El trastorno de estrés postraumático (PTSD) es un trastorno asociado a un trauma y a estrés que se manifiesta después de la exposición a situaciones traumáticas y se caracteriza por la aparición de alteraciones cognitivas tales como trastornos en la memoria. De hecho, la formación hipocampal (FH), una estructura clave en la formación de la memoria, es una de las regiones más afectada en el PTSD, presentando una reducción del volumen y anomalías funcionales. Aunque los efectos del estrés en la plasticidad sináptica se han relacionado con el PTSD, los cambios a largo plazo del estrés en la plasticidad sináptica son desconocidos. El estudio de modelos animales que simulan los síntomas encontrados en pacientes de PTSD puede ser una estrategia efectiva para comprender los efectos a largo plazo del estrés y encontrar nuevas dianas farmacológicas. En este sentido, diversos tratamientos han sido propuestos para el PTSD, sin embargo, ninguno de ellos ha resultado totalmente efectivo. La vía BDNF/TrkB se ha propuesto como una nueva diana debido a la importante implicación de esta vía en modelos animales de PTSD. Además, el estrés y el BDNF están regulados recíprocamente y, por lo tanto, es razonable asumir que el uso de agonistas para la vía de BDNF/TrkB, como la 7,8-dihydroxyflavone (7,8 DHF), puede ser un procedimiento eficaz para atenuar los efectos del estrés. Para abordar esta cuestión, en un primer lugar analizamos si la IMO presenta efectos anatómicos y conductuales similares a los encontrados en los pacientes de PTSD que puedan determinar si es un modelo putativo de PTSD y la posible implicación de la plasticidad sináptica en los trastornos de la memoria. Por otro lado, investigamos si la administración del 7,8-DHF en la ventana terapéutica del PTSD puede atenuar los efectos de la IMO y si dichos efectos en plasticidad sináptica están relacionados con la alteración de la memoria. La IMO produjo una disminución del volumen de la FH y una alteración de la memoria en tareas dependientes de la misma, efectos similares a los encontrados en otros modelos y en los pacientes de PTSD. Además, la IMO incrementó la densidad de espinas, la LTP y los niveles de BDNF, HCN1 e Iba1. Por lo tanto, es razonable asumir que los efectos de la IMO en plasticidad sináptica están relacionados con las alteraciones en la memoria. Nosotros sugerimos que la IMO intenta compensar los efectos negativos del trauma inicial que derivan en una desconexión y una posterior reconexión de los circuitos implicados en la alteración de la memoria de una forma similar a lo que ocurre durante el desarrollo. El agonista 7,8-DHF previno las alteraciones en memoria espacial y el incremento de LTP sin encontrarse efecto del fármaco per se. Estos resultados sugieren un efecto protector del 7,8-DHF y apoyan la idea del papel neuroprotector de la potenciación de la vía BDNF/TrkB en esta patología y, por lo tanto, muestran que el 7,8-DHF puede constituir un posible tratamiento para los pacientes de PTSD. / PTSD is a trauma and stressor-related disorder that occurs after the exposure to traumatic situations. PTSD is characterized by the development of cognitive impairments such as memory dysfunction. In fact, HF, a key structure in memory formation, is one of the most affected areas in PTSD, presenting reduced volume and functional abnormalities. Despite stress effects on synaptic plasticity have been related to PTSD, long term synaptic plasticity stress-related changes remain largely unknown. The study of animal models that mimic symptoms of PTSD patients can be an effective strategy to understand the long term consequences of stress and to find novel drug targets. In this regard, several treatments have been proposed for PTSD. However, none of them has been totally successful. The BDNF/TrkB pathway has been suggested as a novel strategy since animal research has revealed an important implication of this pathway in PTSD animal models. Moreover, stress and BDNF are reciprocally modulated. Hence, it is reasonable to believe that the use of BDNF/TrkB pathway agonists, such as 7,8-dihydroxyflavone, could be an effective way to ameliorate stress effects. To address this issue we analyzed whether IMO presents similar anatomical and behavioral effects found in PTSD patients to be a putative PTSD model and the possible role of synaptic plasticity as a substrate for memory impairment. Alternatively, we investigated whether 7,8-DHF can ameliorate the PTSD-like effect of the IMO in a therapeutic window administration and whether synaptic plasticity IMO-related effects are causally related to memory impairment. IMO induced a HF volume decrease and HF-dependent task memory impairment similar to those found in others PTSD models or patients. In addition, IMO increased spine density, LTP, BDNF, HCN1 and Iba1 levels. Therefore, it is reasonable to assume that IMO-induced synaptic plasticity is involved in IMO-related memory impairment. We suggest that IMO induces a development-like process trying to compensate the detrimental effects of the initial trauma which derivate in a disconnection and posterior reconnection of the neural network impairing memory. The agonist prevented spatial memory impairment and LTP increase without effect of the drug per se. Taken together, all these results suggest a protective role of 7,8-DHF supporting the idea of a protective role of BDNF/TrkB pathway enhancement in PTSD and hence the value of 7,8-DHF as a putative treatment for PTSD patients.

