Submitted by Daniele Amaral (daniee_ni@hotmail.com) on 2016-09-26T18:11:59Z No. of bitstreams: 1 DissLMC.pdf: 1097178 bytes, checksum: d229b0a750a3a0e2c2e07472d02d468b (MD5) / Approved for entry into archive by Marina Freitas (marinapf@ufscar.br) on 2016-10-04T17:55:01Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DissLMC.pdf: 1097178 bytes, checksum: d229b0a750a3a0e2c2e07472d02d468b (MD5) / Approved for entry into archive by Marina Freitas (marinapf@ufscar.br) on 2016-10-04T17:55:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DissLMC.pdf: 1097178 bytes, checksum: d229b0a750a3a0e2c2e07472d02d468b (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-04T17:55:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DissLMC.pdf: 1097178 bytes, checksum: d229b0a750a3a0e2c2e07472d02d468b (MD5) Previous issue date: 2015-05-22 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Bees are social insects of fundamental importance to the environment, because they are responsible for pollinating more than 70% of existing agricultural crops in the world. Brazil is the country with the highest number of described species, with representatives of most families. Among representatives of the Apidae family, is the Melipona scutellaris specie, commonly known as "uruçu" or "uruçu do Nordeste”, it is easy to handling and very well adapted to the climate of the state of São Paulo. However, due to the intensive use of pesticides, native bees are suffering the consequences, because, although they are not the target of insecticides, are highly vulnerable to contamination. Among the insecticides developed in the 90s, the neonicotinoids and fipronil have been identified as the main substances involved in collapse, and were suspended in 2013 in the European Union for two years for best evaluation. These insecticides are often used simultaneously, so bees can be contaminated with both molecules. Due to this fact, the aim of this study was determine the median lethal time (LT50) of fipronil and imidacloprid insecticides separately and synergistically on forage bees of M. scutellaris. For this, was obtained only the LD50 and LC50 of imidacloprid, according to the rules of the OECD, because values of fipronil were established by Lourenço et al. (2012a, 2012b). The LD50 of imidacloprid obtained was 2.41 ng a.i. / bee (24 hours) and 1.29 ng a.i./ bee (48 hours). The LC50 value found was 2.01 ng a.i./μL diet (24 hours) and 0.81 ng a.i./μL diet (48 hours). These data indicate that M. scutellaris specie is more sensitive to the insecticide imidacloprid that A. mellifera africanized. From these values, was obtained the LT50 based on topical and oral contamination of fipronil and imidacloprid insecticides and also these substances acting together. The results showed that fipronil has LT50 greater than imidacloprid. When acted in combination to LT50 presented intermediate values between the LT50 fipronil and imidacloprid, isolated. Then, according to the values obtained, there was not synergy, but a decrease in the toxicity of imidacloprid. / As abelhas são insetos sociais de fundamental importância ao meio ambiente já que são responsáveis pela polinização de mais de 70% das culturas agrícolas existentes no mundo. O Brasil é o país com maior número de espécies descritas, com representantes da maioria das famílias. Entre os representantes da família Apidae, está a espécie Melipona scutellaris, conhecida popularmente como “uruçu” ou “uruçu do nordeste”, abelha de fácil manejo e muito bem adaptada ao clima do estado de São Paulo. Porém, devido à intensa utilização de agrotóxicos, as abelhas nativas vêm sofrendo as consequências, já que, embora não sejam o alvo de inseticidas, são altamente vulneráveis à contaminação. Entre os inseticidas desenvolvidos na década de 90, o fipronil e os neonicotinóides têm sido apontados como as principais substâncias envolvidas nos colapsos, tendo sido suspensos em 2013 na União Europeia por dois anos para melhor avaliação. Esses inseticidas muitas vezes são utilizados simultaneamente, e por isso as abelhas podem ser expostas a ambas as moléculas. Devido a tal fato, o objetivo desse trabalho foi estabelecer o tempo letal médio (TL50) dos inseticidas fipronil e imidacloprido de forma isolada