Submitted by Cássia Santos (cassia.bcufg@gmail.com) on 2015-02-06T10:04:11Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Andréia de Souza Gonçalves - 2014.pdf: 1517359 bytes, checksum: 5b0389aea64b9b32f1ae83e69d872ece (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-02-19T12:08:08Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Andréia de Souza Gonçalves - 2014.pdf: 1517359 bytes, checksum: 5b0389aea64b9b32f1ae83e69d872ece (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-02-19T12:08:09Z (GMT). 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The techniques of immunohistochemistry and Enzyme- Linked Immunosorbent Assay (ELISA) were used. The results revealed, with the immunohistochemistry technique, that expression of HLA-G by tumor cells was significantly higher in metastatic OCSCC (n=30) (72% of samples) when compared with non-metastatic OCSCC (n=30) (28% of samples) (P=0.01 ). Moreover, patients with a lower expression of HLA-G presented a tendency to survival longer (22 months) when compared with those with a higher expression of the molecule (16 months). With reference to other clinicopathological parameters analyzed, only the presence of lymph node metastasis (P=0.01) and depth of tumor invasion (P=0.02) were significantly associated with the expression of HLA-G. By ELISA technique, we showed that the salivary concentration of soluble HLA-G provided no differentiation between patients with OCSCC from healthy individuals, since there was no statistically significant difference between the analyzed groups (P=0.17). The findings of this study revealed that high expression of HLA-G in the microenvironment of metastatic OCSCC may represent a tumor escape mechanism which contributes to lower survival and an unfavorable clinical prognosis. However, concentration of soluble HLA-G in saliva of patients with OCSCC is similar to healthy individuals; thereby sHLA-G does not represent a salivary biomarker prognostic. / O HLA-G é uma molécula do Complexo Principal de Histocompatibilidade (MHC) de classe I não-clássica que exerce efeito inibidor em células imunocompetentes que são fundamentais no desenvolvimento de uma resposta antitumoral. Nesse contexto, o objetivo deste estudo foi avaliar a expressão do HLA-G no microambiente do carcinoma espinocelular (CEC) de cavidade oral, bem como a relação dessa molécula com parâmetros clínicos e microscópicos de prognóstico. Além disso, objetivou-se comparar a concentração salivar de HLA-G solúvel (HLA-Gs) nos pacientes com CEC de cavidade oral com indivíduos saudáveis (grupo controle). Técnicas de imunoistoquímica e ensaio imunoenzimático (ELISA) foram utilizadas. Os resultados revelaram, com a técnica de imunoistoquímica, que a expressão de HLA-G pelas células neoplásicas foi significativamente maior nos casos de CEC de cavidade oral metastático (n=30) (72% das amostras) quando comparado ao CEC não-metastático (n=30) (28% das amostras) (P=0,01). Em adição, pacientes com uma menor expressão de HLA-G apresentaram uma tendência para um maior período de sobrevida (22 meses) em comparação aqueles com uma maior expressão da molécula (16 meses). Com referência aos outros parâmetros clínicopatológicos analisados, evidenciou-se que somente a presença de metástase linfonodal (P=0,01) e profundidade de invasão do tumor (P=0,02) foram significativamente associadas com a expressão de HLA-G. Por meio da técnica de ELISA, foi detectado que a concentração salivar de HLA-G solúvel não possibilitou distinguir pacientes com CEC de cavidade oral dos indivíduos saudáveis, uma vez que não houve diferença estatisticamente significativa entre os grupos analisados (P=0,17). Os achados do presente estudo revelaram que a alta expressão de HLA-G no microambiente do CEC com metástase linfonodal pode representar um mecanismo de escape tumoral que contribui para um menor tempo de sobrevida e, consequentemente, pior prognóstico clínico dos pacientes. Entretanto, a quantidade da HLA-Gs na saliva dos pacientes com CEC é semelhante àquela de indivíduos saudáveis, assim a HLA-Gs não representa um marcador salivar de prognóstico.