Las alteraciones tiroideas se han propuesto como participantes importantes en la patogénesis de las psicosis afectivas y no afectivas. Tales alteraciones pueden modular la expresión de la enfermedad con implicaciones sobre su gravedad, evolución y pronóstico. Estudios previos han mostrado la influencia de la función y autoinmunidad tiroideas en la evolución de la enfermedad en pacientes psicóticos y bipolares. Sin embargo, el mecanismo de acción de esta modulación no ha sido aún esclarecida. Los estudios que investigan la relación entre los niveles de hormonas tiroideas y el estado de la autoinmunidad tiroidea y las funciones cognitivas, han encontrado resultados inconsistentes y contradictorios. Sabemos que las alteraciones cognitivas tiene un gran impacto sobre la funcionalidad de los pacientes psicóticos y el pronóstico global de la enfermedad. El objetivo principal de este trabajo es esclarecer el papel real que juega la función y la autoinmunidad tiroideas en la modulación de la evolución de los trastornos psicóticos afectivos y no afectivos, en 3 aspectos; gravedad de síntomas, riesgo de recaídas y afectación cognitiva. Así mismo, estudiamos si esta modulación sobre la afectación cognitiva es diferente en pacientes con psicosis afectivas y no afectivas. Para ello estudiamos tres muestras de pacientes. Una muestra de pacientes con trastorno bipolar (N=77) que han requerido hospitalización por un episodio maníaco o mixto, seguidos durante un año para estudiar el riesgo de reingreso. Para el estudio de la relación entre función y autoinmunidad tiroideas y rendimiento cognitivo se han utilizado dos muestras diferentes: una muestra de 70 pacientes con una psicosis temprana (estudio transversal que incluye la diferenciación de los efectos sobre cognición en psicosis afectivas y no afectivas) y una muestra de 36 pacientes con un primer episodio psicótico (estudio longitudinal de un año de evolución). De nuestros resultados podemos concluir que la función y autoinmunidad tiroideas no se asocian con la gravedad de síntomas maniacos o psicóticos en paciente con trastorno bipolar o psicosis tempranas. Los anticuerpos antitiroglobulina (pero no antiperoxidasa) se asocian con un menor riesgo de rehospitalización en pacientes bipolares después de un ingreso por episodio maniaco o mixto. Por otro lado, niveles más altos de tiroxina libre (T4L), aunque dentro de rango de normalidad, se asocian con un mejor rendimiento en la atención y vigilancia en pacientes afectos de una psicosis temprana, sin embargo, la autoinmunidad tiroidea no parece afectar de la misma manera al rendimiento cognitivo. Los niveles de T4L se asocian a cambios longitudinales en el rendimiento en atención y vigilancia al año, niveles extremos de T4L (aunque dentro de la normalidad), se asocian con un empeoramiento en este dominio cognitivo. La asociación entre T4L y habilidades cognitivas es más evidente en los paciente afectos de psicosis afectivas (trastorno bipolar o trastorno esquizoafectivo) en el dominio de atención y vigilancia. / Thyroid abnormalities have been proposed to be important elements in the pathogenesis of affective and non-affective psychoses. Such alterations may modulate the expression of the illness with implications on its severity and prognosis. Previous studies show the influence of the function and thyroid autoimmunity on the evolution of the disease in bipolar and psychotic patients. However, the mechanism of action of this modulation has not been clarified yet. Studies searching the relationship between thyroid hormones levels and thyroid autoimmunity and cognitive functions have found contradictory and inconsistent results. Cognitive impairment has a major impact on the functionality of psychotic patients and the overall prognosis of the disease. We aimed to clarify the role of thyroid function and autoimmunity on the modulation of the evolution of affective and non-affective psychotic disorders in three aspects; severity of symptoms, risk of relapse and cognitive impairment. We also studied if this modulation is different in affective and non-affective psychoses. For this purpose we studied three patient samples. One sample of bipolar patients (N=77) requiring hospitalization for a manic or mixed episode that were followed up for one year to study the risk of readmission. For the study of the relationship between thyroid function and autoimmunity and cognitive abilities, two different samples were used: one sample of 70 patients with an early psychosis (cross-sectional study including the differentiation of the effects on cognition in affective and non-affective psychoses) and a sample of 36 patients with a first psychotic episode (one year longitudinal study). From our results, we can conclude that thyroid function and autoimmunity are not associated with the severity of manic or psychotic symptoms in patients with bipolar disorder or early psychosis. Thyroglobulin antibodies (but not peroxidase antibodies) are associated with a lower risk of rehospitalization of bipolar patients after a manic or mixed episode. On the other hand, higher levels of free thyroxine (FT4), but within normal range, are associated with better performance on attention and vigilance domain in patients with an early psychosis. However, thyroid autoimmunity does not seem to affect cognitive performance in the same way. FT4 levels are associated with longitudinal changes in the performance in attention and vigilance at one year. Extreme levels of FT4 (although within normal levels) are associated with a decline in this cognitive domain. The association between FT4 and cognitive skills is most evident in patients with an affective psychosis (bipolar disorder or schizoaffective disorder) in attention and vigilance domain.

El ictus representa uno de los trastornos neurológicos más severos. En nuestro entorno, esta patología cerebrovascular revela una elevada prevalencia y se sitúa como segunda causa de muerte y primera causa de invalidez y discapacidad, lo que se traduce en un extraordinario impacto a nivel económico, sanitario y social. El diagnóstico del ictus se basa en la evaluación del paciente a través de técnicas de neuroimagen, identificando si la lesión cerebral es de naturaleza isquémica, hemorrágica o se trata de una patología mimetizante. El tratamiento específico del ictus isquémico agudo incluye la trombolisis o los tratamientos recanalizadores intraarteriales, ambos dirigidos a lograr la recanalización de la arteria ocluida. En cambio, en el ictus hemorrágico, las estrategias de reducción de la presión arterial presentan resultados prometedores pero actualmente se encuentran aún bajo evaluación. Para asegurar la administración del tratamiento agudo adecuado resulta esencial la diferenciación entre los distintos subtipos de ictus así como su distinción de otras patologías mimetizantes de forma rápida y precisa. El uso de biomarcadores para el diagnóstico del ictus representa una herramienta alternativa especialmente aplicable en entornos donde la accesibilidad a la neuroimagen resulta limitada, como el escenario pre-hospitalario, centros sanitarios de primer y segundo nivel, zonas con baja densidad de población o países en vías de desarrollo; y que permitiría agilizar la evaluación del paciente en la fase hiperaguda tras el evento vascular. Actualmente, ningún biomarcador está siendo aplicado en el manejo de los pacientes que han sufrido un ictus, pero algunos candidatos ya han evidenciado su potencial en estudios multicéntricos y diversos meta-análisis. Buenos ejemplos de ello son el péptido natriurétio de tipo B (BNP) para identificar la etiología cardioembólica del ictus isquémico, o la medición de copeptina en la predicción del pronóstico de los pacientes. El objetivo que persiguen los trabajos incluidos en esta tesis doctoral es identificar nuevos biomarcadores candidatos para el diagnóstico del ictus a través de técnicas proteómicas aplicadas en modelos in-vivo e in-vitro, así como en muestras humanas. Por un lado, mediante técnicas de cuantificación SILAC y label-free, junto con el empleo de MALDI imaging, hemos podido identificar proteínas involucradas en la isquemia cerebral para su evaluación como biomarcadores específicos de esta patología. Por otro lado, hemos logrado describir distintas proteínas capaces de discriminar los ictus isquémicos de aquellos de naturaleza hemorrágica mediante su cuantificación en plasma. Además, hemos sido capaces de evaluar el valor añadido de algunos de los candidatos identificados aportando información sobre su capacidad predictiva y de discriminación. Los resultados de esta tesis doctoral han permitido avanzar un paso más en el conocimiento de la fisiopatología de la isquemia cerebral y suponen la apertura de nuevas vías de investigación en futuros estudios. Además hemos podido examinar nuevos candidatos para la diferenciación de los subtipos isquémico y hemorrágico. Explorar el valor real de los candidatos descritos como biomarcadores diagnósticos en cohortes multicéntricas representa el siguiente paso derivado de los resultados presentados en esta tesis doctoral. La implementación del uso de biomarcadores diagnósticos de ictus en la práctica clínica diaria parece un excelente escenario de futuro que podría traducirse en una clara mejoría en el manejo de los pacientes en fase aguda y en una mejor administración de los recursos socio-sanitarios. / Stroke is one of the most severe neurological disorders. In our society, this cerebrovascular disease reveals a high prevalence and represents the second cause of dead and the first cause of disability, with a dramatic impact at the economic, social and health systems. The evaluation of patients for stroke diagnostic is based on neuroimaging, classifying the lesions of ischemic and hemorrhagic nature or identifying mimicking pathologies. The specific treatment for acute ischemic stroke includes thrombolysis or intraarterial recanalization, aiming to achieve the opening of the occluded artery. In contrast, in hemorrhagic stroke, blood-pressure lowering strategies are currently under evaluation, although promising results have been reported. In order to ensure the most suitable acute treatment, it is absolutely essential an accurate differentiation of ischemic and hemorrhagic stroke and the identification of stroke mimicking conditions. The use of biomarkers for stroke diagnosis represents an alternative tool especially applicable in those contexts with limited neuroimaging availability, such as pre-hospital settings, primary health centers, low population density areas or developing countries. Currently, although no biomarker is still being clinically applied in the management of stoke patients, some candidates have evidenced a great potential in multi-centric studies and different meta-analyses. Some examples are B-type natriuretic peptide (BNP) for the identification of cardioembolic strokes, or copeptin for the prediction of patients’ prognosis. The main aim of the studies included in this doctoral dissertation is the identification of new putative biomarkers for stroke diagnosis using diverse proteomic approaches in in-vivo and in-vitro models, as well as in human samples. On the one hand, we describe different proteins involved in cerebral ischemia for their evaluation as specific biomarkers. On the other hand, we identified different bloodstream proteins with discerning ability between acute ischemic and hemorrhagic strokes. The added value of some of these markers has been statistically evaluated, raising new information about their predictive and discriminative capability. The results of this doctoral dissertation represent an additional step in the knowledge of cerebral ischemia pathophysiology and opens new paths for future research. Besides, we could examine new candidates for the differentiation of the ischemic and hemorrhagic stroke subtypes. The evaluation of the described biomarker candidates and their real diagnostic value will be assessed in future multi-centric analyses as a next step derived from the results reported. The daily clinical implementation of diagnostic biomarkers of stroke might be translated in a dramatic improvement in the management of acute stroke patients and in a better administration of the social and healthcare resources.

