyboard ability, alphanumeric display, memory data storage and serial output to microcomputer connection.
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Medidor não invasivo de alta tensão, tempo e exposição em aparelhos de raios x

Laan, Flavio Tadeu van der January 1996 (has links)
Neste trabalho, propõe-se desenvolver um medidor para controle de qualidade em RX diagnóstico, que permite medidas rápidas de alta tensão, tempo e exposição em aparelhos de RX, de modo não invasivo, baseado na leitura frontal do feixe. A unidade é composta de dois diodos fotovoltaicos como transdutores, amplificadores de corrente, como condicionadores de sinais e de um sistema de aquisição e processamento, para o tratamento do sinal digital. 0 medidor permite a medida da alta tensão de pico (kVp), taxa de exposição (R/min), e do tempo de exposição (s) em aparelhos de RX, na faixa de 50 a 150 kVp. As medidas são realizadas num sistema microprocessado, programadas por teclado e apresentadas num display alfanumérico. São memorizadas e transferidas a um microcomputador por meio de uma saída serial / This work contains a development of an instrument for non invasive as well fast measurement of essential parameters related to quality control of X-ray equipment's using only the frontal reading of the beam intensity. The unit is composed of a data acquisition system for reading two Photovoltaic diodes sensor, for measurement of Peak Kilovoltage (kVp), Exposure Rate (R/min) and Exposure Time (s) of the x-ray equipment. The measurements are performed with microprocessed instrumentation, with programmed keyboard ability, alphanumeric display, memory data storage and serial output to microcomputer connection.
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Noninvasive prenatal test for detection of genetic diseases using next-generation sequencing / Teste pré-natal não invasivo para detecção de doenças genéticas utilizando sequenciamento de nova geração

Silva, Carolina Malcher Amorim de Carvalho 09 August 2017 (has links)
Since 2011 the prenatal diagnosis field has undergone a revolution with the introduction of a noninvasive prenatal test (NIPT) for genetic diseases relying on analysis of fetal cell-free DNA present in maternal plasma. Although available in Brazil, we rely on outsourcing the technology developed abroad or the test itself. Therefore, our objective was to develop and implement a comprehensive NIPT using high-coverage targeted next-generation sequencing to: 1) estimate fetal fraction; 2) determine fetal sex; 3) detect trisomy; 4) detect monogenic disease. We developed a robust and accurate model (r2= 0.994, p-value < 2.2e-16) for fetal fraction estimation based on distribution of SNP minor allele fraction (MAF). We used Z-score for fetal sex determination (100% accuracy) and trisomy detection of chromosomes 21 (T21) and 18 (T18), achieving a sensitivity of 100% (95% CI: 63.06% - 100.00%) and a specificity of 98.53% (95% CI: 92.08% - 99.96%) for T21, and 40% (95% CI: 5.27% - 85.34%) and 98.59% (95% CI: 92.40% - 99.96%) for T18. For monogenic disease detection (skeletal dysplasia) we performed variant analysis, with 71% (5/7) of detection rate. To our knowledge, this is the first work to integrate all analysis in one single test, and to perform monogenic disease detection without using parental genotype. We showed in this work that it is possible to implement such techniques in our country, using available resources and/or engaging in collaboration with reference research groups abroad. It shows the potential of developing internal technologies, and applying it to other noninvasive fields, such as cancer and organ rejection diagnostic and monitoring / Desde 2011 a área de diagnóstico pré-natal sofreu uma revolução com a introdução de teste pré-natal não-invasivo (NIPT) de doenças genéticas, que se baseia na análise de DNA fetal livre de células presente no plasma materno. Apesar de estar disponível no Brasil, nós dependemos em terceirizar a tecnologia desenvolvida no exterior, ou o teste em si. Sendo assim, nosso objetivo foi desenvolver e implementar um teste NIPT abrangente utilizando sequenciamento de nova geração de alta cobertura targeted para: 1) estimar fração fetal; 2) determinar sexo fetal; 3) detectar trissomia; 4) detectar doença monogênica. Nós desenvolvemos um modelo robusto e preciso (r2= 0.994, p-value < 2.2e-16) para estimativa de fração fetal baseado na distribuição da fração alélica de SNPs. Nós utilizamos Z-score para determinação de sexo fetal (100% de precisão) e detecção de trissomia dos cromossomos 21 (T21) e 18 (T18), atingindo uma sensibilidade de 100% (95% IC: 63.06% - 100.00%) e especificidade de 98.53% (95% IC: 92.08% - 99.96%) para