Made available in DSpace on 2015-12-10T14:22:44Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-08-28. Added 1 bitstream(s) on 2015-12-10T14:28:56Z : No. of bitstreams: 1 000853894.pdf: 932709 bytes, checksum: 0fe73496b79c388c307c277adca72273 (MD5) / Introdução:O Carcinoma de Nasofaringe(CNF) é uma neoplasia epitelial maligna agressiva, com principal incidência entre homens de 40-60 anos de idade, com distribuição geográfica e étnica variada. Está associado à infecção pelo Epstein- BarrVirus (EBV), e a presença deste nas células tumorais parece ter impacto no prognóstico. Porém, outros fatores que podem estar relacionados ao desfecho do CNF, têm sido pesquisados. O biomarcador IMP3, proteína de ligação ao mRNA que tem reconhecida função na ação das células tumorais, vem sendo analisado como um marcador factível correlacionado com a sobrevida global nos pacientes com câncer. Métodos: Para explorar a expressão do IMP3 nas amostras tumorais de pacientes com CNF vistos no Hospital das Clinicas da Faculdade de Medicina de Botucatu- UNESP, foram compilados 35 prontuários e documentados de acordo com as características morfológicas e tempo de sobrevida. A expressão imunohistoquímica foi mensurada e correlacionada com os diversos parâmetros clínicopatológicos. Conclusão: mostrou-se elevado índice de recidiva e morbimortalidade, com grande número de casos avançados ao diagnóstico, e potencial correlação de melhor prognóstico com a alta expressão do marcador analisado. Impacto: Um melhor entendimento do IMP3 comobiomarcador, proporcionando novas perspectivas no prognóstico do carcinoma de nasofaringe / Background: The nasopharyngeal carcinoma (NPC) is an agressive malignant epithelial neoplasm, mainly prevalent among 40-60-year-old men, with varied geographic and ethnic distribution. It is associated with Epstein Barr Virus (EBV), whose presence in the tumor cell seems to impact the prognosis. However, other factors that may be related to NPC's clinical impact and have been studied. The IMP3 biomarker, a mRNA binding protein, which has a recognized role in the tumor cell formation, has been analized as a feasible marker correlated to the overall survival of cancerpatients. Given this evidence, the object of this research isanalyze possible correlation of this biomarker to the clinical out come of these patients. Methods: To explore the IMP3 expression in the CNF patients' tumor samples seen at the Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina in Botucatu- UNESP, were compiled 35 cases and documented in basis of their morphological features and status of life. The immunohistochemical expression was measured and correlated with the several clinic-pathologic parameters. Results: The analysis showed high rates of relapse and mortality, also a significant number of local advanced tumors at diagnosis, and potential correlation of better prognosis with the high expression of the biomarkeranalized. Impact: A betterunderstandingof IMP3 as a biomarker, providing new routesofprognosis in nasopharynx carcinoma

Made available in DSpace on 2015-12-10T14:23:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-07-14. Added 1 bitstream(s) on 2015-12-10T14:29:32Z : No. of bitstreams: 1 000854732.pdf: 3835428 bytes, checksum: 4cf17ee516a8e0b0badde61a0f9d3d5c (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O vírus de Epstein-Barr (Epstein-Barr virus - EBV) infecta latentemente mais de 90% da população humana. A infecção viral está associada ao desenvolvimento de alguns cânceres, incluindo o carcinoma de nasofaringe. Alguns estudos sugerem a contribuição na evasão imune e progressão dos cânceres causados pelo EBV. Diferentes variantes da proteína latente de membrana 1 (LMP1), principal produto do EBV, são discriminadas, principalmente, por variações nos domínios transmembrana e carboxi-terminais da proteína. O domínio C-terminal de LMP1 é capaz de ativar vias de sinalização intracelular que regulam os fenômenos de migração e invasão celular. Adicionalmente, induz síntese de produtos que degradam a matriz extracelular e favorecem a angiogênese. Até o momento, não se sabe se diferentes variantes de LMP1 apresentam propriedades distintas no que se refere a esses fenômenos do escape imune e progressão tumoral. Assim sendo, no presente estudo avaliamos a influência das variantes de LMP1 sobre a capacidade de migração e invasão celular in vitro e a imunomodulação de HLA-ABC e HLA-DR, CD80, CD83, CD54, CD40 e PD-L1 nas linhagens celulares HEK293T e NP69. Observamos que as variantes Alaskan, Med+, China 1 e China 2 induziram a migração