El ictus es una de las principales causas de mortalidad y discapacidad en nuestro medio. El pronóstico del ictus depende en gran parte de factores basales no modificables como la edad o la gravedad inicial del mismo, pero también de circunstancias que ocurren durante la historia natural del mismo y conllevan un mal desenlace. En la presente tesis doctoral nos focalizamos en éstas últimas, las complicaciones del ictus. Así, nuestros objetivos en el presente trabajo son, en primer lugar, establecer cuáles de las complicaciones del ictus presentan un mayor impacto sobre el pronóstico del mismo en nuestro medio. En segundo lugar, evaluar en qué indicaciones el uso de biomarcadores sanguíneos constituye una necesidad asistencial. En tercer lugar, evaluar la asociación de los biomarcadores sanguíneos al pronóstico del ictus y las complicaciones del mismo en la literatura y, finalmente testar el valor predictivo de biomarcadores candidatos para las indicaciones identificadas en los puntos anteriores. Para esto hemos realizado un análisis del registro de ictus de la Sociedad Española de Neurología (RENISEN), en el que identificamos que el edema cerebral con hipertensión intracraneal y las infecciones respiratorias son las complicaciones con un mayor impacto sobre la mortalidad del ictus, encontrándose en un segundo escalón las complicaciones cardiológicas. Un interesante hallazgo de este análisis es que el impacto de esas complicaciones depende de la gravedad del ictus. Por otra parte, hemos realizado una encuesta a neurólogos vasculares europeos en los que vemos que la indicación más demandada para el uso de biomarcadores en el ictus es el manejo de las terapias de reperfusión. A través de revisiones sistemáticas y metaanálisis, hemos detectado que el uso de biomarcadores para el manejo de las complicaciones del ictus ha sido poco estudiado. De entre los marcadores metaanalizados, la proteína C-reactiva constituye un candidato para el manejo de las infecciones asociadas al ictus. Respecto a los estudios experimentales, hemos identificado dos candidatos nuevos para guiar las terapias de reperfusión, la proteasa activadora del factor VII (FSAP) y la proteasa de clivaje del factor de Von Willebrand (ADAMTS13), relacionadas con la recanalización arterial, y hemos descrito la utilidad de la medición de troponina I ultrasensible en la fase aguda del ictus, identificando a los pacientes con mayor riesgo de desarrollar complicaciones cardiológicas. Si nuestros resultados se confirmasen en estudios prospectivos, podríamos llegar a implementar el uso de biomarcadores sanguíneos en pacientes con ictus isquémico para el manejo de las complicaciones del mismo. / Stroke represents one of the main causes of mortality and disability. Stroke outcome depends mainly on baseline, non-modifiable factors, such as age or stroke severity, but also on several conditions that may occur across the natural history of stroke and leads to a poor outcome. In the present doctoral thesis we focus on these conditions, namely post-stroke complications. Therefore, our objectives in the present project are: first, to assess which post-stroke complications have the highest impact on stroke prognosis; second, to evaluate in which indications the use of blood biomarkers is more demanded by physicians; third, to evaluate across the literature whether the association between blood biomarkers and stroke outcome and complications has been assessed; and fourth, to test the predictive value of some candidates for the previously identified indications. To assess these objectives, we performed a comprehensive analysis of the stroke registry of the Spanish Neurological Society (RENISEN), finding that brain edema with increased intracranial pressure and respiratory tract infections were the complications with the highest impact on in-hospital mortality, followed by cardiologic complications in a second step. An interesting finding of the analysis is that the impact of these complications depends on stroke severity. Moreover, we performed a survey across European stroke neurologists, finding that the indication in which the use of biomarkers is more requested is the management of reperfusion therapies. By applying systematic reviews and meta-analysis, we have found that the use of biomarkers for the management of post-stroke complications has been poorly studied. From the meta-analyzed biomarkers, C-reactive protein appears as a surrogate biomarker for the management of post-stroke infections. Regarding experimental studies, factor seven activating protease (FSAP) and ADAMTS13 (A Disintegrin And Metalloproteinase with a ThromboSpondin type 1 motif, member 13), both associated with arterial recanalization, have emerged as candidates to guide reperfusion therapies. Moreover, we have described a role for high-sensitive troponin-I determination in acute stroke, in identifying those patients at the highest risk of suffering cardiologic complications. If our results are confirmed in future prospective studies evaluating the prognostic implications of the use of these biomarkers, such biomarkers could be translated into clinical practice for the management of post-stroke complications.

