Orientador: Gilson Hélio Toniollo / Banca: Adjair Antonio do Nascimento / Banca: Gilson Pereira de Oliveira / Banca: Odilon Vidotto / Banca: Vanete Thomaz Soccol / Resumo: Considerando a importância da neosporose como interferente na produtividade animal, avaliou-se a freqüência de anticorpos anti-Neospora caninum em bovinos leiteiros, complementando os estudos com amostras sorológicas colhidas de caninos e humanos de convívio rural, inter-relacionando os resultados. Com o objetivo de investigar a possível transmissão vertical em bovinos, colheu-se também sangue de fêmeas e de seus respectivos fetos, abatidos em frigorífico, provenientes da região sudoeste do Estado de Mato Grosso. O total de 1076 soros correspondente a: 932 de fêmeas bovinas leiteiras, 37 de cães, 67 de humanos, provenientes de 24 propriedades da região sudoeste do Estado de Mato Grosso, 20 soros de fêmeas bovinas e 20 de seus respectivos fetos. Os soros examinados por meio da Imunofluorescência Indireta (IFI) revelaram a presença de anticorpos contra Neospora caninum em 499 bovinos (53,54%), 25 caninos (67,57%) e sete humanos (10,45%). Dos exames sorológicos de animais de abatedouro, duas fêmeas e seus respectivos fetos apresentaram positividade, com infecção caracterizada no terço médio da gestação. Ainda do mesmo grupo, três fêmeas mostraram-se positivas, em diferentes titulações, sem transmissão de anticorpos para os fetos, sendo duas analisadas em período gestacional correspondente ao terço final, e uma inicial. Os resultados obtidos permitem inferir que a infecção pelo protozoário encontra-se amplamente disseminada na região estudada. / Abstract: To determine the prevalence of anti-Neospora caninum antibodies, 932 samples of blood sera from female dairy cattle belonging to 24 farms in the southwest of the state of Mato Grosso were analyzed by means of the indirect immunofluorescent-antibody test (IFAT = 200). Serum samples from 37 dogs and 67 humans living in the same farms were tested for anti- N. caninum antibodies. From these, 499 (53,54%) of the cattle sera, 25 (67,57%) of the dog sera and seven from the human sera (10,45%) were positive for the infection. In order to determine the occurrence of vertical transmission of N. caninum in bovine, maternal and fetal sera obtained from 20 Killed pregnant heifers from the same region were analyzed. Antibodies were found in five heifers (25%) from which two fetuses (10%) showed positive results. Fetal antibodies were detected on mid gestation. These data suggest that neosporosis is present among dairy cattle in the studied geographic region. / Doutor

Orientadora: Rosangela Zacarias Machado / Banca: Antônio Raimundo Lima Cruz Teixeira / Banca: Andrea Cristina Higa Nakaghi / Banca: Aureo Evangelista Santana / Banca: Mirela Tinucci Costa / Resumo: Poucos relatos têm sido feitos de felídeos domésticos brasileiros a respeito de erliquiose e babesiose, baseados na presença de mórulas em leucócitos e piroplasmas em eritrócitos, respectivamente, e também na presença de anticorpos anti-Ehrlichia canis. O presente estudo teve como objetivo diagnosticar, pela Reação em Cadeia pela Polimerase (PCR), os principais hemoparasitas e a frequência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii e anti-Neospora caninum, em amostras de sangue e de soro de 200 felídeos errantes na cidade de São Luís-MA, Brasil. Dos 200 animais amostrados, 11 (5,5%) foram reagentes frente ao antígeno de E. canis, 5 (2,5%) foram reagentes frente ao antígeno de Babesia canis, 101 (50,5%) frente ao antígeno de T. gondii, e 49 (24,5%) frente ao antígeno de N. caninum, pela Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI). Dois (1%) dos 200 animais amostrados foram positivos pela PCR, um para E. canis e o outro para E. chaffeensis. Os amplicons foram confirmados por sequenciamento, e o DNA de E. canis encontrado mostrou 97% de identidade genética com amostras de E. canis de cães de diferentes países. Quanto ao DNA de E. chaffeensis encontrado, 97% de identidade genética foi encontrada com amostras de E. chaffeensis isoladas em diferentes países. Nenhuma das duas amostras positivas para E. canis ou E. chaffeensis foram positivas para Babesia canis vogeli ou Cytauxzoon sp. Realizou-se, também, PCR para Mycoplasma sp. em amostras de sangue dos felídeos pesquisados; das 200 amostras, 5 (2,5%) foram positivas para Mycoplasma haemofelis, 4 (2%) foram positivas para 'Candidatus Mycoplasma turicensis', e 20 (10%) para 'Candidatus Mycoplasma haemominutum', totalizando 14,5% dos animais. Destaca-se a importância da primeira detecção sorológica de Ehrlichia sp. e molecular de Ehrlichia chaffeensis em gatos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: A few reports have been made in Brazilian domestic felines about ehrlichiosis and babesiosis. These studies are based on the presence of morulae in leukocytes and piroplasms in erythrocytes, respectively, and