e de forma combinada sobre as abelhas forrageiras de M. scutellaris. Para isso, obteve-se a DL50 e CL50 apenas do imidacloprido, conforme as normas da OECD, já que para o fipronil esses valores foram estabelecidos por Lourenço et al. (2012a, 2012b). A DL50 do imidacloprido obtida foi 2,41 ng i.a./abelha, para 24 horas e 1,29 ng i.a./abelha, para 48 horas. O valor de CL50 desta mesma substância encontrado foi 2,01 ng i.a./μL dieta, para 24 horas e 0,81 ng i.a./μL dieta, para 48 horas. Esses dados indicam que a espécie M. scutellaris é mais sensível ao inseticida imidacloprido que A. mellifera africanizada. A partir desses valores, obtivemos a TL50 baseada na contaminação tópica e oral dos inseticidas fipronil e imidacloprido e também dessas substâncias agindo juntas. Os resultados apresentaram que o fipronil possui TL50 maior que o imidacloprido. Quando agiram de forma combinada a TL50 apresentou valores intermediários entre a TL50 do fipronil e do imidacloprido, isolados. Então, de acordo com os valores obtidos, não ocorreu sinergismo e sim uma diminuição da toxicidade apresentada pelo imidacloprido.

Orientador: Osmar Malaspina / Resumo: As abelhas Apis mellifera africanizadas são consideradas importantes polinizadores no Brasil, uma vez que muitas culturas de alimentos dependem da polinização promovida por esses insetos. No entanto, com o crescimento da produtividade agrícola houve aumento do uso de agrotóxicos para o controle de pragas, os quais podem atingir também insetos não-alvo. Com a ação dos inseticidas como uma das possíveis causadoras da morte massiva desses polinizadores, pesquisas sobre o impacto dos agrotóxicos em abelhas receberam destaque. Diante do exposto, o presente estudo propôs investigar os efeitos de uma dose subletal de tiametoxam (TMX) (0,0227 ng de ingrediente ativo/μl de alimento), importante inseticida da classe dos neonicotinóides, no cérebro e no intestino de Apis mellifera africanizadas, por meio da avaliação da atividade de biomarcadores enzimáticos de exposição e de estresse oxidativo e pela ocorrência de peroxidação lipídica. O nível de estresse celular também foi investigado pela imunomarcação das proteínas de choque térmico HSP70 e HSP90 em conjunto com a detecção de morte celular pelo ensaio de TUNEL (Terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling). Os dados mostraram que, no cérebro, o TMX aumentou a atividade de acetilcolinesterase (AChE) em 1, 3 e 5 dias de exposição, enquanto a carboxilesterase (CaE) diminuiu no primeiro dia e a glutationa s-transferase (GST) aumentou no quinto dia. Por sua vez, as enzimas antioxidantes foram menos atuantes no cérebro, se... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Africanized Apis mellifera bees are considered important pollinators in Brazil, since many food crops depend on the pollination by these insects. However, with the growth of agricultural productivity there has been an increase in the use of insecticides for pest control, which also can reach non-target insects. With the action of insecticides as one of the possible causes of the massive death of these pollinators, the studies of the effects of pesticides on bees were highlighted. Given the context, the present study aimed to investigate the effects of a sub lethal dose of thiamethoxam - TMX (0.0227 ng of active ingredient / μl of food), a insecticide of the class of neonicotinoids, in the brain and intestine of Africanized Apis mellifera, through the evaluation of the activity of enzymatic biomarkers of exposure and of oxidative stress and by the occurrence of lipid peroxidation. The level of cell stress was also investigated by the immunostaining of the HSP70 and HSP90 proteins together with the detection of cell death by the TUNEL (Terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling) assay. The data showed that, in the brain, TMX increased acetylcholinesterase activity (AChE) at 1, 3 and 5 days of exposure, while carboxylesterase (CaE) decreased on the first day and glutathione s-transferase (GST) increased in the fifth day. On the other hand, antioxidant enzymes were less active in the brain, and only glutathione peroxidase (GPX) showed increased activity on the f... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor