Carcinoma adenóide cístico é uma neoplasia maligna de glândula salivar com alto grau de recorrência e metástase. Células tumorais que invadem tecidos subjacentes formam invadopódios, protrusões de membrana ricas em actina, cortactina e MT1-MMP capazes de degradar a matriz extracelular (MEC). Proteólise de moléculas da MEC, como a laminina, promove liberação de fragmentos e peptídeos bioativos. Nesse trabalho, estudamos o papel dos peptídeos AG73 e C16, da laminina-111, na atividade de invadopódios de células derivadas de carcinoma adenóide cístico (CAC2). Nossos resultados mostram que AG73 e C16 regulam atividade de invadopódio e aumentam a expressão de MT1-MMP em células CAC2. Silenciamento da integrina <font face=\"Symbol\">b1 e inibição da via ERK diminuem a atividade de invadopódio induzida por esses peptídeos. Já a inibição da via Rac diminui a atividade de invadopódios induzida apenas por AG73. Propomos que os peptídeos AG73 e C16 regulariam a atividade de invadopódios através da integrina <font face=\"Symbol\">b1 e da via ERK 1/2. Já a via Rac1 transduziria sinais gerados apenas pelo peptídeo AG73. / Adenoid cystic carcinoma is a frequently occurring malignant salivary gland neoplasm with high level of recurrence and metastasis. Tumor cells that invade surrounding tissues rely on invadopodia to degrade extracellular matrix (ECM). Invadopodia are actin and cortactin-rich membrane protrusions that localize MT1-MMP required for ECM degradation. Breakdown of ECM molecules, such as laminins, releases fragments and bioactive peptides. Here we addressed the role of laminin-111 peptides AG73 and C16 in invadopodia activity of cells derived from human adenoid cystic carcinoma (CAC2). Our results show that AG73 and C16 increase invadopodia activity and MT1-MMP expression in CAC2 cells. Silencing of <font face=\"Symbol\">b1 integrin and ERK pathway inhibition decrease AG73 and C16-induced invadopodia. Rac1 pathway inhibition decreases only AG73-induced invadopodia formation. We propose that AG73 and C16 increase invadopodia activity in CAC2 cells through <font face=\"Symbol\">b1 integrin. ERK1/2 pathway would transduce signals generated by both peptides, while Rac1 pathway is related to AG73 signaling.

Carcinoma adenóide cístico é uma neoplasia maligna de glândula salivar com alto grau de recorrência e metástase. Células tumorais que invadem tecidos subjacentes formam invadopódios, protrusões de membrana ricas em actina, cortactina e MT1-MMP capazes de degradar a matriz extracelular (MEC). Proteólise de moléculas da MEC, como a laminina, promove liberação de fragmentos e peptídeos bioativos. Nesse trabalho, estudamos o papel dos peptídeos AG73 e C16, da laminina-111, na atividade de invadopódios de células derivadas de carcinoma adenóide cístico (CAC2). Nossos resultados mostram que AG73 e C16 regulam atividade de invadopódio e aumentam a expressão de MT1-MMP em células CAC2. Silenciamento da integrina <font face=\"Symbol\">b1 e inibição da via ERK diminuem a atividade de invadopódio induzida por esses peptídeos. Já a inibição da via Rac diminui a atividade de invadopódios induzida apenas por AG73. Propomos que os peptídeos AG73 e C16 regulariam a atividade de invadopódios através da integrina <font face=\"Symbol\">b1 e da via ERK 1/2. Já a via Rac1 transduziria sinais gerados apenas pelo peptídeo AG73. / Adenoid cystic carcinoma is a frequently occurring malignant salivary gland neoplasm with high level of recurrence and metastasis. Tumor cells that invade surrounding tissues rely on invadopodia to degrade extracellular matrix (ECM). Invadopodia are actin and cortactin-rich membrane protrusions that localize MT1-MMP required for ECM degradation. Breakdown of ECM molecules, such as laminins, releases fragments and bioactive peptides. Here we addressed the role of laminin-111 peptides AG73 and C16 in invadopodia activity of cells derived from human adenoid cystic carcinoma (CAC2). Our results show that AG73 and C16 increase invadopodia activity and MT1-MMP expression in CAC2 cells. Silencing of <font face=\"Symbol\">b1 integrin and ERK pathway inhibition decrease AG73 and C16-induced invadopodia. Rac1 pathway inhibition decreases only AG73-induced invadopodia formation. We propose that AG73 and C16 increase invadopodia activity in CAC2 cells through <font face=\"Symbol\">b1 integrin. ERK1/2 pathway would transduce signals generated by both peptides, while Rac1 pathway is related to AG73 signaling.