La Miastenia Gravis (MG) es una enfermedad autoinmune en la que los anticuerpos reconocen proteínas de la postsinapsis neuromuscular (Receptor Acetilcolina, MuSK, LRP4, Cortactin). Clínicamente, los pacientes presentan fatigabilidad que puede ser ocular o generalizada. En las formas generalizadas puede existir afectación de la musculatura bulbar, que en ocasiones es grave y comporta una situación de riesgo vital para el paciente (SRV). Es una enfermedad heterogénea, por lo que el uso de biomarcadores es esencial para confirmar el diagnóstico preciso y garantizar un abordaje óptimo del paciente, especialmente en las SRV. Actualmente, los biomarcadores diagnósticos útiles en la MG son los diferentes autoanticuerpos y los estudios electrofisiológicos. Los anticuerpos antiMUSK son los únicos biomarcadores con correlación clínica en el reducido subgrupo de pacientes con MG y estos autoanticuerpos. Hasta el momento, no se han identificado marcadores clínicos ni serológicos capaces de determinar el riesgo de padecer una SRV, ni de predecir la evolución de ésta o la respuesta a las diferentes terapias. El primer objetivo de esta tesis fue estudiar el papel de los miRNAs circulantes como nuevos biomarcadores en la MG. El segundo objetivo fue estudiar si existía algún marcador pronóstico en pacientes con MG que presentaban una SRV. Los miRNAs son pequeñas moléculas no codificantes implicadas en la regulación de un gran número de genes, y que se han propuesto como biomarcadores en un gran número de enfermedades. En la MG se había descrito el perfil de miRNAs en células mononucleares de sangre periférica, pero el perfil de miRNAs circulantes no se había estudiado. Analizamos el perfil de miRNAs circulantes mediante qPCR. Siete miRNAs mostraron niveles inferiores en los pacientes con MG comparados con los controles. El miR15b se encontró en niveles más bajos en los 3 grupos de pacientes (Early onset MG -EoMG-, Late onset MG -LoMG- y MG con timoma). El miR122, miR140-3p, miR-185, miR-192 y miR20b se encontraron bajos en los EoMG y LoMG. El miR885-5p mostró niveles bajos sólo en LoMG. Puesto que EoMG y LoMG presentaban un perfil común de miRNAs esto sugiere que, al menos en parte, comparten un mismo mecanismo fisiopatológico. El perfil de miRNAs en los pacientes con timoma inesperadamente no mostraba diferencias respecto al resto de subgrupos, así como tampoco se detectaron diferencias en función del tratamiento recibido. Como conclusión, el estudio de los miRNAs circulantes en pacientes con MG puede aportar nueva información sobre la patogenia de esta enfermedad, aunque su utilidad como biomarcadores clínicos debe aún ser establecida. Para identificar los posibles factores capaces de determinar el riesgo de padecer una SRV o de predecir la evolución de ésta, realizamos un estudio retrospectivo de los pacientes incluidos en el registro nacional de enfermedades neuromusculares (NMD-ES) que habían presentado alguna SRV. De los 648 pacientes con una forma generalizada de MG incluidos en el registro, 62 (9’56%) tuvieron una SRV y 29/62 (4’47%) se encontraban bajo tratamiento inmunosupresor. 32 estaban en estadio MGFA V al requerir soporte ventilatorio, y 30 en estadio IVB al necesitar una SNG para alimentación. No se detectó ningún factor de riesgo significativo para presentar una SRV. El desencadenante más frecuente fueron las infecciones, pero no implicaban un peor pronóstico. La mediana de tiempo hasta la retirada de la SNG fue de 13 días (1-434) y la de extubación fue de 12 días (3-176) y fue significativamente menor en los LoMG, demostrando que la edad tampoco implicaba un peor pronóstico. Cuatro pacientes fallecieron, todos LoMG con múltiples comorbilidades. El 20% de pacientes persistían en SRV al cabo de un mes. Por tanto, aunque el porcentaje de SRV en pacientes afectos de MG es bajo, existe aún un subgrupo de pacientes que presentan SRV prolongadas, lo que resalta la necesidad de nuevas terapias más rápidas y efectivas para estos casos. / Myasthenia Gravis (MG) is an autoimmune disease with antibodies against postsynaptic proteins in the neuromuscular junction (Acetilcholine receptor, MuSK, LRP4, Cortactin). From the clinical point of view, patients with MG present ocular or generalized fatigability. When there is bulbar involvement, weakness can be severe and at times life-threatening. It is a highly heterogeneous disease, and therefore the use of biomarkers is essential to confirm the diagnosis and guarantee an optimal achievement to patients, especially in life-threatening events (LTE). Nowadays, the only diagnostic biomarkers in MG are the different autoantibodies and the electrophysiological tests, and antiMUSK antibodies are the only biomarkers with clinical correlation in a small subgroup of patients. Besides, no consistent prognostic factors have been identified to predict the risk to present a life-threatening event (LTE) or to predict their evolution and response to treatment. The first objective of this thesis was to describe the profile of circulating miRNAs in serum of patients with MG and their utility as biomarkers. The second objective was to evaluate the prognostic factors of MG patients who presented an LTE. MiRNAs are small non-coding molecules involved in the regulation of a large amount of genes, and have been proposed as biomarkers in different diseases. The profile of miRNAs has been previously described in peripheral blood mononuclear cells of patients with MG, but not in serum. An analysis of circulating miRNAs in patients with MG and AChR antibodies was performed by qPCR, and a different expression of 7 miRNAs was found. MiR15b was found in lower levels in the 3 groups of patients (Early onset MG -EoMG-, Late onset MG -LoMG- and MG with thymoma). MiR122, miR140-3p, miR185, miR192 and miR20b were found in lower levels in EoMG and LoMG. MiR885-5p was found in lower levels only in LoMG. As EoMG and LoMG share a miRNA profile, this supports that they probably share a common altered mechanism. Patients with thymoma did not express a characteristic profile of circulating miRNAs, and there was no difference either in the serum miRNA profile depending on the treatment. Our results demonstrate that the analysis of circulating miRNAs can provide useful information about pathogenic mechanisms in MG. To identify the risk factors to present a LTE, or to predict their evolution and response to treatment, a survey was performed of patients with MG included in a nationwide registry in Spain (NMD-ES). From the total of 648 patients included, 62 (9’56%) presented a LTE and 29/62 (4’47% of 648) were under immunosuppressant treatment. Thirty-two had a MGFA V status and required intubation, and 30 were in IVB status and needed a feeding tube. There was not any identifiable risk factor to predict the LTE. The most frequent precipitating factor was infections, but it did not imply a worse outcome. Median time to removal of the feeding tube was 13 days (1-434). Median time to weaning was 12 days (3-176), and it was shorter in LoMG than in EoMG. Thus, age did neither imply a worse outcome. Four patients died, all of them with LoMG and severe comorbidities. Twenty per cent of patients remained in a life-threatening situation after one month. Therefore, it is important to find new biomarkers to identify these resistant patients and to improve our therapeutic arsenal with more efficacious and faster drugs.