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-05-25T15:45:53Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Diego Antônio Costa Arantes - 2015.pdf: 5243498 bytes, checksum: 85643aafc3a6a4e6090981926b875c7f (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-05-25T15:48:09Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Diego Antônio Costa Arantes - 2015.pdf: 5243498 bytes, checksum: 85643aafc3a6a4e6090981926b875c7f (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-25T15:48:09Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Diego Antônio Costa Arantes - 2015.pdf: 5243498 bytes, checksum: 85643aafc3a6a4e6090981926b875c7f (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2015-03-02 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG / The transforming growth factor β (TGF-β) and interleukin 10 (IL-10) are immunosuppressive cytokines which promote failure of the local anti-tumor immune response and, therefore, influence the proliferation and prognosis of malignant neoplasms. The aim of this study was to investigate the tissue and salivary expression of TGF-β and IL-10 in patients with oral squamous cell carcinoma (OSCC) and compare it with that of healthy subjects (Control). The association of these cytokines with clinical parameters of prognosis (staging, metastasis and survival) and histological grade of malignancy (WHO grading) was also investigated. Cytokines in the tissue (OSCC, n = 65; Control, n = 30) were identified using the immunohistochemistry technique (IHC) and in the saliva (OSCC, n = 22; Control, n = 23) the Enzyme-linked Immunosorbent Assay (ELISA) was used. The tissue expression of TGF-β and IL-10 in metastatic lymph nodes (n = 23) of OSCC patients was investigated. The expression of TGF-β and IL-10 in the tissue was measured using a semi-quantitative method in conjunction with staining intensity. Our findings demonstrated a high tissue expression of IL-10 and TGF-β2, and a low or absent expression of TGF-β1, in the majority of OSCC samples when compared to the group with clinically healthy oral mucosa (Control) (p < 0.05 for IL-10 and TGF-β2). The salivary concentration of IL-10 was also high, and distinguished the OSCC patients from their healthy counterparts (p = 0.04), while the salivary concentration of TGF-β1 was similar for both the OSCC and control groups (p = 0.97). The relationship between the cytokine expression and clinical and microscopic prognostic factors showed that the expression of IL-10 and TGF-β2 in neoplastic cells of the primary tumor was maintained by the metastatic neoplastic cells in the cervical lymph nodes. The expression of TGF-β1 remained low or absent in the metastatic lymph nodes. It was shown that there was an association between the high expression of IL-10 by tumor cells and the advanced clinical stages (T3-T4) of patients (p = 0.02). Although not statistically significant, the expression of TGF-β2 was higher in tumors at more advanced stages (p > 0.05). These findings demonstrate that OSCC provides an immunosuppressive environment conducive to tumor proliferation, with high expression of IL-10 and TGF-β2, which contributes to a worse clinical prognosis. In addition, of the immunosuppressive cytokines investigated, IL-10 has greater potential for becoming salivary biomarker when associated with an unfavorable clinical prognosis of OSCC patients. / Fator de crescimento transformador β (TGF-β) e interleucina 10 (IL-10) são citocinas imunossupressoras que propiciam a falha da resposta imune anti-tumoral local e influenciam, assim, na progressão e prognóstico de neoplasias malignas. O objetivo deste estudo foi investigar a expressão tecidual e salivar de TGF-β e IL-10 em pacientes com carcinoma espinocelular de cavidade oral (CECO) e comparar essa expressão com aquela dos indivíduos saudáveis (Controle). A associação dessas citocinas com parâmetros clínicos de prognóstico (estadiamento, metástase e sobrevida) e grau histológico de malignidade (segundo a OMS) também foi investigado. A identificação das citocinas no tecido (CECO - n= 65 e Controle - n=30) foi feita pela técnica de imunohistoquímica (IHC) e na saliva (CECO - n=22 e Controle - n=23) pelo ensaio imunoenzimático (ELISA). A expressão tecidual de TGF-β e IL-10 em linfonodos metastáticos (n= 23) de pacientes com CECO foi investigada. No tecido, a expressão de TGF-β e IL-10 foi mensurada por método semi-quantitativo associada à intensidade de marcação. Nossos achados demonstraram uma alta expressão tecidual de IL-10 e TGF- β2 e, baixa ou ausente expressão de TGF-β1, na maioria das amostras de CECO se comparada ao grupo de mucosa oral clinicamente saudável (Controle) (P<0,05 para IL-10 e TGF-β2). A concentração salivar de IL-10 também foi elevada e distinguiu o paciente com CECO dos indivíduos saudáveis (P= 0,04). Já a concentração salivar de TGF-β1 foi similar entre o grupo de paciente com CECO e o controle (P= 0,97). A relação da expressão das citocinas com fatores clínicos e microscópicos de prognóstico revelou que a expressão de IL-10 e TGF-β2 nas células neoplásicas do tumor primário foi mantida pelas células neoplásicas metastáticas nos linfonodos cervicais. A expressão de TGF-β1 se manteve baixa ou ausente em linfonodos mestastáticos. Associação entre alta expressão de IL-10 pelas células neoplásicas e o estadiamento clínico avançado (T3-T4) dos pacientes foi evidenciada (P=0,02). Embora sem diferença estatística, a expressão de TGF-β2 foi maior nos tumores em estágios mais avançados (P>0,05). Esses achados demonstram que o CCEO possui um ambiente imunossupressor propício para progressão tumoral, com elevada expressão de IL-10 e TGF-β2, o qual contribui para um pior prognóstico clínico dos pacientes. Além disso, das citocinas imunosupressoras investigadas, a IL-10 apresenta maior potencial para se tornar um biomarcador salivar associado ao prognóstico clínico desfavorável do paciente com CECO.