Orientador: Luiz Paulo Kowalski / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-04T05:01:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Perez_DanyelEliasdaCruz_D.pdf: 1930321 bytes, checksum: 307f3509cc4d84642154bbe8c9644f16 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: Introdução: O objetivo deste estudo foi avaliar as características clínicas, histopatológicas e imunohistoquímicas de 129 casos de carcinoma adenóide cístico (CAC) de cabeça e pescoço, a fim de identificar fatores prognósticos importantes associados a este tumor. Material e métodos: Entre os anos de 1955 e 1997, cento e vinte e nove casos de CAC foram tratados no Departamento de Cirurgia de Cabeça e Pescoço do Hospital do Câncer A. C. Camargo, São Paulo. Os dados clínicos dos pacientes foram obtidos dos prontuários médicos e resumidos em uma ficha clínica padronizada. As lâminas histológicas foram revisadas para confirmação do diagnóstico e os tumores classificados em tipos histológicos cribriforme, tubular ou sólido. Reações imunohistoquímicas contra proteína p53, antígeno nuclear de proliferação celular (PCNA), Ki-67, antígeno carcinoembrionário (CEA), c-erbB-2 e bcl-2 foram realizadas utilizando a técnica estreptavidina-biotina-peroxidase. Resultados: Setenta e um pacientes eram homens (55%) e 58 (45%) mulheres, com uma idade média de 51,5 anos (10-96 anos). As glândulas salivares menores intra-bucais e as parótidas foram as mais acometidas e 96 pacientes (74,4%) foram diagnosticados com tumores em estádios clínicos III ou IV. O tipo histológico mais comum foi o tipo cribriforme (54,2%), seguido pelos tipos tubular (25,2%) e sólido (20,6%). Cirurgia foi a principal forma de tratamento (75,9%) e 42,7% dos pacientes foram submetidos à radioterapia pós-operatória. As taxas de sobrevida global aos 5 e 10 anos foram 56,5% e 32,5%, respectivamente, e a sobrevida livre de doença foi 42.7% e 29.2% para os mesmos períodos. Análise univariada da sobrevida revelou que pacientes com idade superior a 45 anos (p=0.04), tempo de queixa inferior a 18 meses (p=0.007), presença de parestesia (p=0.04), estádio T (p=0.01), estádio N (p=0.04), estádio M (p<0.001), estádio clínico (p=0.01), tipo histológico sólido (p<0.001), presença de tumor residual após a cirurgia (p<0.001) e aumento da expressão de p53 (p=0.08) correlacionaram com pobre prognóstico. A análise multivariada de sobrevida mostrou que estádio clínico avançado, tipo histológico sólido e expressão de p53 foram fatores prognósticos significantes independentes em pacientes com CAC. Conclusões: Após análise dos dados, concluímos que estádio clínico avançado, tipo histológico sólido e expressão de p53 foram os fatores prognósticos mais significantes associados ao CAC de cabeça e pescoço / Abstract: Introduction: The aim of this study was to analyze the clinical, histological and immunohistochemical prognostic factors of a large series of adenoid cystic carcinoma treated in a single institution, using univariate and multivariate survival analyses. Methods: All cases of head and neck ACC treated between 1955 and 1997, at the Department of the Head and Neck Surgery and Otorhinolaryngology, Hospital do Cancer A. C. Camargo, Sao Paulo, were selected for the study. The clinical data were obtained from the medical records and the histopathological slides reviewed. Immunohistochemical reactions against p53 protein, proliferation cell nuclear antigen (PCNA), Ki-67, carcinoembryonic antigen (CEA), c-erbB-2 and bcl-2 were performed using the streptavidin-biotin-peroxidase method. Results: Of 129 cases, seventy-one were male (55%) and 58 female (45%), with mean age of 51.5 years (10-96 years). The palate and parotid gland were the most common sites. TNM stage revealed 96 (74.4%) clinical stages III + IV tumors, and the most common histological type was the cribriform type (54.2%), followed by tubular (25.2%) and solid type (20.6%). Surgery was the main treatment modality (75,9%) and 42,7% of the patients were submitted to postoperative radiotherapy. The overall survival rates at 5 and 10 years were 56.5% and 32.5% respectively, and the free disease survival rates were 42.7% and 29.2% for the same periods. Univariate survival analysis revealed that age older than 45 years (p=0.04), period of complaints inferior to 18 months (p=0.007), presence of paresthesia (p=0.04), T stage (p=0.01), N stage (p=0.04), M stage (p<0.001), clinical stage (p=0.003), solid histological type (p<0.001), presence of residual tumor (p<0.001) and increased expression of p53 (p=0.08) correlated with a poor prognosis. In the multivariate survival analyses, clinical stage, solid histological subtype and increased expression of p53 were independent significant prognostic factors. Conclusions: According to our findings, clinical stage, solid growth pattern and expression of p53 were the most important prognostic factors in patients with ACC / Doutorado / Patologia / Doutor em Estomatopatologia