Introducción: La Depresión Resistente al Tratamiento (DRT) es una condición clínica del Trastorno Depresivo Mayor (DSM-5, 296.xx) que tiene un importante impacto en la calidad de vida de las personas que la padecen y en los recursos de los sistemas de salud, asociado a un mayor número de hospitalizaciones y de dosis de medicamentos psicotrópicos. Objetivo: Establecer el diagnóstico evolutivo, después de diez años, en una cohorte de 193pacientes con diagnóstico principal de Trastorno Depresivo Mayor y que iniciaron tratamiento por Depresión Resistente al Tratamiento entre 1994 y 1998, en el Hospital de la Santa Creu i Sant Pau de Barcelona, con el fin de proponer posibles determinantes en la aparición de esta condición clínica. Metodología: Para establecer el diagnóstico evolutivo principal se revaloraron los pacientes con uno de dos métodos: a) revisión de la historia clínica y consenso con el psiquiatra actual o b) entrevista personal y realización dela SCID I y II. La exploración de los factores predictivos de DRT se realizó mediante una regresión logística, donde las variables explicativas estudiadas fueron: edad, género, años de evolución, presencia de criterios melancolía, duración del EDM en semanas, Índice de Thase y Rush (ITR), puntuación en la Escala de Hamilton, remisión o no de la sintomatología y como variable dependiente, el diagnóstico evolutivo .Resultados y Conclusiones: De los 193 pacientes iniciales de la muestra hubo 43 pérdidas y de los 150 pacientes evaluados 91 (61%) mantenían el diagnóstico principal de TDM, en 59 pacientes (39%) el diagnóstico principal cambió. De estos últimos, el 13% cambió a Trastorno Depresivo Persistente (DSM-5 300.4), el 10% a Trastorno Bipolar (DSM-5 296.4 y 296.8), el 9% a Trastorno de Personalidad (DSM-5 301.x) y el 8% a “Otros Diagnósticos” tales como Esquizofrenia, Dependencia al Alcohol y Otros Tóxicos o Trastorno Mental Orgánico. La variable relacionada con la evolución posterior, según un modelo de regresión logística es el tiempo de evolución del episodio índice, que permite pronosticar correctamente el 86% de los casos que mantienen el diagnostico principal de TDM. / Introduction: Treatment-resistant depression (TRD) is a clinical condition associated with Major Depression Disorder (296.xx, DSM-5) that has a considerable impact on the quality of life of those who suffer from it, as well as on health care resources. Objective: To establish the disorder progression after 10 years in a cohort of 150 patients with the diagnosis of Major Depression Disorder and who began treatment for TRD between 1994 and 1998 at Santa Creu i Sant Pau Hospital (Barcelona, Catalonia), in order to identify the possible predictive factors for the appearance of this condition. Methods: In order to establish diagnostic stability, patients were reevaluated using one of the following methods: a) review of the medical records comparing them with current psychiatrist criteria or b) personal interview and administration of SCID I and II. To determine factors predictive of TRD, we used logistic regression in which the variables were age, sex, years since diagnosis, presence of melancholic symptoms, and like independent variable the duration of the major depressive episode (in weeks), Thase and Rush Index (TRI), Hamilton Rating Scale for depression score, remission of symptoms and the disorder progression. Results and conclusions: We found that the diagnosis of TRD remained stable in 61% (91 patients). Of the remaining 39% (59 patients), 13% were diagnosed with Persistent Depressive Disorder (DSM-5, 300.4), 10% with Bipolar Disorder (DSM-5, 296.4 and 296.8), 9% with Personality Disorder (DSM-5, 301.x) and 8% with “Other Diagnoses”, such as Schizophrenia, Alcohol Use Disorder and Substance Use Disorder or Mental Disorders of Organic Origin. The variable related to the further development, according to a logistic regression model is the time evolution of the index episode, which allows correctly predict 86% of the cases remain the primary diagnosis of MDD.

En este trabajo estudiamos marcadores con valor diagnóstico o pronóstico en el momento de presentar un síndrome clínico aislado (CIS, del inglés clinically isolated syndrome). Dado que presentar un CIS representa un riesgo para desarrollar esclerosis múltiple (EM), se considera crucial identificar qué pacientes tendrán un segundo brote y determinar el grado de acumulación de discapacidad a medio y largo plazo. Por ello, aún se considera necesario identificar marcadores que representen los diferentes aspectos de esta enfermedad, especialmente si se demuestra su utilidad en la práctica clínica diaria. Así, nuestro objetivo fue determinar el valor diagnóstico y pronóstico de marcadores clínicos, biológicos y radiológicos en el momento del CIS. Primero, dado que el espectro de enfermedades de la neuromielitis óptica (NMOSD, del inglés neuromyelitis optica spectrum disorders) es uno de los principales diagnósticos diferenciales de la EM, decidimos evaluar la utilidad de determinar sistemáticamente la presencia de anticuerpos NMO-IgG en el momento del CIS, observando que tal abordaje no es necesario ya que la determinación de este anticuerpo fue negativa en la mayoría de los pacientes. Por tanto, otras características clínicas y radiológicas también deben considerarse durante el diagnóstico diferencial y esta determinación podría realizarse en casos indeterminados. Posteriormente se estableció una colaboración con Aurélie Ruet y Bruno Brochet [Centre Hospitalo-Universitaire (CHU) de Bordeaux, INSERM-CHU centre d’Investigation Clinique, Université de Bordeaux en Francia] para evaluar más a fondo el valor añadido de presentar dos o más factores predictivos de EM, previamente identificados por ellos, en pacientes con CIS que no cumplen los criterios diagnósticos de 2010 para diseminación en espacio, observando que si bien es más bajo, los pacientes con combinaciones de estos factores aún presentan un riesgo de desarrollar EM y deberían ser monitorizados más estrechamente. De igual forma, la utilidad de realizar una RM medular en el momento del CIS se considera un tema controvertido. Por tanto, analizamos su valor diagnóstico y pronóstico añadido, observando que aunque su aportación a los criterios diagnósticos es más bien modesta, la presencia de lesiones medulares representa un riesgo aumentado para evolucionar a una EM y para desarrollar una mayor discapacidad. También establecimos otra colaboración con la compañía israelí Glycominds, Inc., para validar el valor predictivo del gMS-Classifier2, un algoritmo que incorpora anticuerpos anti-glicano IgM en suero, diseñado con el objetivo de identificar pacientes con CIS en riesgo de presentar un segundo brote. El gMS-Classifier2 resultó ser un factor de riesgo independiente para EM, si bien los hallazgos en la RM representan un riesgo más elevado. Finalmente, valoramos varios marcadores biológicos en líquido cefalorraquídeo durante una fase de screening y una de validación que requirió trabajos colaborativos con Jens Kuhle, Ludwig Kappos (Department of Neurology, University Hospital Basel, en Suiza), Luisa María Villar y José Carlos Álvarez-Cermeño [Departamentos de Inmunología y Neurología del Hospital Ramón y Cajal, Instituto Ramón y Cajal de Investigación Sanitaria (IRYCIS) en Madrid]. De todos los biomarcadores testados, los niveles basales de NfL resultaron ser factores independientes de riesgo para desarrollar una EM, siendo los hallazgos de RM nuevamente los mayores indicadores de riesgo. Además, los NfL presentaron fuertes correlaciones con los cambios en el volumen cerebral a los cinco años de seguimiento. / The present work is concerned with finding diagnostic and prognostic markers at the time of a clinically isolated syndrome (CIS). Given that presenting a CIS indicates the possibility of developing multiple sclerosis (MS), it is considered crucial to identify which patients will present a second attack and to determine the degree of disability accumulation over the medium to long-term. Therefore, the search for markers that capture the different aspects of this disease is still considered necessary, particularly if they demonstrate to be useful in the daily clinical practice. Therefore, we