also in the presence of antibodies anti-Ehrlichia canis. This study aimed to diagnose, by the chain reaction Polimerase (PCR), the main hemoparasite and frequency of anti-Toxoplasma gondii and Neospora caninum antibodies in blood samples and serum, respectively of two hundred wandering felines in St. Luís island - MA, Brazil. Of 200 animals sampled, (36%) showed reacty against the antigen of E. canis, five (2.5%) were reactive against the antigen of Babesia canis, one hundred and one (50.5%) were reactive against the antigen of T. gondii, and forty-nine (24.5%) were also reactive against the antigen of N. caninum, by the Indirect Immunofluorescence Assay (IFA). Two (1%) of 200 animals sampled were positive for E. canis nPCR, and one to E. chaffeensis. The nPCR amplicons were confirmed by sequencing and the DNA of E. canis were more closed related to similarity with strains of E. canis detected in another countries, with 97% identity. The E. chaffeensis DNA was closed related to E. chaffeensis detected in another countries, with 97% identity. Neither of the two samples positive for E. canis and E. chaffeensis were positive to Cytauxzoon. Moreover, 14,5% of the animals were positive to Mycoplasma sp: five samples (2.5%) were positive for Mycoplasma haemofelis, four (2%) were positive for 'Candidatus Mycoplasma turicensis' and twenty (10%) to 'Candidatus Mycoplasma haemominutum'. This study was the first serological detection of Ehrlichia sp and molecular detection of Ehrlichia chaffeensis in Brazilian domestic cats. Besides, this is the first report of Mycoplasma sp infections in cats from São Luís-MA. / Doutor

Orientador: Rosangela Zacarias Machado / Banca: Solange Maria Gennari / Banca: Aramis Augusto Pinto / Banca: Deise Aparecida de Oliveira Silva / Banca: Ana Patricia Yatsuda Natsui / Resumo: Neospora caninum é um protozoário do Filo Apicomplexa, que foi primeiramente descrito como causa de encefalomielite em filhotes caninos sorologicamente negativos para Toxoplasma gondii. Estudos anteriores neste importante hospedeiro da cadeia epidemiológica de N. caninum demonstram que as respostas de anticorpos IgG são tardiamente detectadas e que a infecção clínica é de difícil indução. Desta forma, este trabalho objetivou o estudo da imunidade de cães frente à infecção oral por N. caninum. Os resultados obtidos a partir de análises de diversos animais experimentalmente infectados indicam que os cães apresentam uma prolongada fase aguda da infecção, com eliminação de oocistos associado à queda nos níveis de linfócitos T CD4+ e CD8+ e diminuição de MHC de classe II por células apresentadoras de antígeno. Adicionalmente, os animais apresentam soroconversão instável durante o mesmo período, sendo que somente IgG1 e IgG3 foram detectados em adultos e filhotes, respectivamente, entre o 2o e 3o mês de infecção. De forma concomitante, observa-se uma predominância da expressão de citocinas imunomoduladoras como TGF 1, IL-4 e IL-10. Após dois meses de infecção, o perfil da resposta se inverte, sendo observado picos de produção dos marcadores CD4 e CD8 de linfócitos T e citocinas próinflamatórias como IFN , IL-6 e IL-12, além do aumento nos títulos de anticorpos, principalmente IgG1 e IgG4 nos cães jovens. Com base nestes resultados, conclui-se que os cães apresentam uma relação de equilíbrio com N. caninum, a qual induz nesta espécie uma modulação da resposta imunológica durante a fase de merogonia. / Abstract: Neospora caninum is an Apicomplexan parasite firstly described as the cause of encephalomyelitis in puppies serologically negative to Toxoplasma gondii. Previous reports on the parasite’s definitive host indicate a late IgG antibody response and that clinical disease is difficult to be induced. The aim of this study was to investigate canine immunity during N. caninum oral infection. The results obtained from the analysis of infected animal’s samples indicate that dogs present a protracted acute phase, with oocyst shedding correlated to a drop in CD4+ and CD8+ T cell levels, and low MHC class II expression by antigen presenting cells. Additionally, the dogs presented an unstable seroconversion pattern in the same period, with only IgG1 and IgG3 being detected in adult dogs and puppies, respectively, between the second and third months of infection. Concomitantly, dominant Th2 cytokine expression was observed, with peak expression levels of TGF 1, IL-4 and IL-10. After 2 months of infection, the immunity profile shifts towards a Th1 response, with high levels of CD4 and CD8 lymphocytary marker production and pro-inflammatory cytokine expression (IFN , IL-6 and IL-12), besides of the raise in antibody levels, especially IgG1 and IgG4 in puppies. Based in the results presented herein, we may conclude that dogs present a balanced host-parasite relationship, modulating the host immune response during N. caninum merogony. / Doutor