celular da linhagem NP69 de maneira distinta quando comparadas entre si e com a célula sem LMP1. Observamos, também, maior capacidade de invasão celular das células HEK293T-China 2 em comparação à HEK293T. Com relação à expressão de moléculas envolvidas na modulação da resposta imune, observamos que a transfecção de LMP1 aumentou a expressão de CD80 e CD83 apenas nas células NP69-Alaskan, e de CD54 e PD-L1 de maneira similar nas células NP69-LMP1. Conclui-se, portanto, que LMP1 promove migração distinta das células NP69-LMP1 e invasão de células HEK293T-China 2, e modula a expressão de moléculas envolvidas no escape imunológico / The Epstein-Barr virus (EBV) latently infects more than 90% of human adults. Viral infection is associated to the development of some cancers, including nasopharyngeal carcinoma. Oncogenic potential of the virus is usually studied in terms of its capacity to transform the infected cells nevertheless some studies suggest that the EBV infection may also contribute to immune evasion, and cancer progression. Several latent membrane protein 1 (LMP1) variants are described, discriminated mainly by variations in its C-terminal and the transmembrane domains of the protein. LMP1 C-terminal domain activate intracellular signaling pathways that regulated cell migration; moreover, LMP1 upregulate the expression of cell proteins with roles in extracellular matrix remodeling and angiogenesis. Currently it is unknown whether different LMP1 variants possess distinct properties regarding biological phenomena relevant to immune evasion, and cancer progression. Thus, in the present study we evaluated the in vitro migration and invasiveness, and immunomodulation of HLA-ABC, HLA-DR, CD80, CD83, CD54, CD40, and PD-L1 of HEK293T cells, and NP69 cells. We observed that Alaskan, Med+, China 1, and China 2 stimulates distinctly migration of NP69 when compared to cell without LMP1. We also saw that HEK293T-China 2 had a pronounced cellular invasion when compared to HEK293T. In regard of expression of molecules involved in immune response modulation, we observed that LMP1 enhanced expression of CD80, and CD83 in NP69-Alaskan cells; and CD54, and PD-L1 in a similar level in NP69-LMP1 cells. In summary, LMP1 promote distinct cellular migration in NP69LMP1 cells, and HEK293T-China 2 invasion, and is capable of modulate molecules involved in immune evasion

Orientador: Maria Aparecida Custódio Domingues / Coorientador: Vitor Nakajima / Banca: Maria Luiza Cotrim Sartor de Oliveira / Banca: Alexandre Todorovic Fabro / Banca: Abina Altemani / Resumo: Introdução:O Carcinoma de Nasofaringe(CNF) é uma neoplasia epitelial maligna agressiva, com principal incidência entre homens de 40-60 anos de idade, com distribuição geográfica e étnica variada. Está associado à infecção pelo Epstein- BarrVirus (EBV), e a presença deste nas células tumorais parece ter impacto no prognóstico. Porém, outros fatores que podem estar relacionados ao desfecho do CNF, têm sido pesquisados. O biomarcador IMP3, proteína de ligação ao mRNA que tem reconhecida função na ação das células tumorais, vem sendo analisado como um marcador factível correlacionado com a sobrevida global nos pacientes com câncer. Métodos: Para explorar a expressão do IMP3 nas amostras tumorais de pacientes com CNF vistos no Hospital das Clinicas da Faculdade de Medicina de Botucatu- UNESP, foram compilados 35 prontuários e documentados de acordo com as características morfológicas e tempo de sobrevida. A expressão imunohistoquímica foi mensurada e correlacionada com os diversos parâmetros clínicopatológicos. Conclusão: mostrou-se elevado índice de recidiva e morbimortalidade, com grande número de casos avançados ao diagnóstico, e potencial correlação de melhor prognóstico com a alta expressão do marcador analisado. Impacto: Um melhor entendimento do IMP3 comobiomarcador, proporcionando novas perspectivas no prognóstico do carcinoma de nasofaringe / Abstract: Background: The nasopharyngeal carcinoma (NPC) is an agressive malignant epithelial neoplasm, mainly prevalent among 40-60-year-old men, with varied geographic and ethnic distribution. It is associated with Epstein Barr Virus (EBV), whose presence in the tumor cell seems to impact the prognosis. However, other factors that may be related to NPC's clinical impact and have been studied. The IMP3 biomarker, a mRNA binding protein, which has a recognized role in the tumor cell formation, has been analized as a feasible marker correlated to the overall survival of cancerpatients. Given this evidence, the object of this research