T21, e 40% (95% IC: 5.27% - 85.34%) e 98.59% (95% IC: 92.40% - 99.96%) para T18. Para detecção de doença monogênica (displasia esquelética) nós realizamos análise de variante, com uma taxa de detecção de 71% (5/7). Até onde sabemos, este é o primeiro trabalho a integrar todas as análises em um único teste, e a realizar detecção de doença monogênica sem utilizar genótipo parental. Nós mostramos neste trabalho que é possível implementar essas técnicas no nosso país, utilizando recursos disponíveis e/ou desenvolvendo colaborações com grupos referência internacionais. Isto demonstra o potencial de desenvolver tecnologias internas, e aplicá-las à outras áreas não-invasivas, como diagnóstico e monitoramento de câncer e rejeição de transplante
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AVALIAÇÃO LABORATORIAL E MONITORAÇÃO NÃO INVASIVA DA PRESSÃO INTRACRANIANA EM CRIANÇAS COM PNEUMONIA

Ravski, Leandro Aparecido 22 February 2016 (has links)
Made available in DSpace on 2017-07-21T14:13:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Leandro Aparecido Ravski.pdf: 4617218 bytes, checksum: e0fe68e5c3e65a36aaefc7a187e57e8b (MD5) Previous issue date: 2016-02-22 / Pneumonia is an acute disease characterized by inflammation of the lung parenchyma tissue.It is a respiratory disease with the highest incidence in the world. There are approximately 150 million cases in children under 5 years each year, and approximately 2 million result in death. In pneumonia, the damage to the lung tissue occurs due to the release of reactive oxygen species, causing increased oxidative stress due to the formation of free radicals. In the search for new alternatives to assist in the diagnosis of pneumonia, the assessment of possible variations in intracranial pressure (ICP) compared to pulmonary infection can be of great importance. Researchers have developed a new ICP measurement system completely noninvasive,which changed the course of history of neuroscience. This work aims to bring new data to the scientific community, characterizing normal PIC waves to a group of healthy children and investigating possible changes in children diagnosed with pneumonia. This study included 96 volunteers, divided into two groups: Test (hospitalized children diagnosed with pneumonia) and control (healthy children). There was the realization of the following laboratory tests: blood count, biochemical tests, inflammatory markers, serum total antioxidant capacity and catalase activity. In addition to the completion of the ICP monitoring with the use of new non-invasive technology. There was a significant increase in blood glucose, the inflammatory parameters in hematological parameters (total leukocytes, neutrophils, rods and targeted) and total serum antioxidant capacity of the test group. Urea, creatinine, total protein, albumin, total cholesterol, HDL, LDL, hemoglobin and hematocrit were significantly decreased in the test group. Although there was no statistical difference between the groups in terms of PIC. Our study showed the PIC's behavior in children, identifying changes in both groups, showing no direct relationship with pneumonia. This study served to introduce this innovative monitoring unit pic completely non-invasive, which has revolutionized the neuromedicina without the need for trepanation of the skull, can now be studied without any population risks to volunteer study. / A pneumonia é uma doença aguda, caracterizada pela inflamação do parênquima do tecido pulmonar. É a doença respiratória de maior incidência no mundo. Ocorrem aproximadamente 150 milhões de casos em crianças menores de 5 anos a cada ano, e aproximadamente 2 milhões resultam em morte. Na pneumonia, o dano ao tecido pulmonar ocorre devido à liberação das espécies reativas do oxigênio, causando aumento do estresse oxidativo, devido à formação de radicais livres. Na busca de novas alternativas para auxiliar no diagnóstico da pneumonia, a avaliação de possíveis variações na pressão intracraniana (PIC) frente à infecção pulmonar pode ter grande importância. Pesquisadores desenvolveram um novo sistema de aferição da PIC totalmente não invasivo, que alterou o curso da história da neurociência. Este trabalho tem o objetivo de trazer novos dados à comunidade científica, caracterizando ondas de PIC normais para um grupo de crianças sadias e investigando possíveis alterações em crianças diagnosticadas com pneumonia. Este estudo incluiu 96 voluntários, divididos em dois grupos: Teste (crianças internadas diagnosticadas com pneumonia) e Controle (crianças saudáveis). Houve a realização dos seguintes exames laboratoriais: hemograma, dosagens bioquímicas, marcadores inflamatórios, capacidade antioxidante total do soro e