aimed to determine the diagnostic and prognostic value of a number of clinical, biological, and radiological markers available at the time of the CIS. First, considering neuromyelitis optica spectrum disorders (NMOSD) as one of the main differential diagnoses of MS after a first attack, we decided to assess the value of systematically determining NMO-IgG status at the time of a CIS, observing that such approach is not necessary since the antibody determination was negative in most patients. Therefore, other clinical and radiological characteristics should also be taken into account during the differential diagnosis and this test could be considered in indeterminate cases. Next, a collaborative work was established with Drs. Aurélie Ruet and Bruno Brochet [Centre Hospitalo-Universitaire (CHU) de Bordeaux, INSERM-CHU centre d’Investigation Clinique, Université de Bordeaux, France] to further assess the added value of presenting ≥2 predictive factors for MS, previously identified by them, in patients not fulfilling the 2010 criteria for dissemination in space, and observed that although lower, patients with combinations of these predictive factors are still at risk of developing MS and should be monitored closely. Likewise, the usefulness of a baseline spinal cord MRI at the time of a CIS is still somewhat controversial. Therefore, we analysed its added diagnostic and prognostic value, observing that although the diagnostic value is modest, presence of spinal cord lesions do pose an increased and independent risk for both evolution to MS and disability accumulation. One more collaboration was established with the Israeli company Glycominds, Inc., to validate the predictive value of gMS-Classifier2, an algorithm incorporating serum IgM anti-glycan antibodies, designed with the aim of identifying CIS patients at risk of a second demyelinating attack. gMS-Classifier2 turned out to be an independent risk factor for clinically definite MS, although MRI findings still posed a higher risk. Finally, we evaluated a number of biological markers in cerebrospinal fluid during a screening and a validation phase that involved a couple of collaborative works with Jens Kuhle, Ludwig Kappos (Department of Neurology, University Hospital Basel, in Switzerland), Luisa María Villar, and José Carlos Álvarez-Cermeño (Departments of Neurology and Immunology, Multiple Sclerosis Unit, Hospital Ramón y Cajal, Instituto Ramón y Cajal de Investigación Sanitaria (IRYCIS) in Madrid). Of all biomarkers, only baseline neurofilament light chain levels were independent risk factors for MS with MRI findings again posing the highest risk but, interestingly, they showed very strong correlations with brain volume changes at five years of follow-up.

En los últimos años, el descubrimiento de la existencia de redes neuronales que muestran coherencia en cuanto a su actividad espontánea durante el reposo, fenómeno conocido con el nombre de conectividad funcional (CF), ha proporcionado un medio fructífero para abordar las bases neurobiológicas de enfermedades psiquiátricas como la esquizofrenia. Uno de los muchos sistemas cerebrales que muestran patrones de actividad sincronizada es la “Default mode Network” (DN), red formada por una serie de regiones que disminuyen su actividad simultáneamente durante la realización de tareas cognitivas y que se activan durante periodos libres de tarea. Numerosos estudios han observado alteraciones en esta red en pacientes con esquizofrenia, sin embargo, existen una serie de factores limitantes para la interpretación y generalización de estos resultados: la mayoría de estos trabajos se han realizado con pacientes crónicos, sin fenotipos definidos y en diferentes estadios de la enfermedad. Por ello, en un intento de elucidar parámetros biológicos que definan fenotipos consistentes, los objetivos de estas tesis son, por un lado, estudiar la CF de la DN en las primeras fases de la enfermedad psicótica, y por otro lado, estudiar la CF de la DN en dos grupos de pacientes con esquizofrenia clínicamente diferenciados (uno con alucinaciones auditivas (AA) persistentes y otro sin historia de AA). Para ello, en el primero de los trabajos, se realizan adquisiciones de resonancia magnética funcional en estado de reposo (R-fMRI) en una muestra de 19 pacientes con un primer episodio de psicosis y 19 controles sanos. Posteriormente, se examina la CF de 11 semillas previamente seleccionadas pertenecientes a los dos subsistemas que conforman la DN (córtex dorsomedial prefrontal y lóbulo temporal medial), según trabajos previos de Andrews- Hanna. En el segundo trabajo se realizan adquisiciones de R-fMRI en una muestra de 19 pacientes con esquizofrenia y AA persistentes, 14 pacientes con esquizofrenia sin historia de AA y 20 controles sanos. Siguiendo la misma metodología que en el estudio anterior, se examina la CF de los dos subsistemas que conforman la DN. Los resultados muestran que la CF de la DN estaría ya alterada desde el inicio de la enfermedad psicótica. Además, en el caso de los pacientes con un primer episodio de psicosis, éstas alteraciones parecen limitarse al subsitema del córtex dorsomedial prefrontal. Los pacientes con esquizofrenia en cambio, aunque muestran alteraciones en ambos subsistemas de la DN, éstas són mucho mayores en el caso de los pacientes alucinadores, llegando a afectar a todas y cada una de las semillas examinadas. Además, los resultados muestran un patrón de alteraciones en la CF entre regiones pertenecientes a ambos subsystemas de la DN y regiones clave de la “Salience Network”, entre otras áreas, característico de los pacientes alucinadores. / In recent years, the discovery of the existence of neural networks that show consistency in their spontaneous activity at rest, a phenomenon known as functional connectivity (FC), has provided a fruitful means of addressing the neurobiological basis of psychiatric diseases such as schizophrenia. One of several brain systems showing patterns of synchronized activity is the "Default mode Network" (DN), a network comprised of a number of regions that decrease their activity simultaneously when performing cognitive tasks and increase their activity during free task periods. Numerous studies have found abnormalities in this network in patients with schizophrenia. However, there are some limitations for the interpretation and generalization of these results; most of these studies were performed with chronic patients, without defined phenotypes and at different stages of the disease. Therefore, in an attempt to elucidate biological parameters that define consistent phenotypes, the objectives of this thesis are: firstly, to study the DN FC in the early stages of psychotic illness, and secondly, to study the DN FC in two clinically differentiated groups of patients with schizophrenia (one with persistent auditory hallucinations (AH) and one without a history of AH). To do so, in the first study, resting state functional magnetic resonance imaging acquisitions (R-fMRI) were performed on a sample of 19 patients with a first episode of psychosis and 19 healthy controls. Subsequently, taking advantage of the fractionation of the DN into two distinct subsystems (dorsomedial prefrontal cortex subsystem, and medial temporal lobe subsystem) and a validated set of 11 seed regions-of-interest (Andrews – Hanna), we examined the FC in all eleven of them. In the second study, R-fMRI acquisitions were performed on a sample of 19 patients with schizophrenia and persistent AH, 14 schizophrenia patients without a history of AH and 20 healthy controls. Following the same methodology as in the previous study, we examined the FC of the 11 ROI comprised in the DN. The results show that the DN FC is altered from the begining of psychotic illness. Furthermore, in the case of patients with a first episode of psychosis, these abnormalities appear to be limited to the dorsomedial prefrontal cortex subsystem. In the second study, both groups of patients exhibited alterations in both dMPFC and MTL subsystems of the DN. However, these alterations were greater in patients with persistent AH. In particular, these patients exhibited cross-network abnormalities between the DN and the salience processing system.