Orientador: Albina Messias de Almeida Milani Altemani / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-16T16:39:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bonfitto_VeraLuciaLeite_D.pdf: 2371427 bytes, checksum: 9766d47098dc3a0a8725d3d05732303e (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: A angiogênese induzida pelo tumor é o resultado não somente do balanço entre indutores e inibidores da angiogênese, mas também da demanda metabólica tumoral. Nos carcinomas salivares com diferenciação mioepitelial, a densidade microvascular (DMV) é mais baixa do que nos carcinomas sem tal diferenciação. Apesar do fenótipo antiangiogênico da célula mioepitelial, as razões para essa associação ainda não foram completamente esclarecidas. Com a finalidade de aumentar o conhecimento sobre os fenômenos envolvidos na vascularização de carcinomas salivares, analisamos a DMV em tumores de diferentes tipos e graus histológicos. Além disso, em carcinomas adenóides císticos (CAC) com transformação para alto grau (CAC-TAG) analisamos a expressão de proteínas relacionadas ao metabolismo celular e a DMV entre áreas convencionais e transformadas. Estes achados foram também comparados com aqueles encontrados no CAC clássico. Material e Métodos: Em 42 carcinomas salivares com diferenciação mioepitelial e em 56 sem tal diferenciação, a vascularização tumoral foi avaliada através da DMV em lâminas coradas pelo CD34 (marcador pan-endotelial) e pelo CD105 (marcador de neoangiogênese). Além disso, em 7 casos de CAC-TAG e em 18 CACs foram examinadas as expressões dos marcadores relacionados ao metabolismo celular: transportador de glicose transmembrana (GLUT1) e antígeno mitocondrial (AMT), e do Ki- 67 (para análise do índice de proliferação). Resultados: Somente a DMV-CD105 foi significantemente diferente entre os diferentes subgrupos de tumores. Os tumores de alto grau apresentaram DMV-CD105 significantemente aumentada em relação aos de baixo grau. Os carcinomas com diferenciação mioepitelial e o carcinoma de células acinares mostraram DMV-CD105 semelhantes. Nos CAC-TAG, o componente transformado caracterizava-se pela perda da camada mioepitelial e índice aumentado de Ki-67. As áreas convencionais do CAC-TAG e o CAC clássico foram negativas para GLUT1 na maioria dos casos (83,3% e 81,3%, respectivamente) e exibiam expressão baixa ou ausente de AMT (100% e 66,7% dos casos respectivamente). Em contraste, as áreas transformadas do CAC-TAG exibiam aumento da expressão de GLUT1 (50% dos casos) e de AMT (100%). No CAC-TAG, comparando a DMV entre áreas convencionais e transformadas não se notou alteração significante. Conclusões: Nos carcinomas salivares, as células mioepiteliais não aparentam desempenhar papel crucial na vascularização tumoral, a qual é influenciada por fatores não necessariamente relacionados à demanda metabólica e progressão tumoral. A correlação da neoangiogênese com grau histológico tumoral sugere que a agressividade do carcinoma salivar pode ser um dos fatores indutores, embora por mecanismos ainda não esclarecidos / Abstract: Tumor-induced angiogenesis is not only determined by the net balance between inductors and inhibitors but also by factors related to tumor metabolic demand. Salivary carcinomas with myoepithelial component have been reported to have a lower microvascular density (MVD) than others without such cells. Despite the anti-angiogenic phenotype of the myoepithelial cells, the reasons for this association remain unclear so far. To broaden our understanding of phenomena involved in vascularization of salivary carcinomas we analyzed the MVD in tumors of different histological types and grade. In addition, in adenoid cystic carcinomas (ACC) with high-grade transformation (ACC-HGT), the expression of proteins linked to cellular metabolism as well as MVD was compared between conventional and HGT areas. We also compared the findings with ordinary ACC. Material and Methods: In 42 salivary carcinomas with myoepithelial differentiation and 56 without, tumor vascularization was assessed by measuring MVD in CD34 (pan-endothelial marker) and CD105 (neoangiogenesis marker) stained sections. In addition, in seven cases of ACC-HGT and in 18 ACCs the expressions of GLUT1, mitochondrial antigen (MTA) and Ki-67 (for evaluation of proliferation index) were also examined. Results: Only CD105-MVD was significantly different among the different tumor subgroups. High-grade tumors showed significantly higher CD105-MVD. Carcinomas with myoepithelial differentiation and acinic cell carcinomas exhibited similar CD105-MVD. In ACC-HGT, loss of myoepithelial layer was found only in the HGT component, which also showed higher Ki-67 index. Conventional areas of both ACC-HGT and ACC were negative for GLUT1 in most cases (83.3% and 81.3%, respectively) and exhibited low or no expression of MTA (100% and 66.7% of cases respectively). In contrast, the HGT component presented increased expression of both proteins (GLUT1+ in 50% of cases; MTA+ in 100%). MVD did not differ significantly between conventional and HGT components. Conclusions: In salivary carcinomas, myoepithelial cells do not appear to play a pivotal role in tumor vascularization, which is influenced by factors not necessarily related to metabolic demand and carcinoma progression. The correlation between tumor degree and neoangiogenesis (MVD-CD105) suggests that carcinoma aggressiveness may be one of the inductors but the mechanisms remain to be clarified / Doutorado / Anatomia Patologica / Doutor em Ciências Médicas