atividade da catalase. Além da realização do monitoramento da PIC com a utilização da nova tecnologia não invasiva. Ocorreu aumento significativo na glicemia, nos parâmetros inflamatórios, nos parâmetros hematológicos (leucócitos totais, neutrófilos, bastonetes e segmentados) e na capacidade antioxidante total do soro para o grupo Teste. Uréia, creatinina, proteínas totais, albumina, colesterol total, HDL, LDL,hemoglobina e hematócrito foram significativamente diminuídos no grupo Teste. Ainda houve diferença estatística entre os grupos na análise da PIC. Nosso estudo mostrou o comportamento da PIC em crianças, identificando alterações nos dois grupos estudados, não demonstrando relação direta com a pneumonia. Este estudo serviu para introduzir este inovador aparelho de monitoramento da PIC, totalmente não invasivo, que vem revolucionando a neuromedicina, sem a necessidade de trepanação do crânio, podendo agora, qualquer população ser estudada sem riscos ao voluntário do estudo.
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Rastreamento não invasivo para diabetes tipo 2 / The type 2 diabetes screening

Ribeiro, Áurea Celeste da Costa 07 August 2015 (has links)
Submitted by Rosivalda Pereira (mrs.pereira@ufma.br) on 2017-06-12T18:38:51Z No. of bitstreams: 1 AureaRibeiro.pdf: 891843 bytes, checksum: d5cc513c7bcc492d7dce1b74bc679b9f (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-12T18:38:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AureaRibeiro.pdf: 891843 bytes, checksum: d5cc513c7bcc492d7dce1b74bc679b9f (MD5) Previous issue date: 2015-08-07 / The type 2 diabetes screening has become an important resource due to the increase in this disease in the modern world, it is estimated that there are 385 millions of diabetics in worldwide and that 46% of this number are unaware of their condition. This complicates their treatment and many patients at diagnosis already present any complications due to lack this in the early stages of diabetes. Researchers have discussed the e ectiveness of type 2 diabetes screening, for example: The Brazil made a screening in 2001 and it was considered an unnecessary cost of almost 40 million. The tracking of type 2 diabetes has become an important resource due to the large increase in this disease in the modern world, it is estimated that there are 385 million diabetics worldwide and that 46% of this number are unaware of their condition. This complicates their treatment and many patients the diagnosis already present any complications due to lack this in the early stages of diabetes. There were discussions about the effectiveness of screening for type 2 diabetes, in Brazil for example, the last scan was considered unnecessary cost of almost 40 million. Simplest and most effective methods of screening are studied, such as the US and China that use some non-invasive methods to calculate the risk of diabetes. This study proposes a non-invasive screening method based on eficient coding technique to extract features of a Brazilian database (HIPERDIA) to form a new concise representation thereof, with the decrease of redundancy. The main hypothesis worked at this stage was the pursuit of independent components, which possibly it were present at the formation of the disease. Thus, the original data were decomposed by the independent component analysis method. In the classification stage to ensure discrimination between classes was used the method of support vector machines for one class. Tests were done to check the performance of the classifier after the feature extraction phase, and showed that it increases the performance of support vector machine to one class in making the discrimination between diabetics and non-diabetics. Results were reached (100%) with the combination of certain characteristics, and the method shows promise in obtaining a non invasive type 2 diabetes screening. Other tests were done to determine the influence of each non invasive marker in the final result and the generality of the method using other databases, as t of the Pima Indians and African Americans data sets. Then, reducing the number of features used to train the method and testing whether all possible combinations among the remaining, removing one by one, a total of 12,910 possibilities. It was observed the characteristics or markers that most affected the final outcome were age and characteristics related to body fat. Testing the generality of the method in other databases found that the method works best with balanced data set. / O rastreamento do diabetes tipo 2 tornou-se um recurso importante devido ao grande aumento desta doença no mundo moderno, estima-se que haja 385 milhões de diabéticos no mundo e que 46% deste número