Malgrat que la malaltia de Parkinson (MP) fou descrita fa 200 anys, només fa 50 anys de l'aplicació clínica exitosa de la levodopa pel seu tractament simptomàtic. La seva biodisponibilitat i les fluctuacions dels nivells plasmàtics però, es relacionen en part amb les complicacions motores i no motores de la MP, i motiva la investigació d'altres formes i vies d'administració, com la intestinal. Es revisen les observacions clíniques, sèries de casos, estudis comparatius, retrospectius, prospectius, controlats, aleatoritzats i un assaig clínic doble cec que demostren que l'administració de gel intestinal de levodopa/carbidopa (GILC) redueix les fluctuacions motores. L'objectiu de l'estudi és descriure una llarga experiència de 9 anys en el maneig del tractament amb GILC per a la MP que respon a levodopa amb fluctuacions motores intenses malgrat el tractament convencional optimitzat. Amb un estudi prospectiu, obert, observacional, de 116 mesos de durada, de la pràctica clínica habitual, examinant aspectes clínics motors i no motors a l’inici, al mes, als tres, sis, dotze mesos, i anualment de tractament. També es recullen els efectes adversos (EA) i les mesures adoptades per resoldre'ls i les causes de retirada del tractament. Es realitzen quatre subestudis prospectius: 1- de cognició i conducta, en subgrup de 5 pacients amb una bateria de tests neuropsicològics a l’inici i als tres-sis mesos. 2: de qualitat del son en 5 pacients amb bateria de tests subjectius i polisomnografia a l’inici i als tres-sis mesos i 3: de l'estat de salut, qualitat de vida i la càrrega del cuidador en 9 pacients a l'inici a la setmana,3, 6 i 12 mesos amb qüestionaris de qualitat de vida la càrrega de cuidador. S'inclogueren 37 pacients (22 homes/15 dones), amb una mitjana de 6,03 + 1,42 hores diàries en Off , que van seguir el tractament amb GILC una mitjana de 40,86 + 31,26 mesos (rang 1 a 116mesos). Amb el tractament tots experimenten milloria de les fluctuacions motores, reduint de 4,87 + 1,08 hores Off el dia als 3 mesos, de 4,91 + 1,12 al cap d'1 any, de 4,90 + 1,20 al cap de cinc anys i de 6,25 + 0,35 als 9 anys en dos pacients. Les discinèsies es redueixen en duració però els canvis en la gravetat no són estadísticament significatius. A mitjà termini milloren els estadis motors i activitats de vida diària, varien poc la resta d'aspectes motors, millora l'activitat mental, conducta i ànim, no s'agreugen els trastorns neuropsiquiàtrics i milloren els trastorns de control d'impulsos. Presenten un alt nombre de EA que generalment són ben controlats. En els subestudis no hi ha deterior neuropsicològic amb el tractament i milloren funcions atencionals, de fluència semàntica i de control motor voluntari. La qualitat del son, que és dolenta basalment, no s'agreuja, tampoc es modifica. Malgrat l'alt nombre de complicacions la qualitat de vida millora significativament el 26% en test emprat, sense agreujament, ans reduint la càrrega del seu cuidador. Amb aquest estudi, el més llarg prospectiu, concloem que el tractament amb GILC és ben tolerat i segur, millora eficaç i sostingudament les fluctuacions motores en la pràctica clínica habitual, millora o no agreuja altres trastorns motors, cognitius i de la son, i millora la qualitat de vida i la càrrega del cuidador. / Even Parkinson's disease (PD) was first described 200 years ago, it's been only 50 years of successful clinical use of levodopa for its symptomatic treatment. Levodopa bioavailability and fluctuations in plasma levels however, are related in part to motor and non-motor complications of PD and encourages research of other forms and routes of administration, such as the intestinal delivery. Clinical observations, case series, comparative, retrospective, prospective, controlled, randomized and double-blind clinical trials that demonstrate that administration of levodopa / carbidopa intestinal gel (LCIG) reduces the motor fluctuations are reviewed. However LCIG is a complex and expensive treatment, long-term management and the effects on cognition and behaviour, sleep and the impact in patient's quality of life and caregiver burden are not well stablished. The aim of the study is to describe a long experience of nine years in the management of treatment with LCIG for PD responding to levodopa with severe motor fluctuations despite optimal conventional therapy. In a prospective, open, observational study of 116 months of clinical practice, PD motor an non-motor clinical aspects were collected, UPDRS scale and patient diaries were used to evaluate the motor condition, previously, at the beginning LCIG treatment, at three and six months, and annually until nine years of follow up. Adverse events (AE) were collected as well as the corresponding action taken to solve them, the causes of treatment withdrawal were also collected. Four prospective sub-studies were performed: 1 of cognition and behavior: in a subgroup of 5 patients evaluated with a specific battery of neuropsychological tests at baseline and at three-six months. 2 of quality of sleep: in a subgroup of 5 patients evaluated with Epworth scale, fatigue scale, Pittsburg quality of sleep questionnaire, Beck depression scale, and Hamilton anxiety scale, and overnight polysomnography study at baseline and at three-six months and 3 of health status, quality of life and caregiver burden: in 9 patients evaluated with quality of life questionnaire in PD (PDQ-39), health status questionnaires (EQ-5D and EQ-VAS), global clinical impression scale (CGI) and caregiver burden questionnaire (Zarit Burden index) at the start of LCIG, first week, 3, 6 and 12 months of treatment. Thirty seven patients were included (22M/15F) with a mean of 6.03 + 1.42 hours a day in Off state, they followed ILCG treatment an average of 40.86 + 31.26 months (range 1 to 116). All patients experienced improvement in motor fluctuations, reducing 4.87 + 1.08 hours a day in Off state at 3 months, 4.91 + 1.12 after 1 year, 4.90 + 1 20 after five years and 6.25 + 0.35 to 9 years of treatment in two patients. Dyskinesias were reduced in duration but changes in severity of disability were not statistically significant. H&Y stages and S&E activities of daily living scale improved at mid term, with little variation of other motor aspects. Mental activity, behavior and mood improved, most of neuropsychiatric disorders were not exacerbated and impulse control disorders improved. Patients under LCIG had a high number of AE which were usually well controlled. In sub-studies no neuropsychological impairment was found with treatment and attentional functions, semantic fluency and voluntary motor control improved. The quality of sleep, which was bad at baseline, did not worse, either modified. Despite the high number of complications, quality of life significantly improved 26% of PDQ39 without worsening, but reducing the caregiver burden. Our experience with this study, the largest prospective, confirms that treatment with ILCG is well tolerated and safe, effective and sustained for improving motor fluctuations of PD in routine clinical practice, improves or not worsens other motor aspects, cognitive and sleep, and improves quality of life and caregiver burden, where the correct management requires the organization of a multidisciplinary team.