isanalyze possible correlation of this biomarker to the clinical out come of these patients. Methods: To explore the IMP3 expression in the CNF patients' tumor samples seen at the Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina in Botucatu- UNESP, were compiled 35 cases and documented in basis of their morphological features and status of life. The immunohistochemical expression was measured and correlated with the several clinic-pathologic parameters. Results: The analysis showed high rates of relapse and mortality, also a significant number of local advanced tumors at diagnosis, and potential correlation of better prognosis with the high expression of the biomarkeranalized. Impact: A betterunderstandingof IMP3 as a biomarker, providing new routesofprognosis in nasopharynx carcinoma / Mestre

Orientador: Deilson Elgui de Oliveira / Coorientador: Ramon Kaneno / Banca: Flávia Karina Delella / Banca: Bryan Eric Strauss / Resumo: O vírus de Epstein-Barr (Epstein-Barr virus - EBV) infecta latentemente mais de 90% da população humana. A infecção viral está associada ao desenvolvimento de alguns cânceres, incluindo o carcinoma de nasofaringe. Alguns estudos sugerem a contribuição na evasão imune e progressão dos cânceres causados pelo EBV. Diferentes variantes da proteína latente de membrana 1 (LMP1), principal produto do EBV, são discriminadas, principalmente, por variações nos domínios transmembrana e carboxi-terminais da proteína. O domínio C-terminal de LMP1 é capaz de ativar vias de sinalização intracelular que regulam os fenômenos de migração e invasão celular. Adicionalmente, induz síntese de produtos que degradam a matriz extracelular e favorecem a angiogênese. Até o momento, não se sabe se diferentes variantes de LMP1 apresentam propriedades distintas no que se refere a esses fenômenos do escape imune e progressão tumoral. Assim sendo, no presente estudo avaliamos a influência das variantes de LMP1 sobre a capacidade de migração e invasão celular in vitro e a imunomodulação de HLA-ABC e HLA-DR, CD80, CD83, CD54, CD40 e PD-L1 nas linhagens celulares HEK293T e NP69. Observamos que as variantes Alaskan, Med+, China 1 e China 2 induziram a migração celular da linhagem NP69 de maneira distinta quando comparadas entre si e com a célula sem LMP1. Observamos, também, maior capacidade de invasão celular das células HEK293T-China 2 em comparação à HEK293T. Com relação à expressão de moléculas envolvidas na modulação da resposta imune, observamos que a transfecção de LMP1 aumentou a expressão de CD80 e CD83 apenas nas células NP69-Alaskan, e de CD54 e PD-L1 de maneira similar nas células NP69-LMP1. Conclui-se, portanto, que LMP1 promove migração distinta das células NP69-LMP1 e invasão de células HEK293T-China 2, e modula a expressão de moléculas envolvidas no escape imunológico / Abstract: The Epstein-Barr virus (EBV) latently infects more than 90% of human adults. Viral infection is associated to the development of some cancers, including nasopharyngeal carcinoma. Oncogenic potential of the virus is usually studied in terms of its capacity to transform the infected cells nevertheless some studies suggest that the EBV infection may also contribute to immune evasion, and cancer progression. Several latent membrane protein 1 (LMP1) variants are described, discriminated mainly by variations in its C-terminal and the transmembrane domains of the protein. LMP1 C-terminal domain activate intracellular signaling pathways that regulated cell migration; moreover, LMP1 upregulate the expression of cell proteins with roles in extracellular matrix remodeling and angiogenesis. Currently it is unknown whether different LMP1 variants possess distinct properties regarding biological phenomena relevant to immune evasion, and cancer progression. Thus, in the present study we evaluated the in vitro migration and invasiveness, and immunomodulation of HLA-ABC, HLA-DR, CD80, CD83, CD54, CD40, and PD-L1 of HEK293T cells, and NP69 cells. We observed that Alaskan, Med+, China 1, and China 2 stimulates distinctly migration of NP69 when compared to cell without LMP1. We also saw that HEK293T-China 2 had a pronounced cellular invasion when compared to HEK293T. In regard of expression of molecules involved in immune response modulation, we observed that LMP1 enhanced expression of CD80, and CD83 in NP69-Alaskan cells; and CD54, and PD-L1 in a similar level in NP69-LMP1 cells. In summary, LMP1 promote distinct cellular migration in NP69LMP1 cells, and HEK293T-China 2 invasion, and is capable of modulate molecules involved in immune evasion / Mestre