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Regulation of Canonical and Non-canonical NF kappa B Signalling in Lymphocytes by the Bcl10-MALT1 ComplexTusche, Michael Walter 01 September 2010 (has links)
The NF kappa B family of heterodimeric transcription factors is activated by many stimuli, and lead to the upregulation of countless genes. Not surprisingly, NF kappa B plays a critical role in many aspects of cellular function. In T and B lymphocytes, antigen receptor stimulation leads to the activation of NF kappa B through a signal transduction cascade involving the Bcl10-MALT1 complex. We hypothesized that this complex may be critical to signalling cascades other than those emanating from antigen receptors. B cell activation factor of the TNF family (BAFF) activates non-canonical NF kappa B heterodimers that promote B cell survival. Here, we show that MALT1 is required for BAFF-induced phosphorylation of NF kappa B2 (p100), p100 degradation and RelB nuclear translocation in B220+ B cells. TRAF3, a known negative regulator of BAFF-R mediated signaling, interacts with MALT1 in a manner which is negatively regulated by BAFF, and TRAF3 levels are enhanced in MALT1-/- B cells. MALT1-/- CD21highCD23low (MZ) B cells show a defect in BAFF-induced survival and MALT1-/- x BAFF-transgenic (Tg) mice have decreased MZ and B1 B cell levels compared to BAFF-Tg mice. In agreement with this in vitro data, phenotypes associated with over-expression of BAFF including increased serum immunoglobulin titres, spontaneous germinal center (GC) formation, and immune complex deposition in the kidney were found to be dependent on B cell-intrinsic MALT1 expression. Our results demonstrate a novel role for MALT1 in biological outcomes induced by BAFF-mediated signal transduction.
The mechanism by which the Bcl10-MALT1 complex regulates antigen induced NF kappa B activation in T cells remains controversial. To shed light on this regulatory network, we conducted biochemical purification of Bcl10, and identified Uev1a, a known regulator of antigen receptor mediated NF kappa B activation. We hypothesized that mms2, and structurally similar molecule to Uev1a, may also impinge on NF kappa B activation. Mms2 overexpression in 293T cells inhibited the Bcl10-induced activation of an NF kappa B sensitive luciferase. Lymphocyte development and antigen receptor induced activation occurs normally mms2-/- mice. However, class switched serum immunoglobulins, and survival responses to DNA damage inducing gamma-irradiation, are decreased in mms2-/- mice. Therefore, mms2 is dispensible in vivo for lymphocyte function and development, but is required for DNA damage responses.
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Regulation of Canonical and Non-canonical NF kappa B Signalling in Lymphocytes by the Bcl10-MALT1 ComplexTusche, Michael Walter 01 September 2010 (has links)
The NF kappa B family of heterodimeric transcription factors is activated by many stimuli, and lead to the upregulation of countless genes. Not surprisingly, NF kappa B plays a critical role in many aspects of cellular function. In T and B lymphocytes, antigen receptor stimulation leads to the activation of NF kappa B through a signal transduction cascade involving the Bcl10-MALT1 complex. We hypothesized that this complex may be critical to signalling cascades other than those emanating from antigen receptors. B cell activation factor of the TNF family (BAFF) activates non-canonical NF kappa B heterodimers that promote B cell survival. Here, we show that MALT1 is required for BAFF-induced phosphorylation of NF kappa B2 (p100), p100 degradation and RelB nuclear translocation in B220+ B cells. TRAF3, a known negative regulator of BAFF-R mediated signaling, interacts with MALT1 in a manner which is negatively regulated by BAFF, and TRAF3 levels are enhanced in MALT1-/- B cells. MALT1-/- CD21highCD23low (MZ) B cells show a defect in BAFF-induced survival and MALT1-/- x BAFF-transgenic (Tg) mice have decreased MZ and B1 B cell levels compared to BAFF-Tg mice. In agreement with this in vitro data, phenotypes associated with over-expression of BAFF including increased serum immunoglobulin titres, spontaneous germinal center (GC) formation, and immune complex deposition in the kidney were found to be dependent on B cell-intrinsic MALT1 expression. Our results demonstrate a novel role for MALT1 in biological outcomes induced by BAFF-mediated signal transduction.
The mechanism by which the Bcl10-MALT1 complex regulates antigen induced NF kappa B activation in T cells remains controversial. To shed light on this regulatory network, we conducted biochemical purification of Bcl10, and identified Uev1a, a known regulator of antigen receptor mediated NF kappa B activation. We hypothesized that mms2, and structurally similar molecule to Uev1a, may also impinge on NF kappa B activation. Mms2 overexpression in 293T cells inhibited the Bcl10-induced activation of an NF kappa B sensitive luciferase. Lymphocyte development and antigen receptor induced activation occurs normally mms2-/- mice. However, class switched serum immunoglobulins, and survival responses to DNA damage inducing gamma-irradiation, are decreased in mms2-/- mice. Therefore, mms2 is dispensible in vivo for lymphocyte function and development, but is required for DNA damage responses.