Tesi realitzada a l'Institut d'Investigacions Biomèdiques August Pi i Sunyer (IDIBAPS) / INTRODUCCIÓ: En els últims 7 anys, s’ha identificat una nova categoria d’encefalitis associada a anticossos contra superfície neuronal, que cursen amb psicosis, catatonia, crisis epilèptiques, i moviments anormals. Aquests desordres són potencialment letals, però curables si es reconeixen i es tracten. HIPÒTESI: Un subgrup d’encefalitis pediàtriques prèviament considerades idiopàtiques o post-infeccioses estan causades per anticossos dirigits contra antígens sinàptics o de la membrana neuronal. OBJECTIUS: Caracterització clínica e immunològica d’encefalitis pediàtriques d’etiologia no filiada, centrant-nos en 3 grups de pacients amb evidència preliminar d’un origen immunomediat: 1) encefalitis associada a la presència d’un teratoma a nivell sistèmic, 2) encefalitis amb crisis refractàries i estatus epilèptic, i 3) recidives neurològiques post-encefalitis herpètica (EHS). METODOLOGIA: Estudi clínic e immunològic dels pacients amb els desordres proposats. Per a la identificació dels antígens s’ha utilitzat una estratègia prèviament validada consistent en una selecció de pacients amb fenotips clínics similars associada a tècniques de cribratge immunològic desenvolupades i adaptades per la detecció d’anticossos dirigits contra antígens de superfície neuronal, incloent: immunohistoquímica de teixit nerviós, immunocitoquímica de cultius de neurones, immunoprecipitació, i caracterització d’antígens mitjançant espectrometria de masses. Els efectes dels anticossos dels pacients sobre els antígens diana s’han investigat en cultius de neurones dissociades de hipocamp de rata. RESULTATS: Per objectius específics: 1) Hem identificat un nou fenotip paraneoplàstic de la síndrome d’opsoclonus-mioclonus i d’encefalitis amb afectació de tronc i cerebel associades a la presència d’un teratoma sistèmic, sense anticossos NMDAR, que afecta predominantment a pacients joves, i que respon favorablement a immunoteràpia i a resecció tumoral. 2) Hem caracteritzat un nou anticòs dirigit contra el receptor sinàptic GABAA involucrat en encefalitis amb crisis refractàries i status epilepticus, que afecta de forma predominant a nens i adults joves. En el model in vitro aquests anticossos produeixen una disminució dels receptors GABAA a la sinapsis, i aquests efectes són reversibles en eliminar els anticossos del medi de cultiu. 3) Hem demostrat que l’EHS és un fort desencadenant d’autoimmunitat sinàptica i no restringida a NMDAR. Hem descrit per primer cop que els anticossos contra NMDAR i/o altres proteïnes sinàptiques poden ser causa de recidives autoimmunes post-EHS. En nens petits aquestes recidives es manifesten en forma de “coreoatetosis post-EHS”, amb o sense crisis refractàries i estatus epilèptic acompanyants; i en adolescents i adults es manifesten predominantment amb símptomes psiquiàtrics. CONCLUSIONS: Aquests estudis han resultat en la identificació de nous síndromes i respostes inmunològiques, en la caracterització de les dianes antigèniques responsables, i en el desenvolupament d´un test diagnòstic per un grup de encefalitis infantils inmunomediades. Els estudis han canviat paradigmes de diagnòstic i tractament de les encefalitis infantils. Això es deu en gran part a que les investigacions han facilitat el diagnòstic i tractament precoç de desordres d’etiologia prèviament desconeguda, amb freqüent resposta a immunoteràpia. / BACKGROUND: In the last 7 years, a new category of encephalitis associated with antibodies against neuronal surface epitopes has been identified. These disorders are potentially lethal but curable if recognized and treated. HYPOTHESIS: A subgroup of pediatric encephalitis previously considered idiopathic or post-infectious are caused by antibodies against neuronal surface receptors and proteins. OBJECTIVES: Clinical and immunological characterization of pediatric encephalitis of unknown origin, focusing on three groups of patients: 1) encephalitis associated with systemic teratoma; 2) encephalitis with refractory seizures; and 3) neurological relapses post-herpes simplex encephalitis (HSE). METHODS: Clinical and immunological study of patients and serum/CSF. To identify antibodies we selected patients with similar clinical phenotypes and immunological screening with immunohistochemistry in cultures of live neurons, immunoprecipitation, and antigen characterization by mass spectrometry. The effects of the antibodies on the target antigens have been investigated in cultures of dissociated rat hippocampal neurons. RESULTS: By specific objectives: 1) We have identified a new paraneoplastic phenotype of opsoclonus-myoclonus syndrome and brainstem-cerebellar encephalitis associated with systemic teratoma, without anti-NMDAR antibodies that predominantly affects young patients, and that responds favorably to immunotherapy and tumor resection. 2) We have characterized a novel antibody directed against GABAA receptor involved in encephalitis with refractory seizures in children and young adults. In an in vitro model we showed that these antibodies produce a reduction of GABAA receptors in the synapse, and that these effects were reversible upon removing antibodies from the culture medium. 3) We have described for first time that antibodies to NMDAR and/or other synaptic proteins can cause autoimmune relapses post-HSE. In young children these relapses present with "post-HSE choreoathetosis" with or without associated refractory seizures, and in teenagers and adults presents with predominant psychiatric symptoms. CONCLUSIONS: These studies have resulted in the identification of new syndromes and immunological responses, in the characterization of antigenic targets, and in the development of a diagnostic test for a group of children with immune-mediated encephalitis. These studies have changed diagnostic and treatment paradigms of childhood encephalitis by facilitating early diagnosis and treatment of patients affected with disorders of previously unknown etiology, and that frequently respond to immunotherapy.