desconhece sua condição. Isto dificulta seu tratamento e muitos pacientes no diagnóstico já apresentam alguma complicação devido a falta deste nos estágios iniciais da diabetes. Haviam discussões sobre a efetividade do rastreamento para diabetes tipo 2, no Brasil por exemplo, o último rastreamento teve um custo considerado desnecessário, de quase 40 milhões de reais. Métodos mais simples e eficazes de rastreio são estudados, como nos EUA e China que utilizam alguns métodos não invasivos para calcular o risco de diabetes. Este estudo propõe um método de rastreamento não invasivo baseado na técnica de codificação e ciente para extrair características de uma base de dados brasileira(HIPERDIA) para formar uma nova representação concisa destes, com a diminuição de redundância. A principal hipótese trabalhada nesta fase foi a busca das componentes independentes, que possivelmente estiveram presentes na formação da doença. Desta forma, os dados originais foram decompostos pelo método de análise de componentes independentes. Na fase de classificação para assegurar a discriminação entre as classes utilizou-se o método de maquinas de vetores de suporte para uma classe. Testes foram feitos para verificar o desempenho do classificador após à fase de extração de características, e mostraram que ela aumenta o desempenho da máquina de vetor de suporte para uma classe em fazer a discriminação entre diabéticos e não diabéticos. Alcançou-se resultados de (100%)com a combinação de certas características, e o método demonstra a promessa em obter-se um rastreamento de diabetes não invasivo confiável. Outros testes foram feitos para verificar a influência de cada marcador não invasivo no resultado final e a generalidade do método utilizando outras bases de dados, como a base de índios Pima e de americanos de origem africana. Diminuindo o número de características utilizadas para treinar o método e testando-se todas as possibilidades de combinações entre as restantes, retirando-se uma a uma, com um total de 12.910 possibilidades. Observou-se as características que mais afetavam no resultado final foram idade e as características relacionadas com a gordura corporal. Testando-se a generalidade do método em outras bases de dados verificou-se que o método trabalha melhor com bases balanceadas.
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Análise e melhoria de um sistema não invasivo de monitoramento da pressão intracraniana / Analysis and improvement of a non-invasive intracranial pressure monitoring system

Andrade, Rodrigo de Albuquerque Pacheco 03 October 2013 (has links)
A Pressão intracraniana (PIC) é um dos principais parâmetros fisiológicos em animais e humanos e sua morfologia é extremamente importante. Entretanto, todos os métodos de monitoramento existentes no mercado são invasivos, existindo uma ampla demanda por sistemas não invasivos, expandindo assim o campo de pesquisas acerca desse importante parâmetro neurológico, que só não é melhor estudado devido a forma invasiva de ser monitorado. A motivação é fazer com que o monitoramento da PIC seja tão comum e tão essencial quanto é hoje o monitoramento da pressão arterial, facilitando o diagnóstico e até prognóstico de diversas doenças. Este trabalho analisa e implementa melhorias de um sistema não invasivo de monitoramento da pressão intracraniana, baseado em extensometria. Um dos objetivos, no que tange o desenvolvimento do produto, é analisar o equipamento como um todo - Sensor, Hardware, Firmware e Software - e propor melhorias a partir dos testes realizados. Os testes realizados In vivo mostraram uma boa correlação do sinal com um sistema Gold Stardard, evidenciando o potencial promissor do método. / The intracranial pressure (ICP) is one of the main physiological parameters in animals and humans and its morphology is extremely important. However, all monitoring methods available in the market are invasive and there is a large demand for non-invasive systems, thus expanding the scope of research on this important neurological parameter, that just is not further studied because of the invasive method of monitoring. The motivation is to make monitoring the ICP as common and as essential, as monitoring the blood pressure is nowadays, facilitating diagnosis and even prognosis of various diseases. This work analyzes and implements improvements in a non-invasive intracranial pressure monitoring system based on extensometer. One of the goals, regarding product development, is to analyze the unit as a whole- Sensor, Hardware, Firmware and Software- and propose improvements from the tests. The in vivo tests showed a good correlation with a Gold Stardard system signal showing the promising potential of the method.