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Screening for activators of NF-[kappa]B using Sleeping Beauty TransposonsDasgupta, Maupali. January 2008 (has links)
Thesis (Ph. D.)--Kent State University, 2008. / Title from PDF t.p. (viewed July 17, 2008). Advisor: George R. Stark. Keywords: NF-[kappa]B, RIP1, Transposons, TNF, Insertional Mutagenesis. Includes bibliographical references (p. 115-134).
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Study of the intracellular function of the Salmonella enterica serovar Typhimurium type III secretion effector SspH1 /Haraga, Andrea. January 2005 (has links)
Thesis (Ph. D.)--University of Washington, 2005. / Vita. Includes bibliographical references (leaves 78-87).
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The role of the transcription factor NF-kappa B in hepatocyte proliferation and apoptosis /Chaisson, Michelle L. January 2001 (has links)
Thesis (Ph. D.)--University of Washington, 2001. / Vita. Includes bibliographical references (leaves 81-96).
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Acetaminophen-induced proliferation of estrogen-responsive breast cancer cells is associated with increased c-mcy RNA expression and NF-kB activityGadd, Samantha. January 2001 (has links)
Thesis (Ph. D.)--West Virginia University, 2001. / Title from document title page. Document formatted into pages; contains xi, 147 p. : ill. (some col.). Vita. Includes abstract. Includes bibliographical references (p. 128-143).
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NF-kB in epidermal signal transduction and tumor development /Hogerlinden, Max van, January 2002 (has links)
Diss. (sammanfattning) Stockholm : Karol. inst., 2002. / Härtill 4 uppsatser.
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Nuclear factor-kappa B (NF-[kappa]B) activation in human monocytes induced by endotoxin of Porphyromonas gingivalis a thesis submitted in partial fulfillment ... for the degree of Master of Science in Periodontics ... /Yamashita, Junro. January 2004 (has links)
Thesis (M.S.)--University of Michigan, 2004. / Includes bibliographical references.
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Caractérisation des facteurs de transcription impliqués dans l'expression génique de cytokines chez les neutrophiles humainsCloutier, Alexandre January 2009 (has links)
Les neutrophiles représentent une composante fondamentale du système immunitaire. En effet, il est bien connu qu'ils sont essentiels à la défense de l'organisme contre les agressions microbiennes. En plus de leurs fonctions anti-microbiennes classiques, les neutrophiles, via la sécrétion de cytokines (incluant les chimiokines), jouent un rôle prépondérant dans l'initiation et la modulation de la réponse immunitaire. Lors d'une infection ou d'une blessure, les neutrophiles agissent à titre de premier répondant et migrent rapidement au site de l'aggression. La production rapide de cytokines par les neutrophiles permet le recrutement additionnel de neutrophiles au site inflammatoire et celui d'autres populations leucocytaires, tout en modulant les fonctions de ces dernières. La génération de cytokines par les neutrophiles est induite par une vaste gamme de stimuli: agonistes d'origine microbienne, facteurs chimiotactiques, cytokines, chimiokines et facteurs de croissance. Ces signaux inflammatoires induisent l'activation de nombreuses voies de signalisation menant ultimement à l'activation de facteurs transcriptionnels. L'expression des gènes de cytokines inflammatoires doit être finement régulée afin qu'il y ait une production adéquate de ces médiateurs. Elle repose, en grande partie, sur le recrutement de facteurs transcriptionnels capables de se lier à des séquencescibles sur les promoteurs de ces gènes.Les travaux présentés dans cette thèse portent sur l'identification des facteurs de transcription impliqués, ainsi que des sentiers de signalisation en amont, dans l'expression de gènes encodant des cytokines chez le neutrophile humain. Dans le premier chapitre de la section résultats, nous avons montré que l'expression génique des cytokines dépend fortement de l'activation du facteur de transcription NF-[kappa]B. Celui-ci contrôle l'expression inductible de tous les gènes étudiés. De plus, nous avons montré que la génération de ces cytokines chez les neutrophiles dépend fortement de l'activation des voies p38 MAP kinases (aux niveaux transcriptionnel et traductionnel) et MEK/ERK (au niveau traductionnel seulement). Dans le deuxième chapitre, nous avons étudié l'expression et la localisation des différents facteurs de transcription de la famille C/EBP, de même que l'activation de C/EBP[bêta] via sa phosphorylation en Thr 235 chez les neutrophiles humains. Grâce à la surexpression d'un répresseur des C/EBP (A-C/EBP2N3T) chez les cellules PLB-985 granulocytiques, nous avons montré l'importance de la famille de C/EBP dans la production de MIP-1[alpha], de MIP-1[bêta] et d'IL-8 chez les neutrophiles humains.Les facteurs C/EBP ne semblent toutefois pas impliqués dans la production de TNF-[alpha] par ces cellules. La surexpression d'un mutant de C/EBP[bêta] (C/EBP[bêta] T235A) chez ces mêmes cellules nous a par ailleurs permis de déterminer que la phosphorylation de cet acide aminé est essentielle à la production des chimiokines MIP-1[alpha], MIP-1[bêta] et IL-8. Nous démontrons enfin une association constitutive de C/EBP[bêta] et de C/EBP[epsilon] avec le promoteur de l'IL-8 chez les neutrophiles primaires humains. Un des éléments déclencheurs de la transcription de ce gène serait probablement l'induction de la phosphorylation de C/EBP[bêta] sur les promoteurs géniques. Enfin, dans le troisième chapitre de la section résultats, nous explorons le rôle de la MAPK p38 dans la production de cytokines chez les neutrophiles. Nous y identifions quelques-uns de ses substrats impliqués dans la transcription et la traduction de cytokines inflammatoires. Ainsi, nous avons determiné que la MAPK p38 participe à l'activation des facteurs de transcription C/EBP[bêta] et CREB, probablement via l'activation des kinases MSK-1 et RSK. Nous avons également établi l'impact de la phosphorylation de la Ser 133 de CREB sur la production de cytokines chez les neutrophiles humains. Finalement, nous avons documenté l'activation de la kinase MNK1 par la MAPK p38, et son rôle dans la régulation traductionnelle des cytokines. L'ensemble de ces travaux a permis d'identifier des molécules-clés dans la génération de cytokines, plus particulièrement de chimiokines, chez le neutrophile humain. Nos travaux ont donc contribué de manière substantielle à nos connaissances des mécanismes transcriptionnels et traductionnels gouvernant l'expression de gènes précoces chez le neutrophile. Nos résultats permettront en outre l'identification de cibles thérapeutiques potentielles qui pourraient servir à atténuer l'inflammation chronique observée dans de nombreuses pathologies où les neutrophiles prédominent.
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Nouveau mécanisme de régulation de l'apoptose par les récepteurs couplés aux protéines GIorio-Morin, Christian January 2013 (has links)
L’apoptose est un processus dont l’importance physiologique et pathophysiologique est de mieux en mieux appréciée. Si plusieurs mécanismes expliquant son initiation et son exécution ont été décrits, les détails de sa régulation fine restent à être précisés. Par ces travaux, nous démontrons une interaction directe entre la protéine pro-apoptotique Siva1 et la queue C-terminale de plusieurs récepteurs couplés aux protéines G, incluant TP, IP, PAF, AT?R et CHRM3. Pour TP, nous prouvons que la stimulation du récepteur par le U46619 entraîne une translocation et une accumulation cytoplasmique de Sival, ainsi qu’une modulation de ses interactions avec Mdm2, XIAP et TRAF2, résultant en une induction de l’apoptose. Nous rapportons également que l’expression de Siva1 potentialise l’ubiquitinylation de TP en réponse à une stimulation et que cette ubiquitinylation n’affecte ni la dégradation, ni l’internalisation du récepteur. Nous démontrons par ailleurs que la stimulation de TP diminue l’expression totale d’i?B?, l’inhibiteur principal de la voie NF?B et que cet effet corrèle avec le niveau d’expression de Siva1. En démontrant l’existence d’un complexe entre TP et TRAF2 suite à une stimulation réceptorielle, nous proposons que la modulation NF?B par TP pourrait résulter d’une signalisation dépendant de l’ubiquitine et analogue à celle des TNFR. D’autre part, nous présentons une interaction entre Siva1 et l’arrestine et apportons des données suggérant que l’expression de Siva1 pourrait moduler l’activation des MAPK. Nous proposons finalement un modèle réconciliant les fonctions anti- et pro-apoptotiques de TP et dans lequel le phénotype final d’une stimulation dépendrait de l’expression relative de Siva1. Les corolaires de ce modèle pourraient possiblement bonifier la prise en charge d’incidents ischémiques comme l’infarctus du myocarde ou l’accident vasculaire cérébral, et améliorer le traitement du cancer par une diminution de la toxicité d’agents chimiothérapeutiques et l’amélioration de la sensibilité tumorale.[symboles non conformes]
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