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Estudo endócrino-reprodutivo, não invasivo de ararajubas, Guaruba guarouba (Gmelin, 1788), mantidas em cativeiro / Endocrine-reproductive non-invasive study in golden conures, Guaruba guarouba (Gmelin, 1788), kept in captivity

Sinhorini, Juliana Anaya 27 June 2013 (has links)
O estudo endócrino-reprodutivo com o uso da extração e dosagem de metabólitos de esteroides em excretas tem sido proposta como uma ferramenta extremamente útil por não ser invasiva e permitir estudos longitudinais com grande número de coletas de amostras sem produzir estresse, além de ser viável em psitacídeos. Assim, este estudo objetivou descrever e comparar as concentrações de metabólitos de glicocorticoides, testosterona, estrógeno e progesterona em excretas de ararajubas em diferentes categorias reprodutivas, com o uso de técnicas não invasivas, além de validar fisiologicamente os ensaios para dosagens desses metabólitos em excretas da espécie. Para isso, foram utilizadas 24 (vinte e quatro) ararajubas, das quais foram coletados excretas durante diferentes fases reprodutivas, sendo: sem atividade reprodutiva, em atividade de incubação de ovos e em atividade de postura de ovos. Além disso, foram feitos desafios com aplicação de ACTH e GnRH, para validação dos ensaios. Como resultados, obtivemos picos de concentração de metabólitos de glicocorticoides após aplicação de ACTH e picos de concentração de metabólitos de testosterona nos machos após aplicação do GnRH, validando fisiologicamente os ensaios para mensurar estes metabólitos hormonais; os ensaios para mensurar metabólitos de estrógeno e progesterona foram validados biologicamente. Foram observados valores semelhantes de metabólitos de glicocorticoides entre as diferentes categorias reprodutivas, porém diferentes nos metabólitos de testosterona, estrógeno e progesterona, com valores maiores durante postura (testosterona e estrógeno), e maiores na postura com relação aos animais sem atividade reprodutiva (progesterona). / The endocrine and reproductive study using the extraction and quantification of metabolites of steroids in excreta has been proposed as an extremely useful tool for being non-invasive and allow longitudinal studies with large numbers of samples collected without producing stress, and is feasible in parrots. Thus, this study aimed to describe and compare the concentrations of metabolites of glucocorticoids, testosterone, estrogen and progesterone in the excretes golden conures in different reproductive categories, with the use of non-invasive techniques, and validate physiologically assays for determination of these metabolites in the excreta species. For this, we used 24 (twenty four) golden conures, which excreta were collected during different reproductive phases, as follows: no reproductive activity, activity in the incubation of eggs and egg-laying activity. Additionally, challenges were performed with application of ACTH and GnRH for validation tests. We observed peak concentrations of glucocorticoid metabolites after administration of ACTH and peak concentrations of metabolites of testosterone in males after application of GnRH, physiologically validating assays to measure these hormone metabolites; tests to measure metabolites of estrogen and progesterone were biologically validated. Values of glucocorticoid metabolites were similar between different reproductive categories, but between metabolites of testosterone, estrogen and progesterone were different, with higher values during posture (testosterone and estrogen), and higher in posture toward animals without reproductive activity (progesterone) .
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Monitoramento não invasivo da ciclicidade ovariana em Lycalopex vetulus / Non-invasive monitoring of ovarian cyclicity in Lycalopex vetulus

Candeias, Isis Zanini das 28 November 2014 (has links)
Devido as atuais mudanças globais é esperado que um grande número de espécies necessitem de uma integração de ações dentro e fora do seu ambiente natural para a conservação. O bioma cerrado é um dos ecossistemas mais ricos em biodiversidade, mas devido a ação antrópica, resta menos de 20% de sua cobertura vegetal original. A Raposinha do Campo (Lycalopex vetulus) é um canídeo de pequeno porte (2,5-4kg) endêmico do cerrado do Brasil central e está presente na lista dos animais ameaçados de extinção do Estado de São Paulo. Não existe em literatura uma descrição detalhada do ciclo estral desta espécie. O presente estudo teve como objetivo caracterizar a ciclicidade ovariana de Lycalopex vetulus com o uso de método não-invasivo: Extração e mensuração de metabólitos fecais de progesterona e estradiol, com o uso da técnica de enzimaimunoensaio, verificando também a possível existência de diferenças mensais entre as médias das concentrações dos referidos metabólitos em um período de 12 meses. Foram utilizadas 8 fêmeas, adultas, presentes em cinco instituições no estado de São Paulo, onde foram coletadas fezes 3 vezes por semana de cada indivíduo, durante 12 meses, para a extração e mensuração dos metabólitos de progesterona, estradiol e corticosterona. Os perfis das excreções dos metabólitos fecais dos hormônios sexuais de 6 das 8 fêmeas, foram muito semelhantes, sendo período de maior atividade reprodutiva entre os messes de julho, agosto e setembro, ocorrendo mais de um ciclo ovulatório dentro desse período. Nos outros meses do ano, apesar de algumas variações acima da linha basal, não foram encontrados indícios de atividade reprodutiva. De acordo com essas características, semelhante entre a maioria das fêmeas do estudo, podemos sugerir que a raposa-do-campo seja poliestrica sazonal, com atividade reprodutiva ocorrendo nos meses de julho, agosto e setembro. Esses achados são muito próximos do visualizado em populações de vida livre, onde acasalamentos são observados entre junho e julho. O perfil de excreção dos metabólitos fecais de glicocorticóides segue o mesmo padrão observado para os metabólitos de progesterona e estradiol, com um aumento mais significativo da excreção nos meses de julho, agosto e setembro. Esses resultados indicam que além da grande quantidade de estressores que podem alterar a excreção de glicocorticóides, também deve-se considerar a flutuação sazonal e o status reprodutivo do indivíduo ao avaliar as concentrações de metabólitos de glicocorticóides. Duas fêmeas, que dividem o mesmo recinto, não apresentaram um padrão de ciclicidade reprodutiva. Os resultados obtidos nesse estudo indicam que a dosagem de metabólitos fecais de progesterona e estradiol podem ser usadas para diferenciar o período reprodutivo do período não reprodutivo em fêmeas de Lycalopex vetulus, fornecendo informações importantes sobre a biologia reprodutiva da espécie, o que pode contribuir no desenvolvimento de estratégias para a conservação desta espécie, como por exemplo aumentar o sucesso reprodutivo ex situ. / Due to the current global changes is expected that a large number of species require an integration of actions inside and outside their natural environment for them conservation. The cerrado is one of the richest ecosystems in biodiversity, but due to human action, there remains less than 20% of its original vegetation cover. The Hoary fox (Lycalopex vetulus) is a small canid (2,5-4kg) endemic of the cerrado from the central Brazil and is present in the list of endangered species in the state of São Paulo. It was not found in literature any detailed description of the estrous cycle of this species. The present study aimed to characterize ovarian cyclicity in Lycalopex vetulus using a noninvasive method: Extraction and measurement of fecal metabolites of estradiol and progesterone, using the technique of enzymeimmunoassay, It was also verified the possible differences between the monthly mean concentrations of these metabolites in a period of 12 months. 8 captive adult females, were studied in five different institutions in the state of São Paulo, where feces were collected three times per week for each individual for 12 months for extraction and measurement of metabolites of progesterone, estradiol and glucocorticoids. The profile of the concentration of fecal metabolites of sexual hormones from 6 of 8 females was very similar, being the period of major reproductive activity between the months of July, August and September, with the occurrence of more than one ovulatory cycle within that period. In the others months of the year, despite some variations above the baseline, no evidence of reproductive activity were found. According to these characteristics, similar in most females of the study, we can suggest that the hoary fox is seasonal polyestrous with reproductive activity occurring in the months of July, August and September. These findings are very close to the observed in wild populations, where mating is observed between June and July. The profile of excretion of fecal glucocorticoid metabolites follows the same pattern observed for the metabolites of progesterone and estradiol, with a more significant increase in excretion in the months of July, August and September. These results indicate that besides the large amount of stressors that can alter the excretion of glucocorticoids also it must be considered the seasonal fluctuation and the reproductive status of the individual to evaluate the levels of glucocorticoids. Two females, who share the same captivity, did not show a pattern of reproductive cyclicity. The results of this study indicate that the dosage of fecal metabolites of estradiol and progesterone can be used to differentiate the reproductive period of non-reproductive period in females of Lycalopex vetulus, providing important information about the reproductive biology, which may contribute to the development of the species conservation strategies, such as increasing the reproductive ex situ success.

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